电泳技术与应用
电泳的工作原理和应用
电泳的工作原理和应用1. 电泳的工作原理电泳是一种分离和检测生物分子的常用技术，它基于生物分子的电荷和大小差异，利用电场的作用将它们分离开来。
电泳的工作原理包括以下几个方面：1.1 理论基础电泳的基本原理是利用电力将带电粒子分离的方法。
在电场中，带电分子会受到电场力的作用，根据它们的电荷和大小差异，移动速度不同，从而实现分离。
1.2 胶状介质的作用电泳中常用的胶状介质有琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等。
这些胶状介质可以提供一个分离通道，限制大分子的运动，使其根据大小分子的差异进行分离。
胶状介质的选择与样品性质和分离要求密切相关。
1.3 分离机理在电泳过程中，带电分子会在胶状介质中进行迁移。
迁移速度与电场强度、胶状介质孔隙度、电荷量以及分子大小等因素密切相关。
根据迁移速率的不同，带电分子将会在胶状介质中分离开来。
1.4 检测方法电泳分离后，需要通过染色、荧光探针或质谱等方法进行检测和测定。
这些检测方法可以通过读取信号强度、波长或质量谱来确定样品的组分和含量。
2. 电泳的应用电泳作为一种常用的分离和检测方法，被广泛应用于科学研究、医学诊断和生物工程等领域。
以下是电泳的一些常见应用：2.1 蛋白质电泳蛋白质电泳是电泳技术在蛋白质分离和分析中的应用。
通过电泳可以将蛋白质按照电荷和大小进行分离，从而得到不同的蛋白质带。
这对于研究蛋白质的结构、功能和相互作用等具有重要意义。
2.2 DNA电泳DNA电泳是电泳技术在DNA分离和分析中的应用。
通过电泳可以将DNA按照大小进行分离，从而获得DNA的分子量信息。
这对于DNA测序、基因分型和DNA指纹等具有重要意义。
2.3 RNA电泳RNA电泳是电泳技术在RNA分离和分析中的应用。
通过电泳可以将RNA按照大小进行分离，从而获得RNA的分子量信息。
这对于研究RNA的剪接、修饰和转录调控等具有重要意义。
2.4 聚合物电泳聚合物电泳是电泳技术在聚合物分离和分析中的应用。
通过电泳可以将聚合物按照大小进行分离，从而研究聚合物的分子量分布、聚合度和结构等。
电泳的应用
电泳的应用
电泳是一种重要的技术，在多个领域都有广泛的应用。
以下是一些电泳的具体应用：
1.在生物化学、临床化学、毒剂学、药理学、免疫学、微生物学、食品化学等科学研究中，利用电泳技术对各种生物大分子如蛋白质、核酸、酶，甚至病毒与细胞进行研究和分析。
2.在农业生产领域，电泳技术用于土壤改良和植物生长的刺激，以及用于病虫害的防治。
3.在工业生产中，电泳涂装是一种常见的电泳应用，它能够用于对各类产品进行涂层，如汽车、电器、船只和机械部件等。
4.在汽车工业中，电泳漆是使用最广泛的汽车涂装材料，电泳涂装在汽车行业的应用是最为广泛的。
5.在食品行业，电泳技术用于对食品成分的分析和质量控制。
6.在环保领域，电泳技术用于废水处理和有害物质的分离和回收。
7.在医疗领域，电泳技术被用于疾病诊断和生物医学研究。
例如，使用聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用于蛋白质纯度的鉴定，这使得它成为医学检验中常用的技术。
电泳技术的临床应用-完整版
电泳技术的临床应用-完整版电泳技术的临床应用简介电泳技术是一种用电场对带电粒子进行排序的技术，包括凝胶电泳、毛细管电泳等多种方法。
这些技术在临床应用中具有重要意义，可以用于基因检测、蛋白质分析、药物筛选等领域。
章节一、凝胶电泳在临床基因检测中的应用1.1 基本原理凝胶电泳是将DNA分子或RNA分子按照大小和电荷在聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶中进行排序的方法。
利用电荷作用力和凝胶孔径可以实现DNA分子的分离和检测。
