基质辅助激光解吸附电离 -回复
反相高效液相色谱／基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分离鉴定螺蛳血管紧张素转换酶抑制肽
ｒｐ ｙ ｅｅ ｔｏ ｐ ａ ｏ ｉａ ｉｎ ｍａ ｓｓ ｅ ｔｏ ｔ （ Ｌ ／ ＩＭＳ）ａ ｄ ｔ ｅ ｍａ ｉ ａ ｓｓｅ ａ ｅ ａ ｈ ／ ｌｃｒ ｓ ｒ ｙ ｉｎ ｚ ｔｏ ｓ ｐ ｃ ｒ ｍｅｒ ＨＰ Ｃ ＥＳ — ｙ ｎ ｈ ｒ ｘ—ｓ ｉｔ ｄｌ ｓ ｒ ｔ ｄ ｓ ｒ ｔｏ ／ｏ ｉａｉ ｎ ｔｍｅｏ ｉｈ ｓ ｐ ｃｒ ｍｅｒ （ ｅ ｏ ｐ ｉ ｎ ｉ ｎｚ ｔ ｉ ｆ ｇ ｔｍａ ｓｓ ｅ ｔｏ ｔ ｏ ｌ ｆ ｙ ＭＡＬ — ＤＩＴＯＦ ＭＳ）ｃ ｍｂｎ ｎ ｔ ｈ — ｏ ｉ ｉｇ ｗｉｈ ｔ ｅａ
夏树 华 ， 王 璋
（ 南 大 学 食 品 学 院 ，江 苏 无 锡 ２ ４ ３ ） 江 １０ ６
摘 要 ： 用 反 相 高 效 液 相 色 谱 （ ＰＨＰ Ｃ） 酶解 螺 蛳 腹 足 肌 得 到 的 血 管 紧 张 素 转 换 酶 （ Ｅ） 制 肽 进 行 两 步 分 运 Ｒ— Ｌ 对 ＡＣ 抑 离 提 纯 ， 一 步 主 要 得 到 ８个 组 分 ； 取 其 中 活 性 最 高 的组 分 进 一 步 分 离 ， 到 ２个 组 分 ， 中 活 性 较 高 组 分 的 第 选 得 其 ＡＣ 半 抑 制 浓 度 为 ４ ． ｍｏ／ ， 本 为 单 一 肽组 分 。 对 提 纯 的 组 分 分 别 使 用 高 效 液 相 色 谱 ／ 喷 雾 离 子 质 谱 法 Ｅ ３ ５￣ ｌＬ 基 电
ｐｕ ｉｉБайду номын сангаасｔ ｙ ＲＰ－ Ｌ ＭＡＬ － ｒ ｃ ａｂ － ｆ ＨＰ Ｃ／ ＤＩＴＯＦ ＭＳ －
ＸＩ Ｓ ｈｕａ， Ｗ ＡＮＧ Ａ ｈｕ Ｚｈａ ｇ ｎ
（ ｏ ｃｅ ｃ ｃ ｏ ｌ ｏ ｈ ｒ ａ ｇｚ ｎ ｖ ｒｉｙ，Ｗｕ ｉ２ ４ ３ Ｆｏ ｄＳ ｉｎ ｅＳ ｈ ｏ ，Ｓ ｕｔｅｎ Ｙ ｎ ｔｅ Ｕ ｉｅ ｓｔ ｘ １ ０ ６，Ｃ ｉ ａ ｈｎ ）
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 技术的主要特点是，先通过PCR扩增目标序列，然后加入snp序列特异延伸引物，在SNP 位点上，延伸1个碱基。
将制备的样品分析物与芯片基质共结晶，将该晶体放入质谱仪的真空管, 而后用瞬时纳秒(10-9s) 强激光激发，由于基质分子经辐射所吸收的能量，导致能量蓄积并迅速产热，从而使基质晶体升华，核酸分子就会解吸附并转变为亚稳态离子，产生的离子多为单电荷离子，这些单电荷离子在加速电场中获得相同的动能，进而在一非电场漂移区内按照其质荷比率加以分离，在真空小管中飞行到达检测器。
MALDI产生的离子常用飞行时间（Time-of-Flight,TOF）检测器来检测，离子质量越小，就越快到达。
理论上讲，只要飞行管的长度足够，TOF检测器可检测分子的质量数是没有上限的。
MassARRAY SNP 检测的质谱范围为5000 to 8500 Da。
主要用途： 1.对生物大分子物质分子量的测定； 2.对蛋白质进行高通量的鉴定； 3.对有机小分子化合物分子量的测定； 4.对寡核苷酸的分析； 5.对基因的单核苷酸多态性的分析仪器类别：0303071402 /仪器仪表/成份分析仪器/质谱仪指标信息： 1.质量数测定范围最高可达40万Da以上； 2.检测灵敏度范围：10-15～10-18摩尔； 3.质量准确度可达5ppm； 4.分辨率右达2万。
