维生素分析与检验.
果蔬维生素C含量测定及其分析
果蔬维生素C含量测定及其分析摘要本次实验我们测定了橘子中的维生素c含量，试验中，通过2,6-二氯酚靛酚对维生素C的滴定从而测定了橘子所含的维生素C含量，我们测得橘子的维C 的含量是20.46mg/100g，相对较低。
经查阅资料，讨论后发现维生素C在空气中易氧化，而且不同成熟程度、品种、新鲜程度、生长地、测定温度等客观因素也会对其有很大的影响。
一、前言实验目的：测定橘子中的维生素c含量，从而进行分析。
实验原理：维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，缺少它时会产生坏血病，因此又称为抗坏血酸（ascorbic acid）。
它对物质代谢的调节具有重要的作用。
近年来，发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力，并具有化学致癌物的阻断作用。
维生素C主要存在于新鲜水果及蔬菜中。
水果中以猕猴桃含量最多，在柠檬、桔子和橙子中含量也非常丰富；蔬菜以辣椒中的含量最丰富，在番茄、甘蓝、萝卜、青菜中含量也十分丰富，野生植物以刺梨中的含量最丰富，每100克中含2800毫克，有“维生素C王”之称。
维生素C为无色晶体，味酸，溶于水及乙醇，不耐热，在碱性溶液中极不稳定，日光照射后易被氧化破坏，有微量铜、铁等重金属离子存在时更易氧化分解，干燥条件下较为稳定。
故维生素C制剂应放在干燥、低温和避光处保存；在烹调蔬菜时，不宜烧煮过度并应避免接触碱和铜器。
维生素C具有很强的还原性。
它可分为还原性和脱氢型。
还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），本身则氧化为脱氢型。
在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色。
因此，当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时，维生素C尚未全部被氧化前，则滴下的染料立即被还原成无色。
一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。
所以，当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化，此时即为滴定终点。
如无其它杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比。
18维生素的测定
（三）液相色谱分析 色谱推荐条件： 预柱：ODS 10μm,4mm×4.5cm 分析柱：ODS 5μm,4.6mm×25cm 流动相：甲醇：水＝98：2，混匀，临用
前脱气。
紫外检测器波长：300nm,量程0.02 进样量：20μL 流速：1.65～1.70mL/min
生物鉴定法：费时、费力、需要动物饲养场地 微生物法：仅限于水溶性维生素的测定 荧光法：用于硫胺素的测定 仪器法：快速、灵敏、有较好的选择性 HPLC：用于大多数维生素的测定，费用高
二、脂溶性维生素的测定
脂溶性维生素的理化性质
溶解性：脂溶性维生素不溶于水，易溶于苯、 乙 醚、 丙酮、三氯甲烷、乙醇等有机溶剂。
做空白试验
重复上述操作，将20ml维生素B1标准使用液加入 盐基交换管以代替试样提取液，即得到标准净化液。
4.氧化
将5ml试样 净化液分别加 入A、B两个 反应瓶；
同时将5ml 标准净化液分 别加入A1、B 1两个反应瓶 中。
Maizel-Gerson 反应瓶
氧化流程
A、A1瓶 15%NaO H (3 ml)溶液振摇
（一）原理
样品中维生素A 及维生素E 经皂化提取 处理后，将其从不可皂化部分提取至有 机溶剂中。用高效液相色谱法C18 反相 柱将维生素A 和维生素E 分离，经紫外 检测器，用内标法定量测定
（二）样品处理
1.皂化称取适量样品（含维生素A 约3μg， 维生素E 各异构体约40μg）于三角瓶中， 加30mL 无水乙醇，振摇使样品分散。加 入5mL100g/L 抗坏血酸溶液和2.00mL 苯 并[e]芘溶液（5μg/L，内标用），混匀， 加10mL 氢氧化钾溶液（50％浓度），混 匀，于沸水浴上回流30min，使皂化完全， 皂化后立即放入冰水中冷却。
维生素B1的分析
含量测定
原理
本品的12.5ug/ml盐酸液(9 1000)， 在246nm波长处测定吸收度，吸收系数 为421。根据吸光系数法测定维生素B1 片含量. UV 共轭双键 λmax = 246nm
方法
取本品20片，精密称定，研细，精密称取细 粉适量?（约相当于维生素B125 mg），置 100ml量瓶中，加盐酸溶液(9 1000)约 70ml，振摇15min使维生素B1 溶解，加盐酸 溶液(9 1000)稀释至刻度，摇匀，滤过， 取续滤液备用． 精密量取续滤液5ml，再加盐酸溶液(9 1000) 稀释，定溶于100ml量瓶中，摇匀，在246nm 波长处测定吸收度。标准吸光系数421。
和计算方法.
