不同提取方法对苦参生物总碱的影响
绿色农药苦参碱的提取工艺研究
硫酸 滴定液 （．１ｍｏ／） １ ，摇 匀，置水 浴加 ０Ｏ ｌＬ ０ｍＬ 热 使残 渣完 全溶解 并 除尽 乙醚 ，放冷。加入 新煮 沸 后放 冷的蒸馏水 １ ５ｍＬ与 甲基红指 示液 ２滴 ，用氢 氧化钠滴定液 （． ｌ ）滴定至黄色 ，即得。每 ０ ２ｍｏ／ ０ Ｌ
１ｍＬ硫 酸滴定液 （ ．１ｍｏ／ ）相当于 ４９ ７ｍｇ的 ０Ｏ ｌ Ｌ ． ６ 苦参 碱 。
加 入 硫 酸滴 定液 （ ．１ｍｏ／ ） １ ０Ｏ ｌＬ ０ｍＬ，摇 匀，置 水 浴加 热 使 残 渣 完 全 溶 解 并 除尽 乙 醚 ，放 冷。加
入新 煮 沸后 放 冷 的蒸 馏 水 １ ５ ｍＬ与 甲基红 指 示 液 ２滴 ，用氢 氧 化钠 滴 定 液 （ ．２ｍｏ／ ）滴 定至 黄 ００ ｌＬ 色 ，即得 。每 １ ｍＬ硫 酸 滴定 液 （ ．１ｍｏ／ ）相 ０Ｏ ｌ Ｌ 当于 ４９ ７ｍｇ的苦 参碱 。 ． ６
１ 高温浸泡提取法生产工艺 ． ２ 将 苦 参根 干 燥 粉 碎 ，过 ０２ ． ｍｍ （０目）筛 ， ５ ６
按 照 １： ６～ １）的质量 比例 与 ６ ％乙 醇溶 液混 合， （ ０ ０ ８ ０℃搅拌过 夜。 过滤除去不溶物 ， 提取液于 ８ ０℃蒸干 取 上述干粉 ０５ｇ ． ，精密称 定，置具 塞锥 形瓶 中，
点，选用 浸泡超 声 提取 法、高 温浸 泡提取 法和 碱性
关键 词 ： 苦参碱 ； 超声波 ； 碱性醇 ； 提取率 ；
出膏率
苦参碱 （ ｔｎ ，Ｓｐ ｏａ ｉ ｎ）系从豆科植 Ｍａ ｉｅ ｏｈ ｃｒ ｄ ｅ ｒ ｐｉ
物苦 参 （ｏｈ ｒ ａｅｃｎ ｔ Ｓｐ ｏａｆ ｖｓｅｓＡｉ）或豆 科植物广豆根 ｌ ．
Ｖ ｇ ｔ ｂ ｅ ０ ２． ｅ ｅａ ｌｓ １ ９ ２
苦参碱的提取,分离与鉴定
中药苦参是豆科植物苦参(Sophors Flavescens Ait)的干燥根,味苦,性寒,有清热燥湿,杀虫等作用.临床上用于治疗痢病,黄胆和皮肤瘙痒症.近年还发现具有抗肿瘤,升白,抗病毒性肝炎等药理作用,苦参中主要含生物碱,此外还有黄铜类成分.一, 苦参中主要已知生物碱的结构和性质1.氧化苦参碱（oxymarrine）C12H24N2O2，白色棱晶，易溶于水，甲醇，乙醇，氯仿，不溶于乙醚，苯。
溶点：207～208℃（不含结晶水）162～163℃（含一个结晶水）77～78℃（含多个结晶水）结晶水可在145～150℃／0。
002mmHg下除去，可于许多金属离子如Fe2＋ Cu2+ Cr3+等生成沉淀，［α］？？＋47.7℃(乙醇).2.苦参碱(matrine)C15H24N2O在轻石油醚中结晶时，由于温度等条件不同，可以得到αβδ三种结晶（溶点分别为76℃ 87℃ 84℃）和一种流体即γ型。
通常室温下结晶得到的是α型，易溶于水，甲醇，乙醇，氯仿，溶于苯，在乙醚中溶解度小。
［α］？？＋39.11[乙醇]3.脱氢苦参碱(槐果碱)（sophocarpine）C15H24N2O白色棱晶。
溶点80～81℃，易溶于甲醇乙醇氯仿，略溶于苯和乙醚，在水中溶解度小。
［α］？-29.44(乙醇)4.槐定(sophoridine)C15H24N2O白色棱晶，溶点106～108℃，为苦参碱的一种空间异构体。
二．实验目的与要求（1）通过苦参生物碱的提取掌握用渗滤法和离子交换法提取生物碱的方法。
（2）掌握沙氏提取器的使用方法。
（3）掌握氧化铝吸附薄层层离法和柱层层离法鉴定和分离生物碱的方法。
三．原理氧化苦参碱为喹诺里西汀类生物碱，叔胺氮氧化合物与酸成盐溶于水与非生物碱分开，提取的生物碱盐的阳离子部分与H+型树脂发生交换生物碱吸附在柱上，吸附有生物碱的树脂，碱化呈游离生物碱，可被氯仿等有机溶剂提取。
