福乐片中柠檬酸的含量测定(柠檬酸、琥珀酸、苹果酸)
食品中各种酸的测定方法附公式
食品中各种酸的测定方法附公式酸度的测定概述食品中的酸味物质，主要是溶于水的一些有机酸和无机酸。
在果蔬及其制品中，以苹果酸，柠檬酸，酒石酸，琥珀酸和醋酸为主；在肉，鱼类食品中则以乳酸为例。
此外，还有一些无机酸，像盐酸，磷酸等。
这些酸味物质，有的是食品中的天然成分，像葡萄中的酒石酸，苹果中的苹果酸；有的是人为的加进去的，像配制型饮料中加入的柠檬酸；还有的是在发酵中产生的，像酸牛奶中的乳酸。
酸在食品中主要有以下三个方面的作用。
1、显味剂不论是哪种途径得到的酸味物质，都是食品重要的显味剂，对食品的风味有很大的影响。
其中大多数的有机酸具有很浓的水果香味，能刺激食欲，促进消化，有机酸在维持人体体液酸碱平衡方面起着重要的作用。
2、保持颜色稳定食品中的酸味物质的存在，即pH值的高低，对保持食品的颜色的稳定性，也起着一定的作用。
在水果加工过程中，如果加酸降低介质的pH值，可抑制水果的酶促褐度；选用pH6.5-7.2的沸水热烫蔬菜，能很好地保持绿色蔬菜特有的鲜绿色。
3、防腐作用酸味物质在食品中还能起到一定的防腐作用。
当食品的pH小于2.5时，一般除霉菌外，大部分微生物的生长都受到了抑制；若将醋酸的浓度控制在6%时，可有效地抑制腐败菌的生长食品中酸度测定的意义1.测定酸度可判断果蔬的成熟程度例如：如果测定出葡萄所含的有机酸中苹果酸高于酒石酸时，说明葡萄还未成熟，因为成熟的葡萄含大量的酒石酸。
不同种类的水果和蔬菜，酸的含量因成熟度、生长条件而异，一般成熟度越高，酸的含量越低。
如番茄在成熟过程中，总酸度从绿熟期的0.94%下降到完熟期的0.64%，同时糖的含量增加，糖酸比增大，具有良好的口感，故通过对酸度的测定可判断原料的成熟度。
2.可判断食品的新鲜程度例如：新鲜牛奶中的乳酸含量过高，说明牛奶已腐败变质；水果制品中有游离的半乳糖醛酸，说明受到霉烂水果的污染。
3.酸度反映了食品的质量指标食品中有机酸含量的多少，直接影响食品的风味、色泽、稳定性和品质的高低。
微生物法测定维生素片中的泛酸含量
分析检测微生物法测定维生素片中的泛酸含量高志城，周 敏，张任广（广东省科学院测试分析研究所（中国广州分析测试中心），广东广州 510000）摘 要：目的：建立适用于定量测定维生素片中泛酸含量的微生物法。
方法：植物乳杆菌（ATCC8014）繁殖速度与泛酸的含量呈正比关系，且在一定浓度范围内呈线性关系，对培养后菌悬液的吸光度与泛酸标准工作曲线进行比较，定量测定出维生素片中的泛酸含量。
结果：微生物法测定泛酸的线性范围为0～98.0 ng，其标准曲线多变量相关系数为0.991 29，测定维生素片中的泛酸含量的相对标准偏差（RSD）为2.23%，回收率为91.4%～103.4%。
结论：微生物法测定维生素片中的泛酸含量操作简便、稳定可靠、重复性好。
关键词：微生物法；泛酸；维生素片；植物乳杆菌Determination of Pantothenic Acid in Vitamin Tablets byMicrobiological MethodGAO Zhicheng, ZHOU Min, ZHANG Renguang(Institute of Analysis, Guangdong Academy of Sciences (China National Analytical Center, Guangzhou),Guangzhou 510000, China)Abstract: Objective: A microbiological method for quantitative determination of pantothenic acid in vitamin tablets was established.Method: The growth rate of Lactobacillus plantarum (ATCC 8014) was in direct proportion to the content of pantothenic acid,and showed a linear relationship within a certain concentration range. According to the comparison between the absorbance of bacterial suspension after culture and the working curve of pantothenic acid standard, the content of pantothenic acid in vitamin tablets was determined quantitatively. Results: The linear range of the microbiological method was 0～98.0 ng and the multivariate correlation coefficient of the standard curve was 0.991 29. The relative standard deviation (RSD) of the determination of pantothenic acid content in vitamin tablets was 2.23% and the recovery rate was 91.4%～103.4%. Conclusion: The microbiological method for the determination of pantothenic acid in vitamin tablets is simple, reliable and repeatable.Keywords: microbiological method; pantothenic acid; vitamin tablets; lactobacillus plantarum泛酸常用的检测方法有微生物法[1]、微孔板试剂盒法[2]以及仪器分析法。
超声辅助离子色谱法分析5种中药饮片中有机酸含量
随着 天然产 物化 学 和药 理 学研 究 的不 断 发 展 ，越
来越 多 的 国 内外 学 者 开 始 重 视 中药 中 的 有 机 酸 类 成
分 。建立 快速 、高效 的有 机酸 检 测方 法 ，有 利 于 阐明
中药 的药 效机理 ，也 有 助 于 中药 资 源 的深 入 开 发 。离 子 色谱法 检测有 机 酸含 量 具有 快 速 、有效 、简单 和 自 动化 等优 点 。超 声提 取 因其 耗 时少 、消耗 溶 剂 少 、提
１ ． ３ 色谱 条 件 ：色 谱 柱 ：Ｉ ｏ ｎ Ｐ ａ ｃ ＡＧ １ １ － ＨＣ 保 护 柱
（ ５ ０× ４ ｍｍ ） ，Ｉ ｏ ｎ Ｐ ａ ｃ ＡＳ １ １ 一 ＨＣ 分 析 柱 （ ２ ５ ０×
４ ｍｍ） ；色谱 柱温 ：３ Ｏ ℃ ；ＡＳ Ｒ Ｓ ３ ０ ０（ ４ ｍｍ） 自循 环 电抑制 模式 （ 抑 制 电流 ：１ ３ ７ ｍＡ） ；流 动 相 ：Ｋ０Ｈ 溶
３ 参 考 文 献
［ １ １ ２ １ ￣ 瑞琪 ， 王 娜妮 ， 朱岩． 加速溶 剂萃取离子 色谱法测定 烟草 中 无 机 阴离 子 和 有机 酸 ［ Ｊ ］ ． 浙江 大学学报 （ 理 学版） ， ２ ０ １ ２ ， ３ ９ （ ２ ） ：
２ ０５ － ２０ ９．
５ ０ ～６ ５ ａｉ ｒ ｎ ，１ ５ ～５ ０ ｍｍｏ ｌ ／ Ｌ 。 ２ 结 果 与 讨 论 ．
浙 江 中 医杂 志 ２ ０ １ ５年 ４ 月第 ５ Ｏ卷 第 ４ 期