1.2 检测方法通过对DNA分子进行各种特定的处理，如限制性内切酶切割、PCR扩增等，然后进行凝胶电泳，可以检测基因变异、突变等。
1.3 实际应用凝胶电泳在临床基因检测中应用广泛，可以用于遗传病的诊断、个体基因分型等。
章节二、毛细管电泳在临床蛋白质分析中的应用2.1 基本原理毛细管电泳是利用毛细管的小孔径和电场作用力对蛋白质进行分离和分析的方法。
根据蛋白质的电荷和大小的不同，可以实现蛋白质的分离。
2.2 分析方法通过对蛋白质进行化学修饰和标记，然后进行毛细管电泳分析，可以获得蛋白质的分子量、等电点等信息。
2.3 实际应用毛细管电泳在临床蛋白质分析中被广泛运用，可以用于疾病标志物的检测、药物代谢产物的分析等。
章节三、电泳技术在药物筛选中的应用3.1 基本原理电泳技术在药物筛选中的应用主要是通过分析化合物的电荷、极性等性质，来确定药物的分子特征。
3.2 筛选方法通过对化合物进行毛细管电泳分析，可以确定其在电场下的迁移率，从而进一步进行相关的筛选实验。
3.3 实际应用电泳技术在药物筛选中具有广泛的应用前景，可以用于药物新品种的开发和质量控制。
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法律名词及注释：1、限制性内切酶：指一类能够识别DNA的特定序列并在该序列的特定位点上切割DNA分子的酶。
2、PCR扩增：聚合酶链式反应，是一种体外生物分子复制技术，通过循环反应过程，可以扩增出特定的DNA片断。
3、药物代谢产物：指药物在人体内发生代谢反应后形成的新的化学物质。
电泳的原理的应用举例说明
电泳的原理的应用举例说明1. 什么是电泳电泳是一种将带有电荷的物质迁移至不同电势下的技术。
它利用电场力将带电物质分离、富集和净化。
电泳主要通过溶液中的离子或者电介质负载物分离。
这是一种常用的生物技术方法，也被广泛运用于分子生物学、生物化学和生物医学等领域。
2. 电泳的原理电泳的原理基于物质在电场下的迁移行为。
当电场应用到溶液中时，离子和电介质负载物会被迁移到电场两极。
每个物质的迁移速度取决于它的大小、形状和电荷。
根据这些特性，电泳可以用于不同方法的分离和分析。
3. 电泳的应用举例以下是一些电泳的应用举例，说明电泳在不同领域的重要性和实际应用。
3.1 蛋白质分析电泳在蛋白质分析中被广泛使用。
通过电泳技术，可以将蛋白质溶液加载到聚丙烯酰胺凝胶上，然后应用电场来分离蛋白质。
蛋白质在凝胶上的迁移速率取决于其大小和电荷，从而使得蛋白质可以根据这些特性进行分离和鉴定。
3.2 DNA分析电泳也广泛应用于DNA分析。
例如，在凝胶电泳中，DNA片段可以被分离并根据其大小进行排序。
这种技术被广泛应用于基因测序、DNA指纹分析和基因突变诊断等领域。
凝胶电泳技术也被应用于DNA和RNA的可视化和定性分析。
3.3 基因检测电泳被广泛应用于基因检测中。
例如，人类基因组计划使用了一种叫做聚合酶链反应（PCR）的技术，该技术使得科学家能够扩增和分离DNA样本中的特定基因片段。
通过将扩增后的DNA样本加载到凝胶上，然后进行电泳，可以检测到特定基因的存在与否。
3.4 药物研发电泳在药物研发中也有着重要的应用。
例如，通过凝胶电泳，可以检测药物与目标分子之间的相互作用。
这种技术可以帮助药物研发人员确定药物的选择性和亲和性，并进一步优化药物设计。
3.5 体液检测电泳在体液检测中也被广泛使用。
例如，通过凝胶电泳，可以检测血液中的蛋白质和DNA，从而帮助疾病的诊断和监测。
电泳技术还可以在尿液和唾液样本中检测潜在的疾病标志物。
3.6 食品安全检测电泳在食品安全领域也扮演着重要角色。
电泳技术及其应用
电泳技术及其应用电泳技术电泳技术，是指在电场作用下，带电颗粒由于所带的电荷不同以及分子大小差异而有不同的迁移行为从而彼此分离开来的一种实验技术。
一、电泳技术的基本原理在电场中，推动带电质点运动的力(F)等于质点所带净电荷量(Q)与电场强度(E)的乘积。