R-SO3-Na+ ＋ H+CL- ――>R-SO3-H+ + NaCLSO3Na + H2O生物碱四. 实验方法.1 酸水提取和离子交换（1）渗漉法取苦参碱400克,加入适量0.5%(g/v)的盐酸湿润后放置一小时，装入渗滤液的PH值及生物碱反应，使渗滤液通过离子交换脂柱，待经过树脂柱的滤液生物碱反应或微弱的反应时，停止交换，将树脂倒入烧杯中，酮蒸馏水洗涤几次，滤干，树脂放入搪瓷盘中自然晾干。
苦参碱的提取研究
苦参碱的提取研究苦参碱是一种草本植物苦参中的主要生物碱成分，广泛应用于医药领域。
苦参碱具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤等多种药理作用，因此成为现代医药研究的热门对象之一、以下是针对苦参碱的提取研究的一些内容，总字数超过1200字。
一、苦参碱的提取方法1.传统提取方法：一般采用传统的溶剂提取方法，包括水提、醇提和碱提等。
具体操作步骤为：将细粉状的苦参材料与适量的溶剂混合，置于提取设备中进行反应。
反应时间根据不同的提取溶剂和设备而异，通常为数小时至数十小时。
提取液经过过滤、浓缩、蒸馏等操作后，获得苦参碱的提取物。
2.超声波辅助提取：超声波具有高能量、高频率、高效率的特点，对于草本植物的提取具有较高的效果。
超声波提取方法主要是利用超声波的振荡作用使植物细胞壁破裂，增强苦参碱的释放。
超声波辅助提取的操作过程与传统提取方法相似，仅在提取过程中加入超声波器，并调节合适的超声波频率和功率。
3.超临界流体萃取法：超临界流体（常用的是二氧化碳）具有较好的渗透能力和溶解能力，与固体物质接触后能迅速渗透到物质内部，从而加快有效成分的释放。
超临界流体萃取法主要通过改变温度和压力等条件，使二氧化碳表现出超临界态，并对苦参材料进行提取。
该方法能够高效且选择性地提取苦参碱，并且操作过程中无需使用有机溶剂，对环境友好。
二、苦参碱提取研究的影响因素2.提取溶剂的选择和用量：提取溶剂的选择和用量直接影响到苦参碱的提取效果。
一般来说，具有较好极性的溶剂，如水、乙醇等，对苦参中的苦参碱具有较好的提取效果。
但是，有机溶剂的使用也会带来环境问题，因此需要在提取效果和环境友好之间进行权衡。
3.提取时间和温度：提取时间和温度是苦参碱提取研究中重要的操作参数。
通常情况下，提取时间和温度越长、越高，提取速度越快，但也可能加速苦参碱的降解。
因此，需要根据不同的实验要求和苦参材料的特性进行合理的调节。
三、苦参碱提取研究的现状和展望苦参碱的提取研究已经取得了一定的进展，但仍存在一些问题和挑战。
苦参生物碱的提取分离流程
苦参生物碱的提取分离流程苦参生物碱的提取分离可有意思啦！咱先来说说苦参生物碱为啥要提取分离呢。
苦参啊，它里面含有的生物碱有好多厉害的作用。
这些生物碱可能在医药呀，或者其他一些科研领域有着特殊的价值。
比如说可能对某些疾病有治疗的潜力之类的。
那怎么把这些生物碱从苦参里弄出来呢？这就涉及到提取的过程啦。
有一种方法呢，是溶剂提取法。
就像是把苦参当成一个宝藏盒子，我们要用合适的溶剂这个钥匙去打开它，把生物碱取出来。
一般会选择乙醇这类溶剂，把苦参放进去浸泡一段时间。
这个浸泡就像是给苦参泡个舒服的澡，让生物碱慢慢地从苦参里跑到溶剂里面。
浸泡的时间得合适，太短了生物碱还没来得及出来，太长了可能又会有其他杂质跟着跑出来了。
还有就是超声提取法。
这个就更酷啦！超声就像是给苦参做了个按摩，在超声的震动下，苦参生物碱就会比较快地从苦参里被“震”到溶剂里。
这种方法速度比较快，而且相对来说提取的效率还挺高的呢。