超声辅助离子色谱法分析 ５ 种 中药饮片 中有机酸含量 ＊
王娜 妮 张 扬 黄孝闻 寿 旦
浙 江省 中医 药研 究 院 浙江 杭 州 ３ １ ０ ０ ０ ７ 关键 词 离子 色谱 法 超 声波 中药饮 片 有机 酸 析 复 杂 样 品 中 有 机 酸 方 面 具 有 较 大 的 优 势 。利 用 ＫＯＨ 溶 液梯 度 淋 洗 ，能 够 同 时 分 离 多种 常 见 无 机 阴 离子 和 有 机 酸［ １ ］ 。针 对 中药 饮 片 中存 在 的 有 机 酸 种
琥珀酸亚铁片质量标准
琥珀酸亚铁片质量标准一、外观性状琥珀酸亚铁片应为红棕色薄膜衣片，除去包衣后显暗红色。
二、鉴别（1）取琥珀酸亚铁片1片，研细，加水适量，搅拌，滤过，滤液加三氯化铁试液1滴，溶液显蓝绿色。
（2）取琥珀酸亚铁片1片，研细，加稀硝酸适量，溶解后，滤过，滤液加硝酸银试液1滴，即产生白色沉淀。
三、含量测定（1）仪器和试剂①仪器：电子天平（精确至0.0002g）、容量瓶（250ml）、吸管（5ml、10ml）、三角瓶、电子恒温水浴锅、紫外可见分光光度计。
②试剂：盐酸0.1mol/L盐酸醋酸铵溶液、25%枸橼酸溶液、1mol/L 盐酸醋酸溶液、琥珀酸亚铁对照品。
（2）实验步骤①对照品溶液的制备：精密称取琥珀酸亚铁对照品适量，加25%枸橼酸溶液制成每1ml含0.04mg的溶液。
②供试品溶液的制备：取本品1片，研细，精密称取适量（约相当于琥珀酸亚铁25mg），置25ml容量瓶中，加25%枸橼酸溶液适量，超声处理使溶解，并稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品溶液。
③测定法：精密吸取上述两种溶液各5ml，分别置两个三角瓶中，各精密加入0.1mol/L醋酸铵溶液5ml，摇匀，室温下放置30分钟后，再分别精密加入25%枸橼酸溶液5ml，摇匀，室温下放置30分钟后再分别精密加入钼酸铵试液4ml与8-羟基喹啉试液3滴摇匀并放置10分钟最后分别加入硝酸银试液4ml摇匀在室温下放置60分钟观察结果照紫外可见分光光度法在420nm的波长处分别测定供试品与对照品的吸光度填入下表。
将测得的吸光度代入公式计算。
（3）注意事项①实验所用试剂均需净化干燥处理。
②测定时室温应控制在20℃～30℃之间。
③绘制标准曲线时要求点要准每点的吸光度要平衡。
④绘制标准曲线时要求点要准每点的吸光度要平衡。
⑤测定时供试品与对照品操作条件要一致。
四、有关物质按照国家食品药品监督管理局标准YBH07562003进行实验。
五、微生物限度按照《中国药典》2010版进行实验。
苹果酸、柠檬酸含量测定方法(HPLC)
苹果酸、柠檬酸含量的测定（HPLC法）1）原理苹果酸、柠檬酸在酸性缓冲液中，利用反相键合色谱法将其从样品基质中分离出来，根据该类物质在紫外波长下的吸收进行定性和定量分析。
2）试剂1）溶剂：水，过滤后的二次蒸馏水2）流动相：0.5%的H3PO4/KH2PO4缓冲液，PH=2.81, 含2.5%乙腈3）苹果酸、柠檬酸标准品；纯度99.2%和99.5%4）苹果酸、柠檬酸标准溶液分别准确称取苹果酸、柠檬酸标准品0.2g 和0.02g ，精确至0.0001g，用过滤后的二次蒸馏水将标准品溶解，转移、定容于50ml容量瓶中，混匀后贴标签备用。
5）苹果酸、柠檬酸标准工作溶液分别将上述标准品贮备液以5倍和10倍比例稀释，得到三个不同浓度的系列，在给定的色谱条件下，每一浓度样品进样三次，然后绘制出标准工作曲线。
标准溶液应避光，在0~4℃下贮存，标准液贮存期不超过二个月。
3）仪器所使用的玻璃仪器必须是洁净的。
3.1 液相色谱：单元泵，可变波长检测器，化学工作站。
3.2 色谱柱：ODS反相柱150mm * 4.6mm(ID).5um填充颗粒。
