第十二章厌氧菌和分枝杆菌
病原生物学- 厌氧菌

一 破伤风梭菌 (一)生物学特性
1.G+细长杆菌,芽胞位于菌体顶端且大于菌体, 呈鼓槌状。芽胞抵抗力强,土壤中存活数十 年。耐100℃ 60分钟。对青霉素敏感。
2.培养
普通平板上迁徙生长,血平板上形成溶血环。在庖肉 培养基上生长,出现混浊变黑,右侧试管未接种。
(三)微生物学检查
用动物实验查出毒素: 1组:食物或呕吐物上清0.5ml给小鼠腹腔注射。 2组:煮沸上清液0.5ml。 3组: 上清液0.5ml加多价抗毒素血清。
(四)防治
加强食品卫生;治疗用多价抗毒素血清,早期 足量,并对症治疗。
陕西肉毒毒素中毒事件值得警觉
母亲自制的豆腐乳,改变了王录社一家的命运 2003年07陕西省岐山县安乐乡唐家岭村王录社
四、艰难梭菌 C.difficile
为肠道内正常菌群,专性厌氧, 菌群失调时引起伪膜性肠炎。
第二节 无芽胞厌氧菌
1.致病条件:无芽胞厌氧菌是人体的正常菌群, 为机会性致病菌,引起内源性感染。 ① 由于机械或物理损伤导致它们侵入非正常 寄居部位。 ② 局部形成厌氧环境。 ③ 菌群失调和机体抵抗力下降。
1、直接涂片、染色镜检:G+有荚膜大杆菌伴有 其它杂菌,WBC减少、形态不规则。 2.分离培养及鉴定:
厌氧培养:“汹涌发酵”或接种小白鼠死后剖 检,尸体膨胀恶臭,“泡沫肝”。
(四)防治 1.彻底清创、抗菌治疗,注射多价抗血清。 2.高压氧舱治疗,必要时手术截肢。
三、肉毒梭菌C.botulinum
(一)生物学性状 1.培养:严格厌氧、血平板形成β溶血环。 2.抵抗力:芽胞耐100 ℃数小时, 121℃ 30分。肉毒毒素100℃1分钟即被破坏。 但酸性条件下稳定,胃液中1天不破坏。 3. 分型:按抗原性分为7型,仅A、B、E型 对人致病。
【学习课件】第12章厌氧性细菌

一、破伤风梭菌 (C.tetani)
(一)生物学性状(掌握) (二)致病性与免疫性(掌握、难点) (三)微生物学检查法(了解) (四)防治原则(掌握)
2021/7/9
(一)生物学性状
❖形态与染色
▪ 鼓槌状杆菌,散在排列, G+ ▪ 周鞭毛、无荚膜、芽胞大于菌体位于一端
2021/7/9
Anaerobic bacteria
2021/7/9
厌氧性细菌
厌氧芽胞梭菌
无芽胞厌氧菌
破伤风梭菌
破伤风
(掌握)
产气荚膜梭菌
气性坏疽
(熟悉)
肉毒梭菌
肉毒中毒
(熟悉)
条 件 致 病 菌
(了解)
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厌氧芽胞梭菌的共同特性
1.革兰阳性大杆菌,大多数严格厌氧。
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厌氧培养法
❖庖肉培养基法 ❖焦性没食子酸吸氧法 ❖厌氧罐法 ❖厌氧气袋法 ❖厌氧培养箱法
生物学作用 A
卵磷 脂 酶, 增 加血 管 通透 性 ,
溶血和坏死作用
+
坏死作用
-
增加胃肠壁通透性
-
坏死作用,增加血管通透性
-
溶血素
-
溶血素,细胞毒素
±
胶原酶、明胶酶、坏死作用
+
蛋白酶
-
μ (mu)
透明质酸酶
±
ν (nu)
DNA 酶
±
神经氨酸酶
改变神经节苷脂受体
+
其它
肠毒素
肠毒素、细胞毒素
+
