抗体工程概述
抗体工程意义
抗体工程意义摘要：一、抗体工程概述二、抗体工程的意义1.疾病诊断与治疗2.生物安全与防御3.生物研究与发展三、抗体工程发展现状与展望四、我国抗体工程的发展正文：抗体工程是一种生物技术，旨在通过基因工程方法制备具有特定抗原结合能力的抗体。
抗体工程在医学、生物学和农业等领域具有广泛的应用。
本文将从抗体工程的意义、发展现状与展望以及我国抗体工程的发展等方面进行阐述。
一、抗体工程概述抗体工程主要利用重组DNA技术，将编码抗体的基因片段克隆到表达载体中，转染到细胞中表达，从而获得具有特定功能的抗体。
这种技术使得科学家可以大规模制备具有高度特异性和亲和力的抗体，为研究和应用提供有力支持。
二、抗体工程的意义1.疾病诊断与治疗抗体工程为制备针对各种疾病的特异性抗体提供了可能。
例如，制备针对肿瘤细胞的抗体，可以用于癌症的诊断和治疗；制备针对病原体的抗体，可用于疫苗研究和病原体检测。
2.生物安全与防御抗体工程在生物安全和防御领域具有重要意义。
例如，制备针对病毒、细菌等病原体的抗体，可以用于预防和治疗相关传染病；制备针对生物毒素的抗体，可以用于中毒解毒和生物恐怖事件的应对。
3.生物研究与发展抗体工程为生物学研究提供了强大的工具。
例如，制备针对特定蛋白质的抗体，可以帮助研究者深入研究目标蛋白的结构和功能；制备具有特定功能的抗体，可以用于蛋白质药物的开发和生物传感器的研制。
三、抗体工程发展现状与展望近年来，抗体工程在全球范围内得到了广泛重视，各国纷纷加大研究力度。
目前，抗体药物已成为生物制药领域的重要组成部分，市场份额持续增长。
此外，单克隆抗体、双特异性抗体等新型抗体的研发成为热点，为疾病治疗带来新希望。
四、我国抗体工程的发展我国抗体工程研究始于20世纪80年代，经过30多年的发展，我国抗体工程取得了世界领先的成果。
在抗体药物研发、生产和销售方面，我国已经形成了一定的产业规模。
同时，政府加大对生物制药产业的扶持力度，为我国抗体工程发展创造了有利条件。
抗体工程制药
Adapted from M
ilstein (1980)
Scientific American
, Oct. p.58
1
2
3
4
m
m
m
m
1
2
3
4
oclonal
antibodies
Cell fusion
Spleen cells
+
Myeloma
x
Antiseum
Antigen
Immunization
1
2
3
4
多克隆抗体和单克隆抗体
Pure single Ab
After immunization, the mouse spleen contains B cells producing
specific antibodies.
