微生物检测手段及注意事项
微生物检测操作规程
微生物检测操作规程一、引言微生物检测是一个广泛应用于医疗、食品、环境等领域的重要检测方法，通过对样品中微生物的定性和定量分析，可以判断样品的卫生质量和安全性。
为了确保微生物检测结果的准确性和可靠性，制定一套操作规程是非常必要的。
本文将详细介绍微生物检测操作规程的步骤和注意事项。
二、操作规程1. 样品采集a. 根据检测对象的不同，选择合适的采样方法。
例如，对于食品样品，可以采用无菌容器直接采集；对于空气样品，可以使用空气采样器进行采集。
b. 采集样品时应注意避免外界污染，避免手部接触样品，以免引入外部微生物。
2. 样品处理a. 根据不同检测方法的要求，对样品进行预处理。
例如，对于固体样品，可以进行均质处理或稀释处理；对于液体样品，可以进行滤液处理。
b. 在样品处理过程中，应注意避免交叉污染，使用无菌操作器具和器皿，确保样品的纯净度。
3. 微生物培养a. 根据检测要求，选取合适的培养基和培养条件。
不同的微生物可能对培养基和培养环境有特殊要求，需要进行适当调整。
b. 严格按照培养基配制方法进行操作，确保培养基的质量和纯度。
c. 在培养过程中，保持适当的温度、湿度和通气条件，以促进微生物的生长。
4. 微生物检测a. 根据检测要求，选择合适的微生物检测方法。
常用的方法包括菌落计数法、涂布法、过滤法等。
b. 在进行微生物检测前，对检测仪器和试剂进行校准和验证，确保其准确性和可靠性。
c. 严格按照检测方法的步骤进行操作，注意避免交叉污染和误操作。
5. 结果分析a. 对微生物检测结果进行分析和解读，判断样品的微生物质量。
b. 结果分析过程中，应注意排除干扰因素，确保结果的准确性。
6. 结论和报告a. 根据微生物检测结果，给出结论和评价，判断样品是否符合相关标准或要求。
b. 撰写检测报告时，要求结果准确、清晰，并附上操作过程和结果分析的详细记录。
三、注意事项1. 操作过程中应保持操作台面和操作器具的清洁，并进行必要的消毒处理，以防止交叉污染。
微生物限度检查操作规程
微生物限度检查操作规程《微生物限度检查操作规程》一、目的微生物限度检查是用于确认产品是否符合微生物水平要求的一种分析方法。
本操作规程的目的是制定微生物限度检查的操作步骤，确保检查结果的准确性和可靠性。
二、适用范围本操作规程适用于所有需要进行微生物限度检查的产品，包括食品、医药和化妆品等。
三、操作步骤1. 准备工作：清洁实验室工作台面和仪器设备，准备所需的培养基和试剂，并确保仪器设备的正常运转。
2. 取样：按照产品的取样标准，从不同批次或不同位置进行取样，并确保取样的代表性。
3. 样品制备：将取样的产品进行样品制备，包括稀释、搅拌和过滤等步骤，以便于后续的微生物检查。
4. 培养：将样品接种在适当的培养基上，根据不同的微生物种类和要求进行培养，并进行恒温培养一定时间。
5. 计数：在培养一定时间后，对培养基上的菌落进行计数，并按照标准方法进行结果的记录和确认。
6. 结果判定：将检查结果与产品的微生物限度标准进行比对，根据结果作出是否合格的判定。
7. 结果记录：将微生物限度检查的结果进行记录，包括样品信息、操作步骤、检查结果和判定等信息，并将结果报告给相关部门或供应商。
四、注意事项1. 操作人员应具备一定的微生物检测知识和操作技能，严格按照操作规程执行。
2. 实验室应保持清洁、卫生，并进行定期消毒和验证。
3. 实验室设备应定期维护和校准，确保设备的准确性和可靠性。
4. 所使用的培养基和试剂应符合相关标准，存放在干燥、阴凉、避光的环境中。
5. 检查结果应及时报告，并根据结果采取相应的控制措施。
以上就是《微生物限度检查操作规程》的主要内容，希望能够帮助大家更好地进行微生物限度检查，确保产品质量和安全。
微生物限度检查法标准操作规程3篇
微生物限度检查法标准操作规程第一篇：微生物限度检查法标准操作规程概述1.引言微生物限度检查法（Microbial Limit Test, MLT）是药品、医疗器械、食品和化妆品等生物制品产品质量控制检验的重要手段之一。
