抗生素微生物测定中的注意事项

性是否一致 ， 观察菌落形态 。检验菌种 由于传代次数太多 ， 也 容易 出现变异 ， 操作过 程 中环 境 、 器具和试剂 的污染也 能导 致菌种异常 。在排除菌种异 常的情况下 ， 应检查菌液浓度是 否合适 ， 可根 据抑菌 圈大小调 节菌液浓度 ， 观察 抑菌圈是否 能达到正常范围。 此外 ， 培养基的 ｐ Ｈ值 、 盐的浓度 和各成分 的比例都会给
测 定工 作 带 来 不 良影 响 ，调 节 培 养 基 的 ｐ Ｈ值 可 影 响抗 生 素
抗 生素是 医疗上 广泛使用的药品 ，为 了保证其质 量 ， 生 产及药检部 门都严格地按 国家药典对产 品进行检验 。 生素 抗 效价 的生物测定—— 管碟法 是 目前抗 生素效 价测定 的 国际
察 到透 明的抑菌 圈。我们在多年的实际检测工作 中发现培养 基的选择 、 菌种变异 、 菌圈 出现双圈或无抑 菌圈等 问题能 抑 影 响抗生素 的测定结果 ， 现将在实际工作 中对 以上 问题 的解 决方法总结 如下 ， 供大家参考 ：
素在琼脂培养基 内的扩散速度。
调整菌层培养基 内试 验菌的菌量 ， 在有些试验 菌菌量过 少， 使抑 菌圈边缘 模糊不清 晰 ， 但试验菌量过 多也会抑 菌圈
定来判定该 抗生 素 已不是庆大霉素 ， 不能再用 微生物测定法
进行含量测定 。
宜 的方法过滤 ， 调整 ｐ Ｈ值 ， 分装灭 菌备用 。根据 《 国兽药 中
典》 抗生素微生物检定法 中选用 ５ 种不 同处方 的培养 基 。 目 前市场 已有部分干燥培养基商品生产供应 。临用 时按照使用 说 明书进行配制 ， 但注意培养基的 ｐ Ｈ值应符合规定 ， 否则必 须校正 ， 有些还未收入《 中国兽 药典》 的培养基 和市场上 还没 干燥 品出售 的培 养基 ， 则需 自行按规定 配制 ， 配制培养 基 对 用 的几种 主要原料 的选择极 为重 要 ， 如胨 、 肉膏 、 酵母 膏 、 琼
种变异染菌 的可能性 ， 观察 斜面是否正 常 ， 与规定 的菌种特
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生 索产 品特 性 ， 需要 积累大量 实际工作经验 ， 论知识 更 将理 全 面贯彻到实践 中去 ， 正确地解决实际检测 中出现的问题 。
做到保温防寒 、 防止 贼风 ， 在运输途 中尽量做 到匀 速行 驶 ， 减
辫 疆 李教 业
２０ ０ ８年 第 ５期
藐 生 素徽 生 物 测 定 审 的洼 意 事珏
库 丽扎 达 ， 尔江 ， 吾 列 玛 沙
（ 新疆维吾 尔自治区兽 药饲料监察所， 乌鲁木齐 ８０ ６ ） ３０ ３
中图分类号 ： ８ ８２ 文献标识码 ： ￥ ５． Ｂ
文章编号 ：０ ３ ４ ８ （ｏ ８）５ ０ ４ — １ １ ０ — ８ ９ ２ ０ ０ — ０ １ ０
少紧急刹车造成 的应激 。另外 ， 牲畜到达 目的地后不要立 即 喂水喂料 ， １ 第 ｄ只能给少许优质干草和少量多次饮水 ， 则 否
容 易 引 起运 输 搐 弱 症 。
２７ 与原畜主签好 合同 ， ． 保存好相关证据 ， 以备后查 。合同 要 明确双方责任 ，对引进 的奶 牛带病应如何处理等问题进行
明确 ， 以防引起不必要 的纠风和经济损失。防止 以劣换优等奶
牛掉 包 欺 骗行 为 的 出现 。
团
太小 ， 并且影响试 验的灵敏度 。由于双碟 底不平或制备琼脂
培养基平板时工作 台面不 够平 ， 结果导致培养基层厚度不够
均匀也可使 抑菌 圈边缘不正 。
１ 培 养基 的质 量
培养基 中原料 的质 量对抑菌 圈边 缘清 晰度 及试 验结果 的精确 度影响较大 ， 因此应对原材料进 行预测试 验 ， 挑选适
脂等都能影 响抗 生素所致 的抑菌圈大小与清晰度 。因此每次 更换原 料时需作抑 菌圈预测 试验 ，以便挑 选适 当的品种使
用 ， 一 方 面 ， 可 以试 验 培 养 基 的配 方 ， 脂 含 量 的 减 少 也 另 也 琼
３２ 抗生素无抑菌圈 。在抗生素的测定过程 中， ． 经常 出现无 抑菌 圈或抑菌 圈模糊 现象 ，例如在测定硫酸粘杆菌素时 ， 就 出现过这种现象 ， 经大量试 验证实 ， 该抗生 素对检验菌 种的 菌龄和菌 的浓度要求较 高 ， 检验 中必须保证接种时所用 培养 基新鲜 ， 无冷凝水则不能使用 ， 用灭菌生理盐水将菌苔洗下 ， 所 以检验菌要头天接种次 日使用 ， 以保证菌体 的活性。
当的品牌使用 。 制成 的培养基不应有沉淀 ， 如产生沉淀 ， 可在
３ 抗 生素 的抑 菌 圈 出现 双 圈或无 抑菌 圈
３１ 测定硫酸庆大 霉素抗生素 时常出现抑菌圈为双圈 的现 ．
配制培养基 后 ， １５ ，０ ｎ溶化 ， 置 １ ℃ ２ ｍｉ 趁热用纸 浆减 压或适
象， 出现异常 的原 因一 般是 由于庆大霉素成分 出现 了异常或 出现了增效剂等不该有 的成分 ， 此是只能进行组分鉴别或鉴
通用方 法 ， 国药典也采用此法 。管碟法是利用抗 生素摊布 我
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特定试验菌 的琼脂培养基 内扩散 ， 形成一定浓度 的含抗 生素
的溶解度直接影响其抗菌效力 ，培养基 ｐ Ｈ值 的改变也可影
响细菌 的生长 ， 接影响 最低抑 菌浓度 ， 直 生长速度 以及 抗生
的球形 区， 抑制了试验菌 的繁殖 ， 通过透明琼脂培养基 ， 可观
总之 ，虽然抗生素的微生物测定是一种常规检验方 法 ，
影响抑 菌圈的大小 。
但 是其 中出现很多 的问题 ， 原因复杂 ， 响因素众 多 ， 影 要解决
这些 问题 ， 不仅需要 检验人 员全面了解实验影响因素和各抗
２ 影 响抗生 素抑 菌 圈直径 大小 和清 晰度
抗生素微生 物测定 中抑菌圈太大或太小 ， 先应排除菌 首