影响微生物检测结果的注意事项分析
影响微生物检验质量的因素及注意事项
影响微生物检验质量的因素及注意事项微生物具有质量轻、体积小、适应性强、繁殖力强等特点，因此广泛的分布于自然界中，如果不能够提升微生物检验的质量不仅会影响到产品本身的质量，还会严重的危及到患者的安全与健康，因此，微生物的检验质量与我们的生活息息相关。
今天咱们就来科普一下影响临床微生物检验质量的原因以及相关注意事项。
一、检验人员由于全自动鉴定仪器并不能完成对所有微生物的检验，因此检验人员在检验工作中的每一步都应该结合微生物检验基础知识水平以及个人的经验、技能来进行高度的主观分析判断，防止影响到临床微生物的检验质量。
另外，微生物检验人员对于临床微生物的检验质量除了与其必须具备严肃认真的工作态度、精密细致的观察和操作习惯外，还与检验人员是否熟练掌握微生物检验技术有关。
因此，检验人员在上岗前必须进行严格的岗前培训，还要主动的去学习新技术，多去参加培训和讲座，认真学习和了解微生物学的检验标准、方法以及相关法律法规，参与编写仪器的操作程序以及测试程序，还有各类盲样测试与水平测试，加强对于计量学基本知识以及学习质量保证体系知识的掌握，不断的提升自己的检测水平、专业技能以及分析问题、解决问题的能力。
另外，负责微生物检验的管理人员也应该定期对检验人员进行定期的考核，以了解检验人员的专业知识和操作熟练程度，提升检验人员的整体素质，使微生物检验质量得以提高。
二、设备和仪器生物安全柜、冰箱、烘箱、培养箱、显微镜、超净工作台、高压灭菌器、水浴锅、pH计等都是微生物检验的主要设备和仪器，它们都是能够影响微生物检验质量的因素。
所以在在使用时应确认所有设备和仪器均被符合资历的计量部门校准合格，并按照有关规定以及生产厂家的方法正确使用，定期对设备和仪器进行检查和清理，尤其是常用的贵重设备和仪器更要做到用前积极检查，用后及时登记，为了保证仪器的良好的工作状态，还应该定期对设备和仪器进行维护和保养。
三、培养基和试剂试剂以及培养基也会影响到微生物检验的质量。
微生物检验标本的正确采集及注意事项
微生物检验标本的正确采集及注意事项正确采集临床微生物标本，直接影响到微生物培养鉴定结果。
据相关统计：微生物标本的检测误差来源：80%来源于分析前20%来源于分析中和分析后其它检验样本的检测误差来源：45%分析前10%分析中（仪器））45%分析后.检验标本采集质量控制的重要性,分析前的误差来源所占比例的这个数据是惊人的，在我们的大型医院都存在这个问题，而在我们医院应该不会低于这个数据。
可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗，为临床科学用药和成功的感染控制提供依据，是正确、合理使用抗菌药物，延缓细菌耐药，减少抗菌药物滥用和监测医院感染的第一步，也是最重要的一步。
为此应正确采集各种细菌学标本。
一、血液标本的采集1、采集方法（1）75%酒精清洁局部皮肤。
（2）待皮肤干后，再用2%—2.5%碘酒从穿刺点中心部位开始消毒，范围不应小于5cm （直径），且不能用手指触摸消毒后的皮肤。
（3）皮肤碘酒干后（约1min），穿刺采集血液，采血量成人5-10ml，婴幼儿1-5ml。
（4）采血后立即在床旁接种培养瓶，并迅速轻摇，充分混匀防止凝固，但又不可剧震以防溶血。
2、注意事项（1）怀疑菌血症应尽早采血，体温上升（38.5℃）采血可提高阳性率，但也要防止因等待而延误时机。
（2）对已经使用抗菌药物，而又不能停药者，应在抗菌药物浓度最低时采集也即在下次用药前采血。
切忌不要在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本，也不能从静脉导管及动脉插管中取血。