3.3 进样器：20ul微量进样针3.4 色谱条件：流动相：0.5%H3PO4/KH2PO4缓冲液（PH=2.81）；含0.025%乙腈。
流量：1.0ml/min柱温：40℃检测波长：206nm进样量：5ul保留时间：苹果酸2.5min；柠檬酸3.5min以上条件是典型条件，可根据情况对给定参数作适当调整，以确保方法的稳定性和耐用性。
4）测定步骤4.1样品溶液的制备称取浓缩果汁 4.0~5.0g 或清汁10ml，精确至0.01g，用二次蒸馏水将其溶于50ML 容量瓶中，定容至刻度，混匀后，用0.45um滤膜的过滤器将其过滤至样品瓶中，贴上标签备用。
4.2 测定：在以上色谱条件下，运行仪器和测试方法，待基线稳定后，按照标准溶液、样品的顺序进样。
4.3计算根据标准液绘制的标准曲线进行外标法定量，保留时间和响应因子均由标准液确定。
吡哌酸片质量标准-中国药典2020年版二部
供试品溶液 取本品内容物适昼，加流动相溶解并稀 释制成每 1ml 中约含咄眽酸 0. 3mg 的溶液，滤过，取续 滤液。
对照溶液 精密量取供试品溶液适盘，用流动相定最稀 释制成每 1ml 中约含咄眽酸 0.6µg 的溶液。
灵敏度溶液 精密量取对照溶液适最，用流动相定量稀 释制成每 1ml 中约含咄眽酸 0.06µg 的溶液。
(2) 取本品细粉适据，加 0. Olmol/L 盐酸溶液溶解并稀释 制成每 1ml 中约含咄眽酸 3µg 的溶液，滤过，取续滤液，照阰 眽酸项下的鉴别 (2) 试验，显相同的结果。
【检查】 有关物质 照高效液相色谱法（通则 0512) 测定。
供试品溶液 取本品细粉适最，加流动相溶解并稀释制 成每 1ml 中约含咄眽酸 0. 3mg 的溶液，滤过，取续滤液。
对照溶液 精密呈取供试品溶液适量 ， 用流动相定最稀 释制成每 1ml 中约含咄眽酸 o. 6µg 的溶液 。
灵敏度溶液 精密量取对照溶液适裁，用流动相定量稀 释制成每 1ml 中约含阰眽酸 0.06µg 的溶液。
系统适用性溶液、色谱条件、系统适用性要求、测定法与 限度 见阰眽酸有关物质项下，
溶出度 照溶出度与释放度测定法（通则 0931 第一法） 测定。
测定法 取供试品溶液与对照品溶液，在 275nm 的波长 处分别测定吸光度，计算出供试品中 P比眽酸的含量。
【类别】 同咄眽酸 。
【规格】 按 C,, H1, 沁 03• 3H,O 计 (1) o. 25g (2)0. 5g
【贮藏】 密封保存 。
阰眽酸胶囊
Bipaisuan Jiaonang
Pipemidic Acid Capsules
柠檬酸检测SOP
柠檬酸（枸橼酸）检测SOP1．目的为规范柠檬酸检测的操作，确保检测的准确性。
2．范围本标准操作规程适用于柠檬酸的检测操作。
3．定义无4．职责4.1.QC负责本规程的起草、修订、培训及执行。
4.2.QA、QC组长、质量管理部经理负责本规程的审核。
4.3.质量总监负责批准本规程。
4.4.QA负责本规程执行的监督。
5．引用标准《中华人民共和国药典》2020年版二部6．材料见程序。
7．流程图无8．程序8.1.性状：本品为无色的半透明结晶、白色颗粒或白色结晶性粉末；无臭，味极酸；在干燥空气中微有风化性；水溶液显酸性反应；在水中极易溶解，在乙醚中略溶。
8.2.鉴别8.2.1.仪器及设备：100ml烧杯、中试管、酒精灯、试管夹、刻度吸管等8.2.2.试剂及配制：稀硫酸，取硫酸57ml，加水稀释至1000ml，即得。
高锰酸钾试液，可取用高锰酸钾滴定液（0.02mol/L）。
硫酸汞试液，取黄氧化汞5g，加水40ml后，缓缓加硫酸20ml，随加随搅拌，再加水40ml，搅拌使溶解，即得。
溴试液，取溴2～3ml，置用凡士林涂塞的玻璃瓶中，加水100ml，振摇使成饱和的溶液，即得。