F,QE 质点的前移同样要受到阻力(F)的影响，对于一个球形质点，服从Stoke定律，即:F′,6πrην 式中r为质点半径，η为介质粘度，ν为质点移动速度，当质点在电场中作稳定运动时:F,F′即QE,6πrην 上式交换后可写成:V/E=Q/6&r@vν/E的含意为单位电场强度下的移动速度，里可用迁移率μ表示，即( ) 从上式可见，球形质点的迁移率，首先取决于自身状态，即与所带电量成正比，与其半径及介质粘度成反比。
除了自身状态的因素外，电泳体系中其它因素也影响质点的电泳迁移率。
二，电泳技术的分类:电泳法可分为自由电泳(无支持体)及区带电泳(有支持体)两大类。
用支持体的电泳技术:1.纸上电泳2.醋酸纤维薄膜电泳3.薄层电泳4.非凝胶性支持体区带电泳 (支持体有:淀粉，纤维素粉，玻璃粉，硅胶等)5.凝胶支持体区带电泳 ?淀粉液 ?聚丙烯酰胺凝胶 ?琼脂(糖)凝胶不用支持体的电泳技术:1.Tiselius或微量电泳2.显微电泳3.等电点聚焦电泳技术4.等速电泳技术5.密度梯度电泳三、影响电泳的因素1、首先决定于带颗粒的性质，即颗粒所带净电荷的数量，大小及形状一般说来，颗粒带净电荷多，直径小而接近于球形，则在电场中泳动速度快，反之则慢。
泳动度还与分子的形状，介质粘度，颗粒所带电荷有关，泳动度与颗表面电荷成正比，与介质粘度及颗粒半径反比。
带电荷的高分子在电解质溶液中把一些带有相反电荷的离子吸引在其周围，形成一离子扩散层。
加以电场时，颗粒向符号相反的电极移动即带阳电荷颗粒移向负极，带阴电荷颗粒移向正移;离子扩散层由于带有过剩的与颗粒符号相反的电荷，可以向相反方向移动。
电泳技术的原理及应用总结报告
电泳技术的原理及应用总结报告一、电泳技术的原理电泳是一种利用电场作用力将带电粒子分离的技术。
其基本原理是通过施加电场，使带电粒子在电场中运动，根据粒子的电荷量和电荷性质的不同，使粒子在电场中以不同的速度迁移，从而实现分离。
电泳技术的原理主要包括以下几个方面：1.高分子链带电：电泳分离的主要对象是带电的高分子。
在电场作用下，带电高分子链受到电场力的作用，发生迁移运动。
2.裂解动力：带电高分子链在空间中受电场力的作用下，随着电场力的增大，高分子链发生裂解，形成不同长度的分子片段。
3.正向、反向电泳：根据高分子链的目标分离要素的电荷性质，可以选择正向电泳还是反向电泳。
正向电泳指的是目标分离要素的迁移方向与电场方向一致，利于正带电粒子分离；反向电泳指的是目标分离要素的迁移方向与电场方向相反，利于负带电粒子分离。
4.分离效应：基于带电高分子链裂解的速度和不同长度带电链片段的移动速度差异，实现粒子的分离。
二、电泳技术的应用电泳技术是生物化学、医学、环境科学等领域中广泛应用的分析和分离方法。
以下是电泳技术的一些常见应用：1.DNA分析：电泳技术可以用于DNA序列分析、DNA片段长度测定、DNA芯片检测等。
通过电泳，能够分离检测到的DNA片段，并得到其长度和浓度信息。
2.蛋白质分离：电泳技术常用于蛋白质的分离和定量。
通过电泳，可以将不同大小、不同电荷的蛋白质分离开来，获取蛋白质的特征信息。
3.药物分析：电泳技术在药物分析中有着广泛的应用，可以用于药物成分的指纹图谱分析、药物的纯度检测等。
电泳可以快速、准确地分离和检测药物的组分。
4.环境监测：电泳技术可以用于分析环境样品中的各种离子和有机物质。
通过电泳，可以快速检测水质、大气污染物、土壤污染物等。
5.口腔医学：电泳技术在口腔医学中的应用主要是分离和分析不同牙体质地、牙釉质及牙本质的特征和成分。
总之，电泳技术的原理是通过施加电场，利用电荷性质和粒子大小的差异，实现带电粒子的分离。
简述电泳法的原理及应用
简述电泳法的原理及应用原理电泳法是一种利用电场效应将带电粒子分离的技术。
其基本原理是在外加电场的作用下，带电粒子在电泳介质中移动，从而实现它们的分离。
该技术在分子生物学、环境监测、食品安全检测等领域得到广泛应用。