（3）培养基与血液之比以10:1为宜，以稀释血液中的抗生素，抗体等杀菌物质；有人主张对接受抗菌药物治疗的病人，培养基与采血量之比可为20:1或大于这个比例。
（4）近年研究表明，将血液注入血培养基前，更换针头反而易导致污染。
（5）每例至少采血两次，间隔0.5-1h，以利于提高阳性率和区分感染菌与污染菌。
（6）疑为细菌性心内膜炎及布鲁氏病的病人，以肘动脉或股动脉采血为宜，除在发热期采血外，并要多次采血（24h 3-4次）和增加采血量（可增加10ml）。
微生物检验注意事项
微生物检验注意事项发布时间：2021-07-22T15:42:34.893Z 来源：《医师在线》2021年3月上作者：薛红梅[导读]薛红梅（剑阁县疾病预防控制中心；四川广元628300）微生物检验是利用微生物学的基础理论和检验技能，通过系统的检验方法，及时、准确的对各种标本做出病原学诊断，为疾病的诊断、治疗和预防提供科学的依。
微生物检验涉及了培养基制备技术、染色技术、分离纯化技术、鉴定技术等，由于微生物肉眼不能直接看到、生命力旺盛、适应能力强、分布广泛等特点，在检验各环节需特别注意，秉承有菌观念无菌操作的原则，保证检验结果质量，微生物检验注意事项，你了解多少呢？一：微生物标本的采集1.无论是食品标本、环境标本还是人体生物标本的采集时，采样器材、盛装容器都应是无菌的，还可通过采样空白监督采样过程对标本是否造成污染。
2.标本在保存、运输和检验过程中要避免相互污染，接触不同样标本的实验器材和容器不可混用。
3. 采集的标本要具典型性、代表性，如固体食品标本需多个部位采集，液体食品标本混匀后再采集，提高检出率。
二：微生物标本的送检1 .标本的运输：对于高风险病原微生物标本应由经过生物安全培训的2名及以上专业人员专车运送，运输的过程中应防止标本倾斜、倒置、反复冻融。
2.采集的标本应及时送至实验室进行检测。
如不能及时送检，需在4℃低温下保存，但不得超过24h 。
三：微生物标本的检验（一）检验前准备：包括各种培养基的配制和相关仪器设备的准备。
1.培养基配制注意事项：1.1配制培养基所用的器皿，最好使用中性硬质的玻璃器皿，如用铜铁会影响细菌生长；未被污染或新添置的玻璃器皿，初步冲洗后置清洁液浸泡过夜用水冲洗干净即可，但被致病菌污染的玻璃器皿必须先灭菌再清洗。
1.2对含有琼脂成分的培养基在配制时先用冷水搅拌分散均匀无团块，再进行加热。
琼脂遇热水时，表面易吸水变硬，结成硬块，不利于溶解。
灭菌前需进行加热煮沸时琼脂完全溶解，方可进行分装试管或锥形瓶，否则分装后可能出现琼脂分布不均，凝固性不一。
微生物检验结果报告注意事项
微生物检验结果报告注意事项一、涉及定性项目的检验结果报告沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠杆菌O157：H7、空肠弯曲杆菌、副溶血性弧菌（定性）等，如果检样是称重取样，则最后检测结果一定报告为检出/25g或未检出/25g。
如果检样是体积取样，则最后检测结果一定报告为检出/25mL或未检出/25mL。
检测标准要求g必须要小写，mL中m必须小写，L则必须大写。
记录中所有有用的信息必须填上，无法填充的用“/”划掉。
二、菌落总数检验结果报告1.菌落总数小于100CFU时，按“四舍五入”原则修约以整数报告，如80.5CFU可修约报告为81CFU;80.4CFU则修约报告为80CFU。
2.菌落总数大于等于100CFU时，左边数第3位数字采用四舍五入原则修约后，取前2位数字，后面位数用0代替，也可用10的指数形式表示：如10-2两平板平均菌落数为238CFU/g，可修约为240CFU/g，最后报告为24000CFU/g或2.4×104CFU/g。
3.霉菌、酵母菌、乳酸菌、蜡样芽孢杆菌、产气荚膜梭菌报告形式和菌落总数一样。