提取出来之后，可不能就这么直接用呀，因为里面还有好多其他的东西混着呢，这就需要分离了。
分离的时候呢，可以用色谱法。
想象一下色谱法就像是一场比赛，不同的生物碱就像是不同的选手，它们在这个特殊的赛道（色谱柱）上奔跑，因为它们各自的性质不同，所以跑的速度就不一样，这样就可以把它们一个一个地分开啦。
比如说有的生物碱极性大，有的极性小，根据这个极性的差别，就能把它们很好地分开。
还有一种是利用生物碱的酸碱性来分离。
有的生物碱是碱性的，我们就可以用酸把它变成盐，然后再利用盐的性质把它和其他物质分开。
这就像是给生物碱穿上了一件特殊的衣服（变成盐），让它变得和其他东西不一样，这样就容易分开了。
在整个提取分离的过程中啊，有好多小细节得注意。
比如说温度呀，温度不合适的话，可能会影响生物碱的稳定性，它要是不稳定了，就可能在提取分离的过程中被破坏掉了。
还有就是提取和分离过程中的设备要干净卫生，要是有其他的脏东西混进去，那可就前功尽弃了。
苦参生物碱的提取分离虽然有点复杂，但就像探索一个神秘的小世界一样，每一步都充满了惊喜和挑战呢。
苦参中生物碱的提取及纯化工艺研究进展
苦参中生物碱的提取及纯化工艺研究进展苦参（Sophora flavescens Aiton）是一种常见的中药材，广泛应用于传统药物和中成药中。
苦参中的生物碱是其主要活性成分，具有抗菌、抗炎、抗肿瘤等药理作用。
因此，提取和纯化苦参中的生物碱具有重要的研究价值和应用前景。
本文将综述苦参中生物碱的提取和纯化工艺研究进展。
苦参中主要含有多种生物碱，如苦参碱、苦参素、大黄素等。
目前，常用的提取方法主要包括水煎膏剂提取法、溶剂提取法和微波辅助提取法等。
水煎膏剂提取法是一种常见的传统提取方法，主要通过将苦参粉末与水煎煮，然后浓缩、过滤和析出等步骤获得苦参提取物。
水煎膏剂提取法操作简单、成本低廉，但其提取效果有限，且存在易受环境条件影响、提取物稳定性差等缺点。
溶剂提取法是一种常规的苦参提取方法，常用的溶剂包括乙醇、甲醇、乙酸乙酯等。
该方法可以显著提高提取效果，但同时也会带来一些问题，如溶剂残留、环境污染等。
因此，需要对溶剂提取法进行优化和改进，减少对环境的影响。
微波辅助提取法是近年来发展起来的一种新型提取方法，其主要原理是利用微波的加热作用加速提取过程。
微波辅助提取法具有提取速度快、提取效果好的优点，已经在苦参提取中得到了广泛应用。
然而，目前关于苦参微波辅助提取法的研究仍较少，有待进一步深入研究。
苦参中生物碱的纯化工艺主要包括溶剂分配法、硅胶柱层析法、高效液相色谱法等。
其中，溶剂分配法是一种常用的纯化方法，通过溶剂的不同极性和沸点差异，实现苦参中生物碱的纯化。
硅胶柱层析法是一种较为经典的纯化方法，通过利用硅胶的吸附和解吸作用，将苦参中生物碱与其他杂质分离。
高效液相色谱法是一种高效、快速的纯化方法，已经得到了广泛应用。
值得注意的是，纯化工艺的选择需要根据苦参中生物碱的性质和目标纯度的要求来确定。
总的来说，针对苦参中生物碱的提取和纯化工艺，目前已有多种方法和技术可供选择。
然而，仍然存在一些问题需要进一步研究和改进，如提取效果和纯化效果的提高、环境友好性等。
苦参不同方法提取物抗鱼体车轮虫作用的研究