3.正确使用UV-1102型分光光度计测定吸
光度值.
二 仪器和试剂
仪器：电子天平、研钵、100ml容量瓶、移液管、 UV-1102型分光光度计 等
试剂: 维生素B1片、维生素B1纯品粉末、稀酸、 氢氧化钠试液 、铁氰化钾试液、正丁醇、 盐酸溶液(9 1000)
三 原理及操作步骤
硫色素反应
原理
H3C N N
NH2 S
+
CH2 N
CH2CH2OH
CH3
Cl- HCl
氨基嘧啶环－CH2－噻唑环(季铵碱) 噻唑环在碱性介质中开环，在与嘧啶环环合，
经铁氰化钾等氧化剂氧化成具有荧光的硫色3C N
N H3C N
CH2 N
CH3 N a OH
NH2
S C2H4OH
HCl
CH2 N
CH3
NH2 O
NaS C2H4OH
-H 2O
N
H3C N
N N NaS
CH3 C2H4OH
维生素b1片含量测定的方法验证
维生素B1在体内参与糖代谢，对维持神经系统正常 功能和防止脚气病有重要作用。
维生素B1的测定方法
荧光分光光度法
01
利用维生素B1在特定波长下的荧光特性进行定量分析。
高效液相色谱法
02
通过色谱柱将维生素B1与其他杂质分离，再通过紫外检测器进
行定量。
微生物法
03
利用含有维生素B1的微生物培养基培养微生物，通过测定微生
维生素B1片含量测 定的方法验证
目 录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 结果分析 • 结论
01
CATALOGUE
实验目的
确定维生素B1片的含量
目的
通过实验测定，确定维生素B1片 中维生素B1的含量，为生产质量 控制和药品监管提供依据。
方法
采用高效液相色谱法（HPLC）进 行测定，通过色谱柱分离、检测 器检测，计算峰面积并外标法定 量。
采用合适的统计分析方法，如平 均值、标准差、变异系数等，对 数据进行分析和比较。
实验误差分析
误差来源
分析实验过程中可能产生的误差来源，如称量误差、滴定误差、 读数误差等。
误差传递
根据误差来源，计算误差对最终结果的影响，并评估误差传递的 规律和特点。
误差控制
针对误差来源，采取相应的措施，如使用高精度天平、规范操作 流程等，以减小误差对结果的影响。
05
CATALOGUE
结论
实验结论总结
实验结果表明，采用高效液相色谱法测定维生素B1片 的含量是可行的，该方法具有较高的准确度和精密度
，能够满足药品质量控制的测定要求。
输标02入题
在实验过程中，我们发现维生素B1片在波长为 246nm处有最大吸收，因此选择该波长作为检测波长 较为合适。
维生素c制剂的质量分析实验报告
维生素c制剂的质量分析实验报告维生素 c制剂是将维生素 c (或称甲基维生素）溶于稀盐酸溶液中制成，经加酶催化反应，然后与硫酸铜、硫酸铝钾、硫酸亚铁等反应得到一种脂溶性化合物，俗称“维生素 C”或“维生素 K”（亦称 VK),化学式为 KOH。
维生素 c主要存在于豆科植物和动物性食物中，其主要作用是维持细胞代谢和正常生理功能等。
维生素 c不仅在生理上能保护心脏、肝脏、肌肉、造血、神经、生殖等器官及组织细胞，同时能调节内分泌系统，预防心血管病如心肌炎、心肌病等，是人体不可缺少的重要营养素。
在机体各个组织中分布广泛且较为稳定，但随着年龄增长和氧化还原反应等作用减弱而逐渐失去作用。
维生素 c作为一种广谱抗坏血酸药物，在防治疾病方面有着广泛应用；而且治疗疾病效果明显；是一种理想且廉价的常用抗菌药物、抗病毒、抗生素制剂，在人类使用和治疗方面均有着不可替代的作用。
因此维生素 c制剂被广泛应用于各大医院药品采购目录中。
鉴于维生素 c制剂质量控制的特殊性和重要性，为了保证医药产品质量监督与控制工作能够正常开展，我部组织本实验室开展了维生素 c制剂质量分析工作。
1、制定实验方案维生素 c制剂主要是用于治疗和预防维生素的缺乏引起的各种疾病。
对临床用量较大的药品，如治疗心肌炎药物、抗菌药物等，由于其成分含量的特殊性，在临床使用中其质量管理也尤为重要。
针对原料来源和生产工艺情况，建立科学合理的原料种植管理模式对提高质量管理水平起到至关重要作用。