电泳法所依赖的原理是电荷的存在和带电粒子在电场作用下的运动规律。
带电粒子在电场中受到电场力的作用，其运动速度与电荷量成正比。
当不同带电粒子在相同电场下移动时，由于其电荷量不同，速度也不同，从而实现分离。
应用电泳法在科学研究、生命科学研究以及工业生产中都有广泛的应用。
下面将分别介绍其在这些领域的应用。
科学研究1.蛋白质分离和定量：电泳法是蛋白质分离和定量的常用方法。
通过将蛋白质样品加载到电泳凝胶中，利用凝胶孔道大小的差异和电荷性质，可以将不同大小和电荷的蛋白质分离开来。
这种方法被广泛应用于蛋白质组学研究、蛋白质结构和功能研究等领域。
2.核酸分析和测序：电泳法也常被用于核酸的分析和测序。
通过将DNA或RNA样品加载到电泳凝胶中，根据其大小和电荷性质，可以将不同大小和电荷的核酸分离开来。
这为基因测序、基因分型、基因突变检测等提供了重要的工具和方法。
生命科学研究1.DNA指纹鉴定：电泳法在DNA指纹鉴定中得到了广泛应用。
通过将DNA样品加载到电泳凝胶中，根据DNA片段在凝胶中的迁移速度和长度，可以进行DNA指纹鉴定，例如用于犯罪案件的嫌疑人身份确认、亲子鉴定等。
2.蛋白质纯化：电泳法在蛋白质纯化中也有应用。
通过将复杂的蛋白质样品加载到电泳凝胶中，可以将目标蛋白质与其他杂质分离开来。
这种方法被广泛应用于蛋白质研究和蛋白质药物研发中。
工业生产1.药物分析：电泳法在药物分析中有重要作用。
通过将药物样品加载到电泳凝胶中，可以检测和分离不同成分的药物。
这种方法被广泛应用于药物研发、药物质量控制、药物安全监测等领域。
2.食品安全检测：电泳法是食品安全检测中常用的分析方法之一。
通过将食品样品加载到电泳凝胶中，可以检测食品中的有害物质和添加剂。
电泳技术的原理及其应用
电泳技术的原理及其应用1. 引言电泳技术是一种广泛应用于生物学、医学、药物研发和分析化学领域的分离和分析方法。
它基于物质在电场中的迁移速度差异，通过电化学原理将被分析物质分离出来。
本文将介绍电泳技术的原理以及一些常见的应用领域。
2. 电泳技术的原理电泳技术主要基于物质在电场中的迁移速度差异而实现分离。
通过施加电场，带电粒子或溶液中的分子会在电场中运动，而运动速度与其电荷、大小和形状有关。
电泳技术的原理可以归纳为以下几个方面：•电场作用：施加电场可以使带电粒子受到电荷作用力，从而在溶液中迁移。
•电泳介质：电泳介质通常是凝胶，如聚丙烯酰胺凝胶或琼脂糖凝胶。
它们通过限制溶液中溶质的扩散，使分子在凝胶中的运动主要受到电场力的影响。
•迁移速度差异：不同的分子在电场中的迁移速度差异主要由它们的电荷、大小和形状决定。
带有相同电荷的粒子，较大的粒子迁移速度较慢，较小的粒子迁移速度较快。
•检测方法：电泳技术常用的检测方法包括紫外光检测、荧光检测和放射性检测等。
这些方法可以用来检测分离出来的分子，并对其进行分析。
3. 电泳技术的应用电泳技术在生物学、医学、药物研发和分析化学等领域都有广泛的应用。
下面将介绍几个常见的应用领域：3.1 DNA测序DNA测序是电泳技术的一个重要应用领域。
通过电泳技术可以将DNA分子分离出来，根据DNA片段在电泳过程中的迁移速度差异，可以确定DNA序列。
这对于基因组研究、遗传变异分析和疾病诊断等都具有重要意义。
3.2 蛋白质分离与分析电泳技术也常用于蛋白质的分离和分析。
通过电泳技术可以将蛋白质分离出来，并根据其迁移速度差异进行分析。
这在生物学研究和药物研发中都非常常见。
3.3 药物研发电泳技术在药物研发中有着重要的应用。
通过电泳技术可以对药物进行分离和定量分析，从而评估药物的纯度、稳定性和活性等。
这对于药物研发过程中的质量控制非常关键。
3.4 环境分析电泳技术也被广泛应用于环境分析领域。
通过电泳技术可以对环境样品中的污染物进行分离和分析，对于环境监测和污染物治理具有重要意义。
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电泳技术与应用一．电泳的基本原理：生物大分子如蛋白质，核酸，多糖等大多都有阳离子和阴离子基团，称为两性离子。