Each B cell produces only one kind of antibody, which binds to i
原理：将同位素分析的高灵敏度与抗原抗体反应的特异性相结合，以放射性同位素作为示踪物的标记免疫测定方法。 放射免疫测定原理示意图
2.克隆化 为提高筛选出来的阳性克隆的稳定性，将单个细胞通过无性繁殖而获得细胞集团的整个培养过程。 有限稀释法：通过一系列稀释，使每个细胞培养孔平均只含一个细胞，而分离细胞 软琼脂法：将杂交瘤细胞悬液分散在半固体营养琼脂糖上，使呈单个细胞定位生长繁殖，以达到克隆化的目的。
HAT培养基： H 为次黄嘌呤，是HGPRT的底物，为DNA合成提供原料（核苷酸旁路合成原料） A 可阻断正常的DNA合成（嘌呤及TMP合成受抑制） T 在胸苷激酶（TK）的作用下生成胸腺嘧啶核苷酸，为DNA合成提供原料
生物工程的抗体工程
生物工程的抗体工程生物工程是应用工程学原理和生命科学知识，通过改变或利用生物体的遗传物质（如DNA、RNA）以及其代谢产物制造药物，改进农业生产或环境保护等领域的技术。
而抗体工程是生物工程领域中的一个重要分支，它利用对抗体的理解和工程化的方法来设计、生产和改良抗体，以应用于医疗诊断、治疗和疫苗研发等领域。
一、抗体的基本结构和功能抗体，也称免疫球蛋白，是一种由机体免疫系统产生的特异性蛋白质。
它由两个重链和两个轻链组成，每条链上包含一个可变区和一个恒定区。
抗体通过识别和结合病原体、细胞表面抗原或其他外源性物质来发挥免疫功能。
具体而言，抗体可以通过中和病原体、激活免疫细胞或为其他免疫效应分子（如补体）的结合提供平台等方式，来保护机体免受感染。
二、抗体工程的目标和方法抗体工程的主要目标是通过改变或改良抗体的结构，以使其表现出更好的疗效、减少副作用、提高稳定性等特性，在医疗和生产应用中发挥更大的作用。
为了实现这一目标，研究人员采用了多种方法。
1. 重组抗体重组抗体是指通过基因工程技术将抗体的编码基因导入到表达系统中，使其在非哺乳动物细胞或真核细胞中进行表达，并通过纯化和检测步骤获得的人工合成的抗体。
这种方法可以避免从动物体内提取抗体的繁琐过程，而且可调控性更强，可在较大规模上生产高纯度的单克隆抗体。
2. 人源化抗体人源化抗体是指通过重组技术将小鼠抗体的可变区与人源性抗体的恒定区结合，形成一种以人源性为主体的抗体。
这种方法可以减少小鼠源抗体在人体内产生的免疫原性反应，提高抗体的耐受性和稳定性。
3. 单克隆抗体单克隆抗体是指通过体外或体内杂交瘤技术，获得具有相同特异性和亲和性的抗体产生的B细胞克隆。
单克隆抗体具有高度特异性和亲和性，可用于精确诊断和靶向治疗。
4. 工程化抗体工程化抗体是通过对抗体基因进行改造，改变抗体的结构和性质。
比如引入一个特定的氨基酸残基，增强抗体的稳定性；或者改变抗体的亲和力和效价，提高治疗效果。
抗体工程与药物研发
抗体工程与药物研发随着现代医学技术的不断发展，药物的研发也在不断的进步。
其中一项关键技术就是抗体工程。
抗体是免疫系统特异性识别各种病原体的重要分子，因此在药物研发中具有重要的作用。
本文将详细介绍抗体工程在药物研发中的应用和意义。
一、抗体工程的概念抗体工程，是指使用分子生物学和遗传工程等现代技术，对抗体的结构、功能、亲和力以及不良反应进行修改和改良，从而开发一种新型抗体的过程。
抗体工程技术的出现，使得科学家们可以通过改变抗体的结构，增强其亲和力和生物活性，使得新型抗体更适用于药物研发。
二、抗体工程在药物研发中的应用1.抗体药物的研发抗体药物指的是使用单克隆抗体对某些疾病进行治疗，或者将一些化合物与单克隆抗体结合，从而增强其对疾病的治疗效果。