它的意义在于保证制品中微生物污染的可控性，保障产品的安全有效性。
本篇文章将围绕微生物限度检查法的标准操作规程，对其概述进行介绍。
2.主要内容2.1 微生物限度检查法的定义微生物限度检查法（Microbial Limit Test, MLT）是指对药品、医疗器械、食品和化妆品等生物制品产品中细菌和真菌等微生物数量进行检查的方法和标准。
它是评价产品质量与卫生安全性的重要方法。
2.2 微生物限度检查法的目的微生物限度检查法的目的在于评价药品、医疗器械、食品和化妆品等生物制品产品中的微生物数量是否在规定的限度范围内，以保证产品的安全性和有效性。
同时，微生物限度检查法也可为制品的生产、质量控制和质量管理提供有效依据。
2.3 微生物限度检查法的适用范围微生物限度检查法适用于药品、医疗器械、食品和化妆品等生物制品的质量控制检验。
其中，针对药品类，在我国《药典》中有详细规定。
3. 微生物限度检查法的标准操作规程3.1 样品处理样品处理过程应密闭、无菌且保持无菌状态。
洗手、穿戴无菌工作服及手套等工艺应符合规定，以避免二次污染。
3.2 检验方法微生物限度检查法主要分为计数法和筛选法，具体方法可根据制品的特性进行选择使用，并符合规定的国家标准。
对于细菌，常用的检验方法包括菌落计数法、薄膜过滤法等；对于真菌，常用的检验方法包括直接涂片法、薄膜过滤法等。
3.3 限度对于不同的制品，在药品中通常采用菌落计数法，在制品中微生物的限度规定一般标准分别为：细菌总数不超过10^3CFU/g或/mL，霉菌和酵母菌总数不超过10^2CFU/g或/mL。
3.4 结果判定若检测出的微生物数目符合规定限度，则判定结论为合格；若其中一个指标不符合规定，则判定为不合格。
谈谈微生物检验操作技能及注意事项
谈谈微生物检验操作技能及注意事项微生物检验过程之中除了要保障检测环境的无菌以及工作器具的清洁之外，对于检测人员的技能操纵也有相当的要求。
为了全面保障实验室内检验操作的准确可信，应当从下面几个方面注意操作事项。
1.培养基的使用微生物的培养基础在于培养基的配置，每次根据不同的微生物培养要重新确定培养基的配置配方与流程。
配置前要确定其生产日期与最佳使用时段，在开瓶前检验密封性，确保未变质、吸潮、发霉的情况下进行配置使用。
培养基配置时需要保障称量准确，一定要将配置和灭菌放在同时进行，没有及时进行灭菌措施的培养基绝不能长时间放置，尤其不能隔夜，否则一律以污染物处理。
灭菌操作以恒温恒压为主要条件，维持一定的灭菌时间。
灭菌完成之后要放置冰箱进行保存，但最好当天使用。
保存时间不应当超过三天时间，对于难以确定保存时间的培养基，一律以污染物处理。
在培养基的使用之中，需要根据班次安排使用量。
水浴加热培养基为液态，先化开的培养基能够取出放在锅盖上缓慢冷却，但是所有的培养基都不能长期处于高温加热状态下。
（没懂起什么意思）微生物在检测时培养基温度通常要控制在45℃，过烫的情况下会导致菌群死亡，过冷会导致培养基凝聚，无法观察。
检测做样要集中进行，培养基每次打开都有可能提升杂菌污染几率，出现实验误差。
培养基除菌群外均要流出空白位置，方便对照观察。
1.检测环境的维持检测环境的维持分为检测室大环境的维持和超净工作台小环境的维持。
检测室大环境之中，每当微生物样本检测之前需要关闭窗户、空调与风扇，然后用酒精等杀毒药物对空间内进行消毒喷雾，避免检测室内的空气运动对超净工作台内部环境产生影响。
如果在检测室内有紫外灯，需要定期打开紫外灯进行杀毒操作。
（酒精擦拭消毒仪器设备，含氯消毒制剂擦拭消毒操作台面）在小环境超净工作台之中，需要对初效过滤器进行定期清洁与及时更换，在检测前将工作台进行全面清洁，使用医用酒精进行擦拭消毒。
超净工作台需要提前至少半个小时打开紫外光灯，对超净台内所有的环境进行杀毒操作。
微生物检测技术的微生物鉴定方法与注意事项
微生物检测技术的微生物鉴定方法与注意事项随着生物技术和医疗技术的快速发展，微生物检测技术在医药、环境、食品等领域的应用越来越广泛。