4.称重取样以CFU/g为单位报告，体积取样以CFU/mL为单位报告。
三、大肠菌群检验结果报告。
LST初发酵，产酸产气，接种BGLB复发酵后仍产酸产气，则证明样品受到了大肠菌群污染，可检索MPN表，得出相应结果。
检测时如果采用（10-1，10-2,10-3）三个稀释度，最后BGLB产气管为（2，0，0），查MPN表可得出大肠菌群检测值为9.2MPN/g；检测时如果采用（100，10-1,10-2）三个稀释度，最后BGLB产气管仍为（2，0，0），查MPN表可得大肠菌群检测值为0.92MPN/g；如果采用（10-2，10-3,10-4）三个稀释度，最后BGLB产气管仍然为（2，0，0），查MPN表可得大肠菌群检测值为92MPN/g。
称重取样以MPN/g为单位报告，体积取样以MPN/mL为单位报告。
微生物检验的注意事项
医药健闻微生物检验的注意事项刘洋 （河南京城皮肤中医院，河南郑州 450000）临床上，微生物检验是对人体的各种物质进行微生物学检验，为临床诊断和治疗提供依据。
什么是微生物微生物是包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生动物在内的生物群体。
具体来说，可分为细菌、病毒、真菌、放线菌、立克次体、支原体、衣原体和螺旋体。
微生物体积非常小，需使用光学显微镜和电子显微镜才能看见。
微生物与人类的生命活动有着密切关系。
长期寄居人体的微生物在机体防御机能正常的情况下能够保持一种动态平衡，但当机体免疫功能下降时，这种平衡会被打破，进而引发疾病。
微生物种类繁多，对抗生素的敏感性有明显差异。
若在没有检验的情况下随意使用抗生素，不仅于健康无益，甚至会产生超级耐药菌，危害身体健康。
因此，微生物检验是临床治疗疾病不可或缺的步骤，可以为疾病的诊断、治疗、监测提供参考依据。
微生物检验的注意事项微生物检验有严格流程设置，必须按照步骤依次进行。
若当中某个过程出现问题，将会影响检验结果，进而影响医生的诊断。
微生物检验共有五个环节，依次是采集样本、镜检、分离培养、细菌鉴定以及药敏试验。
除了有严格的操作标准，对操作人员、检验环境及所用物品也有明确要求。
操作人员检验人员需要具备实验室认可的资质及相关检测工作经验，可以正确完成所有检验步骤，确保检验结果客观准确。
操作人员在检验前，需要先洗手37医药健闻并消毒，最大程度减少手部微生物对样本的影响。
人体在呼吸时，如果呼出的气体接触到了样本，微生物可能会附着在上面，因此要装备齐全的防护措施，避免直接接触到样本。
进入无菌室前，应在缓冲间更换消毒过的工作服、工作帽及工作鞋；进入无菌室后，尽量减少走动，避免空气流动。
操作人员是决定检验结果准确性的关键，只有在检验过程中严格按照标准执行，才能避免人为因素影响检验结果而导致的诊断错误、用药不当等问题。
检验环境微生物检验对软件设施和硬件设施都有严格要求，二者缺一不可，必须同时满足才能顺利开展检验工作。
微生物检验时的注意事项
微生物检验时的注意事项对微生物进行检验时有很多需要注意的事项，检测环境一定要非常干净，同时实验室的器具也需要保持洁净，进行操作的有关人员一定要具备非常强的专业性，操作要在无菌环境下进行，避免因为工作人员的失误导致检验结果出现差错。
除此之外，还要保持适宜的温度，保证决策的合理性。
1.微生物检验概述微生物检验指的是对病原微生物进行研究，借助检验手段和先进的技术将病原体检测出来，让临床诊断变得更加准确和科学，同时为下一步的治疗提供思路，给接下来的用药提供科学指导，防止出现感染扩散。
2.培养基的灭菌及使用2.1在每一次进行配置前，都要保证生产日期在保质期的时间之内，检查开瓶日期以及瓶口的密封度是否完好，不可以出现变质和受潮等现象。
2.2在进行培养基的配置时，要保证称量非常准确，并且分装的盐水准确无误。
