药效评价原则 - 副本
药效评价原则
抗肿瘤药物药效学指导原则一、基本原则1. 抗肿瘤药物分类(1) 细胞毒类药物(cytotoxic agent)：包括干扰核酸和蛋白质合成、抑制拓扑异构酶及作用于微管系统的药物等；(2) 生物反应调节剂(biological response modifier)；(3) 肿瘤耐药逆转剂(resistance reversal agent)；(4) 肿瘤治疗增敏剂(oncotherapy sensitizer)；(5) 肿瘤血管生成抑制剂(tumor angiogenesis inhibitor)；(6) 分化诱导剂(differentiation inducing agent)；(7) 生长因子抑制剂(growth factor inhibitor)；(8) 反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide) 。
2. 抗肿瘤药物药效学需研究内容2.1 包括体外抗肿瘤试验，体内抗肿瘤试验。
2.2 评价药物的抗癌活性时，以体内试验结果为主，同时参考体外试验结果以做出正确的结论。
2.3 I类抗肿瘤新药应进行药物作用机制初步研究。
二、体外抗肿瘤活性试验1. 试验目的1.1 对候选化合物进行初步筛选；1.2 了解候选化合物的抗瘤谱；1.3 为随后进行的体内抗肿瘤试验提供参考，如剂量范围、肿瘤类别等。
2. 试验方法选用10-15株人癌细胞株，根据试验目的选择相应细胞系及适量的细胞接种浓度，按常规细胞培养法进行培养；推荐使用四氮唑盐MTT还原法、XTT 还原法、磺酰罗丹明B染色法、或51Cr释放试验、集落形成法等测定药物的抗癌作用。
药物与细胞共培养时间一般为48-72 小时，贴壁细胞需先贴壁24 小时后再给药。
试验应设阳性及阴性对照组，阳性对照用一定浓度的标准抗肿瘤药，阴性对照为溶媒对照。
3. 评价标准以同一样品不同浓度对肿瘤细胞抑制率作图可得到剂量效应曲线，然后采用Logit法计算半数有效浓度(IC50值或EC50值)。
临床药效学评价
临床疗效的评价绪论临床治疗研究的发展•正反两方面的经验和教训•发展了科学性的临床疗效考核方法•大量临床试验的结果开始用于指导临床医师的医疗实践, 循证医学的发展•随着大量新的防治手段的出现，对治疗的安全性应有足够的认识评价的内容：•药物•手术•预防措施•治疗方案（如肿瘤化疗)•特定形式的治疗单元的评价（如冠心病监护病房的作用)临床疗效评价的重要性•循证医学询证医学简介•定义：evidence-based medicine, EBM•基本思想:任何临床决策的确定，都要基于临床科研所取得的最佳数据。
证据是基石询证医学与产生的背景传统医学与询证医学的区别询证医学与临床药效学评价•证据：按质量与可靠程度分为5级•证据分级，推荐分级对临床治疗设想进行检验的重要性•临床治疗本身的复杂性–许多疾病产生的机理并未完全了解，多病因共同作用–治疗措施本身可以对人体产生多方面的作用–人体疾病的复杂性：轻重、病程、并发症、药物间的作用•避免下结论时的主观性临床疗效评价设计的原则(1)①明确的研究目的和检验假设②确定疗效考核指标及具有临床意义的最小疗效③明确入选标准和排除标准④正确设立对照组和进行随机化分组⑤由②计算出需要研究的病例数临床疗效评价设计的原则(2)⑥制订干预措施、步骤、时间、中止治疗原则⑦采用盲法原则⑧选用正确的统计分析方法⑨对结果作出正确的解释•最重要的是对照组的设立和采用随机化分组的原则临床疗效评价基本设计方案：•临床试验:–随机对照临床试验–非随机同期对照研究–历史对照研究–自身前后对照研究–交叉对照研究–序贯试验临床疗效评价的三大要素设立对照随机分组盲法评定设立对照组的重要性•治疗后所产生的病情变化，不仅仅是所给治疗的特异性作用结果，还可能包含：–疾病的自行缓解–霍桑效应：–安慰剂效应:临床疗效评价的目的•识别所考核治疗措施本身的特异性治疗作用–最好的方法就是在治疗组以外，另行设立一个同样受到关注的对照组，并给予安慰剂，最后将两者的结果进行比较，得出结论。