比如，现在市场上已经上市的“帕博利珠单抗”、“鲁西珠单抗”等，都是抗体药物。
2.抗体检测方法的研发抗体工程技术也被广泛的应用于抗体检测方法的研发。
传统的抗体检测方法往往需要大量的试剂和时间，而抗体工程技术可以制造大量的单克隆抗体，从而提高检测的准确性和效率。
比如，目前使用最广泛的荧光素酶标记法（ELISA）就是一种抗体检测方法。
3.新型疫苗的研发除了协助药物研发以外，抗体工程技术还可以用于开发新型疫苗。
例如，在研发新型疫苗的过程中，研究人员可以利用抗体工程技术开发出一系列的人工合成抗原，并用人工合成的抗原去激发免疫系统，从而提高疫苗的预防效果。
三、抗体工程的意义1.提高药物疗效使用抗体工程技术可以修改抗体的结构并增强其亲和力和生物活性，从而获得更加高效的药物，可以提高药物疗效。
2.减少不良反应仅凭人体天然抗体所进行的治疗，会将抗体释放到整个人体之中，并可能因此导致多种副作用。
而通过抗体工程技术改良抗体的特性，可以使其仅对某些位点具有亲和力，从而可以减少不必要的不良反应。
3.创造新型药物市场抗体工程技术开辟了新型药物研发的途径，能够制造出多种具有疗效的新型抗体药物，并且这些新型药物的应用前景广泛，可以为传统药物市场带来更大的发展空间。
抗体工程及其医学研究应用进展综述
抗体工程及其医学研究应用进展综述引言：抗体工程是一门快速发展的交叉学科，将生物工程、免疫学和细胞生物学等领域的知识相结合，通过对抗体结构的理解和调整，开展一系列的合成、修饰、表达和筛选等技术手段，以获得具有更好性能和功能的抗体。
抗体工程的研究和应用已经取得了巨大的突破，不仅在生物药物领域有着广泛的应用，还在肿瘤治疗、免疫诊断和疾病治疗等方面显示出了巨大的潜力。
一、抗体工程的基本原理和技术手段1.1 抗体的结构和功能抗体作为机体免疫系统中的重要组成部分，能够特异性地识别和结合抗原，通过调节免疫反应参与病原体的消除和清除。
抗体由两个重链和两个轻链组成，而抗原结合位点则由可变区域形成。
抗体的可变区域是抗体结构和功能调整的关键。
1.2 抗体的表达与生产抗体工程利用重组DNA技术将人类抗体基因导入细胞中进行表达，既可以利用哺乳动物细胞进行表达，也可以利用大肠杆菌等原核细胞进行高效表达。
此外，还可以通过将抗体基因导入植物、真菌和昆虫细胞等进行表达。
1.3 抗体的修饰与改造为了提高抗体的生物活性和药理特性，研究者们通过各种方法对抗体进行修饰和改造。
包括亲疏水性调节、Fc区域的修饰、药物载体的连接等多种策略，可以增加抗体的稳定性、半衰期和靶向性，提高其治疗效果。
1.4 抗体的筛选与优化通过单克隆抗体技术和体外进化技术，可以从大量库中筛选和优化抗体，以获得高亲和力和高效性的抗体。
研究者们还采用计算机辅助设计的方法，根据抗体和抗原结合位点的理化特性，预测和优化抗体的结构。
二、抗体工程在生物药物领域的应用2.1 单克隆抗体药物单克隆抗体药物是目前生物药物领域研究最广泛且应用最为成功的类别之一。
它们具有高度特异性和亲和力，能够针对特定的靶标进行干预和调控，广泛用于肿瘤治疗、自身免疫性疾病治疗和感染性疾病防治等方面。
2.2 抗体药物联合疗法利用多种抗体的互补作用，通过联合使用不同特点和作用机制的抗体，可以显著提高疗效，降低耐药性和毒副作用。
抗体工程及其临床应用
抗体工程及其临床应用近年来，抗体工程技术的发展为人们带来了更多的治疗选择，尤其是在癌症等疾病治疗领域。
抗体工程技术通过对人体免疫系统中存在的抗体进行改造和深入研究，以此为基础，设计出具有更高治疗效果和更好治疗作用的新型抗体药物。