2.3必须做到现配置现灭菌，不能长时间没有灭菌地配好培养基，坚决不允许出现过夜的情况。
2.4灭菌的时候要保证恒定的温度，同时保证在恒压环境下进行，对灭菌时间也要有严格的要求，确保在有效的时间内进行灭菌。
2.5进行灭菌处理的培养基要放在冰箱中进行保存，时间最长可以保存一周，但是原则上不能超过三天。
并且要按照“先入先出”的原则，优先使用最先培养好的。
2.6使用的时候也要对使用量有着严格要求，先使用水浴锅把培养基溶化到液态，紧接着迅速调低水浴的温度，培养基一定不能长时间接触高温环境。
2.7对产品微生物进行检测的时候，将培养基温度保持在四十五度左右，温度不能过高，也不能过低。
过高的温度容易将菌烫死，过低的温度则会造成培养基结块凝固，给观察结果制造麻烦。
2.8每瓶培养基都需要做空白。
2.9在集中的时间做样，对同一瓶培养基的打开不要过于频繁，造成培养基的污染，减少误差结果的出现。
2.10当培养基的数量很少时，可以先把少量的培养基倾倒成空白用板。
3.维持检测环境3.1检测室3.1.1进行检测的时候，要管好检测室的窗户和空调，用医用酒精对检测室进行消杀，避免检测室内的空气流动对超净工作台的内部环境产生影响。
微生物标本采集注意事项及报告结果解读
胸腔穿刺液标本
• 10---50%肺炎患者伴胸腔积液 • 系无菌体液，培养阳性具有重要意义，阳 性率低 • 可直接注入血培养瓶，提高阳性率 • 可能分离出皮肤污染菌或胸腔引流管定植 菌
呼吸道病原学诊断存在的问题
• 送检率低 • 送检标本构成比不合 理 • 规范标本采集、运送 及保存 • 规范微生物检验流程 • 方法学：敏感性、特 异性、检验周期及明 确的临床意义 • 加强临床沟通
尿液标本的采集
尿标本
美国IDSA，不推荐采用常规的留置尿管的尿培养来观察是 否存在导尿管相关性尿路感染； 当病人有症状时，应拔除留置尿管，观察三天，如果症状 不消失，再考虑采集清洁中段尿送检； 对于无自主排尿意识的昏迷病人，应在更换尿管后24小 时内留取管内尿液——必要时先用稀释的洗必泰溶液进行 膀胱冲洗，三小时后待消毒液被尿液冲淡后再采集标本。
胆汁
漏出液 关节液（非关节炎） 除烧伤外的皮肤表面标 本
紧急标本：患者有潜在的威胁生命的疾病，需要立即得到处理； 常规标本：患者可能患重要的感染性疾病，需要临床确诊或预防性观察，但不 危机生命。 选择性标本：需经过专业和审慎的处理，但结果需要更多的验证。
临床标本的拒收标准
• 目的： • 拒收标本不是对申请医生的否定，也不表 示患者没有感染； • 拒收标本只是为了得到一份符合要求的标 本，为临床提供更有用的信息；
三、穿刺液标本的采集
穿刺液主要包括:
脑脊液 胆汁 胸水 腹水 心包液 关节液 鞘膜液 在正常人体中，上述体液均是无菌的。有感染的情况下检出 的细菌，在排除污染后应视为病原菌，及时给予正确的治疗，使病 人早日恢复健康。
微生物检验中保证结果准确性应注意的问题
、
。
题
。
每 天 应 定期检 查 培养 温 度 和 厌 氧箱 的 厌 氧 程
。
保证 无 菌 间 无 菌操作 台的卫 生
度 确保培养条件
，
每 天 对 无 菌 问 缓 冲 间 传 递 窗 等进 行 清 洁
、 、
，
每 周 定 期 对 抽 滤设 备 进 行 热 碱 洗 注 意 密 封
，
使 用 无 菌 间 专 用 的 清洁 工 具
，
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使容 器 内部能 形 成蒸 汽 进 行有 效 地 杀 菌
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摘 【
要 】为 保 证 微 生 物 检 验 结 果 的 准 确 性 本 文 从 检 验 环 境 检 验 设 备 检 验 人 员 检 验 操 作 等