苦参不同方法提取物抗鱼体车轮虫作用的研究张继平;贺顺连;胡卫平【摘要】采用超声波、冷凝回流及常温浸泡3种方法从苦参中提取分离生物碱,经初步分析,其主要成分为苦参碱、氧化苦参碱等.运用药理学方法对得到的生物碱进行了抗鱼体车轮虫试验,结果显示:苦参生物碱能对鱼体鳃部车轮虫起到有效的驱杀作用;不同提取方法的提取物中由于生物碱的成分与含量有差异,对车轮虫的杀灭效果也有显著差异;超声波提取物中苦参碱的含量最高,对车轮虫的杀灭效果也最好,表明苦参生物碱中对车轮虫起驱杀作用的成分主要是苦参碱.【期刊名称】《长江大学学报（自然版）理工卷》【年(卷),期】2005(002)002【总页数】3页(P57-59)【关键词】鱼体车轮虫;苦参提取物;治疗作用【作者】张继平;贺顺连;胡卫平【作者单位】广东佛山科学技术学院动物科学系,广东,佛山,528231;广东佛山科学技术学院动物科学系,广东,佛山,528231;湖南五指峰生化有限公司,湖南,浏阳,410300【正文语种】中文【中图分类】S943近几年，全国各地的水产养殖中都不断发生因寄生虫病暴发流行而损失惨重的事件。
顺德、南海等地在1999年、2000年连续出现鳗鲡、鳜鱼的车轮虫病、指环虫病的暴发，由于缺乏有效药物治疗，损失很大，严重危害了水产养殖业的稳步健康发展。
目前，国内水产用杀虫药物大都以人工合成的化学药物为主(如有机磷杀虫剂、重金属类杀虫剂、菊酯类杀虫剂等)，此类化学药物毒性与残留都较大，虫体也易产生抗药性，不符合环保和健康食品要求[1]。
中草药商品制剂用于水产养殖主要见于防治水产动物细菌与病毒病[2]，针对水生动物寄生虫病的制剂很少，也主要是见于民间使用，因此，生产上用药常带有很大的盲目性。
由于植物源生物碱可通过破坏虫体的神经系统以及引起虫体拒食作用等起到驱虫杀虫效果[3]，因此，本试验尝试从苦参中提取生物碱用于抗鱼体车轮虫研究，旨在为探索研究及开发应用中草药防治水生动物寄生虫病提供理论参考。
苦参碱提取工艺与氧化苦参碱制备方法
1 简述苦参碱、氧化苦参碱(苦参素)是苦豆子、苦参、广豆根等豆科槐属植物中生物碱的主要成份。
苦参碱(matrine)和氧化苦参碱(oxymatrine)化学分子式分别为C15H24N2O 和C 15H24N2O2，分子量分别为248 和264，是苦参型生物碱的主要活性成分，二者在一定条件下可以转化.2 苦参碱提取工艺2.1溶剂提取法苦参碱的溶剂提取法, 常用水、酸水及乙醇等作为提取溶媒, 提取方法多为浸渍、渗滚、煎煮、回流等经典方法。
孔令明等川从酸水回流提取、乙醇回流提取两大苦参总碱方法的对比中发现,乙醇回流法对苦参总碱的提取效果较好, 是一种目前较为合适的苦参总碱溶剂提取方法。
其最佳工艺参数为: 采用筛分目数20—60 目的苦参粉, 以60 % 的乙醇溶液, 料液比为1 : 2 , 回流提取2 次。
谭桂莲分别对水煎法、乙醇回流法和渗滤法提取氧化苦参碱工艺进行优选研究, 结果表明, 渗滤法所得浸提物中, 氧化苦参碱含量明显高于水煎法和乙醇回流法, 故认为渗滤法为氧化苦参碱的最佳提取方法。
2.2 离子交换法利用生物碱盐通过强酸型阳离子交换树脂柱, 使生物碱盐阳离子交换在树脂上, 而非生物碱化合物则流出柱外, 将交换后的树脂晾干, 用氨水碱化, 氯仿提取的原理。
高拴平等研究了离子交换法提取分离苦参碱的工艺和过程, 技术路线是:苦参粉→甲醇回流提取→回收溶剂→粗提物→稀硫酸溶解→脱脂→水层→除鞣→上D201型阳离子交换树脂※碱化树脂→氯仿提取→回收溶剂→脱水→丙酮→苦参碱结晶。
采用上述提取分离方法, 苦参碱的产率最高, 结晶质量最好。
张存莉等采用不同浓度的乙醇和阳离子交换树脂对苦参碱进行提取和纯化, 并对不同的苦参碱纯化工艺进行比较和研究。
结果表明, 用60%的乙醇进行提取和用阳离子交换树脂进行纯化的工艺过程生物碱收率较高, 生产成本较低, 工序较为简单, 有一定的进步性, 适宜工业化生产。
2.3 树脂吸附法吸附树脂是近10年来发展起来的一类有机高分子聚合物, 它具有物理化学稳定性高、吸附选择性独特、不受无机物存在的影响、再生简便、解吸条件温和, 使用周期长、宜于构成闭路循环, 节省费用等诸多优点。