仿制药一致性评价【范本模板】
仿制药一致性评价定义仿制药一致性评价是指对已经批准上市的仿制药，按与原研药品质量和疗效一致的原则，分期分批进行质量一致性评价，就是仿制药需在质量与药效上达到与原研药一致的水平。
药学研究是指通过体外溶出等分析方法对药物进行药学分析,其目的在于考察制剂的生产工艺及处方是否有需要变更，初步确认制剂与原研药的一致性。
生物等效性(bioequivalency , BE ）是指在同样试验条件下试验制剂和对照标准制剂在药物的吸收程度和速度的统计学差异。
当吸收速度的差别没有临床意义时,某些药物制剂其吸收程度相同而速度不同也可以认为生物等效。
一站式服务我司作为提供专业的医药科技公司，能够提供包括:1、药学研究(CMC）：包括：制剂处方工艺、质量研究(杂质及溶出曲线等）、稳定性考察等完整的药学研究过程2、生物等效性（BE）:包括：寻找合作临床机构、招募受试者采血、生物样品测试及分析、数据管理及统计分析等全过程的服务3、需要进行大临床试验的品种,按照2017年已经颁布的指导原则,参照Ⅱ期、Ⅲ期临床试验的经验，提供整个临床试验的组织及监查管理服一致性评价（CMC&BE）的主要工作内容第一阶段：项目评估◆项目的市场价值◆竞争品种的多少◆是否有参比制剂◆评估需要的费用和周期◆咨询相关官员与专家◆项目立项确定进行BCSⅠ类或者Ⅲ类豁免BE的申请：高渗透性的数据与文献支持材料、体外溶出曲线数据的提供与分析，如果能够满足CFDA的2016年87号文《人体生物等效性试验豁免指导原则》就可以豁免BE研究。
第二阶段：药学研究(CMC）◆参比制剂的选择及备案◆购买参比制剂◆与参比制剂的质量对比（主要包含溶出曲线和杂质）◆药学等效判定◆处方工艺等的二次开发◆溶出曲线的对比◆处方工艺的确定及中试放大◆三批中试产品的工艺验证◆中试样品的质量和参比制剂的一致◆API的溶解性和渗透性研究（限BCS Ⅰ和BCS Ⅲ类）◆制剂稳定性和包装考察◆申报资料的撰写及整理，提供原始记录第三阶段：BE研究API的BCS分类属于Ⅱ和Ⅳ的产品必须进行BE研究,不能够豁免;BCSⅠ类或者Ⅲ类，符合豁免BE的条件可以不进行BE研究，否则就必须进行BE研究.◆BE研究方案的制定◆统计分析计划的制定◆Ⅰ期临床基地、生物样品测试单位等的确定◆伦理委员会的审核◆在CDE的BE备案◆生物样品分析方法的验证◆招募受试者◆服用药物及生物样品的采集◆生物样品的分析◆数据管理及统计分析◆撰写总结报告。
新型药物开发与药效评价
新型药物开发与药效评价随着科学技术的不断进步，新型药物的开发与药效评价变得愈发重要。
本文将探讨新型药物开发的方法与药效评价的原则，并对其意义进行分析。
一、新型药物开发的方法1.1 分子设计法分子设计法是指通过对疾病相关分子的结构进行研究，设计和合成具有特定药理活性的化合物。
这一方法包括药物分子建模、计算机辅助药物设计等技术手段，为药物开发提供了有力的工具。
1.2 高通量筛选法高通量筛选法是利用自动化设备对大量的化合物进行快速筛选，筛选出具有生物活性的潜在药物。
该方法能够大大加快药物开发的速度，提高成功率。
1.3 生物合成法生物合成法是利用生物体自身的代谢途径合成药物，如通过微生物发酵合成抗生素。
这一方法具有绿色环保、高效快速等优点，在新药研发中有广阔的应用前景。
二、药效评价的原则2.1 安全性评价药效评价首要考虑的是药物的安全性。
药物必须在一定剂量范围内不产生明显的毒副作用，对人体或动物的正常生理功能无明显影响。
2.2 有效性评价药效评价还需要评估药物的疗效，即药物对疾病目标的治疗能力。
这需要严谨的实验设计和科学的统计方法，确保评价结果的准确性和可靠性。