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不宜再使用 。 （ １ ） 发酵 液 检测 应 在满 罐 ２ ４ 小 时 内 以及 发酵 质 ， 培养基 的组成包括 ： ①酸碱缓冲液 ， ②无机盐， 成 熟 后 取样 ， 以避 免 主酵 过 程 ， 酵母 的大 量 繁 殖 ， ③有机物 ， ④微量成分 ， 日常溶解应按此顺序进行添 制培养基 ， 应先溶化琼脂 ， 再定容， 避免造成 （ ２ ） 设备 的热清洗水以及 消毒液应在清洗后 加。 自 温度 第 一 时间 取样 ， 以 避免 残 留的 消毒 剂 以及 热量 会 培养 基浓度 变化 。培养基杀 菌时 间不 宜过长 ， 将 微 生 物 杀死 ， 导致 结 果 不 准 确 。如 果 设备 清 洗 不宜 过高 ， 否则 会破 坏琼脂 、 营养物质 等 ； 不能 高压 灭菌 的培养基 ， 所用物 品应 预先 空物杀菌 ， 如赖 氨酸 后 放 置时 间较 长 ， 可 选择 使用 前再 取水 样 。 杀菌温度不 宜过高 ， 如麦 汁 （ ３ ） 开 机前 设备 表 面卫生 应 在清洗 完 毕 ， 准备 培养基 。含糖 的培养基 ， 也会 生 产前 取样 ， 开 机后设 备 表 面卫 生应在 完 成生 产 、 培养基 。杀菌后 放置在 杀菌锅 内的 时间过长 ，
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一培养基质控的注意事项 二灭菌器具的注意事项 三样品制作的注意事项 四检验过程的注意事项 五细菌培养的注意事项 六接种的注意事项 七出结果的注意事项 八实验室内部人员比对、实验室间比对 及能力验证注意事项
一培养基质控的注意事项
1.1培养基的分类 各成分培养基、即用型培养基、脱水商业培养基 1.2培养基的验收 生产企业提供资料（性能评价、测试菌株）、外观 检查（名称、批号有效期、外观包装等） 1.3培养基的质量控制 外观、色泽的均一性；PH值；琼脂凝胶的硬度、微 生物污染（即用培养基）、生长特性（可采用划线 法，目标均生长良好，非目标均不生长或微弱生 长）、生长率（非选择性被测试/参考大于70%，测 试平板应大于100cfu，参考培养基是已知质量良好的 培养基）。 备注：GB4789.28-2013培养基好试剂的质量要求
五细菌培养的注意事项
培养皿是否倒置；培养箱温度（例如：霉 菌培养箱需要有制冷功能）、培养环境是 否正确（湿度、厌氧）；培养时间是否正 确。
六接种的注意事项
6.1酒精灯是否点燃（注意：生物安全柜不 能使用酒精灯，可用紫外灭菌器）；接种 培养基是否准备好；接种工具是否准备好； 接样量是否正确；典型、典型/可疑菌落是 否会分辨；接种环/接种针是否灼烧后凉透； 划线方法是否正确；接样试管是否浸泡消 毒液24小时再灭菌；培养温度、环境是否正 确；培养物是否灭菌；接种完毕是否对操 作台进行消毒；接种后手是否清洗消毒。
四检验过程的注意事项
4.1测试手和台面是否用75%酒精消毒；点燃 酒精灯是否在30cm范围内；检测方法是否 正确；标识方法是否正确；倒稀释液时瓶 口是否灼烧；移液管或枪头污染是否更换； 稀释度是否合适；是否做空白； 4.2培养基灭菌方法是否正确；倒培养基时 温度是否太烫或太低；倒、盖培养基时瓶 口是否灼烧、快速；培养基不能太薄（15ml 左右）；倒完后培养皿是否摇匀；培养基 是否不沾于皿盖和边缘上；培养基摇匀后 冷凝前是否不移动；覆层方法是否正确。
八实验室内部人员比对、实验室间 比对及能力验证注意事项
8.3 需要能力验证要及时查看CNAS网站， 上面发布能力验证计划；能力验证的原始 记录一定要完整、全面，便于追溯。 关注CNAS-CL-09文件