+ 大多菌株产生;± 某些菌株产生;-不产生;nt 未研究
只能被同型抗毒素中和。 ❖ 肉毒毒素不耐热,煮沸1分钟即可被破坏。
12 厌氧菌

Ø必须在无氧环境下才能生长繁殖的细菌 厌氧芽胞梭菌Ø根据能否形成芽胞无芽胞厌氧菌ØG +大杆菌,可形成芽胞;Ø广泛分布于土壤、人和动物肠道;Ø抵抗力强;Ø可产生强烈外毒素,引起破伤风、气性坏疽、肉毒中毒等,多数为外源性感染;Ø专性厌氧培养。
Ø是破伤风的病原菌。
Ø外伤感染后死亡率达20%,新生儿死亡率可高达90%。
Ø世界上每年约有100万病例发生,死亡率在30-50%之间,其中一半的死亡病例是新生儿。
G+杆菌,周身鞭毛,无荚膜,形成芽胞后菌体成鼓槌状严格厌氧大多生化反应阴性 芽胞抵抗力强致病物质: 溶血毒素(tetanolysin ) 痉挛毒素(tetanospasmin ) 裂解成A 链(轻链)和B 链(重链)B 链与运动神经元胞浆膜上受体结合,A 链进入胞浆 A 链进入CNS ,阻止上下神经元间正常抑制性神经冲动传递,造成骨骼肌强直性痉挛对脊髓前角细胞和脑干神经细胞有高度的亲和力侵入伤口,伤口厌氧微环境细菌仅在局部繁殖,释放毒素 破伤风(牙关紧闭,苦笑面容,角弓反张等)致病过程1、组织开放性损伤,创口较深。
2、受到外界破伤风梭菌侵入。
3、创口内有失活组织或局部组织缺血缺氧。
破伤风免疫属外毒素免疫,主要是抗毒素发挥中和作用。
破伤风痉挛毒素毒性很强,极少量毒素即可致病,而如此少量的毒素尚不足以引起免疫,且毒素与组织结合后,也不能有效刺激免疫系统产生抗毒素,故一般病后不会获得牢固免疫力。
获得有效抗毒素的途径是进行人工免疫。
Ø伤口直接涂片镜检,病菌分离培养阳性率低Ø主要根据典型症状和病史作出诊断清创扩创,防止厌氧微环境形成。
人工主动免疫:破伤风类毒素或白百破三联疫苗。
感染早期立即注射破伤风抗毒素(TAT),即人工被动免疫;还可注射免疫球蛋白。
* 注射TAT之前一定要皮试治疗原则:1、抗毒素:应早期、大量中和游离外毒素。
10-厌氧菌、分枝杆菌、棒状杆菌

• 据WHO预计,目前全球约20亿人已感 WHO预计 目前全球约20亿人已感 预计, 染了MTB。 染了MTB。 • 全球现有TB病人2000万。 全球现有TB病人 病人2000万 • TB的死亡将达历史最高水平,全球每 TB的死亡将达历史最高水平 的死亡将达历史最高水平, 天有8000 人死于 , 每年约300 万人 人死于TB 天有 8000人死于 TB, 每年约 300万人 死于TB 特别是在发展中国家, 死于TB 。特别是在发展中国家,TB 的形势尤其严峻,全球98% TB死亡 的形势尤其严峻,全球98%的TB死亡 95%的新发TB都是在发展中国家 都是在发展中国家。 和95%的新发TB都是在发展中国家。
• 所致疾病
– 食物中毒 • 进食污染食物(多为罐头、肉制品、豆制品)发生食物中毒-进食污染食物(多为罐头、肉制品、豆制品)发生食物中毒--食入毒素 • 临床表现:少见胃肠道症状,主要为神经末梢麻痹(松驰型) 临床表现:少见胃肠道症状,主要为神经末梢麻痹 松驰型) 神经末梢麻痹(
– 婴儿肉毒病
• 细菌进入肠道,繁殖,产生毒素而致病 细菌进入肠道,繁殖, • 以6个月以内的小婴儿居多
免疫性