2.3 药物代谢与药动学评价药效评价还需考虑药物的代谢和药动学特性，如药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄等过程。
这些特性对于合理用药和药物剂量的确定至关重要。
三、新型药物开发与药效评价的意义3.1 创新药物的研发新型药物开发及药效评价为创新药物的研发提供了科学方法和技术支持，使得更多潜在药物成为可能，有望解决当前无法满足临床需求的药物瓶颈问题。
3.2 合理用药指导药效评价结果可为临床医生提供合理用药的指导，帮助选择最佳药物治疗方案，并根据个体差异调整药物剂量，提高治疗效果。
3.3 药物研发成本降低新型药物开发方法的出现以及药效评价方法的改进，能够加速创新药物的研发进程，从而降低药物研发的时间和成本，使更多患者受益。
3.4 促进医学科研进步新型药物开发与药效评价的研究不仅促进了药学领域的发展，也对其他医学科研领域起到了推动作用。
抗菌药物IIIII期临床药效评价试验指导原则
抗菌药物II、III期临床药效评价试验指导原则一、概述〔一〕定义与目的抗菌药物II、III期临床药效评价试验是指在肯定条件下，科学地考察和评价新药对特定的感染性疾病医治、预防的有效性作出评价。
抗菌药物临床药效评价试验指导原则是为新兽用抗菌药物进行II、III期临床试验制定的。
本指导原则规定了各项技术标准及有关研究方法的要求。
抗菌药物〔抗生素和合成抗菌药〕临床药效评价以靶动物为主要对象，其目的是为了评价一种新兽药是否具有医治或预防动物疾病的价值，有无危险性或不良反响。
临床试验开始前，必须具备以下条件：①试验必须在能够进行细致观察并能够对紧急情况采取及时和必要的环境和条件下进行。
②负责临床研究的兽医必须经过临床药理学培训。
③研究者必须事先充分了解临床前药理的各项研究资料。
④有各期临床试验的设计与具体执行方案。
〔二〕适用范围本指导原则适用于各类新抗菌药物进行Ⅱ、Ⅲ期临床试验。
二、II期临床试验初步评价兽药对靶动物目标适应症的防治作用和平安性，确定合理的给药剂量方案。
试验设计内容如下：〔一〕试验动物1.品种：应与受试药物的拟推举应用范围相一致，靶动物的种类、品系、体重和年龄相一致。
不同靶动物和不同适应症应分别进行临床试验。
2.X：应从有试验动物资质证明的喂养单位购置，如果没有资质证明动物，应X清楚，并经检疫合格后才能用于试验。
如果没有实验动物并且实验条件能得到有效操纵，也可使用自然感染的动物。
3.每组动物数人工攻毒病例：小动物不能低于30只，中动物不能低于10头，大动物不能低于6头；自然感染病例：小动物不能低于50只，中动物不能低于30头，大动物不能低于15头。
〔二〕试验材料1.受试药物及X：受试药物应与拟上市的制剂完全一致、同一剂型，有完整的产品质量标准，有符合规定格式的说明书。
受试药物应X于同一批号，由申报单位自行研制并在GMP验收合格的车间生产的样品，并提供产品检验合格汇报。
2.对比药物及X：对比药物应当是已经在我国批准上市，与受试药物作用相似、适应症相同的药物。
药品上市后临床试验指导原则
药品上市后临床试验指导原则1.药物安全性评价：药品上市后需要进行持续的安全性评价，监测药物的不良反应、安全性和不良事件的发生率、严重程度和致命性等情况，以确保药物的使用是安全的。
安全性评价主要包括不良事件和不良反应的收集、报告和分析。
2.药效评价：药品上市后应进行药效评价，以评估药物的疗效和有效性。
药效评价主要包括评估药物的主要和次要疗效指标，例如疾病缓解率、症状改善、生存率等。
药物的疗效评价应符合国家和国际相关的评价标准和指南。
3.临床实用性评价：药品上市后应进行临床实用性评价，以评估药物在临床实践中的可行性和实际效果。
临床实用性评价主要包括比较药物与现有治疗方案的优劣、评估药物在实际临床中的使用适应症、剂量和给药途径等。
