紫外分光光度法对嫩肉粉中木瓜蛋白酶活力的测定方法研究
木瓜蛋白酶活力的快速测定
木瓜蛋白酶活力的快速测定
李卫民
【期刊名称】《饮料工业》
【年(卷),期】2009(012)010
【摘要】介绍了一种经多次试验、操作简便、重复性好的木瓜蛋白酶活力的快速测定方法.
【总页数】4页(P30-33)
【作者】李卫民
【作者单位】珠海市永隆饮品有限公司,广东珠海,519030
【正文语种】中文
【中图分类】Q55
【相关文献】
1.紫外分光光度法对嫩肉粉中木瓜蛋白酶活力的测定方法研究
2.十二烷基苯磺酸钠共振散射光谱法测定木瓜蛋白酶活力
3.血清抗胰蛋白酶活力的快速测定法
4.胰蛋白酶活力的快速测定
5.催化共振散射光谱法测定木瓜蛋白酶活力
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木瓜酶活力测定方法的研究
木瓜酶活力测定方法的研究：
木瓜酶活力测定方法是指用来测定木瓜酶酶动力学性质的方法。
木瓜酶是一种多聚苯乙烯酶，具有解除多聚苯乙烯的能力，在食品加工、医药、农业等领域具有重要的应用价值。
常用的木瓜酶活力测定方法有以下几种：
滴定法：使用滴定的方法测定木瓜酶的活力。
在该方法中，通常使用溴甲酚蓝作为指示剂，测定木瓜酶在解除多聚苯乙烯的过程中所消耗的溴甲酚蓝的量。
通过计算溴甲酚蓝的消耗量，可以确定木瓜酶的活力。
分光光度法：使用分光光度法测定木瓜酶的活力。
在该方法中，通常使用苯乙烯为底物，测定木瓜酶在解除苯乙烯的过程中所产生的二乙烯的吸收光谱。
通过计算二乙烯的吸收值，可以确定木瓜酶的活力。
荧光光谱法：使用荧光光谱法测定木瓜酶的活力。
在该方法中，通常使用苯乙烯为底物，测定木瓜酶在解除苯乙烯的过程中所产生的二乙烯的荧光光谱。
通过计算二乙烯的荧光值，可以确定木瓜酶的活力。
以上是常用的木瓜酶活力测定方法，希望这些信息能帮助您了解这一概念。
紫外分光光度法测蛋白酶酶活
2013/05/13紫外分光光度法测蛋白酶酶活1、原理蛋白酶在一定的温度与pH条件下，水解酪素底物，然后加入三氯乙酸终止酶反应，并使未水解的酪素沉淀除去，滤液对紫外光有吸收，可用紫外分光光度法测定。
根据吸光度计算其酶活力。
酶活单位的定义：每1mL粗酶液，在一定温度和pH值条件下，1min水解酪素产生1ug酪氨酸为一个酶活力单位，以（u/mL）表示。
2、试剂和溶液三氯乙酸、氢氧化钠、盐酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、乳酸、乳酸钠、硼酸钠（硼砂）均为分析纯，酪素、酪氨酸为生化试剂。
2.1 三氯乙酸c（CCL3·COOH）=0.4mol/L称取三氯乙酸65.4g，用水溶解并定容至1000 mL。
2.2 氢氧化钠溶液c（NaOH）=0.5mol/L按GB601配制。
2.3 盐酸溶液c（HCL）＝1 mol/L及0.1 mol/L1 mol/L HＣＬ:取90mL浓盐酸溶解于去离子水中，定容至1000mL。
0.1 mol/L HＣＬ：取9mL浓盐酸溶解于去离子水中，定容至1000mL。
2.4 缓冲溶液a、磷酸缓冲液（pH＝7.5）适用于中性蛋白酶称取磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O）6.02g和磷酸二氢钠（NaH2PO4·12H2O）0.5g，加水溶解并定容至1000mL。
b、乳酸缓冲液（pH＝3.0）适用于酸性蛋白酶甲液称取乳酸（80％～90％）10.6g，加水溶解并定容至1000 mL。
乙液称取乳酸钠（70％）16g，加水溶解并定容至1000 mL。
使用溶液取甲液8 mL，加乙液1 mL，混匀，稀释一倍，即成0.05moi/L乳酸缓冲溶液。
c、硼酸缓冲溶液（pH＝10.5）适用于碱性蛋白酶甲液称取硼酸钠（硼砂）19.08g，加水溶解并定容至1000 mL。
乙液称取氢氧化钠4.0g，加水溶解并定容至1000 mL。
使用溶液取甲液500 mL、乙液400 mL混匀，用水稀释至1000mL。
木瓜蛋白酶的检测
2、以BAEE为底物测木瓜蛋白酶的活性