本文将介绍抗体工程技术的基本原理、临床应用以及未来的发展前景。
一、抗体工程技术的基本原理抗体工程技术是基于生物技术的研究方法，它的研究目的在于设计和生产特定的抗体，以此为基础研究和开发治疗某些特定疾病的新型药物。
该技术主要由以下三部分组成。
1.人工合成抗体基因在抗体工程技术的初期阶段，主要是利用各种技术，开发出适合于人类生理情况的抗体基因，并将其植入到有效载体中，然后转化成一种具备治疗效果的新型抗体药物。
2. 生产抗体通过离子交换、凝胶过滤等技术，可以对生产合成抗体进行提纯，使之更加纯净、安全、有效。
3. 测试新型抗体药物将新型抗体药物注入到动物或人体中，通过药物代谢和副作用等方面的研究，来评估抗体的治疗效果。
二、抗体工程技术的临床应用目前，抗体工程技术已经在临床治疗中取得了一定的成果，下面会介绍主要的两种临床应用。
1. 抗体药物治疗癌症癌症是目前全球面临的一个重大疾病问题，而且常规的治疗方法对患者的生活质量和疾病的治疗效果都会有一定程度的影响。
而抗体药物可以通过直接作用于癌细胞表面的特异性分子上，释放信号分子，抑制癌细胞的生长和分裂，达到治疗癌症的目的。
目前，通过抗体工程技术设计出的新型抗体药物在癌症治疗中的应用似乎有更好的效果。
2. 抗体偶联毒素治疗皮肤病抗体偶联毒素(antibody-drug conjugate)是一种基于抗体的新型药物，通过将抗体和一定浓度的毒素结合在一起，从而形成一种具有治疗特定疾病作用的药物。
在这种药物中，抗体的作用是寻找基于细胞表面的特定受体，而毒素则会在经过特定过程后被释放出来，从而对疾病组织产生治疗效果。
抗体偶联毒素能够通过这种方式，直接削减皮肤病患者的病情。
基因工程抗体和抗体工程
2023-10-30contents •基因工程抗体概述•基因工程抗体技术•抗体工程技术•基因工程抗体和抗体工程的应用•未来展望与挑战目录01基因工程抗体概述基因工程抗体是指通过基因工程技术对抗体基因进行改造或合成，以产生具有特定性能的抗体分子。
基因工程抗体是通过操作DNA分子层面，根据需求对抗体基因进行各种形式的改造，如插入、敲除或突变等，以获得具有特定性能或去除不良特性的抗体。
基因工程抗体的定义基因工程抗体的种类将鼠源性抗体的人源化改造，使其具有人抗体的亲和性和特异性，同时降低鼠源性抗体的免疫原性。
人源化抗体单克隆抗体双特异性抗体突变体抗体通过杂交瘤技术，将鼠源性的B细胞和骨髓瘤细胞融合，产生的杂交瘤细胞能产生单一抗体的克隆。
具有识别两种不同抗原表位的抗体，通常用于肿瘤免疫治疗和自身免疫性疾病的治疗。
通过基因突变技术，改造抗体分子的结合位点，以获得更强的亲和力、更高的稳定性或降低免疫原性。
基因工程抗体可以用于肿瘤免疫治疗，如靶向肿瘤细胞的抗体-药物偶联物(ADC)，通过将细胞毒性药物偶联到抗体上，实现定向杀伤肿瘤细胞。
肿瘤免疫治疗基因工程抗体可以用于治疗自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等，通过抑制或调节免疫反应达到治疗目的。
自身免疫性疾病治疗基因工程抗体可以作为疫苗的一部分，通过刺激机体产生特异性抗体来增强免疫力。
疫苗开发基因工程抗体的应用02基因工程抗体技术从免疫原刺激的B细胞中提取抗体基因，包括重链和轻链可变区基因。
抗体基因的获取将抗体基因与适当的载体连接，构建成表达载体。
载体构建将表达载体导入合适的宿主细胞，如细菌、酵母或哺乳动物细胞系。
转化宿主细胞在宿主细胞中表达抗体，通常以融合蛋白的形式存在。