8.2.3.操作步骤：本品在105℃干燥2小时，其红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。
取样品溶液2ml（约相当于柠檬酸10mg），加稀硫酸数滴，加热至沸，加高锰酸钾试液数滴，振摇，紫色即消失；溶液分成两份，一份中加硫酸汞试液1滴，另一份中逐滴加入溴试液，均生成白色沉淀。
取样品约5mg，加吡啶-醋酐（3:1）约5ml，振摇，即生成黄色到红色或紫红色的溶液。
8.2.4.结果判断：应符合规定。
8.3.溶液的澄清度与颜色8.3.1.仪器及设备：电子天平、25ml纳氏比色管等8.3.2.操作步骤：取本品2g，加水10ml使溶解后，依法检查，溶液应澄清无色；如显色，与黄色2号或黄绿色2号标准比色液比较，不得更深。
8.3.3.结果判断：应符合规定。
8.4.氯化物8.4.1.原理：氯离子与银离子反应生成不溶于硝酸的白色沉淀，反应式如下：Ag+十Clˉ → AgCl↓8.4.2.仪器及设备：电子天平、1000ml容量瓶、50ml纳氏比色管、1ml吸管、100m1烧杯、吸耳球、试管架等。
PTA总有机酸的测定方法 国标
PTA总有机酸的测定方法国标甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、柠檬酸、苹果酸、琥珀酸、酒石酸、草酸、苯乙酸、阿魏酸甲酸、乙酸、丙酸、柠檬酸、苹果酸、琥珀酸、酒石酸、草酸、仪器与设备waters2695Alliance SeparationsModule高效液相色谱仪；waters2996 PhatadiodeArray二极管阵列检测器；Heracus离心机；HORIBApH计。
色谱分析（1）混标配置。
分别准确称取适量上述10种有机酸并用超纯水溶解或稀释，以孔径0.45 u m的微孔滤膜过滤，转移至50mL容量瓶中，定容，配制浓度为100mg/L的储备液，保存于4℃冰箱中。
（2）标准曲线绘制。
有机酸标准液的配置：根据紫外吸收灵敏度，将草酸、酒石酸、苹果酸、甲酸、丙二酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸、丙酸按照0.2∶2.5∶5：5 ∶5∶2.5∶5：5 ∶5 ：5的比例配制混标，逐级稀释，配制成A、B、C、D、E五个浓度级别的标准溶液，以绘制标准曲线。
其中A级别标准溶液浓度为0.2；2.5，5，5，5，2.5，5，5，5，5（u g/mL）；B、C、D分别为上一个级别浓度的5倍稀释，E级为D级的2倍稀释。
并将这10中有机酸编号为：OA01—OA10。
3）色谱条件。
反相C18柱CAPCelIPAKC18MG 4.6mm×250mm，5um，pH范围：2～10，流动相：0. 1%H3PO4的去离子水和乙腈（V/V）98∶2；检测器波长：210nm；流速：1mL/min；进样量：20u；l柱温：35°℃；（4）流动相配置。
取1mLH3PO4用超纯水稀释至1000mL，经孔径为0.45 u m的微孔滤膜过滤，超声脱气后备用。
乙腈（色谱纯）超声脱气备用。
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程为:
Y =1388+10531X ,r =0 9994
2 6 精密度考察 分别精密吸取对照品溶液1 L,注入气相色谱仪测定峰面积,结果愈创木酚和薄荷脑的RSD 分别为1 01%、1 20%(n =5)。
2 7 重现性考察 对同一批号的样品,依法平行测定5次,求得愈创木酚和薄荷脑的含量,RSD 分别为0 49%和1 69%。
2 8 空白试验 对由厂方提供的不含木馏油和薄荷脑的空白样品,按正文方法进行测定,结果没有干扰。
2 9 回收率 精密称取已知含量的样品1g,精密加入适量对照品,依法测定,计算加样回收率。