BAEE( 苯甲酰一L－精氨酸乙酯）被木瓜蛋白酶 催化水解成苯甲酰一L精氨酸(BA) 和乙醇 ， 可以利用 BA和BAEE在253nm 处光吸收值的不同，用光学法测 定酶活性。 BAEE法底物纯度高，准确性高，重复性 好，操作简便， 最省工省时，连续测定时，一个样品 在10min之内即可完成，但仪器设备昂贵， 成本偏高： 该测定方法尤其适合精酶制品的活性检测及酶动力学 性质的研究， 也常用于商品木瓜蛋白酶制品的活性测 定。
紫外吸光光度法测定化妆品中木瓜蛋白酶的活力 冯健雯
工业生产中木瓜蛋 白酶 的活性检测方法比较 方 焕 生吉萍 吴显荣
十二烷基苯磺酸钠共振散射光谱法测定木瓜蛋白酶活力 黄国霞 蒋治 良 梁爱徐红娣
云南峨山番木瓜中木瓜蛋白酶的初步纯化及活性测定 黄兴奇等
4、实验室木瓜蛋白酶活力测定
(1)样品处理：精确称取0.05g的木瓜蛋白酶干粉于研钵中，加入少量石英砂 和几滴酶稀释液研磨15min,将酶液用蒸馏水少量多次洗入500ml容量瓶 (不 要将石英砂带入)，定溶，摇匀。取样液5ml,加入酶溶解液10ml，混匀盖严， 将酶激活15min以上(激活时半胱氨酸的浓度要高于0.03mol/L，而且要当天 配制，激活的酶最好在2h内测完)备用。
乙醇溶液对木瓜蛋白酶催化活性的影响 何 平 詹福建 丘泰球
初志战 黄卓烈 巫光宏
木瓜蛋白酶的生产工艺研 谭爱娟 王利民
一、木瓜蛋白酶的简介：
木瓜蛋白酶是从南方果王——番木瓜中提取的乳汁，经科 学加工而制成的食品添加剂。木瓜蛋白酶具有很高的蛋白分解 活性，已广泛用于啤酒酿造、肉类加工、动植物蛋白水解制品、 饼干果酱 、果汁加工和果酒的生产上。特别是在啤酒工业上， 木瓜蛋白酶可作为澄清剂 ，将啤酒中游离的蛋白质分解为易溶 于水的短肽 、氨基酸 ，既丰富了营养成分，又防止啤酒在贮 运过程中产生浑浊与沉淀，延长了啤酒的保存期；另外，在麦 芽糖化阶段加入木瓜蛋白酶，可弥补麦芽中蛋酶 活力不足的缺 陷，提高氨基氮的浓度，保证发酵的正常进行，确保产品具有 良好风味；在肉制品加工方面，木瓜蛋白酶可作为肉类的嫩化 剂(如嫩肉粉 )、分解剂(能够将固体肉完全水解为容易消化吸 收的肉汁，例如鸡精、兔精制造等)等 。
木瓜酶活力测定方法的研究
木瓜酶活力测定方法的研究木瓜酶是一种黄酮酶，广泛存在于许多植物当中，具有良好的催化活性。
木瓜酶在食品工业、医药领域和生物技术等方面有着广泛的应用。
因此，准确测定木瓜酶的活力是非常重要的。
本文将针对木瓜酶活力测定方法展开研究。
首先，概述目前常用的木瓜酶活力测定方法，随后详细介绍各种方法的原理、操作步骤以及优缺点。
最后，对其中一种测定方法进行深入研究，以便更好地了解木瓜酶活力的测定过程。
目前常用的木瓜酶活力测定方法包括酚酞法、酪氨酸酶法、pH酶法和萤光素法等。
下面将对这些方法进行简要介绍。
酚酞法是根据酚酞与木瓜酶催化产生的酚酞显色反应来测定木瓜酶活力的一种方法。
该方法操作简单、灵敏度较高，但需要使用有毒的试剂和显色剂。
酪氨酸酶法是一种通过测定木瓜酶对酪氨酸水解的催化活性来测定其活力的方法。
该方法对样品处理要求较高，但操作相对简单，测定结果相对准确。
pH酶法是一种基于酶活性对反应物pH值的变化情况进行测定的方法。
该方法对pH的变化极其敏感，可以用来测定木瓜酶的活力，但依赖较强。
萤光素法是一种通过测定木瓜酶与辣根过氧化物酶的复合物产生的荧光强度来测定木瓜酶活力的方法。
该方法操作相对简单，结果准确，但需要专门设备。
在这些方法中，我们选择了酪氨酸酶法进行深入研究。
该方法原理简单，测定结果准确可靠。
具体的操作步骤如下：1.准备样品：收集所需测定的木瓜酶样品，如酒精或水提液。
2.取适量的酪氨酸溶液，使其浓度与之前的样品相同。
3.在试管中，混合适量的酪氨酸溶液和木瓜酶样品。
对照组中只加入酪氨酸溶液。
4.将试管放入恒温水浴中，温度为37°C，孵育一定时间，使酪氨酸水解反应完全进行。
5.向反应体系中加入适量的硫酸，停止反应。
6.使用分光光度计测定反应体系中产生的对映光的光密度。
7.根据光密度值计算出木瓜酶的活力。
这种方法虽然操作简单，但也有一些局限性。