抗体表达抗体基因的克隆和表达抗体库的建立和筛选抗体筛选通过亲和力、特异性等指标筛选出高亲和力和高特异性的抗体。
抗体库的建立通过PCR扩增抗体基因，构建成多样性抗体库。
B细胞克隆从免疫动物的脾脏或淋巴结中提取B细胞，并克隆化。
抗体工程重组模式
抗体工程重组模式介绍抗体工程是一种利用分子生物学技术对抗体进行修饰和改造的方法，以获得具有特定功能和性质的抗体。
抗体工程重组模式是其中一种常见的抗体工程方法，它通过将不同来源的基因片段重新组合，来构建新的抗体变体，从而实现对抗体的可定制化和增强功能。
基本原理抗体工程重组模式通过基因克隆和DNA重组技术，将不同层面上的基因片段进行重组，以构建新的抗体变体。
基本的步骤如下：1. 构建重组基因首先，需要选择目标抗体的亲和区域，并通过PCR方法从抗体产生的淋巴细胞中扩增出相应的基因片段。
然后，将亲和区域的基因片段与选择的功能基因片段进行连接，形成重组基因。
2. 转染与表达将重组基因导入宿主细胞中，通过转染或转染载体等方法实现。
随后，利用适当的条件和培养基，使宿主细胞表达和分泌目标抗体变体。
3. 纯化与鉴定对经过表达的抗体变体进行纯化和鉴定。
常用的纯化方法包括亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析等。
鉴定通常采用SDS-PAGE、Western blot和ELISA等方法，来确定蛋白的分子量、纯度和目标特异性等。
不同的重组模式抗体工程重组模式具有多样性，常见的重组模式包括：1. 改变常量区结构通过替换或插入常量区的基因片段，从而改变抗体的结构和功能。
这种重组模式可以改变抗体的亲和性、稳定性和抗原特异性等。
2. 人源化抗体人源化抗体是将抗体的变异区和亲和区替换为人类源的片段，以减少抗原性反应和增强潜在的临床应用价值。
3. 单链重组抗体单链重组抗体是将变异区和亲和区的基因片段通过特定的连接肽连接在一起，形成单链抗体。
这种重组模式使抗体具有较小的分子量和更好的穿透性。
4. 抗体片段重组通过连接两个或多个抗体片段，形成新的抗体变体。
常见的抗体片段包括Fab、Fc 和scFv等。
这种重组模式可以增强抗体的结构稳定性和生物活性。
优点与应用抗体工程重组模式具有以下优点和应用：1. 可定制化抗体工程重组模式可以根据需要对抗体的结构和功能进行定制，使抗体具有更好的性能和特异性。
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它是在PCR技术和Phage Display的基础上实现的。
抗体种类
鼠单抗 鼠单抗 人-鼠嵌合Fab 人源化抗体 人-鼠嵌合抗体 人-鼠嵌合抗体 人-鼠嵌合抗体 人源化抗体 人源化抗体 兔多抗 人源化抗体化 疗药物交联物 人源化抗体
靶向抗原
CD3 17-1A 血小板受体 ⅡbⅢa CD25 CD20 CD25 TNF-α HER-2 RSV F蛋白 CD33
3 小分子抗体
小分子抗体包括Fab、Fv或ScFv、单域抗体及最 小识别单位等几种。 小分子抗体有很多优点:
可以用细菌发酵生产，成本低; 分子小，穿透力强; 不含Fc，没有Fc带来的效应; 在体内循环的半衰期短，易清除，利于解毒排出; 易于与毒素或酶基因连接，便于直接获得免疫毒素或 酶标抗体等。
Fab
适应症
移植排斥 大肠癌 冠心病 移植排斥 淋巴瘤 移植排斥 炎症性肠病类 风湿关节炎 乳腺癌 RSV感染 移植排斥 淋巴瘤
批准日期
1986 1995 1994 1997 1997 1998 1998 1999 1998 1998 1998 2000
