第七章 酶反应器的类型与选择
第七章 酶反应器的类型与选择

第七章酶反应器的类型与选择◆用于酶进行催化反应的容器及其附属设备称为酶反应器。
◆按照结构的不同分为:搅拌罐式反应器(Stirred Tank Reactor, STR)、鼓泡式反应器(bubble column reactor, BCR )、填充床式反应器(packed column reactor, PCR )、流化床式反应器( Fluidized Bed Reactor, FBR)、膜反应器(Membrane Reactor, MR)等;◆酶反应器的操作方式可以分为分批式反应(batch )、连续式反应(continuous )和流加分批式反应(feeding batch );◆将反应器的结构和操作方式结合一起,对酶反应器进行分类,连续搅拌罐反应器(Continuous Stirred Tank Reactor, CSTR)、分批搅拌罐反应器(Batch Stirred Tank Reactor, BSTR)等。
1.酶反应器的类型1.1搅拌罐式反应器:◆搅拌罐式反应器(stirred tank reactor, STR)是有搅拌装置的一种反应器(图8-1,8-2所示)。
◆在酶催化反应中是最常用的反应器。
它由反应罐,搅拌器和保温装置组成。
◆搅拌式反应器的操作方式可以根据需要采用分批式(batch)、流加分批式(feeding batch)和连续式(continuous)三种。
与之对应的有分批搅拌罐式反应器和连续搅拌罐式反应器之分。
(1)分批搅拌罐式反应器:图8-1 分批搅拌罐式反应器(2)搅拌罐式反应器:连续搅拌罐式反应器(continuous stirred tank reactor ,CSTR)的结构示意图如图8-2图8-2 连续搅拌罐式反应器示意图1.2填充床式反应器:填充床式反应器(packed column reactor, PCR)是一种用于固定化酶进行催化反应的反应器。
如图8-3所示。
酶工程思考题(附答案)

酶工程思考题汇总第一章P251.何谓酶工程?试述其主要内容和任务.酶的生产,改性与应用的技术过程称为酶工程。
主要内容:微生物细胞发酵产酶,动植物细胞培养产酶,酶的提取与分离纯化,酶分子修饰,酶、细胞、原生质体固定化,酶非水相催化,酶定向进化,酶反应器和酶的应用等。
主要任务:经过预先设计,通过人工操作获得人们所需的酶,并通过各种方法使酶的催化特性得以改进,充分发挥其催化功能。
2.酶有哪些显著的催化特性?专一性强(绝对专一性——钥匙学说、相对专一性——诱导契合学说)、催化效率高、作用条件温和3.简述影响酶催化作用的主要因素.底物浓度、酶浓度、温度、pH、激活剂浓度、抑制剂浓度等诸多因素第二章P635.酶的生物合成有哪几种模式?生长偶联型(同步合成型、中期合成型)、部分生长偶联型(延续合成型)非生长偶联型(滞后合成型)7.提高酶产量的措施主要有哪些?a.添加诱导物(酶的作用底物、酶的催化反应物、作用底物的类似物)b.控制阻遏物的浓度c.添加表面活性剂d.添加产酶促进剂11.固定化微生物原生质体发酵产酶有何特点?1.提高产酶率2.可以反复使用或连续使用较长时间3.基因工程菌的质粒稳定,不易丢失4.发酵稳定性好5.缩短发酵周期,提高设备利用率6.产品容易分离纯化7.适用于胞外酶等细胞产物的生产第三章P843.植物细胞培养产酶有何特点?1.提高产率2.缩短周期3.易于管理,减轻劳动强度4.提高产品质量5.其他4.简述植物细胞培养产酶的工艺过程。