首先，酪氨酸的浓度需与样品浓度进行匹配，这对样品的处理和准备有一定要求；其次，由于酪氨酸酶活性对各种因素如温度、pH值等有一定依赖性，因此在样品处理过程中需保持温度和pH的稳定。
（食品化学）实验四、蛋白酶酶活力的测定
实验四、蛋白酶酶活力的测定一、原理以酪蛋白为反应底物，令蛋白酶在其最适宜条件下反应一定时间，用三氯乙酸终止反应后过滤或离心得上清液，用Folin比色法测上清液中蛋白酶解物的浓度，计算蛋白酶活力。
蛋白酶活力定义：在一定的条件下，每分钟水解酪蛋白生成与1μg酪氨酸相当的三氯醋酸可溶物所需的木瓜蛋白酶的量，为1个酶活力单位（u）。
二、材料、仪器与试剂（一）材料：木瓜蛋白酶（二）仪器：可见-紫外分光光度计、水浴锅、天平、具塞刻度试管（10、15ml）、漏斗、滤纸、试管架，容量瓶、移液管（1、10ml）、烧杯（25ml）、玻璃棒。
（三）试剂：1福林试剂(Folin试剂)市场购买的Folin试剂。
此溶液使用时加2倍蒸馏水稀释，即成已稀释3倍的福林试剂。
2、中性稀释液－pH7.2磷酸盐缓冲液称取磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)31.2g,定容至1000mL,即成0.2mol/L溶液(A液)。
称取磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)71.63g,定容至1000mL,即成0.2mol/L 溶液(B液)。
取A 液28mL 和B 液72mL,再用蒸馏水稀释1倍,即成0.1mol pH7.2的磷酸盐缓冲液。
3、酪蛋白溶液2g恒重的酪蛋白，用0.5mol/LNaOH溶液润湿后加入80ml pH7.2磷酸盐缓冲液，沸水浴溶解，冷却后，用1 mol/L盐酸调至pH 7.0，再用磷酸盐缓冲液定容至100ml，得浓度为2%的酪蛋白溶液。
临用现配。
4、三氯醋酸溶液称取三氯乙酸(CCL3COOH)65.4g,定容至1000mL，得0.4mol/L三氯乙酸(TCA)溶液5、酪氨酸标准溶液精确称取精确称取在105℃烘箱中烘至恒重的酪氨酸0.1000g，逐步加入6mL 1N盐酸使溶解,用0.2N盐酸定容至100mL,其浓度为1000μg/mL,再用水稀释5倍，得到200μg/mL的酪氨酸标准溶液。
取200μg/mL的标准酪氨酸溶液，配成不同浓度的溶液（0、20、40、60、80、100μg/mL）6、样品溶液称取木瓜蛋白酶0.100g, 置于研钵中,加入相应的缓冲液定容至50mL,得到稀释500倍的酶液（当天配制、稀释）。
木瓜蛋白酶酶活力测定
木瓜蛋白酶酶活力测定1、原理蛋白酶在一定温度与pH条件下，水解酪蛋白底物，然后加入三氯乙酸终止酶反应，并使未水解的酪蛋白沉淀出去，滤液对紫外光有吸收，可用紫外分光光度法测定，根据吸收度计算酶活力。
2、酶活力定义在一定条件下，每分钟水解酪蛋白生成1ug酪氨酸所需的酶的量，为1个酶活力单位（U）。
3、仪器和设备恒温水浴（37±0.2）℃紫外分光光度计4、试剂和溶液4.1、酶稀释液称取L-半胱氨酸盐酸盐（C3H7NO2S·HC L·H2O）5.27g，氯化钠（NaCL）23.4g，加水500ml溶解，另取乙二胺四乙酸二钠2.23g加水200ml溶解，合并两液混匀，用0.1mol/l 氢氧化钠溶液或0.1mol/l盐酸溶液调至pH=5.5，加水稀释至1000ml。
4．2、0.05mol/l磷酸氢二钠溶液称取磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O）17.89g，加水溶解，并定容至1000ml。
4.3、酪蛋白溶液称取经硅胶干燥器忠干燥至衡重的酪蛋白0.6g（精确到0.0002g），置烧杯中，假如0.05mol/l磷酸氢二钠溶液80ml。
在沸水浴忠边加热边搅拌，直至完全溶解，冷却后，用0.1mol/l盐酸调至pH=7.0,转移到100ml容量瓶中，加水至刻度。
临用现配。
4.4、三氯乙酸溶液称取三氯乙酸8.995g，加无水乙酸钠14.97g，冰乙酸9.45ml加适量水溶解后，加水使成500ml，振摇均匀。