附件信息：配有源后衰变装置，可对多肽、蛋白质的序列进行分析机组简介：基质辅助激光角吸附电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS Reflex Ⅲ）：具有操作简单、快速、谱图直观、能耐受一定浓度的盐和去垢剂等特点，特别适合于混合多肽、蛋白、寡核苷酸的精确质量数测定，其测定质量数范围最高可达40万Da以上，灵敏度可达10-15～10-18摩尔，质量准确度5ppm。
配有源后衰变（post-sourc e decay, PSD)装置，计算机自动联机检索系统。
基质辅助激光解吸电离质谱成像
基质辅助激光解吸电离质谱成像
基质辅助激光解吸电离质谱成像（MALDI-MSI）是一种高分辨率、高通量的成像技术，可以用于生物分子的定量和空间分布分析。
下面
是对该技术的详细介绍。
一、技术原理
MALDI-MSI技术是基于质谱原理的。
它通过将化合物固定在载体（基质）上，在基质表面上形成分子晶体，并通过激光辐射质量分析仪来
直接探测和成像物质分布。
基质能够增强分子的解离和电离，提高其
探测灵敏度和选择性。
二、技术应用
MALDI-MSI技术在生物学、药物学、神经科学、环境科学等领域广泛
应用。
它可以用于定性和定量分析，分析蛋白质、代谢物、脂质、药
物等分子在不同组织、细胞类型中的分布情况，并可以实现组织学和
化学图像的叠加。
三、技术优势
MALDI-MSI技术具有成像精度高、高通量、无需前处理、样本保留完
整性、可追溯性等优势。
同时，它能够探测到微量、低丰度、小分子
等难以被其他技术检测到的化合物，为疾病诊断和药物研发提供了新
的手段。
四、技术挑战
MALDI-MSI技术在分子图像质量、信号噪声比、质量信号比、基质优化等方面还存在挑战。
此外，技术成本较高、仪器复杂、数据处理困难等也是技术发展的难点。
五、技术前景
随着技术的不断优化和应用范围的扩大，MALDI-MSI技术将成为疾病诊断、药物研发、农业、食品安全等多个领域的重要工具。
同时，基质辅助激光解吸电离质谱成像也将成为质谱技术中必不可少的一项技术。
基质辅助激光解析电离飞行时间质谱MALDI-TOF-MS
基质辅助激光解析电离飞⾏时间质谱MALDI-TOF-MS MALDI-TOF-MS（基质辅助激光解析电离飞⾏时间质谱）是近年来发展起来的⼀种新型的简单⾼效软电离⽣物质谱仪。
质谱分析法主要是通过对样品的离⼦的质荷⽐的分析⽽实现对样品进⾏定性和定量的⼀种⽅法。
因此，质谱仪都必须有电离装置把样品电离为离⼦，有质量分析装置把不同质荷⽐的离⼦分开,经检测器检测之后可以得到样品的质谱图，由于有机样品,⽆机样品和同位素样品等具有不同形态、性质和不同的分析要求,所以，所⽤的电离装置、质量分析装置和检测装置有所不同。
但是，不管是哪种类型的质谱仪，其基本组成是相同的。
都包括离⼦源、质量分析器、检测器和真空系统。
以某种⽅式使⼀个有机分⼦电离、裂解，然后按质荷⽐（m/z）⼤⼩把⽣成的各种离⼦分离，检测它们的强度，并将离⼦按其质荷⽐⼤⼩排列成谱，这种分析研究的⽅法叫做质谱图，质谱的最⼤⽤途之⼀是可以测定未知物的分⼦量（质谱能通过检测分⼦离⼦的质荷⽐获得分⼦量），并可以确定化合物的分⼦式（可通过碎⽚离⼦的质荷⽐的强度推测有机物的结构。