临床实用性评价应充分考虑药物的可行性、效果和成本效益。
4.药物的长期效果评价：药物上市后需要进行长期效果评价，以评估药物的长期疗效、副作用和生存质量。
长期效果评价可以通过后续临床试验、队列研究、病例对照研究和治疗效果观察等方式进行。
药物的长期效果评价对于制定合理的药物使用指南和治疗策略非常重要。
5.药物的药物相互作用评价：药品上市后应进行药物相互作用评价，以评估药物在与其他药物合用时的相互作用情况。
药物相互作用评价主要包括药物的相互作用机制、药物相互作用的临床意义和影响、药物相互作用的预防和管理等。
药物相互作用评价有助于指导临床合理用药，减少不良药物相互作用的发生。
6.药品上市后的后期研究：药品上市后需要进行后期研究，以进一步评估药物的安全性和有效性。
后期研究主要包括药品的大规模随机对照试验、观察性研究、药物注册表和药物媒体研究等。
后期研究有助于完善药物的临床使用指南和药物的疗效评估。
总之，药品上市后的临床试验指导原则应该从药物的安全性、药效、临床实用性、长期效果、药物相互作用和后期研究等方面进行全面评价，以确保药物的安全有效使用。
同时，药品上市后的临床试验应严格遵守国家和国际相关的临床研究规范和伦理原则。
药效学试验技术指导原则
药效学试验技术指导原则
药效学试验是评价药物活性和药理学特性的关键试验，为了确保试验结果的准确和可靠，
需要遵循以下技术指导原则：
1. 选择合适的动物模型：根据药物的作用机制和研究目的，选择与人类疾病相关的动物模型。
例如，如果研究药物的抗肿瘤作用，可以选择肿瘤移植动物模型。
2. 随机分组和对照组设计：将实验动物随机分组，确保每组动物之间的差异性均匀分布。
同时
设置对照组，用于比较和评价药物的效果。
3. 正确计量药物：根据体重、体表面积或其他相关因素，正确计量和给药，以确保药物在动物
体内的浓度和剂量与人体内相似。
4. 观察和记录指标：定义主要的观察指标，如药效学参数、临床效果和不良反应等，并确保观
察和记录的客观性和一致性。
5. 试验结束时适时采样和检测：在试验结束时采集合适的样本，如血液、组织等，进行相关测定，以评估药物的体内分布和药效学特性。
6. 数据分析和结果解释：使用合适的统计方法对数据进行分析，并进行结果解释。
确保结果的
客观性和可靠性。
7. 必要的伦理审批：确保所有的试验符合伦理要求和法律法规，并经过相关伦理机构的审批。
8. 安全性评估和风险控制：在试验过程中进行定期的安全性评估，并采取必要的风险控制措施，保障实验动物的健康和生命安全。
以上原则只是指导，具体的试验设计和实施还需根据具体的研究目的和药物特性进行合理的调
整和优化。
药物的药效评价
药物的药效评价药物是人类医疗保健和治疗疾病的重要工具之一。
药物的药效评价是对药物疗效、安全性和质量进行科学客观评价的过程。
本文将介绍药物的药效评价的基本概念、评价方法和应用。
一、药物的药效评价概述药物的药效评价是一项系统的过程，旨在评估药物对疾病的治疗效果以及其安全性和质量。
药物疗效评价的结果对于指导临床用药、制定药物管理政策和改进研发过程具有重要意义。
二、药物的药效评价方法（一）实验室研究：实验室研究是评价药物效应的基础。
通过动物实验、细胞培养等方法，观察和测定药物对疾病模型的影响，包括药效、毒性和代谢过程等。
（二）临床试验：临床试验是评价药物疗效最直接、最可靠的方法。
通过随机对照试验、盲法等设计，收集疗效和安全性的数据，确定药物的临床应用价值。
（三）药物警戒监测：药物上市后的药物警戒监测是对药物疗效和安全性进行长期、广泛监测的重要手段。
通过收集临床应用中的药物不良反应和疗效数据，及时发现和评估药物的问题。
三、药物的药效评价应用（一）指导临床用药：药物的药效评价结果可用于临床实践指南的制定和临床决策的制定，提高临床用药的科学性和准确性。