外植体细胞的获取细胞培养分离纯化产物6.动物细胞培养过程中要注意控制哪些工艺条件?1.培养基的组成成分2.培养基的配制3.温度的控制4.ph的控制5.渗透压的控制6.溶解氧的控制第四章P1351.细胞破碎的方法主要有哪些?各有何特点?机械破碎法:通过机械运动产生的剪切力,使组织、细胞破碎(捣碎法,研磨法,匀浆法)物理破碎法:通过物理因素的作用(温度差破碎法,压力差破碎法,超声波破碎法)化学破碎法:通过化学试剂对细胞膜的作用(添加有机溶剂,添加表面活性剂)酶促破碎法:通过细胞本身的酶系或外加酶制剂的催化作用,使细胞外层结构受到破坏(自溶法,外加酶制剂法)2.试述酶提取的主要方法。
生物反应工程 第7章 生物反应器

将列管并列焊接在一起,组成挡板; [2]
直接利用列管当挡板
H—筒身高度 D—罐径 W—挡板宽度 HL—液位高度 Di—搅拌器直径 S—两搅拌器间距 B—下搅拌器距底 间距
1.罐体
结构:圆柱体和椭圆封头或碟形封头焊 接而成。小型发酵罐罐顶和罐身采用法 兰连接。顶部设有清洗用的手孔。
材料为碳钢或不锈钢。大型发酵罐可用 不锈钢或复合不锈钢制成。小大型发酵 罐可用不锈钢或玻璃钢制成。 刚度和强度:受压容器,空消或实消, 通常灭菌的压力为2.5Kg/m3。
生物催化剂在反应器中的分布方式 生物团块(包括细胞、絮凝物、菌丝体)反应 生物膜反应器两大类。 固相催化剂的运动状态来分类 填充床 流化床 生物转盘等多种型式反应器。 按反应体系的相态来分类 均相——可溶的酶催化反应 非均相
•反应物系在反应器内的流动与混合状态 (反应器内流体的流动类型) 活塞流反应器 (continuous plug flow reactor, CPFR ) 全混流反应器( continuous stirred-tank reactor,
表 通用式发酵罐的几何尺寸与操作条件
几何尺寸与操 作条件范围 H/D=1~4
Di/D=1/2~1/4 W/D=1/8~1/12 B/ Di =0.8~1.0
搅 拌 转 速 N=30 ~ 1000 (r/min) 单位醪液体积的冷却面 积0.6~1.5 (m2/m3)
典型数值
奥地利某公司 200m3
4.温度控制系统:
电极、热交换装置和及其控制 排除发酵过程中由于生物氧化作用及机械 搅拌产生的热量的装置 在发酵过程中,放出的热量可用如下的热 平衡方程式:
Q发酵=Q生物+Q搅拌-Q蒸发-Q显-Q辐射
第七章酶反应器酶反应器的特点与类型酶反应器的选择和使用

缺点:需保持一定的流速,运转成本高,难于放大; 由于颗粒酶处于流动状态,易导致颗粒的机械破损; 流化床的空隙体积大,酶的浓度不高; 底物高速流动使酶冲出,降低了转化率。 改进:使底物进行循环,避免催化剂。 使用几个流态化床组成的反应器组,或使用锥形流态化床。
溶解性物质 ——任何类型反应器
底物
颗粒物质 胶体物质
CSTR、PBR和RCR
(三)反应操作要求
1.若酶受高浓度底物抑制
需要不断调整pH
——搅拌罐型反应器。
2.若反应耗氧 ——鼓泡塔型反应器。
(四)酶的稳定性 固定化酶在反应器中催化活性的损失可能有如下三种 原因: 酶本身失效; 酶从载体上脱落; 载体肢解。 在各种类型的反应器中,CSTR最易引起这类损失。
第七章 酶反应器
• 酶反应器的特点与类型 • 酶反应器的选择和使用
第一节 酶反应器的特点与类型
•定义:以酶或固定化酶作为催化剂进行酶促反应
的装置称为酶反应器(Enzyme reactor)。
•作用:以尽可能低的成本,按一定的速度由规定
的反应物制备特定的产物。
•与化学反应器相比:在低温、低压下发挥 作用,反应时的耗能和产能较少。 •与发酵反应器相比:不表现自催化方式 (即细胞的连续再生)。
(五)应用的可塑性及成本
CSTR类型的反应器应用的可塑性较大,结构简单, 成本也较低;
综上所述,酶反应器的选择没有一个简单的法则或 标准可以遵循,必须根据具体情况进行全面的分析和衡 量。
三、酶反应器的操作