结果5次测定平均回收率愈创木酚为100 4%,RSD 为1 67%;薄荷脑为99 4%,RSD 为1 84%。
2 10 样品测定 吸取供试品溶液和对照品溶液各1 L,注入气相色谱仪,依法测定其峰面积,计算,测得三批样品愈创木酚含量为2 05%、2 02%、2 05%,薄荷脑含量为2 12%、2 10%、2 13%。
3 讨论
3 1 样品处理曾比较了乙醚、石油醚、醋酸乙酯等溶剂,经试验采用醋酸乙酯可以提取完全,且损失少、干扰小。
3 2 试验中对提取时间进行了比较,从10min 至30min 进行了比较试验,结果在20min 可得到良好的结果。
参考文献
1王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究.中国医药科技出版社,1994.188,430
2夏伯庆.痰咳净中的冰片含量测定.中成药,1988,10(7):16
3
叶崇义等.大口径厚液膜毛细管柱气相色谱法用于风油精成分的分析.中成药,1990,12(12):30
福乐片中柠檬酸的含量测定
中国药品生物制品检定所 北京 100050
高天兵 田金改 福乐片
[1]
是由日本西川制药公司生产的制剂,
具有抗疲劳等作用,是由柠檬酸、琥珀酸、苹果酸等多味药组成[2],其主要成分为柠檬酸,本文采用
薄层扫描法测定了福乐片中柠檬酸的含量,方法可靠,重现性好。
1 仪器和试药
日本岛津CS-9000型双波长薄层扫描仪;聚酰胺薄膜(浙江黄岩);柠檬酸对照品由本所提供。
所用试剂均为分析纯。
2 色谱条件
2 1 溶剂系统与显色剂 溶剂系统:乙腈-醋酸乙酯-甲酸(9 1 1)溶液;显色剂:溴甲酚绿试液。
2 2 扫描条件 R =700nm, S =450nm,锯齿扫描,DE LT Y =0 1,线形化因子SX =3。
2 3 对照品溶液的制备 柠檬酸对照品约10mg,精密称定,置5mL 量瓶中,用甲醇定容至刻度,摇匀,为对照品溶液。
2 4 供试品溶液制备 取本品20片,研细,精密称取200mg,置50mL 三角瓶中,精密加入甲醇25mL,超声提取30min,取出,放至室温后,补足重量,滤过,弃取初滤液,精密吸取续滤液1m L 于2mL 量瓶中,加甲醇稀释至刻度,为供试品溶液。
3 方法与结果
吸取供试品溶液与对照品溶液各2 L,分别交叉点于同一聚酰胺薄膜上,以乙腈-醋酸乙酯-甲酸(9 1 1)溶液为展开剂,展开,取出,晾干至无酸味,喷以溴甲酚绿试液[2],放置10min,于可见光450nm 下进行扫描。
3 1 工作曲线的绘制 精密吸取柠檬酸对照品溶液1、2、3、
4 L,点于同一聚酰胺薄膜上,依法展开,取出,晾干,显色,依法扫描测定对照品溶液吸收度积分值,点样量在0~8 g 内线性关系良好,求得回归方程为:
Y =-3377 8+59275X r =0 9993
3 2 精密度及稳定性 在同一薄膜上,点5个相同量(2 L)的供试品溶液,依法展开,显色,扫描测定其吸收值。
结果其RSD 为2 79%。
每隔30min 测定其稳定性,结果表明峰面积在2h 内基本不变。
3 3 重现性试验 对同一批号的样品,依法平行测
定5次,求得柠檬酸含量,X =49 9%,RSD =1 36%。
3 4 空白试验 对由厂方提供的空白样品,按正文方法进行测定,可见光下检视在与柠檬酸色谱图相应位置上没有斑点,薄层扫描结果没有干扰。
3 5 回收率 精密称取已知含量的样品100mg,置50mL 三角瓶中,精密加入柠檬酸对照品50mg,依
114 药物分析杂志
2 4 项下测定,计算加样回收率。
结果平均回收率为104 8%,RSD=
3 05%(n=5)。
3 6 样品测定 吸取 2
4 项下供试品溶液和 2 3 项下对照品溶液各2 L,点于同一聚酰胺薄膜上,依法展开,显色,扫描测定其吸收值,计算,测定3批样品,结果含量为49 28~50 24%,RSD为1 05~2 16%。