（二）指导药物研发：药物疗效评价结果为药物研发提供重要依据，有助于优选候选药物和优化药物配方。
（三）药物安全管理：药物药效评价结果可用于药物安全管理，监测并评估药物不良反应，以保障患者的用药安全。
（四）促进药物市场竞争：药物药效评价结果可用于评估药物疗效和安全性，并为医保支付、药物审批和市场准入提供科学依据，促进药物市场的健康发展。
四、药物的药效评价存在的问题和挑战药物的药效评价面临着一些问题和挑战。
首先，疾病的复杂性和个体差异使药物疗效评价结果具有一定的不确定性。
其次，评价方法和指标有限，不能全面反映药物的疗效和安全性。
此外，缺乏统一的评价标准和标准流程，使评价结果的可比性和可靠性有待提高。
五、总结药物的药效评价对于指导临床用药、改进研发过程和保障患者用药安全具有重要意义。
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抗肿瘤药物药效学指导原则一、基本原则1. 抗肿瘤药物分类(1) 细胞毒类药物(cytotoxic agent)：包括干扰核酸和蛋白质合成、抑制拓扑异构酶及作用于微管系统的药物等；(2) 生物反应调节剂(biological response modifier)；(3) 肿瘤耐药逆转剂(resistance reversal agent)；(4) 肿瘤治疗增敏剂(oncotherapy sensitizer)；(5) 肿瘤血管生成抑制剂(tumor angiogenesis inhibitor)；(6) 分化诱导剂(differentiation inducing agent)；(7) 生长因子抑制剂(growth factor inhibitor)；(8) 反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide) 。
2. 抗肿瘤药物药效学需研究内容2.1 包括体外抗肿瘤试验，体内抗肿瘤试验。
2.2 评价药物的抗癌活性时，以体内试验结果为主，同时参考体外试验结果以做出正确的结论。
2.3 I类抗肿瘤新药应进行药物作用机制初步研究。
二、体外抗肿瘤活性试验1. 试验目的1.1 对候选化合物进行初步筛选；1.2 了解候选化合物的抗瘤谱；1.3 为随后进行的体内抗肿瘤试验提供参考，如剂量范围、肿瘤类别等。
2. 试验方法选用10-15株人癌细胞株，根据试验目的选择相应细胞系及适量的细胞接种浓度，按常规细胞培养法进行培养；推荐使用四氮唑盐MTT还原法、XTT 还原法、磺酰罗丹明B染色法、或51Cr释放试验、集落形成法等测定药物的抗癌作用。
药物与细胞共培养时间一般为48-72 小时，贴壁细胞需先贴壁24 小时后再给药。
试验应设阳性及阴性对照组，阳性对照用一定浓度的标准抗肿瘤药，阴性对照为溶媒对照。
3. 评价标准以同一样品不同浓度对肿瘤细胞抑制率作图可得到剂量效应曲线，然后采用Logit法计算半数有效浓度(IC50值或EC50值)。
体外试验至少重复一次。
附注：评价药物抗癌活性的方法：1. MTT还原法1.1 基本原理：四氮唑[MTT,3-(4,5-dimethylibiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide]是一种能接受氢原子的染料。
活细胞线粒体中与NADP相关的脱氢酶在细胞内可将黄色的MTT转化成不溶性的蓝紫色的甲[月替] (formazan)，而死的细胞则无此功能。
用二甲基亚讽(DMSO)溶解甲[月替]后，在一定波长下用酶标仪测定光密度值，即可定量测出细胞的存活率。
1.2 操作步骤:1.2.1选用对数生长期的贴壁肿瘤细胞，用胰酶消化后，用含10％小牛血清的RPMI l640培养基配成5000个／ml的细胞悬液，接种在96孔培养板中，每孔接种200μl，37℃，5％CO2 培养24 h。