微生物鉴定是其中重要的一环，它可以帮助我们确定不同种类的微生物以及它们对环境和人类健康的影响。
本文将介绍微生物检测技术的微生物鉴定方法以及一些注意事项。
一、微生物鉴定方法1. 直接显微镜观察直接显微镜观察是最简单直接的微生物鉴定方法之一。
通过放大镜或显微镜观察微生物的形态、大小、结构等特征，可以初步确定微生物的类型。
这种方法适用于一些常见的微生物，如真菌、细菌和原生动物等。
2. 培养和生长特性观察培养和生长特性观察是一种常用的微生物鉴定方法。
通过将微生物样本培养在适当的培养基上，观察其生长特点、菌落形态和色素等特征，可以初步确定微生物的类型。
这种方法通常需要较长的培养时间，但可以识别更多种类的微生物。
3. 生物化学试剂盒检测生物化学试剂盒检测是一种常用的微生物鉴定方法。
这种方法利用不同微生物在特定条件下产生的酶或代谢产物与试剂盒中的反应物之间的反应，通过观察反应结果判断微生物的种类。
生物化学试剂盒检测方法可快速、准确地鉴定微生物，适用于临床检测和食品安全监测等领域。
4. 分子生物学技术鉴定随着分子生物学技术的发展，分子生物学技术鉴定成为微生物鉴定的重要方法之一。
例如，聚合酶链式反应（PCR）技术可以通过扩增微生物特定的DNA序列，从而确定微生物的种类。
另外，测序技术可以通过测定微生物的基因组序列，识别微生物的种类和亚种。
分子生物学技术鉴定方法准确性高，但需要专业设备和操作技巧。
二、微生物鉴定的注意事项1. 样品采集与保存样品采集是微生物鉴定的关键步骤之一。
在采集样品时，应注意避免污染和交叉污染，使用无菌容器和工具，并避免直接接触。
对于不同类型的样品，采集方法和处理方式也不同，应根据具体情况进行。
在样品采集后，应妥善保存，并尽快送往实验室进行检测，避免样品变质或污染。
2. 实验室安全措施在进行微生物鉴定实验时，实验室安全是至关重要的。
医院环境微生物采样方法及注意事项
2021/10/10
23
环境卫生学监测结果分析流程
细菌学数据超标
正视结果，不要盲目 的重复采样
是 重复采样
回忆采样过程 是否存在污染
到一线去查看设施和
否
每个操作环节，询问
相关人员的日常操作
方法，检查操作记录
2021/10/10
否 判断是否存在问题
是
采取措施改进操作流程
24
空气微生物消毒方法
（一）采样时间：在接触患者、进行诊疗活动前采 样。
（二）采样方法：被检者五指并拢，用浸有含相应 中和剂的无菌洗脱水液浸湿的棉拭子在双手指曲 面从指跟到指 端往返涂擦2次，一只手涂擦面积 约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉拭 子接触操作者的部分剪去，投入10ml含相应中和 剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。
2021/10/10
1
卫医发[2000]431号《医院感染管理规范》
第三十一条 环境卫生学监测：包括对空气、 物体表面和医护人员手的监测。
医院应每月对手术室、重症监护病房／室 （ICU）、产房、母婴室、新生儿病房、骨髓移植 病房、血液病房、血液透析室、供应室无菌区、 治疗室、换药室等重点部门进行环境卫生学监测。 当有医院感染流行，怀疑与医院环境卫生学因素 有关时，应及时进行监测。
2021/10/10
16
三、物品和环境表面消毒效果监测
（一）采样时间：在消毒处理后进行采样。
（二）采样面积：被采面积＜100cｍ2取全部表面； 采样面积≥100 cｍ2，取100cｍ2
（三）采样方法：棉拭子法：用5×5cm的标准灭菌 规格版，放在被检物体表面，用浸有含有相应中 和剂的无菌洗脱液的棉拭子，在规格板内横竖往 返均匀涂抹5次，并随之转动棉拭子，可连续采样 1～4个规格板面积。剪去手接触部分，并将棉拭 子放入装有10ml含相应中和剂的试管内，立即送 检。
微生物检测技术的生物安全与危险防范的使用注意事项