4.5、酪氨酸标准溶液称取于105℃干燥至衡重的酪氨酸50mg（精确0.0002g）用0.1mol/l盐酸溶解，移入100ml容量瓶中，并用0.1mol／l盐酸调至刻度，摇匀，即可得含酪氨酸50ug／ml的溶液。
4.6、试样溶液称取木瓜蛋白酶0.9g（精确0.0002g）置于研钵中，加入少量酶稀释液研磨20min，用酶稀释液移至250ml容量瓶中，加酶稀释液至刻度，充分摇匀；取出上述液体1ml以酶稀释液稀释，定容20ml，充分摇匀，供测试用（60min内使用）。
紫外吸光光度法测定化妆品中木瓜蛋白酶的活力
紫外吸光光度法测定化妆品中木瓜蛋白酶的活力作者：冯健雯(梧州市产品质量监督检验所,梧州543002)样品用磷酸盐半胱氨酸ＥＤＴＡ缓冲溶液搅拌溶解后,选择一定的ｐＨ值和温度条件,样品中的木瓜蛋白酶能将加入的酪蛋白水解生成可溶解的氨基酸,末水解的酪蛋白用三氯乙酸沉淀后过滤,溶解的水解产物用紫外吸光光度法测定[1]。
1试验部分1.1试剂与仪器磷酸钠溶液:0.05ｍｏｌ·Ｌ-1,称取十二水磷酸氢二钠1.79ｇ溶解于100ｍｌ水中。
柠檬酸溶液:0.05ｍｏｌ·Ｌ-1,将柠檬酸一水合物1.05ｇ用100ｍｌ水溶解。
缓冲溶液:称取十二水磷酸氢二钠17.89ｇ溶于800ｍｌ水中,再将ＥＤＴＡ钠盐二水合物14.0ｇ和盐酸半胱氨酸一水合物6.1ｇ溶于其中。
用1ｍｏｌ·Ｌ-1盐酸或1ｍｏｌ·Ｌ-1氢氧化钠将ｐＨ值调到6.0±0.1,加水定容至1Ｌ。
三氯乙酸溶液:将三氯乙酸30ｇ溶于100ｍｌ水中酪蛋白作用物:将1ｇ干燥的酪蛋白分散在50ｍｌ磷酸钠溶液中,在沸水浴中加热30ｍｉｎ,经常搅拌之,冷至室温,在连续快速的搅拌下,用柠檬酸溶液调ｐＨ值至6.0±0.1,加水定容至100ｍｌ。
标准溶液:1ｍｇ·ｍｌ-1,称取ＵＳＰ木瓜蛋白酶对照标准物100ｍｇ(其活力为100ＰＵ·ｍｇ-1),用磷酸盐半胱氨酸ＥＤＴＡ缓冲溶液溶解,定容100ｍｌ。
标准使用液:移取0.25,0.50,1.00,1.50,2.00,2.50ｍｌ标准溶液于一组10ｍｌ容量瓶中,用缓冲溶液稀释至刻度,摇匀。
酸度计:分度值0.1ｐＨ,ｐＨ6.0±0.1。
超级恒温水浴:40±0.1℃紫外分光光度计:波长200～1000ｎｍ1.2测定方法1.2.1样品处理称取样品1.00～2.00ｇ,加磷酸盐半胱氨酸ＥＤＴＡ缓冲溶液搅拌溶解后转移至50ｍｌ容量瓶中,用缓冲溶液稀释至刻度,摇匀。
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图 1 酪氨酸标准曲线 Fig 1 The standard cu rve of Tyrosin e
2 2 精密度 取市售嫩肉粉样品 1, 做 6个平行样, 由表 1
可知, 酶活力相对标准偏差为 2 6% 。
表 1 精密度实验
T ab 1 T he resu lts of the precision te st
中木瓜蛋白酶的酶活力大小, 为判断嫩肉粉质量优劣提 供参考依 据。把嫩肉粉 溶于盐酸半 胱氨酸 溶液, 取该
混合液与酪蛋白溶液反应 10m in, 用紫外分光 光度法测 得反应 所生成 酪氨酸 的含量。该 方法具 有较好 的准确
性和重现性, 添加标准回收率为 96 8% ~ 105 8% ; 且步骤简明, 所需测试仪器简单。在该方法条件下, 每分
测定吸收度 A 0。 另取酪氨酸对照溶液, 以 0 1m ol /L 盐酸溶液
为空白, 在 275nm 处测定吸收度 An。 1 5 结果计算
酶活力
(U
/g)
=
A -A0 An
∀WW∀310 ∀ 11 ∀ n
∀ 1000
式中:
W 3 # 对照品溶 液 每 1mL 中 含 酪氨 酸 的 量, 单位为微克 ( g );
1 实验部分
1 1 仪器 恒温水浴锅; 751- GW 分光光度计。
1 2 试剂 酪蛋白溶液: 取酪蛋 白 0 6g, 加 0 05m o l/L
磷酸氢二钠溶液 80mL, 置沸水浴中煮 30m in, 时 时搅拌, 冷至室温, 加 0 1m o l/L 盐酸调节 pH 值 至 7 0 0 1, 用水稀释至 100mL, 用前配制。