• 破伤风免疫属抗毒素免疫,主要是抗毒 破伤风免疫属抗毒素免疫, 素发挥中和作用( 素发挥中和作用(毒素与中枢神经组织 结合非常牢固, 结合非常牢固,一旦结合即非抗毒素所 能中和) 能中和) • 病后不会获得牢固免疫力 • 获得有效抗毒素的途径是人工免疫 类 获得有效抗毒素的途径是人工免疫—类 毒素
• 德国科学家Robert Koch在1882年发现了 德国科学家Robert Koch在1882年发现了 一种特殊的微生物—— 结核杆菌 结核杆菌, 一种特殊的微生物 ——结核杆菌 , 结核 病的致病细菌。 病的致病细菌 。 他还证明了这种微生物 是可以在培养基里培养出来的。 是可以在培养基里培养出来的 。 这一发 现使得结核的实验研究成为现实。 现使得结核的实验研究成为现实。
厌氧菌讲义PPT课件

(一)标本采集与运送
1.厌氧菌标本的采集 ➢采集原则:体表及其与外界相通的腔
道,即有正常菌群寄生的部位的标本 ,不宜作厌氧菌检查。 ➢采集方法:针筒穿刺抽取,严格无菌 操作,尽量避免接触空气。
原则上只有在正常情况下无菌的部 位采取的标本(如血、胸腔抽出液、心包 液、腹腔液、关节液、胆汁、外科手术 取出的脓、深部脓肿抽出物、膀胱穿刺 抽出的尿)适于做厌氧培养。被正常菌群 污染的标本(如大便、自行排出的尿、直 接咳出的痰、胃和十二指肠引流液、前 列腺分泌物、支气管镜冲洗液等)不宜做 厌氧培养
2.厌氧菌药敏试验指征:
➢ 严重感染,如心内膜炎、脑脓肿、骨髓 炎治疗时期长,观察药物敏感性变化。
➢ 慢性感染 ➢ 经验用药无效 ➢ 对新药评价 ➢ 耐药监测
3.药敏试验方法 ➢ ATB ANA厌氧菌药敏实验:挑取菌落于
API 20 A培养基,制成3McF的菌悬液, 吸取200uL 至ATB S 培养基接种试条,厌 氧环境下培养24-48 小时,仪器或手工判
2.厌氧菌生长速度慢,实验室报告结果时间较长, 对临床及时指导不够,这是临床医生不愿送标 本的主要原因。
3.临床微生物实验室对开展厌氧菌检验态度不够 积极,主要由于:培养庆氧菌所需要的条件比 较高,操作程序繁琐,花费的成本高,效益低。
二、厌氧菌的基本概念
(一)细菌分类(根椐对氧分子的需求)
专性需氧菌:结核分枝杆菌,星状诺卡 菌
(五)厌氧菌的鉴定
1.API鉴定系统:挑取菌落于API 20 A培养基,制 成3McF的菌悬液,移至API 20 A的试条中,放 厌氧环境中培养24小时,加相应的试剂,判读 结果。
2.ATB快速鉴定系统:挑取菌落于悬浮培养基,制 成4McF的菌悬液,移至Rapid ID 20A的鉴定试 条,于普通培养箱37度培养4小时,加相应的 试剂,仪器判读结果。
第章厌氧菌ppt课件

厌氧菌
郑州大学第一临床学院
冯羡菊
2019
-
1
第一节
概
述
厌氧性细菌(anaerobic bacteria)指一 群在有氧条件下不能生长,必须在无氧条件 下才能生长繁殖的细菌。
2019
-
2
厌氧菌的分类
分为两类: 一类为有芽胞厌氧菌,只有一个属,即梭菌属, 共有130个种,以芽胞形式存于体外。 另一类为无芽胞厌氧菌, 包括40多个属, 300 多个菌种和亚种;多为体内正常菌 群, 存在于皮肤、口腔、上呼吸道、肠道和泌尿生 殖道。易引起这些部位的内源性感染。
坏死梭杆菌形态
2019
-
27
致病性