(一)反应温度的确定与调节控制 (二)pH值的确定与调控 (三)底物浓度 (四)酶浓度 (五)搅拌速度 (六)流动速度
酶反应器 (2)优秀课件

(4) 应具有最佳的无菌条件,否则,杂菌污染使反应器的生产 能力下降。
第一节 酶反应器的类型
一、搅拌罐式反应器
是传统形式的反应器,由容器、 搅拌器及保温装置组成,有的 有挡板。 特点及应用
酶反应器 (2)优秀课件
酶反应器
酶和固定化酶在体外进行催化反应时,都必需在一定 的反应容器中进行,以便控制酶催化反应的各种条件 和催化反应的速度。
定义: 以酶为催化剂进行反应所需的设备称为酶反应器。
作用:
酶反应器是用于完成酶促反应的核心装置。它为 酶催化反应提供合适的场所和最佳的反应条件,以 便在酶的催化下,使底物(原料)最大限度地转化 成产物。它处于酶催化应过程的中心地位,是连接 原料和产物的桥梁。以尽可能低的成本,按一定的 速度由规定的反应物制备特定产物。
易失去活性。
2、连续搅拌罐式反应器
向反应器投入固定化酶和底物
溶液,不断搅拌,反应达到平衡
之后,再以恒定的流速连续流入
底物溶液,同时,以相同流速输
产 物
出反应液(含产物)。
优点是:在理想状况下,混合良 好,各部分组成相同,并与输出 成分一致。
缺点是:搅拌浆剪切力大,易打 碎、磨损固定化酶颗粒。
底物
连续搅拌罐式反应器 (Continuous Stirred Tank Reactor,CSTR)
根据酶分子和产物的分子量大小,选择适当孔径超滤膜, 分离膜可根据需要制成平面膜、直管膜、螺旋膜、中 空纤维膜;
采用膜反应器进行游离酶催化集反应分离于一体,一 则回收循环使用,二则产物连续排出降低产物抑制
膜的介绍
固定化酶反应器总结

固定化酶反应器类型及其适用对象
酶反应器类型 酶反应器适用对象
间歇式搅拌釜反应器 适用于游离酶
连续式搅拌釜反应器 ?
填充床酶反应器 它适用于各种形状的固定化酶和不含固体颗粒、黏度不大的底物溶液,
以及有产物抑制的转化反应。
流化床酶反应器 处理黏度较大和含有固体颗粒的底物溶度,同时,亦可用于需要供气体
或排放气体的酶反应(即固、液、气三相反应)
膜反应器 可以用于游离酶的催化反应,也可以用于固定化酶的催化反应
连续搅拌罐-膜反应器 该反应器适用于颗粒较细的固定化酶、游离酶和细胞以及小分子产物与
大分子底物。
10生物技术蛋白质与酶工程复习题与答案

一. 名词解释1.生物酶工程又称高级酶工程它是酶学与现代分子生物学技术相结合的产物。
2.蛋白质工程蛋白质工程就是运用蛋白质结构功能和分子遗传学知识,从改变或合成基因入手,定向地改造天然蛋白质或设计制造新的蛋白质。
3.多核糖体把细胞放在极其温和的条件下处理,就能得到几个到几十个核糖体在一条mRNA上结合起来的形态4.固定化酶水溶性酶经物理或化学方法处理后,成为不溶于水的但仍具有酶活性的一种酶的衍生物。
在催化反应中以固相状态作用于底物5.酶反应器以酶或固定化酶为催化剂进行酶促反应的装置。
6.酶工程又叫酶技术,是酶制剂的大规模生产和应用的技术7.生物传感器对生物物质敏感并将其浓度转换为电信号进行检测的仪器。
8. motif (模体)指的是蛋白质分子结构中介于二级结构与三级结构之间的一个结构层次,又称超二级结构9. domain功能域生物大分子中具有特异结构和独立功能的区域,特别指蛋白质中这样的区域10.PDB蛋白质数据库(Protein Data Bank,PDB)是一个生物大分子,11. DNA shuffling体外同源重组技术。
通过改变单个基因原有的核苷酸序列创造新基因,并赋予产物以新功能。
12.生物催化剂是指生物反指应过程中起催化作用的游离或固定化细胞各游离或固定化酶的总称13.必需基团有的基团既在结合中起作用,又在催化中起作用,所以常将活性部位的功能基团统称为必需基团(essential group)14.活性中心。