目前市场 上嫩 肉粉 的成 分主要 是木 瓜蛋 白 酶, 木瓜蛋 白酶通过分解胶 原蛋白、弹性 蛋白, 降解胶原纤维和结缔组织蛋白成为小分子的多肽 甚至氨基酸, 令肌肉肌丝和腰筋丝断裂, 因此嫩 肉粉能使老牛肉、猪肚、腊肉等较坚韧肉类迅速 嫩化, 有利消化并提高营养价值, 并可节省烹调 时间与能源, 适合饭店、宾馆及家庭使用 [ 2 ] 。
确反应 10m in后, 加三氯乙酸溶液 5 0mL, 振摇,
于 ( 37 0 2) ! 水浴中放置 40m in, 用干燥滤纸
过滤, 滤液在 2h内采用分光光度法以水为空白,
在 275nm 的波长处测定吸收度 A;
再精 确量取供 试品溶液 1 0mL, 置 于 10mL
具塞试管中, 于 ( 37 0 2) ! 水浴预热 5m in, 加
酶活力是酶性质的重要参数, 显示酶分解底 物能力的强弱。木瓜蛋白酶酶活力的测定, 采用 不同底物衍生的测定方法也不同, 所取得的数值 也不能进行直接比较。传统的作法, 木瓜蛋白酶 是用明胶或血红蛋白作底物来测定的。由于要求 底物具有较高的专一性和便于标准化, 新的测定 方法往往采用合成的 N - 苯甲酰 - L - 精氨酸乙酯 ( BA EE ) [ 3] 。但以 BAEE 为底物的测定 方法所涉 及到的仪器设备昂贵, 成本偏高 [ 4] 。本文采用以 酪蛋白为底物的紫外光谱法来测定嫩肉粉中木瓜 蛋白酶的活力, 该法所需测试仪器简单, 步骤简 明, 容易掌握; 并且该法也常被国内用来测定各 种酶的活力, 所得的数据便于比较。对嫩肉粉中 木瓜蛋白酶活力的测定, 可为嫩肉粉质量优劣提 供一项重要的参考指标。
W # 供试品的取样量, 单位为毫克 ( m g);
10# 反应时间;
11# 测定总体积;
n# 供试品的稀释倍数;
1000# 毫克与克的转换倍数。
在上述条件下, 每分钟水解酪蛋白生成 1 g
酪氨酸所需的嫩肉粉的量为 1个酶活力单位。
215
中国食品添加剂 分析测试
China F ood A dditives
测量次数 酶活力
平均值 标准偏差 RSD ( % )
1
9487
2
9366
3
8938
9253
239
26
4
8972
5
9448
收稿日期: 2009- 05 - 08 作者简介: 欧英杰 ( 1982 - ), 男, 本科, 研究方向为食品检验。
214
木瓜蛋白酶 ( P apa in EC 3 4 22 2) 属 于巯 基蛋白酶, 可水解蛋白质和多肽中精氨酸和赖氨 酸的羧基端, 并能优先水解在肽链的 N 端具有 2 个羧基的氨基酸或芳香 L 氨基酸 ( 如酪氨酸 ) 的 肽键。其最适作用 pH 为 5 0~ 7 0, 在中性或偏 碱性时亦有作用, 耐热性强 [ 1 ] 。
2 结果与讨论
2 1 标准曲线的绘制 用 100 g /mL 的酪氨酸标准溶液配制标准系
列溶液, 在 275 0nm 处进行测定, 并绘制标准曲 线, 见图 1, 以 0 1m o l/L 盐酸溶液为空白。其回 归 方 程 y = 0 0075x - 0 0019, 相 关 系 数 r = 0 9996。在酪氨酸浓度为 0 ~ 100 g /mL 范 围内, 酪氨酸浓度与吸光度具有良好的线性关系。
OU Y ing jie1, ZENG Nuan xi2, FENG Zh i q iang1, XU Pei qin1
( 1. Guangdong F ood Quality Superv ision and Inspection Station, Guangzhou 510308; 2. Guangdong P rov inc ial Pub lic Laboratory o f Food Industry, Guangzhou 510308)