1.2.2 实验组换新的含不同浓度被测样品的培养基，对照组则换含等体积溶剂的培养基，每组设3～5平行孔，37℃，5％CO2 培养4～5 d。
1.2.3 弃去上清液，每孔加入200 μl新鲜配制的含0.2 mg／ml MTT的无血清培养基．37℃继续培养4 h。
小心弃上清，并加入200 μl DMSO，用微型超声振荡器混匀后，在酶标仪上以试验波长为570 nm，参比波长为450 nm测定光密度值。
1.3 结果评定:按下式计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率：肿瘤细胞生长抑制率％＝(1- OD实验/OD对照) ×100％以同一样品的不同浓度对肿瘤细胞生长抑制率作图可得到剂量反应曲线，从中求出样品的半数杀伤浓度IC50。
合成化合物或植物提取纯品的IC50＜10 μg／m1或植物粗提物的IC50＜20 μg／m1时，则判断样品在体外对肿瘤细胞有杀伤作用。
2. 生长曲线法的基本原理：在最适条件下，肿瘤细胞在培养液中呈指数生长，如取细胞数的对数与培养时间作图可得一条直线，故称此时为对数生长期。
随着细胞密度不断增高，由于代谢产物的积聚及营养物的消耗，细胞生长逐渐减慢以致停止，此时称高坪期或稳定期。
因此药物对细胞生长的影响可通过生长曲线反映出来。
3. 染料排斥试验的基本原理：活细胞有排斥某些染料如伊红、台盼蓝、苯胺黑等的能力，而死细胞由于膜完整性的破坏，可被着色。
因此培养的肿瘤细胞中加入这些染料，一定时间后，对着色和未着色的细胞进行计数，即可算出被杀死的细胞比例。
4. 集落形成法的基本原理：克隆原细胞具有持续增殖能力，当单个细胞分裂6代或6代以上时，其后代所组成的群体(集落)便含50个以上细胞。
通过集落计数可对克隆原细胞作定量分析。
它反映了单个细胞的增殖潜力，故能较灵敏地测定抗癌药的活性，日前被认为是一种较理想的检测方法。
常用的集落形成法可分为贴壁法及半固体培养法两种。
5. SRB法的基本原理：SRB(sulforhodamine 是一种蛋白质结合染料，粉红色，可溶于水。
SRB可与生物大分子中的碱性氨基酸结合。
其在515 nm波长的OD读数与细胞数呈良好的线性关系。
故可用作细胞数的定量。
MTT法的一个缺点是OD值可随放置时间而变，而SRB法无此现象。
因此更适用于进行大规模的试验。
三、体内抗肿瘤试验体内抗肿瘤试验必须选用三种以上肿瘤模型，其中至少一种为人癌裸小鼠移植模型或其它人癌小鼠模型。
试验结果三种模型均为有效，再重复一次也为有效，评定该化合物对这些实验性肿瘤具有治疗作用。
鼓励使用人类肿瘤裸鼠移植瘤模型和多种类的移植瘤模型、原位接种模型和中空纤维测定(hollow-fiber assay)等方法。
1. 动物动物要求健康，符合等级动物要求，有实验动物合格证。
雌雄均可，但同一批实验中动物性别必须相同。
小鼠鼠龄为5-6周，体重为18-22克。
评价同一物质的活性时，不同批次的实验必须采用同一品系的小鼠。
2. 肿瘤模型2.1 小鼠肿瘤模型淋巴细胞白血病腹水瘤L1210和P388、白血病L-615、宫颈癌U14、肝癌H22、Lewis肺癌、黑色素瘤B16、网织细胞瘤M5076、肠癌26、肠腺癌38、乳腺癌CD8F1、艾氏腹水瘤（EAC）、肉瘤-180等，以及各种小鼠肿瘤的亚型和耐药株等。
2.2 人癌裸小鼠移植瘤模型应选用体外试验敏感细胞株进行体内抗人癌裸小鼠移植瘤试验。
模型建立和使用应注意：(1) 移植瘤一般由相应的细胞株移植而建立，对细胞株和移植瘤的化疗敏感性应予了解。
(2) 移植瘤复苏后一般应传2-3代后再用于体内抗肿瘤试验。
(3) 对模型生长情况应全面了解，尤其是生长快的模型(4) 为了保持移植瘤的生物学特性和遗传特性，复苏后移植瘤体内传代应少于15-20代3. 试验过程3.1 接种：肿瘤接种方法主要有皮下接种、腹腔接种和原位接种。