坏死梭杆菌是毒力很强的梭杆菌,常引起急性 扁桃体炎,有时并发单核细胞增多症,是儿童 和青年人扁桃体周围脓肿中最常分离到的厌氧 菌。局部症状还包括颈间隙感染和颈静脉脓毒 性血栓静脉炎,尚可引起胸膜渗出性脓胸、增 生性转移脓肿和菌血症。
2019
-
28
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ五节
革兰阳性无芽胞厌氧杆菌
2019革兰染色形态及其他特征脆弱类杆菌两端钝圆着色深中间色浅不均匀有空泡长短不一标本有琥珀味产黑色素普雷沃菌球杆菌可见多形性长短不一紫外线照射发红色荧光标本有恶臭具核酸杆菌菌体细长两头尖紫色颗粒沿菌体长轴成双排列标本有丁酸味坏死梭杆菌菌体细长高度多形性长短不一菌体中部膨胀呈圆球形韦荣球菌极小的革兰阴性球菌消化链球菌球形或卵圆形呈链状的小球菌易染成阴性乳酸杆菌细长无芽胞有时多形性标本有乳酸气味痤疮丙酸杆菌排列呈xyv或栅状标本有丙酸气味放线菌分枝呈棒状xyv或栅状排列脓汁中的黄色颗粒呈琥珀酸气味破伤风梭菌细长鼓槌状极端芽胞圆形产气荚膜梭菌粗大杆菌呈单或双排列有芽胞有荚膜艰难梭菌粗长杆菌芽胞卵圆形或长方形位于次极端2019初代培养
兽医微生物学-革兰氏阳性无芽胞杆菌(李氏杆菌+丹毒杆菌+分枝杆菌)

结核分支杆菌
2. 分离培养:将病料中加入6% 硫酸或 4% NaOH溶液处理15min后,经中和、离心, 取少许沉淀物接种在培养基斜面上,每份 病料接4~6管,管口封严,置37℃培养8 周,每周观察一次,培养阳性时,需进行 培养特性和生化特性鉴定。
第一群
产单核细胞李氏杆菌 L.monocytogenes
伊氏李氏杆菌
L.ivanovii
无害李氏杆菌
L.innocua
韦氏李氏杆菌
L.welshimer
塞氏李氏杆菌 L.seeligeri
第二群---格氏李氏杆菌
L.grayi
产单核细胞李氏杆菌,引 致人和动物的李氏杆菌病。
第一群
产单核细胞李氏杆菌 L.monocytogenes
(七)微生物学诊断
1、显微镜检查:取患病动物结节及病变 与非病变交界处组织直接涂片,抗酸 染色后镜检,如发现红色成丛杆菌时, 可做出初步诊断。 结核杆菌,菌体细长,直或微弯。 牛型菌比人型菌粗而短, 禽型菌呈多形性。菌体呈单个散在 排列,少数成对、成丛。
结核杆菌(抗酸染色)
禽分支杆菌
禽分支杆菌
30℃~37℃。 • 4、血平板上生长茂盛,透明,灰白色露滴
状小菌落,α溶血; • 5、明胶穿刺:沿穿刺线横向四周生长,呈
试管刷状,但不液化明胶。
三、生化特性
• 1、糖类发酵:葡、果、乳,+ • 2、接触酶:- • 3、IMViC:---- • 4、H2S:+ • 5、不分解尿素
四、血清型
• 根据肽聚糖抗原可分为:25个血清 型和1a、1b、2a、2b四个亚型。
37℃~37.5℃,在30℃~34℃可生长; 禽分支杆菌可在42℃生长。
2、生长慢,初代分离1-2周才开始生长, 3-4周才能旺盛生长。生长速度:禽型菌 >人型菌>牛型菌。
初中八年级(初二)生物 第12章厌氧性细菌

二、 产气荚膜梭菌
(C染色
革兰阳性粗大杆菌 芽胞位于次极端,无鞭毛 在体内有明显的荚膜
菌、肉毒梭菌等
病例讨论
李春波,男,55岁,农民。 主诉:因张口困难,全身抽筋而急诊入院。