酶的活性中心是酶与底物结合并发挥其催化作用的部位。
15.有性PCR dna改组16.DNA改组通过改变单个基因原有的核苷酸序列创造新基因,并赋予产物以新功能。
17.免疫传感器偶联抗原/抗体分子的生物敏感膜与信号转换器组成的,基于抗原抗体特异性免疫反应的一种生物传感器。
18.易错PCR是从酶的单一基因出发,在改变反应条件的情况下进行聚合酶链反应,使扩增得到的基因出现碱基配对错误,从而引起基因突变的技术过程。
酶工程复习要点

1、酶的催化作用特点:具有专一性,催化效率高和反应条件温和等显著特点。
2、酶研究的两个方向:理论研究方向和应用研究方向。
理论研究方向:酶的理化性质、催化性质、催化机制等。
应用研究:促进了酶工程的形成。
3、酶工程的定义:利用酶或者微生物细胞,动植物细胞,细胞器,借助于酶的催化作用,通过工程学手段生产产品或提供社会服务的科学体系。
4、酶工程的应用范围:①对生物资源中天然酶的开发和生产②自然酶的分离纯化与鉴定技术③酶的固定化技术④酶反应器的研制与应用⑤与其它生物技术领域的交叉与渗透。
5、酶工程的组成:①酶的发酵生产②酶的分离纯化③酶分子修饰④酶和细胞固定化⑤酶反应器和酶的应用等方面。
6、酶工程的主要任务:通过预先设计,经过人工操作控制而获得大量所需的酶,并通过各种方法使酶发挥其最大的催化功能。
8、酶的分类:第1类,氧化还原酶;第2类,转移酶;第3类,水解酶;第4类,裂合酶;第5类,异构酶;第6类,合成酶;第7类,核酸类酶。
9、酶的作用机制:酶的催化机理可能与几种因素有关:酶与底物结合时,两者构象的改变使它们互相契合,底物分子适当地向酶分子活性中心靠近,并且趋向于酶的催化部位,使活性中心这一局部地区额底物浓度大大增高,并使底物分子发生扭曲,易于断裂。
在另一些情况中,可能还有一些其他的因素使酶反应速度稍有一些提高,如酶与底物形成有一定稳定度的过渡态中间物——共价的ES中间物,这种ES中间物又可迅速地分解成产物,又如酶活性中心的质子供体和质子受体对底物分子进行了广义的酸碱催化等。
10、酶的催化能力:酶仅能改变化学反应的速度,并不不能改变化学反应的平衡点。
酶本身在反应前后也不发生变化例如肽键遇水自发地进行水解的反应极为缓慢,当有蛋白酶存在时,这个反应则进行得十分迅速,可降低反应的活化能。
在一个化学反应体系中,反应开始时,反应物(S)分子的平均能量水平较低为“初态”,在反应的任何一瞬间反应物中都有一部分分子具有了比初态更高一些的能量,高出的这一部分能量称为活化能,使这些分子进入“过渡态”,这时就能形成或打破一些化学键,形成新的物质——产物(P)。
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第七章酶反应器的类型与选择
◆用于酶进行催化反应的容器及其附属设备称为酶反应器。
◆按照结构的不同分为:
搅拌罐式反应器(Stirred T ank Reactor, STR)、鼓泡式反应器(bubble column reactor, BCR )、填充床式反应器(packed column reactor, PCR )、流化床式反应器( Fluidized Bed Reactor, FBR)、膜反应器(Membrane Reactor, MR)等;
◆酶反应器的操作方式可以分为分批式反应(batch )、连续式反应(continuous )和流加分批式反应(feeding batch );
◆将反应器的结构和操作方式结合一起,对酶反应器进行分类,
连续搅拌罐反应器(Continuous Stirred Tank Reactor, CSTR)、分批搅拌罐反应器(Batch Stirred Tank Reactor, BSTR)等。