我部有8个专业实验室，其中2个国家级实验室以及2个省级实验室。
各实验室各司其职，各负其责，形成了从原料到成品一条完整有序的质量管理链。
实验室制定了具体实施方案，保证按照质量管理程序开展试验工作并顺利实施。
2、试样制备称取1 g维生素 c (浓度为10%)溶于150 ml稀盐酸溶液中，充分溶解后移入100 ml刻度玻璃瓶中。
取适量维生素 c加入100 ml10%磷酸钠溶液中，搅拌均匀后静置15 min,使其溶解。
食品分析理论第十章 维生素的测定_OK
• 1、微生物法：根据某种维生素是某种细菌生长所必需的原理，以细 菌繁殖程度或代谢产物定量该维生素含量，方法选择性较高，多用 于水溶性维生素检测，适用于检测多种衍生物的总和（如总叶酸）， 是经典方法。但微生物法操作繁琐、耗时过长，而且要求有特殊设 备和专门的训练人员。
• 2、比色法 可见分光光度、紫外分光光度
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(二)测定方法
• 维生素D的测定方法有：比色法、荧光法、紫外分光 光度法、气相色谱法、液相色谱法及薄层层析法等。
• 比色法灵敏度较高，但操作十分复杂、费时。
• 气相色谱法虽然操作简单，精密度也高，但灵敏度 低，不能用于含微量维生素D的样品。
• 液相色谱法的灵敏度比比色法高20倍以上，且操作简 便，精度高，分析速度快。是目前分析维生素D的最 好方法。
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• 胡萝卜素一般存在于植物性食品中，以含有胡萝卜为食物家 禽、兽类、水产动物及其加工产品，为着色而添加胡萝卜素 的食品，也含有胡萝卜素。
• 胡萝卜素对热及酸、碱比较稳定，但紫外线和空气中的氧可 促进其氧化破坏。用有机溶剂从食物中提取。
• 胡萝卜素本身是一种色素，在450nm波长处有最大吸收。胡 萝卜素常与叶绿素、叶黄素等共存，在测定前，必须将胡萝 卜素与其它色素分开。常用的方法有纸层析、柱层析和薄层 层析法，下面介绍的是纸层析法。
• ②、操作时加入乙酰氯可以消除温度的影响，可使 灵敏度比仅用三氯化锑提高约3倍。并可减少部分甾 醇的干扰。
• ③、此法不能区分D2和D3测定值是两者的总量。
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B、高效液相色谱法
• 1、原理 • 试样经皂化后，用苯提取不皂化物，馏去苯后，使用第一阶段的分
维生素类药物的分析方法
（3）维生素A在光照下产生的无活性的聚合物：鲸醇。 （4）维生素A的异构体等： 以上这些杂质在 310nm~340nm 的波长范围内有吸收， 所以干扰维生素A的测定。
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5. 合成的维生素A和天然鱼肝油中的维生素A均为酯式
维生素A，如供试品中干扰测定的杂质较少，能符合下 列第一法测定的规定时，可用溶剂溶解供试品后直接 进行测定，否则应按第二法，经皂化提取除去干扰后 测定。
pH不同的溶液，在247nm处分别测定差示吸收值
（ΔA）。以浓度C为横坐标，以差示吸收值ΔA为纵坐 标绘制标准曲线。
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样品的测定 取本品20片，精密称定，研细。精密称取适量粉末，
（2）反应介质需无水 （3）温度对呈色强度的影响很大 （ 4）本反应并非维生素 A专属，在相同条件下，某些有关物质均与
三氯化锑显蓝色，干扰测定，常使测定结果偏高。
（ 5 ）三氯化锑试剂有强的腐蚀性，易损坏皮肤和仪器，使用时应 严加注意。
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（三）高效液相色谱法