超声波法提取苦参总碱的研究
摘要 ： 以苦参 的根为原料 ， 通过改变超声时间 、 浓度 、 料液比、 超声频率等条件研究 了对 苦参 总碱 提取效果 的影 响， 从而可以确定
苦参 总碱最适合 的提取条件 。
关键 词 ： 苦参总碱 ； 提取 ； 超声
中图分类号 ： ８ ． Ｒ ２４２ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ：６ ４ ８４ （０ ２ ０ — ０ ９ ０ １ ７ — ６ ６ ２ １ ）１ ０ ０ — ３
有效 的缩短提取 时间， 节约了溶剂 ， 并且 防止 了高温 对有效成分的影响。
２１１ 在 不 同浓 度 的 盐 酸 的 作 用 下超 声对 苦 参 总 碱 ．．
提 取 率的 影响
称取 ２ 苦参粉 ５ ， ｇ 份 放入 ５ 个烧杯 中 ， 依次加人 ｐ Ｈ值为 １ ５ ～ 的盐酸 ， 搅拌均匀， 超声提取。提取后进 行过滤。 滤液静止过夜 ， 放在恒温水浴中蒸干。 在往残 渣 中加 ５ Ｌ ｍ 无水乙醇。 吸取待测液 ２ ｌ ０ 挥干无水乙 醇 ，在加人 １ｍ 缓 冲溶液 ，０ Ｌ的氯仿摇动 ２ ｉ， ０Ｌ １ｍ ｍｎ 静 置 ２ 。等 氯仿 与水 层 完全 分开 后 以 １ｍ ｈ ０ Ｌ氯仿 ＋０ Ｌ １ｍ 蒸馏水做为空白， 在苦参碱的最大波长 ４７ｍ １ｎ
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不同提取方法对苦参生物总碱的影响
摘要：目的：考察不同方法对苦参中苦参生物总碱提取效率的影响。
方法：采用酸性染料比色法，对苦参酸水回流、乙醇回流、酸水超声提取三种方法的提取液中的生物总碱进行含量测定。
结果：水回流、乙醇回流、酸水超声提取液中苦参总碱含量分别为0.573%、0.652%、0.634%。
结论：以苦参总碱作为评价指标，乙醇回流结果较好，酸水超声提取次之，酸水回流最低。
关键词：不同提取方法苦参生物总碱影响
【中图分类号】r-3 【文献标识码】b 【文章编号】1008-1879（2012）12-0393-01
苦参又名地槐、野槐、牛参等，为豆科槐属植物（sophora flavescens ait）的干燥根，分布于我国南北各地[1]。
近年来医学界对苦参有效成分提取、分析及其药理等方面进行大量的研究并取得很大进展。
苦参中苦参总碱的提取方法较为常用的有溶剂提取法，包括水提和醇提，加热回流和超声提取。
目前，其总生物碱的含量测定方法有重量法、酸碱滴定法、酸性染料分光光度法[2]。
为了充分研究不同方法的生物总碱提取效率，我们分别采用酸水回流、乙醇回流、酸水超声三种方法，并采取酸性染料比色法，测定不同提取方法中苦参总生物碱的含量。
该研究为工业化生产苦参总碱提供了科学的方法。
1 材料与方法
1.1 仪器试剂。
uv2100紫外分光光度计（美国惠普公司），ph精
密数显酸度计（上海天达仪器有限公司），微量进样器（上海玻璃仪器厂）。
苦参碱由广东梅州嘉应制药有限公司提供，苦参（广东康美股份有限公司），其它试剂均为分析纯。
1.2 试液配制。
①溴麝香草酚蓝缓冲溶液的配制：量取0.1m的磷酸二氢钾50ml转移至于100ml容量瓶中，加入0.1m氢氧化钠4
2.2ml，再加蒸馏水7.6ml，用酸度计校正为7.6。
并精密称取溴麝香草酚蓝0.0125g，加入上述配制溶液使溶解，摇匀即得。
②苦参碱标准品溶液配制：精密称取苦参碱标准品15.00mg用甲醇定容到5ml，即为
3.0mg/ml。
1.3 比色法最大吸收波长。