1.酶反应器的类型
◆常用的酶反应器类型
1.1搅拌罐式反应器:
◆搅拌罐式反应器(stirred tank reactor, STR)是有搅拌装置的一种反应器(图8-1,8-2所示)。
◆在酶催化反应中是最常用的反应器。
它由反应罐,搅拌器和保温装置组成。
◆搅拌式反应器的操作方式可以根据需要采用分批式(batch)、流加分批式(feeding batch)和连续式(continuous)三种。
与之对应的有分批搅拌罐式反应器和连续搅拌罐式反应器之分。
(1)分批搅拌罐式反应器:
图8-1 分批搅拌罐式反应器(2)搅拌罐式反应器:
连续搅拌罐式反应器(continuous stirred tank reactor ,CSTR)的结构示意图如图8-2
图8-2 连续搅拌罐式反应器示意图
1.2填充床式反应器:
填充床式反应器(packed column reactor, PCR)是一种用于固定化酶进行催化反应的反应器。
如图8-3所示。
反应产物出口
固定化酶
底物溶液进口
图8-3填充床式反应器示意图
1.3 流化床反应器:
流化床反应器(fluidized bed reactor, FBR)是一种适用于固定化酶进行连续催化反应的反应器。
如图8-4所示。
固定化酶
底物溶液进口
图8-4 流化床式反应器示意图
1.4鼓泡式反应器:4
鼓泡式反应器(bubble column reactor, BCR)是利用从反应器底部通入的气体产生的大量气泡,在上升过程中起到提供反应底物和混合两种作用的一类反应器。
也是一种无搅拌装置的反应器。
如图8-5所示。
排气口
进气口
图8-5 鼓泡式反应器示意图
1.5膜反应器:
膜反应器(membrane reactor, MR)是将酶催化反应与半透膜的分离作用组合在一起
而成的反应器。
可以用于游离酶的催化反应,也可以用于固定化酶的催化反应。
用于固定化酶催化反应的膜反应器是将酶固定在具有一定孔径的多孔薄膜中,而制成的一种生物反应器。
膜反应器可以制成平板型、螺旋型、管型、中空纤维型、转盘型等多种形状。
常用的是中空纤维反应器,如图8-6所示。
4
2
3
图8-6 中空纤维反应器示意图
1:外壳2:中空纤维
3:底物溶液进口4:反应产物出口膜反应器也可以用于游离酶的催化反应。
游离酶膜反应器的装置如图8-7所示。
底物溶液进口酶液循环使用
(反应容器)(膜分离器)
图8-7 游离酶膜反应器示意图
1.6喷射式反应器:
喷射式反应器是利用高压蒸汽的喷射作用,实现酶与底物的混合,
进行高温短时催化反应的一种反应器。
如图8-8所示。
反应液
高压蒸汽进口至维持罐
底物溶液进口
图8-8 喷射式反应器示意图
2.酶反应器的选择
2.1 根据酶的应用形式选择反应器:
◆在体外进行酶催化反应时,酶的应用形式主要有游离酶和固定化酶。
(1)游离酶反应器的选择:
◆可以选用搅拌罐式反应器、膜反应器、鼓泡式反应器、喷射式反应器等。
①游离酶催化反应最常用的反应器是拌罐式反应器。
搅拌罐式具有设备简单,操作简便,酶与底物的混合较好,物质与热量的传递均匀,反应条件容易控制等优点,但是反应后酶与反应产物混合在一起,酶难于回收利用。
②对于有气体参与的酶催化反应,通常采用鼓泡式反应器。
鼓泡式反应器结构简单,操作容易, 混合均匀,物质与热量的传递效率高,是有气体参与的酶催化反应中常用的一种反应器。
③对于某些价格较高的酶,由于游离酶与反应产物混在一起,为了使酶能够回收,可以采用游离酶膜反应器。
④对于某些耐高温的酶,如高温淀粉酶等,可以采用喷射式反应器,进行连续式的高温短时反应。
喷射式反应器混合效果好,催化效率高,只适用于耐高温的酶。
(2)固定化酶反应器的选择:
◆应用固定化酶进行催化反应,可以选择搅拌罐式反应器、填充床式反应器、鼓泡式反应器、流化床式反应器、膜反应器等。