常以颗粒分散在溶液中，它们的静电荷取决于介质的H+浓度或与其他大分子的相互作用。
在电场中，带电颗粒向阴极或阳极迁移，迁移的方向取决于它们带电的符号，这种迁移现象即电泳。
二．电泳的主要类型1.醋酸纤维薄膜电泳原理：醋酸纤维素薄膜电泳(CAME)是以醋酸纤维素薄膜(CAM)作支持物的一种区带电泳技术。
醋酸纤维素薄膜对蛋白质样品吸附性小，几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象。
又因膜的亲水性比较小，它所容纳的缓冲液也少，电泳时电流的大部分有样品传到，所以分离速度快，电泳时间短，样品用量少，5ug的蛋白质可得到满意的分离效果。
因此特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。
优点：①电泳后区带界限清晰；②通电时间较短（20min-1h)；③它对各种蛋白质(包括血清蛋白、溶菌酶、核糖核苷酸）都几乎完全不吸附，因此无拖尾现象；④对染料也没有吸附，因此不结合的染料能完全洗掉，无样品处几乎完全无色。
操作过程中应注意事项：由于醋酸纤维素薄膜吸水量较低，因此必须在密闭的容器中进行，并使用较低电流避免蒸发。
应用：广泛应用于血清蛋白、血红蛋白、球蛋白、脂蛋白、糖蛋白、甲胎蛋白、类固醇及同工酶等地分离分析中。
尽管它的分辨力比聚丙酰胺凝胶电泳低，但它具有简单、快速等优点。
2．琼脂糖凝胶电泳原理：琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。
其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是：它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。
琼脂糖凝胶具有网络结构，物质分子通过时会受到阻力，大分子物质在涌动时受到的阻力大，因此在凝胶电泳中，带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量，而且还取决于分子大小，这就大大提高了分辨能力。
但由于其孔径相当大，对大多数蛋白质来说其分子筛效应微不足道，现广泛应用于核酸的研究中优点：①适用于大分子物质的分离如核酸大分子蛋白质②兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用③琼脂糖凝胶制备容易，分离范围广注意事项：①注意DNA酶污染的仪器可能会降解DNA，造成条带信号弱、模糊甚至缺失的现象②注意巨大的DNA链用普通电泳可能跑不出胶孔导致缺带。
③对于琼脂糖凝胶电泳，浓度通常在0.5～2%之间，低浓度的用来进行大片段核酸的电泳，高浓度的用来进行小片段分析。
低浓度胶易碎，小心操作和使用质量好的琼脂糖是解决办法。
注意高浓度的胶可能使分子大小相近的DNA带不易分辨，造成条带缺失现象。
④注意电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，pH值上升，缓冲性能下降，可能使DNA电泳产生条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。
另外还需注意几点：如电压太大可能导致小片段跑出胶而出现缺带现象；DNA样品的纯度和状态注意样品中含盐量太高和含杂质蛋白均可以产生条带模糊和条带缺失的现象；正确的DNA上样量是条带清晰的保证。
注意太多的DNA上样量可能导致DNA带型模糊，而太小的DNA上样量则导致带信号弱甚至缺失。
TIANGEN 公司DNA分子量标准每次上样6ul即可得到清晰均匀的条带；DNA电泳一定要使用DNA Marker或已知大小的正对照DNA来估计DNA片段大小。