3.1.1 皮下肿瘤模型选择肿瘤生长旺盛且无溃破的荷瘤小鼠，颈椎脱臼处死，在无菌条件下（超净台或接种罩），用碘酒、酒精或新洁尔灭消毒动物皮肤，切开皮肤，剥离肿瘤。
将瘤组织剪成1.5 mm3左右，用套管针接种于动物一侧或双侧腋窝皮下；或制成细胞悬液，然后按一定比例加入无菌生理盐水，一般每只小鼠接种肿瘤细胞数量为（1-5）×106。
3.1.2 腹水瘤模型无菌条件下，消毒动物皮肤，吸取生长良好的动物腹水，以生理盐水按一定比例稀释后接种于动物腹腔，接种细胞数量一般为（1-5）×106。
3.1.3 原位接种模型原位接种是指将来源于某脏器的肿瘤接种在动物的某脏器，如将人肝癌接种在裸小鼠的肝脏。
原位接种不是常规的方法，但有其优越性，是鼓励使用的方法。
主要有肺、肝、胃、肠、乳腺、颅内等原位接种方法。
3.2 动物分组3.2.1 试验设阴性对照组、阳性对照组、治疗组。
3.2.2 治疗组设高、中、低三个剂量组。
小鼠肿瘤和腹水瘤接种后次日将动物随机分组，裸鼠移植瘤用游标卡尺测量移植瘤直径，待肿瘤生长至100—300mm3后将动物随机分组。
3.2.3 动物数普通小鼠每组10只，裸鼠6只。
阴性对照组动物数为治疗组动物数×实验组数1/23.3 剂量设置3.3.1 治疗组设高、中、低剂量治疗组，一般按4:2:1设置，高剂量使用最大耐受量或LD10的剂量。
3.3.2 阴性对照组给予相应的溶剂；3.3.3 阳性对照药选用对该动物敏感的、临床应用的抗肿瘤药物，3.3.4 如受试物为一抗癌药物的衍生物或类似物时，必须选用该抗癌药物作为阳性对照药。
3.4 阳性对照药选择原则疗效确切；与被试物质化学结构类似；与被试物质有类似的作用机理。
3.5 药物配制溶于水的药物，用生理盐水或蒸馏水配制；如用酸、碱溶解者，可先用小量酸(0.1-0.5N HCl)或碱(NaHCO3、Na2CO3、NaOH)溶解，调节pH在4.5-9.0的范围内。
用乙醇、丙二醇、吐温80、DMSO助溶的药物，或用吐温60、吐温80、2-3%淀粉、0.5%羧甲基纤维素制成混悬液的药物，可腹腔注射或口服，但必须设相同浓度的溶剂对照组。
用注射用花生油配制的溶液或乳剂可口服、皮下或肌肉注射。
3.6 给药方案和给药途径分组当日开始给药，根据不同药物的代谢动力学和毒性反应等确定给药方案。
给药途径应与推荐临床用药的途径相同。
给药次数较多，或被试物质溶解性较差，静脉给药有困难时，可考虑使用腹腔给药，但在评价药效时要注意这两种给药途径是有差别的。
可采取瘤周、瘤内、肌肉、皮下给药途径。
腹水瘤试验时一般不能应用腹腔给药途径。
4 评价标准4.1 腹水瘤模型接种给药后，观察和记录动物死亡时间，计算生存天数。
如阴性对照组20%动物存活时间超过4周，表明腹水瘤生长不良，实验作废。
采用中位生存时间（即median survival time,MST）来评价每组的生存时间，其计算公式为：每组鼠数的中间数-中间生存天数前死亡的鼠数MST=（中间生存天数-0.5）+中间生存天数死亡的鼠数治疗组与对照组的比较，采用T/C（%）来表示，计算公式为：T MSTT/C % = ────×100%C MSTT MST：治疗组MST ；C MST：阴性对照组MST。
评价标准以125%为界，当T/C%≥125% 时。
视为有效，反之则无效。
4.2 裸鼠移植瘤模型推荐使用测量瘤径的方法，动态观察受试物抗肿瘤的效应。
肿瘤直径的测量次数根据移植瘤的生长情况而定，一般为每周2-3次,每次测量同时还需称鼠重。
肿瘤体积(tumor volume,TV)的计算公式为：V = 1/2×a×b2 或π/6×a×b×c其中a、b、c分别表示长宽高。
两公式的相关性极好，可采用任一公式。
根据测量结果计算出相对肿瘤体积（relative tumor volume，RTV），RTV = Vt / V0。