Campath
CD52
淋巴瘤
2001
生物技术
生物技术制药
(3)单域抗体
即为VH，约为完整分子的1/12。它只由一个结构 域构成，故称单域抗体。单域抗体尽管亲和力有所 降低，但仍保持着原单抗的特异性。
VH
(4)最小识别单位
约为完整分子的1/80-1/70大小，一般由一个CDR 构成，它也保持着抗体的特异性。
CDR
4 双特异抗体和多价抗体
双链抗体 （Diabody）一词最早由Hollinger等于
廖振林
Tel：68914
Email：602581821@
食品学院微生物教研室
概 述
讲述内容
• • • • • • • 1 抗原 2 抗体 3 多克隆抗体 4 细胞工程抗体 5 基因工程抗体 6 抗体的分离纯化与鉴定 7基本结构
异性抗体。
所以双特异性抗体与既往肿瘤免疫治疗相比,
除了能特异性识别肿瘤细胞外,还能将循环血液中
的免疫效应细胞再导向至肿瘤细胞处,从而使效应
细胞的抗肿瘤活性增强,发挥免疫导向作用,这是
肿瘤治疗的新突破。
5
抗体库技术
抗体库技术是用基因工程方法把人或其他动物的 全部抗体的轻、重链可变区基因克隆出来，在原核 载体上表达，然后筛选出所需的特异基因和抗体。
Epitope, Antigenic determinant
抗原決定基
● 一个抗原分子上可能有数个抗原決定基
● 每個 抗原決定基 至少誘生一種專一性抗体
● 蛋白质性 抗原決定基 含有六个以上氨基酸
整体水平抗体生成技术
多克隆抗体（抗血清）
细胞工程抗体生成技术
单克隆抗体
嵌合抗体、改形抗体
基因工程抗体生成技术
其过程是把用PCR法得到的抗体基因插入丝状噬菌
体的DNA，与噬菌体外壳蛋白的基因相连，在辅助
噬菌体的帮助下，噬菌粒包装成丝状噬菌体，抗体
分子通过与P Ⅲ或PⅧ相连，在噬菌体表面的一端
或分散分布，然后可直接对噬菌体表面的抗体分子
进行筛选。
噬菌体表面展示系统(phage
surface display system
定点突变法是将人的可变区基因克隆，根据鼠抗 体的CDR 序列合成几种突变引物，用定点突变的方 法将人的可变区基因的CDR序列变为鼠抗体的CDR序 列，然后表达出改型抗体。
研究表明，在构建改形抗体时，简单地进行CDR 替换并不能保证抗体具有好的亲和力，因此在构建 时还必需包括对影响抗原结合位点的空间结构的框 架序列进行操作。
B
1
抗原決定基
● 若有许多抗原決定基，则需许多株 B 細胞分別生产许多抗体。
B
B B
2
3 4 3
1
抗 原
Y
Y
2 4
Y Y
Y Y Y
Y
1 2
3 4 1
m m
m m
取出脾細胞
+ 癌細胞
2 3 4
细胞融合
1
2
3
4
单抗
各抗体分开
1 2
3
4
m
m
m m
2 3 4
1
Y
Y
Y Y Y Y Y Y
Y
TK-
m
m
HGPRT-
人源化抗体的构建可用全合成法或定点突变法。
全合成法是以人抗体序列为骨架，以鼠抗体的 CDR置换人抗体的CDR，将整个可变区序列的两条链 分解成若干片段，并使相邻的片段具有彼此互补的 粘性末端。合成所有DNA片段，每组片段分别退火， 然后逐组连接成完整的可变区基因，插入质粒中， 进一步即可用于构建和表达改形抗体。
抗 原
31 2 4
BA L B /c
免 疫
1
2
3
4
脾 脏 淋巴結 B 細胞
31 2 4
传统抗血清
所有抗体混合
传统抗血清的交叉反应
专一性反应
交叉反应
沒有反應
2 1 2 3 2
1
2 Ag A
3 1’
2 Ag A’
0x
y Ag B
z
+
?