病史:一周前在地里劳动时,不慎被一绣铁钉刺 破左足底。伤口立即由“赤脚医生”处理包扎, 但至今未愈。入院前24h开始张口困难,逐渐加 重,不能进食。颈项发硬,不能弯腰。5h前开始 全身抽筋,发作历时几秒钟,间歇20~30min。
2.培养特性
厌氧。繁殖周期为 8分钟
血琼脂平板上,双 层溶血环
牛奶培养基中,可 出现“汹涌发酵。
(二)致病性
1.致病物质
α毒素—卵磷脂酶
分解细胞膜上卵磷脂,引起溶血、组织坏死、 水肿、出血
在气性坏疽的形成中起主要作用
胶原酶、透明质酸酶、DNA酶等毒素的 分解破坏作用,造成气肿及组织坏死
(一)生物学性状
1. 菌体细长,有周鞭毛,芽胞呈鼓槌状,G+ 2.芽胞抵抗力很强,在100 °C 1h才被破坏,
在土壤中可存活数十年 3. 严格厌氧,不分解糖类、蛋白质。
(二)致病性与免疫性
1. 致病条件
伤口需形成厌氧微环境 伤口窄而深(如刺伤); 有泥土或异物污染; 大面积创伤、烧伤,坏死组织多,局部 组织缺血; 同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染的 伤口;
势高的呼吸酶; 根据能否形成芽胞,可分为
厌氧芽胞梭菌属:引起外源创伤感染 无芽胞厌氧菌:引起内源性感染
第一节 厌氧芽胞梭菌属(Clostridium)
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特点 细胞壁含有大量的脂类 菌体不易着色,不易脱色,故采用抗 酸染色,故又称抗酸杆菌 无特殊结构,致病与菌体成分有关, 形成慢性肉芽肿性病变 营养要求高,生长缓慢
结核分枝杆菌
Mycobacterium tuberculosis Tubercle bacilli
流行病学
结核病的病原菌
蛋白质
引起迟发性过敏反应
(二)所致疾病
结核病
传染源:开放性肺结核病人痰
传播途径:呼吸道、消化道、皮肤 黏膜
1 肺部感染 (1)原发感染
原发感染
结核分枝杆菌 肺泡 吞噬细胞
吞噬细胞内繁殖
原发性感染
(渗出性炎症) 结核结节 淋巴结病 逐渐纤维化和钙化
全身性粟粒性结核
(2)继发感染
三、免疫性
有毒TB菌
结果
结核菌素试验应用
选择卡介苗接种对象、测定卡介苗接种
后的免疫效果
了解人群自然感染率
作为婴幼儿结核病的辅助诊断
测定肿瘤患者的细胞免疫功能
四、特异性防治
卡介苗预防
接种对象:新生儿和结核菌素试验阴性的儿童 免疫时间:3~5年 联合应用 长期用药
药物治疗
第三节
麻风分枝杆菌
1886年德国细菌学家 Koch 证明
全球性卫生问题
是艾滋病高发区人群的首要死因
世界防治结核病日
3月24日
一、生物学性状
1 形态与染色
细长略弯,有时呈 分枝状;无芽胞、 鞭毛
抗酸染色阳性
2 培养特性
特点 专性需氧 生长缓慢 营养要求高 生长现象 液体:
表面生长(菌膜)
一、生物学特性
一、 生物学性状 形态染色 革兰阳性 芽胞:一端膨大,呈鼓槌状 专性厌氧 抵抗力 强,芽胞在干燥土壤中可存活数十 年,耐热100℃1h,对青霉素敏感
破伤风梭菌
二、致病性与免疫性 传染途径及伤口条件 破伤风为创口感染 发生感染的条件 ——伤口的厌氧微环境 伤口窄而深 混有泥土及异物 大面积创伤、烧伤,局部缺血,坏 死组织多 伴有需氧菌或兼性厌氧菌
根据芽胞有无
无芽胞厌氧菌