微生物检测技术的生物安全与危险防范的使用注意事项微生物检测技术在现代生物科学领域起到了重要的作用，它通过检测和分析微生物的存在和类型，为人们提供了对生物环境和生物体的了解。
然而，使用微生物检测技术也存在一定的生物安全风险和危险性。
本文将讨论微生物检测技术的生物安全问题，并提供一些使用注意事项。
1.实验室安全措施在进行微生物检测实验之前，必须确保实验室具备适当的生物安全设施和设备，以防止微生物泄漏和传播。
实验室应装备有防护手套、实验室衣、护目镜等个人防护装备，以保护实验人员的安全。
同时，实验室应该配备通风系统，能够及时排出室内的污染物。
应定期检查设备的运行状况，并采取预防措施，防止设备故障引起的事故。
2.安全操作规范在进行微生物检测实验时，必须按照相关的安全操作规范进行操作，遵循以下几个方面的注意事项：a.实验人员应经过专业培训，熟悉实验流程，并掌握微生物检测方法的要点和技能。
只有经过训练的人员才能进行实验操作，以确保实验的安全性。
b.实验人员应遵守实验室的规章制度，不得擅自操作和调整实验设备。
实验室的工作人员应时刻保持警惕，防止意外发生。
c.实验物品和废弃物应正确处理。
实验过程中产生的废弃物应按照规定的方式进行处理和处置，避免对环境和周围生物体造成污染和危害。
3.生物安全风险评估在进行微生物检测实验之前，必须对实验中存在的生物安全风险进行评估。
这可以通过对微生物的病原性、扩散性、传染性等方面进行分析，确定实验中可能存在的风险，并采取相应的措施进行防范。
a.根据微生物的分类和危险性，将实验室分为不同的生物安全级别。
不同级别的实验室拥有不同的生物安全措施要求，从而确保实验的安全性。
b.在进行高风险微生物的实验操作时，应采取额外的生物安全措施，如穿戴空气过滤面罩或防护服等。
实验室应制定紧急处理措施和应急预案，以防万一。
4.实验后的生物安全控制实验结束后，还需要采取一些措施对实验室进行清理和消毒，以避免微生物的传播和污染。
微生物检验流程及操作标准
微生物检验流程及操作标准全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：微生物检验是一种重要的实验室技术，用于检测食品、水质、环境等样品中的微生物存在情况。
微生物检验需要严格遵守一系列操作标准和流程，以确保检验结果的准确性和可靠性。
下面我们将介绍一下微生物检验的流程及操作标准。
一、样品采集1. 样品的采集需要采用无菌工具，并保持样品在采集过程中不受到外界环境的污染。
2. 样品的采集过程应尽量避免接触到任何可能引入外源微生物的物质，比如皮肤、空气等。
3. 采集的样品应标明正确的标识信息，包括样品名称、采集地点、采集日期等。
二、样品处理1. 样品收到实验室后，需要尽快进行处理，避免样品内的微生物增殖或死亡。
2. 样品处理过程需要保持在无菌条件下进行，使用无菌工具进行操作。
3. 样品处理过程中需要按照检验要求进行适当的稀释，以确保实验得出准确的结果。
三、培养基准备1. 培养基的制备需要按照标准的配方和步骤进行，以确保培养基的质量符合要求。
2. 制备培养基时需要严格遵守无菌操作规范，避免细菌、真菌等外源微生物的污染。
3. 制备好的培养基需要在适当的条件下保存，确保培养基的稳定性和有效性。
四、接种操作1. 在进行微生物检验之前，需要准备好无菌的接种环、移液器等工具。
2. 采取适当的方法将处理好的样品接种到培养基上，避免接种时引入外源微生物。
3. 接种操作需要在无菌条件下进行，避免培养物受到任何污染。
五、培养与观察1. 接种后的培养基需要置于适当的温度和湿度条件下进行培养，促使样品中的微生物生长。
2. 定期观察培养基上的生长情况，记录生长的数量和形态，用于后续的分析和鉴定。
3. 在观察过程中需要注意反复进行无菌操作，避免细菌、真菌等外源微生物的污染。
六、鉴定与结果解读1. 当样品中的微生物生长到一定程度时，需要进行鉴定和分析，确定其种属和数量。
2. 鉴定过程需要参考相关的鉴定手册和标准，进行适当的试验和测试。