数据。 7.2大肠菌群：计数是否选15-150之间的数；大肠菌群 是否计数所有典型菌落（紫红色、圆形、0.5mm、沉 淀环）和可疑菌落（粉红色、圆形、有时粘稠）；挑 取数量是否正确；是否会革兰氏染色；是否会查 MPN表；是否会计算；是否会出具报告数据。 7.3 出报告后，样品才能处理，检出致病菌无害化处 理 7.4 检验结果报告后，剩下的或同批样品不得复检。
八实验室内部人员比对、实验室间 比对及能力验证注意事项
8.1实验室内部人员比对 要同一个样品、要同一时间、要同样的培养基、同一批灭 菌器皿，然后观察每个人的检测结果（一定要有一个比较 熟练的人员参与），一般用平板法。 8.2实验室间比对，包括能力验证 拿到样品要记录样品的外观特征；拿到之后如果条件允许 最好当天检测（如果不能检测放到冷藏冰箱或根据指导 书）；提前准备好所有的实验用品，包括灭菌器具、无菌 室灭菌、配置培养基等（也就是说所有的器具都是新做的， 不用以前剩余的）；提前准备标准菌株；检测要比较熟练 的多人、多种方法（传统培养基法、3M片法）、多个稀 释度检测；不要忘记空白；15分钟内完成；严格按照标准 方法检测，不要用感觉是或不是；测试后的均质液最好封 口暂时留在冰箱（以免出现什么差错备用）。
一培养基质控的注意事项
1.4培养基的配置 是否能正确计算需要培养基的量，提供足 量的培养基；天平是否校准并记录；每种 培养基所用勺是否更换；分装试管后灭菌 的培养基是否完全溶解后分装；高温高压 灭菌前是否先溶解培养基；灭菌温度、时 间是否正确；是否需要放冷气；培养基是 否标注标识；带有小导管的试管是否需要 急速冷却；开锅时压力是否回零；未用完 时的培养基保存是否正确（不要过度重复 加热）。
七出结果的注意事项
Байду номын сангаас
7.1菌落总数：计数是否选30-300之间的数；菌落数多 时且均匀分布时是否选取几分之一进行计数再算出全 部菌落数；细菌总数是否计数全部可见菌落；是否会 根据公式计算；菌落是否与残渣区分（TTC，红四
氮唑的使用，浓度0.5%，加入量1ml/100ml培 养基)；是否会出具报告数据；是否会出具报告
二灭菌器具的注意事项
2.1 灭菌方法：干热灭菌、湿热灭菌 灭菌温度、时间：湿热灭菌按培养基的使用说明；干热灭菌 时间、温度。 2.2消毒设备的使用及质量控制 编制操作规程并安全使用，注意湿热灭菌使凉气完全排出， 注意温度没降下来不要打开； 2.3质控：压力灭菌锅。物理法，化学指示胶带3M（核查灭菌 温度），生物法：生物指示剂（核查灭菌效果），例如，非 致病性的嗜热脂肪芽孢杆菌 (3M), 溴甲酚紫胨水培养基（灭菌 后大的芽孢杆菌纸片放入溴甲酚紫胨水培养，观察颜色是变 黄还是不变）；干燥箱，物理法：化学指示卡，生物法：非 致病性的枯草芽孢杆菌芽孢。按使用说明。原理就是查看芽 孢菌及芽孢的灭活来检查灭菌效果。 2.4灭菌后的标识及使用时间 标识已灭菌、未灭菌及有效期。包括灭菌枪、移液管、枪头 的灭菌。 注意：移液管、枪头只要碰到其他地方就要消毒或更换。
三样品制作时注意事项
3.1收到样品后，最好立即检测，如果不能放在原 则不能改变样品中微生物的变化，那就需要了解 这个目标菌的特性，嗜冷、嗜热等不适合它生长 的环境。（GB4789.1-2010，冷冻样品在2-5℃不超过18小
时，在45 ℃不超过15分钟）
3.2样品检测前手和台面要用75%酒精消毒；电子 天平/电子秤的准确度；样品检测是否先测低风险 再测高风险（即比较干净熟食食品、未加工的生 鲜食品）；样品（特别是开口处）要用75%的酒 精擦拭，然后用灭菌的剪刀开口以免污染样品； 剪样离酒精灯30cm之内检测；样品要做到均匀取 样；稀释液的PH值是否正确；制完的样品要均质； 样品检测尽快完成。