苦参碱酸性染料比色法的最大吸收波长在400～420nm之间，以2nm为单位左右移动波长，确定最大吸收度的波长所在位置，结果显示410nm处为其最大吸收波长。
1.4 标准曲线的绘制。
取已配制好的上述苦参碱标准品溶液20、30、40、50、60ul分别置于25ml的带塞磨口锥形瓶中，置于水浴80℃蒸干溶剂，加入溴麝香草酚蓝ph=7.6闭塞剧烈振摇3min，分别转入25ml分液漏斗中，静置2h，使水层与氯仿层完全分层后，分取氯仿层，在410nm波长处测定吸收度，以未加生物碱的氯仿萃取液为空白对照[3]。
建立苦参碱含量x与吸光度a间的线性关系，采用spss作回归分析，得到方程为：
a=0.0226x+0.0122，r=0.991
说明苦参碱在60ug～180ug之间线性关系良好。
1.5 稳定性实验。
取苦参碱标准溶液40ul，按
2.3标准曲线下方法每隔1h测定其吸收度，结果表明，苦参碱和溴麝香草酚蓝在
ph=7.6缓冲溶液中形成的离子对，在氯仿中8h内是稳定的。
2 结果与分析
2.1 苦参总碱的提取。
2.1.1 酸水回流法提取苦参总碱。
将苦参药材粉碎成80目粉末，取10g，加0.3%的hcl溶液回流提取3次，提取时间分别为1.5h、1h、1h，加入hcl溶液量依次为40ml、30ml、30ml，总料液比为1∶10。
合并提取液于真空旋转浓缩至10ml，过滤，冷却，加蒸馏水定容到50ml。
2.1.2 乙醇回流法提取苦参总碱。
将苦参药材粉碎成80目粉末，取10g用95%的工业酒精回流提取3次，提取时间分别为1.5h、1h、1h，加入工业酒精的量依次为40ml、30ml、30ml，总料液比为1∶10。
合并提取液于真空旋转浓缩至10ml，过滤，冷却，加蒸馏水定容到50ml。
2.1.3 酸水超声法提取苦参总碱。
将苦参药材粉碎成80目粉末，取10g，用0.3%的hcl溶液超声提取3次，提取时间分别为1.5h、1h、1h，加入hcl溶液量依次为40ml、30ml、30ml，总料液比为1∶10。
合并提取液于真空旋转浓缩至10ml，过滤，冷却，加蒸馏水定容到50ml。
2.2 样品液总生物碱的含量测定。
分别用微量进样器吸取酸水回流、乙醇回流、酸水超声样品液各20ul，置于25ml带塞磨口锥形
瓶中，于水浴80℃蒸干溶剂，分别加入溴麝香草酚蓝ph=7.6缓冲溶液6ml，氯仿6ml，闭塞剧烈振摇5min，分别转入25ml分液漏斗中，静置2h，使水层与氯仿层完全分层后，分取氯仿层，在410nm 波长处测定吸收度，以未加样品液的氯仿萃取液为空白对照。
用工作曲线法进行定量。
结果见表1。
3 讨论
本实验采用工作曲线法进行定量，方法简单，可靠，重现性好。
用待测组分的纯品作对照物质，以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法。
此法可分为工作曲线法及外标一点法等。
工作曲线法是用对照物质配制一系列浓度的对照品溶液确定工作曲线，求出斜率、截距。
在完全相同的条件下，准确进样与对照品溶液相同体积的样品溶液，根据待测组分的信号，从标准曲线上查出其浓度，或用回归方程计算。
酸性染料比色法测定样品生物总碱含量时，为了防止氯仿层中的水分测定结果的影响，应通过加吸水剂无水硫酸钠方法除去氯仿萃取液中的水分。
酸性比色法的ph值要求较高，本实验所用的溴麝香草酚蓝缓冲液，配制好必须用ph酸度计进行校正，否则会对测定结果带来影响。
参考文献
[1]辛海量，赵玉海，林峰，等.苦豆草中总生物碱含量测定[j].解放军药学学报，2002，18（2）：113-115
[2]郑虎占，董泽宏，佘靖.中药现代研究与应用[m].第3版.北
京：学苑出版社，1998.270。