◆应用固定化酶进行反应,由于酶不会或者很少流失,为了提高酶的催化效率,通常采用连续反应的操作形式。
◆颗粒状的固定化酶可以采用搅拌罐式反应器、填充床式反应器、流化床式反应器、鼓泡式反应器等进行催化反应。
2.2根据酶反应动力学性质选择反应器:
(1)必须保证酶分子与底物分子能够有效碰撞,为此,必须使酶与底物在反应系统中混合均匀。
◆搅拌罐式反应器、流化床式反应器均具有较好的混合效果。
填充床式反应器的混合效果较差。
在使用膜反应器时,也可以采用辅助搅拌或者其他方法,以提高混合效果,防止浓差极化。
(2)底物浓度的高低对酶反应速度有显著影响。
具◆有高浓度底物抑制作用的酶,如果采用分批搅拌罐式反应器,可以采取流加分批反应的方式进行反应。
◆对于具有高浓度底物抑制作用的游离酶,可以采用游离酶膜反应器进行催化反应;
◆对于具有高浓度底物抑制作用的固定化酶,可以采用连续搅拌罐式反应器、填充床式反应器、流化床式反应器、膜反应器等进行连续催化反应。
(3)有些酶催化反应,其反应产物对酶有反馈抑制作用。
◆对于具有产物反馈抑制作用的固定化酶,也可以采用填充床式反应器。
(4)某些酶可以耐受100℃以上的高温,最好选用喷射式反应器。
2.3根据底物或产物的理化性质选择反应器:
(1)反应底物或产物的分子质量较大时,由于底物或产物难于透过超滤膜的膜孔,所以一般不采用膜反应器。
(2)反应底物或者产物的溶解度较低、粘度较高时,应当选择搅拌罐式反应器或者流化床式反应器,而不采用填充床式反应器和膜反应器,以免造成阻塞现象。
(3)反应底物为气体时,通常选择鼓泡式反应器。
(4)有些需要小分子物质作为辅酶(辅酶可以看作是一种底物)的酶催化反应,通常不采用膜反应器,以免辅酶的流失而影响催化反应的进行。
2.4所选择的反应器应当能够适用于多种酶的催化反应,并能满足酶催化反应所需的各种条件,并可进行适当的调节控制。
2.5所选择的反应器应当尽可能结构简单、操作简便、易于维护和清洗。
2.6所选择的反应器应当具有较低的制造成本和运行成本。
3.酶反应器的设计
◆酶反应器的设计主要包括反应器类型的选择,反应器制造材料的选择、热量衡算、物料衡算等。
3.1确定酶反应器的类型:
酶反应器的设计,首先要根据酶、底物和产物的性质,按照上一节所述的选择原则,选择并确定反应器的类型。
3.2确定反应器的制造材料:
由于酶催化反应具有条件温和的特点,通常都是在常温、常压、pH近乎中性的环境中
进行反应,所以酶反应器的设计对制造材料没有什么特别要求,一般采用不锈钢制造反应容器即可。
3.3进行热量衡算:
酶催化反应一般在30~70℃的常温条件下进行,所以热量衡算并不复杂。
温度的调节控制也较为简单,通常采用一定温度的热水通过夹套(或列管)加热或冷却方式,进行温度的调节控制,热量衡算是根据热水的温度和使用量计算。
对于某些耐高温的酶,例如高温淀粉酶,可以采用喷射式反应器,热量衡算时,根据所使用的水蒸气热焓和用量进行计算。
3.4进行物料衡算:
物料衡算是酶反应器设计的重要任务。
主要内容包括:
(1)酶反应动力学参数的确定:
(2)计算底物用量:
(3)计算反应液总体积:
(4)计算酶用量:
(5)计算反应器数目:
4.酶反应器的操作
4.1酶反应器操作条件的确定及其调控:
◆酶反应器的操作条件主要包括温度、pH值、底物浓度、酶浓度、反应液的混合与流动等。
(1)反应温度的确定与调节控制:
(2)pH值的确定与调节控制:
(3)底物浓度的确定与调节控制:
(4)酶浓度的确定与调节控制:
(5)搅拌速度的确定与调节控制:
(6)流动速度的确定与调节控制:
4.2酶反应器操作的注意事项:
(1)保持酶反应器的操作稳定性:
(2)防止酶的变性失活:
(3)防止微生物的污染:
11。