采用RP-HPLC法同时测定人血清中维生素 A和维生素E的含量。 根据不同病理生理状态下人血清中维生素A、E的浓度，寻求弄清 与某些疾病的关系，为临床治疗学、营养学等研究提供参考。 1. 仪器与色谱条件 色 谱 柱 为 C18 ； 流 动 相 为 甲 醇 - 水 （ 96:4 ） ； 流 速 为 1.2ml/min。内标物为维生素A醋酸酯。 2. 分析用样品液 对照品：维生素A，维生素E，维生素A醋酸酯
维生素类药物的分析方法：
生物法 微生物法 化学法 物理化学法
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第一节
维生素A的分析
维生素A 包括
维生素含量测定实习报告
实习报告：维生素C含量测定一、实习目的本次实习的主要目的是学习并掌握维生素C含量的测定方法，了解直接碘量法在维生素C含量测定中的应用。
通过本次实习，要求实习生能够熟练操作实验仪器，正确进行实验操作，并能够对实验结果进行分析和讨论。
二、实习原理维生素C，又称抗坏血酸，具有很强的还原性。
在直接碘量法中，维生素C与碘反应，生成碘化维生素C，从而可以计算出维生素C的含量。
该反应需要在酸性环境中进行，以减少其他物质的干扰。
实验中，以淀粉为指示剂，当维生素C完全反应后，溶液会由无色变为蓝色，即为终点。
三、实习器材与药品本次实习所需的器材有：电子天平、台秤、称量瓶、酸式滴定管（25ml）、移液管、锥形瓶等。
药品包括：维生素C试样、碘滴定液、淀粉溶液、稀醋酸、丙酮等。
四、实习步骤1. 维生素C试样的准备：准确称取维生素C试样0.2g，置于250ml锥形瓶中，加入新煮过的冷蒸馏水100ml和10ml1：1稀醋酸溶液，充分溶解。
2. 标准溶液的配制：在250ml烧杯中加入25ml去离子水，称入10g碘化钾和6.5g碘，全部溶解后，转移至棕色试剂瓶中，加水稀释至500ml，摇匀，放暗处保存。
3. 标准溶液的标定：准确移取25.00ml标准溶液于250ml锥形瓶中，加水25ml，加淀粉溶液5ml，以待标定的碘滴定液滴定。
当溶液出现稳定的蓝色并持续30秒不褪色时，为终点。
记录消耗的碘滴定液体积，计算标准溶液的浓度。
4. 维生素C含量的测定：将备好的维生素C试样溶液置于250ml锥形瓶中，加入稀醋酸4ml和淀粉指示液1ml，用碘滴定液滴定。
当溶液显蓝色并持续30秒不褪色时，记录消耗的碘滴定液体积。
五、实习结果与分析通过标定实验，得到了标准溶液的浓度。
在维生素C含量测定实验中，测得维生素C试样的消耗碘滴定液体积为X ml。
根据反应的化学计量关系，可以计算出维生素C试样中的维生素C含量。
六、实习讨论在实验过程中，可能影响测定结果的因素有：碘滴定液的浓度、维生素C试样的纯度、实验操作等。
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VC含量（ug/100gFW） =100*（V1-V2）K V/W V3
式中，W：样品重 V1：滴定样品用滴定液ml数 V2：滴定对照用滴定液ml数 V3：滤液ml数 V：提取液总体积 K：1ml滴定液氧化VC毫克数
荧光法测VB2含量
ޓ
双水相的高效萃取作用 ޓ简便快速，检出限和选择性得到优化。 ޓ丙酮形成的双水相萃取荧光测定VB2的方法要 优于由乙醇形成的双水相
优点：制备样品简单 不受样品挥发度和热稳定性的限制 高效性 、高选择性、分析速度快 缺点：仪器复杂 价格昂贵
脂溶性维生素的分析和检测
维生素C的检测方法 2，6-二氯靛酚滴定法 2，4-二硝基苯肼法 高效液相色谱法 钼蓝比色法 维生素B2的检测方法 分光光度法 催化动力学法 荧光法 色谱法
滴定法测VC含量--2，6-二氯靛酚滴定法
分类：
水溶性维生素：
维生素B族、维生素C、维生素PP、叶酸等
脂溶性维生素：
如维生素A、维生素D、维生素E、维生素K等
水溶性维生素的测试分析方法
分光光度法
分子荧光法
毛细管电泳法
高效液相色谱法
微生物法
高效液相色谱法
色谱柱: symmetry C18 (319 mm ×150 mm, 5μ m) 流动相:甲醇水(含己烷磺酸钠5 mmol/L、冰醋酸1%、 三乙胺013%) = 25∶75 流速: 1 mL /min 检测波长: 275 nm 进样量: 10μ L.