Marker应该选择在目标片段大小附近ladder较密的，这样对目标片段大小的估计才比较准确；注意观察凝胶时应根据染料不同使用合适的光源和激发波长，如果激发波长不对，条带则不易观察，出现条带模糊的现象。
应用：常用于分离、鉴定核酸，如DNA鉴定，DNA限制性内切核酸酶图谱制作等。
3.SDS-PAGE原理：SDS是阴离子去污剂，作为变性剂和助溶试剂，它能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白分子的二、三级结构。
而强还原剂如巯基乙醇，二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂。
在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后，分子被解聚成多肽链，解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白- SDS胶束，所带的负电荷大大超过了蛋白原有的电荷量，这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异。
PAGE胶聚丙稀酰胺是由丙稀酰胺和N,N’-亚甲基双丙稀酰胺经共聚合而成。
此聚合过程是由四甲基乙二胺（TEMED）和过硫酸胺（AP）激发的。
被激活的单体和未被激活的单体开始了多聚链的延伸，正在延伸的多聚链也可以随机地接上双丙稀酰胺，使多聚链交叉互连成为网状立体结构，最终多聚链聚合成凝胶状。
SDS-PAGE一般采用的是不连续缓冲系统，于连续缓冲系统相比，能够有较高的分辨率。
不连续系统中由于缓冲液离子成分，pH，凝胶浓度及电位梯度的不连续性，带电颗粒在电场中泳动不仅有电荷效应，分子筛效应，还具有浓缩效应，因而其分离条带清晰度及分辨率均较前者佳。
优点：①可以把目标分子按分子量大小分开②可以通过调整胶浓度调整迁移速率③可以方便地染色，转印，干胶保存常见问题：（1）.“ 微笑”（两边翘起中间凹下）形带原因？主要是由于凝胶的中间部分凝固不均匀所致，多出现于较厚的凝胶中。
处理办法：待其充分凝固再作后续实验（2）“皱眉”（两边向下中间鼓起）形带原因？主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净。
处理办法：可在两板间加入适量缓冲液，以排除气泡。
（3）为什么带出现拖尾现象？主要是样品融解效果不佳或分离胶浓度过大引起的。
处理办法：加样前离心；选择适当的样品缓冲液，加适量样品促溶剂；电泳缓冲液时间过长，重新配制；降低凝胶浓度。
（4）为什么带出现纹理现象？主要是样品不溶性颗粒引起的。
处理办法：加样前离心；加适量样品促溶剂。
（5）什么是“鬼带”，如何处理？“鬼带”就是在跑大分子构象复杂的蛋白质分子时，常会出现在泳道顶端（有时在浓缩胶中）的一些大分子未知条带或加样孔底部有沉淀，主要由于还原剂在加热的过程中被氧化而失去活性，致使原来被解离的蛋白质分子重新折叠结合和亚基重新缔合，聚合成大分子，其分子量要比目标条带大，有时不能进入分离胶。
但它却于目标条带有相同的免疫学活性，在WB反应中可见其能与目标条带对应的抗体作用。
处理办法：在加热煮沸后，再添加适量的DTT或Beta巯基乙醇，以补充不足的还原剂；或可加适量EDTA来（6）为什么溴酚蓝不能起到指示作用？我们在实验中常会遇到溴酚蓝已跑出板底，但蛋白质却还未跑下来的现象。
主要与缓冲液和分离胶的浓度有关。
（7）为什么电泳的条带很粗？电泳中条带很粗是常见的事，主要是未浓缩好的原因。
处理办法：适当增加浓缩胶的长度；保证浓缩胶贮液的pH正确（6.7）；适当降低电压；（8）浓缩胶与分离胶断裂、板间有气泡对电泳有影响吗？这主要出现在初学者中，一般对电泳不会有太大的影响。
前者主要原因是拔梳子用力不均匀或过猛所致；后者是由于在解除制胶的夹子后，板未压紧而致空气进入引起的。