-
单克隆抗体
可生产有用抗体的 淋巴細胞 若与 癌细胞融合，则形成稳定而可培 养的细胞株。
Hollinger等巧妙地将Ａ抗原抗体的轻链可变区 基因(VLA)与抗Ｂ抗原抗体的重链可变区(VHB)通过 短肽连接子连接;同样地,将VHA与VLB连接,将两组 嵌合基因置于双顺反子的表达质粒中,构建成双链
抗体的表达质粒,目前报道的表达质粒均为双顺反
子。表达后,VLA VHB与VHA VLB交叉连结,形成双特
已建立之小鼠 骨髓癌细胞株
-a
-b
-c
-d
由脾脏收集 B 細胞
传统抗体 (抗血清) 是所有抗体的混和
骨 髓 癌 细 胞
NS-1
B cell
-b -a
-c -d
脾 细 胞
传统抗体 (抗血清)
细胞融合
PEG HAT -a -b Cell fusion
分株培养筛选
对 抗 原 的 反 应
a b c d
+ + + +
-c
-d ELISA
Ag X
无 法 分 辨
a b c d’
+ + + -
Hybridoma cells
融合瘤细胞
（Subcloning）
筛选
-d
d d
-d
旧有抗原
+
d’ X d’
完 全 不 同
Ag X’
新的抗原
-
(确定只有一种细胞)
试验专一性
单抗
基因工程抗体
1 人一鼠嵌合抗体(Chimeric Antibodies)
核酸
核酸补救合成
TK HGPRT
核酸从头合成 (-)
次黄嘌呤(H)\胸苷(T)
氨甲喋呤(A)
免疫前要先 把抗原作 成乳剂
抗原
a
b
抗原通常有多个抗原決定基
Ag X
约在两月內 注射五到八次
抗原決定基
b c
d
脾脏产生各种 B 細胞
免疫
X
BALB/c 免疫后 的脾脏
-a
-b
-c
-d
采血后可得传统抗血清
抗体
人一鼠嵌合抗体是将鼠源单抗的可变区与人抗体的恒 定区融合而得到的抗体。
构建嵌合抗体的大致过程是，将鼠源单抗的可 变区基因克隆出来，连到包含有人抗体恒定区基因 及表达所需的其它元件(如启动子、增强子、选择 标记等)的表达载体上，在哺乳动物细胞(如骨髓瘤 细胞、CHO细胞)中表达。
构建重组表达载体
克隆鼠单抗的可变区基因，可从基因组中分 离，也可用PCR技术分离。 人抗体恒定区可根据需要选择，不同的恒定区会 带给嵌合抗体不同功能。为避免人抗体的恒定区产 生不需要的副作用，可通过点突变来修饰调整其效 应。 人一鼠嵌合抗体与鼠单抗相比，免疫原性大大降 低，利于在人体内应用，所以目前已制备出上百种 抗各种抗原(包括肿瘤相关抗原)的嵌合抗体。
单链抗体的构建在已知亲本DNA序列时可用完全
人工合成法;
在具备亲本单抗可变区的cDNA克隆时，可用定点 突变法在其两端造成适当的内切酶位点，与人工合 成的连接肽编码序列连接，组装到表达载体中; 如果从杂交瘤细胞系构建单链抗体，可用PCR方 法扩增可变区基因，再组装到适当的表达载体上。
单链抗体最常用的表达体系是大肠杆菌，有2种 方式: 一是表达为包涵或非包涵体的不溶蛋白。产量高， 可达细菌蛋白总量的5%-20%，但需进行变性复性， 使其形成正确的立体结构，恢复抗体活性; 二是分泌型表达，将细菌的信号肽序列与单链抗 体的氨基端相连，单链抗体分子就可分泌到质周腔 和细菌体外，进行折叠后成为有活性的分子。但产 量不及前者，一般实验室培养条件下每升细菌的产 量仅在数毫克左右。
“小型化抗体”（单链抗体）
组合抗体库技术
噬菌体抗体库技术 Ig基因转基因小鼠 抗体真核表达技术
多克隆抗体
多克隆抗体（polyclonal antibody）
指由不同B细胞克隆产生的针对抗原物质中多种抗原决
定簇的多种抗体混合物。
如:免疫血清（含多种特异性抗体）。
实际意义：
（1）预防、治疗感染性疾病， 如：破伤风抗毒素血清 抗破伤风， 胎盘球蛋白 抗病毒感染等 副作用：超敏反应 （2）临床诊断，如：肥达氏反应 -- 伤寒、副伤寒 缺点：特异性差。