谢
谢
实验方法
方法1： 准确移取一定量的VB标准溶液于10 ml比色 管中，加入适量硫酸铵 ，3．O ml丙酮或乙醇。用水稀 释 至刻度后振荡1.0min静置分层，移取上层清液于λex／ λem =444／52lnm处测量荧光强度，同时做空白实验。 方法2： 准确移取适量VB2标准溶液(含VB2为m4)于带刻度的比 色管中，加入一定量的盐及丙酮或乙醇，用水稀释至 10 ml后振荡1.0min。静置分层．读取上层有机相体积 ，在λex／λem=444／52lnm处侧量其荧光强度，确定 VB含量m2，用式E=m1／m2计算有机相对VB的萃取 率E。
植物维生素提取
以蒲菜为例 维生素C的提取 称取蒲菜15～20 g加4%偏磷酸25mL进行匀浆,匀浆后用 2%偏磷酸定容至100mL,过滤,滤液进行维生素C含量的测 定. 盐酸硫胺、核黄素（维生素B2） 、盐酸吡哆辛、烟酸、 烟酰胺的提取 称取蒲菜15～20 g,加入75mL 011mol/LHCl于121℃加压 水解提取30min,冷却后定容至100mL,过滤,滤液进行除维 生素C以外的其它水溶性维生素含量的测定.
可见／近红外漫反射光谱无损检测南方蜜橘维 生素C的研究
原理：利用光在生物组织内部具有反射、折射、 衍射和吸收等特性来确定固体样品内部品质的 一种快速分析法，在水果内外部品质无损检测 中已得到广泛应用。对粉末及水果VC的检测也 有相关报道。 缺点：需要化学处理，分析速度慢。
实验仪器及参数设置 选用美国ASD公司的QualitySpec光谱仪，其波长范 围为350-1800nm，光谱采样间隔1nm，扫描时间每次 100ms，扫描10次，光源为12V/45 W钨卤灯。 50个小果系蜜橘样品。经代表性样品选择，确定40个 建模样品进行定标与验证，10个未知样品进行外部验 证。标准化学值测定参照食品卫生检验方法理化部分 总则(GB/T5009.1-2003),常规化学分析采用国家标准 发中的2.6-二氯靛酚滴定法（GB/T6195--86)。 实验采用漫反射方式，每个样品在赤道部位灯间隔采 集3次光谱，取平均值。光谱采集时尽量避免擦伤或伤 疤灯缺陷部位 光谱数据由美国ASD公司的indico V4.0软件进行采集 和转换，采用平滑，多元散射校正和标准3化对光谱数 据进行预处理，以减少噪声，样品粒度和光程变化对 光谱产生影响。数据分析由挪威CAMO公司的 UnscramblerV9.5软件中的PLS完成
试剂：1%草酸，2%草酸，0.001mol/L
2，
6—二氯酚靛酚 步骤：1.称4.0g新鲜样品——加5ml 2%草 酸研磨——过滤到50ml容量瓶中——残渣 用2%草酸提取——用1%草酸定容。 2. 吸取10ml滤液于三角瓶中用2，6—二氯 酚靛酚滴定，记录所用滴定液体积。 3. 对照：于另一容量瓶内加35ml 2%草酸 用1%草酸定容，取10ml进行滴定，记录体 积。
维生素分析与检验
维生素
又名维他命，是 维持人体生命活 动必需的一类有 机物质，也是保 持Байду номын сангаас体健康的重 要活性物质
⊙特点：
①维生素均以维生素原的形式存在于食物中 ②参与机体代谢的调节 ③大多数的维生素必须经常通过食物中获得 ④人体对维生素的需要量很小
⊙重要性：
当体内维生素供给不足时，能引起身体新陈 代谢的障碍，造成皮肤功能的障碍。