3. 根据鉴定结果进行结果解读，判断样品中微生物的种类和数量是否符合标准要求。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
微生物检测手段及注意事项微生物检测手段及注意事项微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文对生长量测定法、微生物计数法、生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常用的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。
一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。
如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。
如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。
随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。
微生物的生长不同于其他生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，通常情况下也没有实际意义。
微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长通常指群体的扩增。
微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。
因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和他们的生长抑制紧密相关。
所以有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。
既然生长意味着原生质含量的增加，所以测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。
微生物生长的衡量，可以从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。
1. 微生物计量法1.1 体积测量法又称测菌丝浓度法，通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。
方法是，取一定量的待测培养液（如10 mL）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5 min）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。
菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。
这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。
称干重法可用离心或过滤法测定。
一般干重为湿重的10~20%。
在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1~5次，进行干燥。
干燥可用烘箱在105 ℃或100 ℃下烘干，或采用红外线烘干，也可在80 ℃或40 ℃下真空干燥，干燥后称重。
如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，在40 ℃下进行真空干燥。
称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母（Activity Dry Yeast, ADY）,一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。
1.3 比浊法微生物的生长引起培养物混浊度的增高。
通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值，判断微生物的生长状况。
对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时，可采用一种特制的有侧臂的三角烧瓶。
将侧臂插入光电比色计的比色座孔中，即可随时测定其生长情况，而不必取菌液。
该法主要用于发酵工业菌体生长监测。
如使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计，在波长600 nm处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值OD600，以此监控E.coli的生长及诱导时间。
1.4 菌丝长度测量法对于丝状真菌和一些放线菌，可以在培养基上测定一定时间内菌丝生长的长度，或是利用一只一端开口并带有刻度的细玻璃管，到入合适的培养基，卧放，在开口的一端接种微生物，一段时间后记录其菌丝生长长度，借此衡量丝状微生物的生长。
2. 微生物计数法2.1 血球计数板法血球计数板是一种有特别结构刻度和厚度的厚玻璃片，玻片上有四条沟和两条嵴，中央有一短横沟和两个平台，两嵴的表比两平台的表面高0.1 mm，每个平台上刻有不同规格的格网，中央0.1 mm2面积上刻有400个小方格。
通过油镜观察，统计一定大格内微生物的数量，即可算出1 mL菌液中所含的菌体数。
这种方法简便，直观，快捷，但只适宜于单细胞状态的微生物或丝状微生物所产生的孢子进行计数，并且所得结果是包括死细胞在内的总菌数。
2.2 染色计数法为了弥补一些微生物在油镜下不易观察计数，而直接用血球计数板法又无法区分死细胞和活细胞的不足，人们发明了染色计数法。
借助不同的染料对菌体进行适当的染色，可以更方便的在显微镜下进行活菌计数。
如酵母活细胞计数可用美蓝染色液，染色后在显微镜下观察，活细胞为无色，而死细胞为蓝色。
2.3 比例计数法将已知颗粒（如霉菌孢子或红细胞）浓度的液体与一待测细胞浓度的菌液按一定比例均匀混合，在显微镜视野中数出各自的数目，即可得未知菌液的细胞浓度。
这种计数方法比较粗放。
并且需要配制已知颗粒浓度的悬液做标准。
2.4 液体稀释法对未知菌样做连续十倍系列稀释，根据估计数，从最适宜的三个连续的10倍稀释液中各取5 mL试样，接种1 mL到3组共15只装培养液的试管中，经培养后记录每个稀释度出现生长的试管数，然后查最大或然数表MPN（Most Probable Number）得出菌样的含菌数，根据样品稀释倍数计算出活菌含量。
该法常用于食品中微生物的检测，例如饮用水和牛奶的微生物限量检查。
2.5 平板菌落计数法这是一种最常用的活菌计数法。
将待测菌液进行梯度稀释，取一定体积的稀释菌液与合适的固体培养基在凝固前均匀混合，或将菌液涂布于已凝固的固体培养基平板上。
保温培养后，用平板上出现的菌落数乘以菌液稀释度，即可算出原菌液的含菌数。
一般以直径9 cm的平板上出现50~500个菌落为宜。
但方法比较麻烦，操作者需有熟练的技术。
平板菌落计数法不仅可以得出菌液中活菌的含菌数，而且同时将菌液中的细菌进行了一次分离培养，获得了单克隆。
2.6 试剂纸在平板计数法的基础上，发展了小型商品化产品以供快速计数用。
形式有小型厚滤纸片，琼脂片等。
在滤纸和琼脂片中吸有合适的培养基，其中加入活性指示剂2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑（TTC，无色）待蘸取测试菌液后置密封包装袋中培养。
短期培养后在滤纸上出现一定密度的玫瑰色微小菌落与标准纸色板上图谱比较即可估算出样品的含菌量。
试剂纸法计数快捷准确，相比而言避免了平板计数法的人为操作误差。
2.7 膜过滤法用特殊的滤膜过滤一定体积的含菌样品，经丫叮橙染色，在紫外显微镜下观察细胞的荧光，活细胞会发橙色荧光，而死细胞则发绿色荧光。
3. 间接测定法微生物的生长伴随着一系列生理指标发生变化，例如酸碱度，发酵液中的含氮量，含糖量，产气量等，与生长量相平行的生理指标很多，它们可作为生长测定的相对值。