（9）凝胶时间不对，或慢或快，怎么回事？通常胶在30MIN-1H内凝。
如果凝的太慢，可能是TEMED，APS剂量不够或者失效。
APS应该现配现用，TEMED不稳定，易被氧化成黄色。
如果凝的太快，可能是APS和TEMED用量过多，此时胶太硬易裂，电泳时易烧胶。
（10）电泳时间比正常要长？可能由于凝胶缓冲系统和电级缓冲系统地PH选择错误，即缓冲系统地PH和被分离物质的等电点差别太小，或缓冲系统的离子强度太高。
（11）.分离胶加上后为什么要立即加水？加入分离胶后，立即覆一层双蒸水，一是为了使分离胶界面保持水平，用水就可以把它压平，使蛋白质分子跑时在同一水平线上；二是阻止空气中的氧气对凝胶聚合的抑制作用。
4.双向电泳原理：先将蛋白质根据其等电点在pH梯度胶内（载体两性电解质pH梯度或固相pH梯度）进行等电聚焦，即按照它们等电点的不同进行分离。
然后按照它们的相对分子质量大小进行SDS-PAGE第二次电泳分离。
样品中的蛋白经过等点电和分子质量的两次分离后，可以得到分子的等电点、分子质量和表达量等信息。
值得注意的是，双向电泳分离的结果使蛋白质点而不是条带。
根据Cartesin坐标系统，从左到右是pI的增加，从下到上是分子质量的增加。
优点：⑴对未处理样本耐受性好⑵不需要预纯化(如：色谱层析)⑶分辨率非常高⑷2D 可以有效的组分收集器⑸蛋白在凝胶介质中受到保护⑹在蛋白质组学技术中应用范围最广（front-end ）⑺与其他技术相比，在一次试验中可检测到的蛋白点更多⑻与后续分析技术兼容性好注意事项及问题：重泡胀后的胶可以不用转移到另一个电泳槽，直接跑 2D 的一向吗？一般情况下是可以的。
但当上样量特别大时，可能会有一部分蛋白质没有被胶条吸收，这样跑完 1D 和 2D 胶后，会有很多横向条纹。
所以在这种情况下，最好在重泡胀后，将胶条转移到另外一个电泳漕中进行电泳。
为什么我在等电聚焦前加的矿物油在聚焦后会减少，暴露出了胶条的背面？这是因为 BioRad 的电泳槽有个盖子。
为了固定电泳槽中的胶条，这个盖子上设计了对应的突起，以便压住胶条。
由于虹吸作用，这个突起会导引矿物油到相邻的空电泳槽，从而降低有胶条的电泳槽中的矿物油液面。
如果由此把胶条暴露在空气中，那对等电聚焦的影响将是毁灭性的。
为了防止这个现象的发生，可以在相邻的空电泳槽里，也加入适量（ 80 ％满）的矿物油。
跑第一向时，为什么要设定一个电流的最大值电压(50 μ A/ 胶)？电流的平方和功率成正比。
电流增大，功率增大，放出的热量也随之增大，就会导致胶条的温度增加。
当温度超过 30 摄氏度时，缓冲液里的尿素就容易解离，产生一些极性分子，从而对等电聚焦产生影响。
跑第一向时，为什么刚开始的电压比较低，而后逐渐增高？刚开始时，体系内的带电小分子比较多（比如无机盐和双极性分子）。
所以在这个阶段，电流主要是由这些小分子的移动所产生的。
由于这些分子质量小，移动他们不需要很高的电压。
当这些小分子移动到他们的目的地时（无机盐移动到极性相反的电极；两性分子移动到对应的 pH 条带），体系内的蛋白质才开始肩负起运载电流的任务，逐渐向所对应的 pH 区域移动。
跑第一向时，为什么会产生一条蓝色的条带，并逐渐向酸性端移动？蓝色条带是缓冲液中痕量的溴酚蓝被聚焦所产生的。
溴酚蓝也是 pH 指示剂，当它移动到酸性区时（ pH4 ），颜色会变成黄色。
溴酚蓝的这个移动过程大体上发生在极性小分子的聚焦之后，蛋白质大分子聚焦之前。
跑第一向时，为什么电压总达不到预定值？当上样量比较大时或体系内盐分比较多时，聚焦的电压有可能达不到所设定的数值。
跑第一向时，在电压达到预定值后，电流为什么会降低？当上样量比较少时，所有蛋白在较短的时间内就移动到所对应的 pH 值区域值，从而变成中性分子。
这样，体系的电阻越来越大，在恒定的电压下，电流就会越来越小。
跑第一向时，为什么在两个电极丝附近有气泡产生？等电聚焦完成后，所有的蛋白质都移动到了相应的 pI 值区域，而成为中心分子。