厌氧菌的分布 厌氧为人体正常菌群构成的优势菌 体内正常菌群厌氧菌与需氧菌的比例 牙表面、胃、小肠中为1:1 眼结膜、鼻涕、唾液、外尿道、皮 肤表面为10:1 牙周、牙垢、结肠中为1000 :1
LGG益生菌主要功能
致病物质 ——破伤风痉挛毒素(外毒素)
破伤风痉挛毒素的作用机制
致病机制
痉挛毒素 末梢神经 淋巴液 血液 脊髓前角 脑干
破伤风
封闭抑制性突 触的介质释放
牙关紧闭 角弓反张
强直性痉挛
伸肌、屈肌同 时强烈收缩
所致疾病——破伤风
典型症状
苦笑面容 角弓反张 其它
三、微生物学检查与防治
固体:
表面粗糙 呈颗粒、结节或菜花状菌落 乳白或米黄,不透明
3 抵抗力
抗干燥 抗酸碱 抗染料 对酒精、湿热及紫外线敏感 对抗结核药物敏感
二、致病性
(一)荚膜
与细胞表面受体结合(粘附与入侵作用) 含多种酶(分解利用营养物质)
致 病
物 质
保护(阻止有害物质的进入菌体)
脂质 索状因子(破坏细胞,引起肉芽肿) 磷脂(形成结核结节) 硫酸脑苷脂(抑制吞噬体与溶酶体结合) 蜡质D(引起迟发性过敏反应)
皮下
郭霍现象
正常豚鼠 10-14天
以前感染过或免疫豚鼠
24-48小时 局部红肿、溃疡 局部红肿、浅溃疡 坏死,经久不愈 不扩散, 脱落后自行愈合
全身扩散
感染免疫/有菌免疫(infection immunity ) 细胞免疫为主,迟发型超敏反应同时存在 免疫和超敏反应的物质基础
结核分枝杆菌核糖核酸(rRNA)
结核菌素试剂
旧结核菌素(old tuberculin,OT)
纯蛋白衍化物(purified protein derivative,PPD)
结核菌素试验
结核菌素试验
方法
取两种PPD 5单位注入两前 臂皮内 48~72小时后观察红肿直径 阴性:<5mm 阳性:>5mm 强阳性:≥15mm
微生物学检查:临床诊断 防治原则 正确处理伤口——及时清创,防止形成 厌氧微环境 人工自动免疫——类毒素(百白破三联 疫苗)平时预防 人工被动免疫——抗毒素 紧急预防 特异性治疗 治疗 抗毒素+抗生素+镇静解痉药物
分枝杆菌属(Mycobacterium)
结核分枝杆菌 麻风分枝杆菌 非结核分枝杆菌
结核菌素蛋白、蜡质D 可产生抗体,但其保护作用不明确
三、微生物学检查
标本取材
涂片染色镜检:抗酸染色
培养法:罗氏固体培养基 动物试验 细菌学基因诊断:PCR
四、微生物学检查法 痰液等 标本处理:浓缩集菌
直接镜检:抗酸染色
分离培养:培养基、时间
动物试验:豚鼠等
快速诊断:PCR等
结核菌素试验
人 直接接触或由飞沫传播 一般是6个月至5年
瘤型麻风 结核样型 界线类 未定类
1、 平衡和改善胃肠道功能
2、 增强人体自身免疫能力
3、 促进双歧杆菌和嗜酸乳杆菌生长和作用
4、 预防和帮助治疗腹泻
5、 预防呼吸道感染 6、 排出毒素 7、 预防龋齿 8、 预防过敏
厌氧培养箱
种类
破伤风梭菌 产气荚膜梭菌 肉毒梭菌 艰难梭菌
破伤风梭菌
Clostridium tetani
(Mycobacterium.leprae)
俗称麻风杆菌,引起麻风,是一种慢性 传染病 流行广泛,主要分布在亚、非和拉丁美 洲
形态与染色
细长略弯曲 无芽胞,无荚膜,无 鞭毛 抗酸染色阳性 典型的胞内寄生菌
致病性
易感人群 传播途径 潜伏期 发病慢、病程长 麻风分为3种类型