因此可利用生理指标等间接参数来测定生物量。
3.1 测定含氮量大多数细菌的含氮量为干重的12.5%，酵母为7.5%，霉菌为6.0%。
根据含氮量×6.25，即可测定粗蛋白的含量。
含氮量的测定方法有很多，如用硫酸，过氯酸，碘酸，磷酸等消化法和Dumas测N2气法。
Dumas 测N2气法是将样品与CuO混合，在CO2气流中加热后产生氮气，收集在呼吸计中，用KOH吸去CO2后即可测出N2的量。
3.2 测定含碳量将少量（干重0.2~2.0 mg）生物材料混入1 mL水或无机缓冲液中，用2 mL 2%的K2Cr2O7溶液在100 ℃下加热30分钟后冷却。
加水稀释至5 mL，在580 nm的波长下读取吸光光度值，即可推算出生长量。
需用试剂做空白对照，用标准样品做标准曲线。
还原糖测定法还原糖通常是指单糖或寡糖，可以被微生物直接利用，通过还原糖的测定可间接反映微生物的生长状况，常用于大规模工业发酵生产上微生物生长的常规监测。
方法是，离心发酵液，取上清液，加入斐林试剂，沸水浴煮沸3分钟，取出加少许盐酸酸化，加入Na2S2O3临近终点时加入淀粉溶液，继续加N a2S2O3至终点，查表读出还原糖的含量。
3.4 氨基氮的测定离心发酵液，取上清液，加入甲基红和盐酸作指示剂，加入0.02 mol/L 的NaOH调色至颜色刚刚褪去，加入底物18%的中性甲醛，反应数刻，加入0.02 mol/L的使之变色，根据NaOH的用量折算出氨基氮的含量。
根据培养液中氨基氮的含量，可间接反映微生物的生长状况。
3.5 其他生理物质的测定P，DNA，RNA，ATP，NAM（乙酰胞壁酸）等含量以及产酸，产气，产CO2（用标记葡萄糖做基质），耗氧，黏度，产热等指标，都可用于生长量的测定。
也可以根据反应前后的基质浓度变化，最终产气量，微生物活性三方面的测定反映微生物的生长。
如在BMP-2的发酵生产上，随时监测溶氧量的变化和酸碱度的变化，判断细菌的长势。
4. 商业化快速微生物检测法微生物的检测，其发展方向是快速，准确，简便，自动化，当前很多生物制品公司利用传统微生物检测原理，结合不同的检测方法，设计了形式各异的微生物检测仪器设备，正逐步广泛应用于医学微生物检测和科学研究领域。
例如：4.1 试剂盒，培养基等手段抗干扰培养基和微生物数量快速检测技术结合解决了传统微生物检测手段不能解决的难题，为建立一套完整的抗干扰微生物检测系统奠定了坚实的基础。
如：抗干扰微生物培养基，新型生化鉴定管，微生物计数卡，环境质量检测试剂盒等，可方便的用于多项检测。
4.2 借助新型先进仪器BACTOMETER全自动各类总菌数及快速细菌检测系统可以数小时内获得监测结果，样本颜色及光学特征都不影响读数，对酵母和霉菌检测同样高度敏感原理是利用电阻抗法（Impedance Technology）将待测样本与培养基置于反应试剂盒内，底部有一对不锈钢电极，测定因微生物生长而产生阻抗改变。
如微生物生长时可将培养基中的大分子营养物经代谢转变为活跃小分子，电阻抗法可测试这种微弱变化，从而比传统平板法更快速监测微生物的存在及数量。
测定项目包括总生菌数，酵母菌，大肠杆菌群，霉菌，乳酸菌，嗜热菌，革兰氏阴性菌，金黄色葡萄球菌等。
微生物OD值是反映菌体生长状态的一个指标，OD是Optical Density （光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度。
通常400～700 nm 都是微生物测定的范围，需要紫外分光光度计测最大吸收波长。
用得最多的是：505 nm测菌丝菌体、560 nm测酵母、600 nm测细菌。
用测OD方法画微生物生长曲线时，同一株菌的起始培养浓度可以准备多管（根据检测点的需要，如需检测10个点，就准备10管），然后每个点取一管出来测OD值就行了。
一般测菌体密度的OD的波长范围是580 nm-660 nm，如枯草芽孢杆菌用600 nm，已经属于可见光区（200 nm～400 nm为紫外光区，400 nm～800 nm为可见光区）。