Ab stract: P apa in can decompose prote in into am ino ac ids and is the essential ing redient o fm eat tenderizer. T his paper studied the determ ination o f papa in s' enzym e activ ity inm eat tender izer. The resu lts can be used for estim ating the qua l ity of m ea t tender izer. D isso lve m eat tenderizer in L - cyste ine hydroch lo ride m onohydra te so lu tion, m ix the m eat ten der izer so lution and case in so lu tion for chem ical reaction 10 m inu tes and de tect the content of reac tion product ty ros ine by UV Spectrophotom e try. Th is m ethod just needs s imp le equipm ent and is conven ient, accura te and practica .l T he recove ry ra te w as 96 8% ~ 105 8% . U nde r the conditions, the am ount o fm eat tender izer for decom pos ing casein into 1 g ty ros ine per m inute is defined one enzym e activ ity un it. T his k ind of de finition about enzym e activ ity is usually used in hom e, so the data is convenien t for com pare and conve rsion. A fter determ ination, w e found the enzym e activ ity of papa in in different m ea t tender izers so ld in m arket w ere d ifferen t, and the tende r capab ility o fm eat tende rizers w ere a lso d iffe rent. So how much to use and how long to m arinate the m eat, different m ea t tenderrizers had diffe rent an sw ers. W e also found som e enzym e activ ity w as ze ro, tha t ind icated the papa in had lo st its enzym e activ ity, or the m eat tenderizer had no t added papain. K ey w ords: UV spectropho tom etry; m ea t tender izer; papa in; enzym e activ ity
供试品溶液的制备: 取嫩肉粉约 0 5g, 精密
称定, 加酶稀释液搅拌, 稀释至 100mL。
1 4 测定法
准确量取供试品溶液 各 1 0mL, 分别置于 2
支 10mL 具塞试管中, 于 ( 37 0 2) ! 水浴预热
5m in, 准确加 入 ( 37 0 2 ) ! 预 热的底 物溶 液
5 0mL, 立即振摇, 置 ( 37 0 2 ) ! 水浴中, 精
中国食品添加剂 分析测试
China F ood A dditives
紫外分光光度法对嫩肉粉中木瓜 蛋白酶活力的测定方法研究
欧英杰, 曾暖茜2, 冯志检验站, 广州 510308; 2. 广东省食品工业公共实验室, 广州 510308)
摘 要: 木瓜蛋白酶具有分解蛋白为氨基酸的能力 , 是市场上嫩 肉粉的主 要成分。本文通 过测定 嫩肉粉