4 讨论
4 1 由于展开剂中含有甲酸,所以在显色之前须挥发至无酸味,否则会干扰所测成分的显色。
4 2 吸附剂曾选用硅胶、硅藻土等,但分离效果不好,后采用正文吸附剂得到很好分离。
4 3 由于聚酰胺对所测成分在紫外区有干扰,被测成分无法定位,难以测定。
故采用本文所述方法。
参考文献
1卫生部药政局等.部分进口传统天然药物及其制剂注册标准(第二分册).5
2中国医学科学院药物研究所编.薄层层离及其在中草药分析中的应用.365
血中巴比妥类药物的
SPE GC/MS法定性、定量分析中国刑警学院法化系 沈阳 110035
朱 昱 宋庆芳 谭家镒
巴比妥类药物是临床广泛应用的安眠镇静药物,也是司法鉴定中常见引起中毒的药物,血、尿等生物检材中该类药物的薄层色谱、紫外光谱、气相色谱等分析方法已有较多报道[1],但目前应用已经比较普遍,分析结论最为可靠的GC/MS分析法报道尚较少。
Mule等曾报道尿中该类药物经液 液萃取及甲基衍生化的GC/MS分析法[2],Poccl等人曾报道尿中该类药物经用Bond Elute Certify 柱固相萃取(SPE)及非衍生化的GC/MS分析法[3],两种方法的灵敏度等相似,但后者操作简便快速。
我们经研究建立了与后者相似的血中该类药物分析方法,但使用国产大孔树脂为固相萃取材料,不仅材料价格低廉,操作也更为简便快速。
1 材料和方法
1 1 药品与试剂 巴比妥、戊巴比妥、异戊巴比妥、司可巴比妥、苯巴比妥:质量符合中国药典(1995年版)规定的原料药或分析纯化学试剂,用甲醇配制成各药物含量均为100 g/mL及10 g/m L的两种混合标准液使用。
异丙烯丙巴比妥(Aprobarbital,内标):纯品,公安部物证鉴定中心提供,用甲醇配制成10 g/mL的标准溶液使用。
GDX系列大孔树脂:80~100目,天津化学试剂二厂产,用甲醇淋洗去除杂质后晾干使用。
甲醇、二氯甲烷等试剂:分析纯。
实验用水为去离子水。
空白血:取自近期未服药健康人,加柠檬酸钠抗凝剂。
1 2 仪器及条件 PE 8420毛细管气相色谱仪, ITD800质谱仪。
GC条件:BPX50 22mm(i. d.) 25m融熔石英毛细管色谱柱,柱温100 (1min)
20 /min 260 (10min),汽化温度260 ,载气He,流速30cm/s,分流比50 1,进样方式为不分流进样(0 7min)。
ITD条件:电离源EI,发射电流63 A,AGC自动增益控制离子化时间,全扫描方式,扫描范围46 ~250amu,倍增器电压1800V,传输线温度260 。
1 3 样品分析 取GDX301树脂0 3cm3放入5mL试管中,加甲醇少许浸没活化,加水4mL。
另取10mL 具塞试管一只,加入血样1 0mL,加内标标准液10 L (如有药物标准液加入,标准液总体积不得大于20 L),用吸管将盛树脂试管内容物移入,加塞摇动5min,然后滤集树脂于内径0 5cm的小层析柱中,用水10mL淋洗树脂,用洗耳球尽量吹去树脂中残存水分,用二氯甲烷洗脱,收集洗脱液5mL。
洗脱液上层少许水珠用吸管吸去,加入无水硫酸钠1~2g脱水,上清液置微型浓缩器中,于50 水浴中挥干。
加甲醇100 L溶解残留物,进样1 L进行分析。
根据各药物主要特征离子质量及质量色谱峰的保留时间进行定性分析。
根据药物基峰离子质量色谱峰面积与内标基峰离子质量色谱峰面积比进行定量分析。
1 4 标准曲线制备 取1mL空白血6份,分别加入各种药物25、50、100、250、500、1000ng及内标100ng,进行分析。
以各药物基峰离子质量色谱峰面
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18(增刊),1998
广东公安司法管理干部学院。