这相当于⼀个精巧的花瓶被打碎了，如果我们仔细地收集和归属这些碎⽚，然后将碎⽚拼构起来，就可以使花瓶复原。
花瓶好⽐有机物的分⼦，打碎花瓶犹如使分⼦电离、裂解。
收集和归属碎⽚就像是按质荷⽐分离、记录离⼦。
⽽将碎⽚重拼花瓶的过程，相当于通过解析谱图得到有机物结构的过程。
由于各种有机物都有其特定的、可以重复的质谱图，⽽且⼈们对质谱裂解过程的研究中已经发现了⼀些普遍适⽤的裂解规律，这为质谱⽤于有机物结构分析提供了可靠的基础）。
飞⾏时间质谱仪Time of Flight Mass Spectrometer (TOF) 是⼀种很常⽤的质谱仪。
这种质谱仪的质量分析器是⼀个离⼦漂移管。
由离⼦源产⽣的离⼦加速后进⼊⽆场漂移管，并以恒定速度飞向离⼦接收器。
离⼦质量越⼤，到达接收器所⽤时间越长，离⼦质量越⼩，到达接收器所⽤时间越短，根据这⼀原理，可以把不同质量的离⼦按m/z值⼤⼩进⾏分离。
一、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪操作规程
一、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪操作规程一. 开机 1. 开主机总电源至ON。
2. 开主机正面有钥匙的开关至ON顺时针。
3. 开计算机及显示器启动FlexControl软件。
4. 等待源高真空达到3×10-6mbar如达不到该数值检查是否有漏气发生。
5. 进入日常操作。
二. 关机1将靶退出。
2在FlexControl界面的Spectrometer关掉高压按“OFF”。
3关闭所使用的软件关闭计算机。
4关主机正面有钥匙的开关至OFF逆时针。
5关主机总电源至OFF。
三日常操作1 打开FlexControl 进入仪器控制界面。
2 确认真空度为10-7mbar或稍低。
3 通过界面Carrier▲或主机正面的Load EJECT开关将样品靶放入仪器等待约2分钟调整好靶位。
在此过程中不应操作软件或硬件以确保仪器通讯畅通。
4 根据测量目的选择测量方法⑴分子量测定根据分子量大小选择相应的线性测量方法和仪器校正方法。
2 肽质量指纹谱测量根据所需测量的肽谱范围选择相应的反射测量方法和仪器校正方法。
⑶根据需要选择正离子或负离子测量方法和仪器校正方法。
⑷如果进行串联质谱分析则选择LIFT方法。
5 选择适当的仪器参数6 测量⑴手动测量a 选择好待测样品的靶位及相应参数后按Start开始测量。
b 根据图谱的质量按Add添加或按Clear Sum删除图谱。
c 按Save As保存图谱。
注在测量过程中可随时调整激光能量和靶位置以获得最佳信噪比和分辨率。
⑵自动测量a 按菜单AutoXecute再按Select选择一个Sequence文件名。
b 按Edit编辑待测样品用Sample position 的Sample依次选定靶位?蟀碅dd添加到Edit AutoXecute Sequence中。
c 按AutoXecute Method选择Calibration 或样品测量方法。
d 按Edit设定激光能量、靶位移动、累加方法等参数并保存该参数。
基质辅助激光解吸电离飞行质谱用于血培养中病原菌的快速鉴定研究进展
ｒ ｅ ｅｔ ｅｐ ｌｅ ｅ ｄｉｃｃｌ ｖ ｃｉｅ ［ ］ Ｃ ｎｅ ，０ ７ １ ０ ｉ ｄｐ ｐｉ —ｕｓｄｄｎ ｒ ｉ ｅｌ ａｃ ｓ Ｊ ． ａ ｃｒ２ ０ ， ｖ ｄ ｔ ｎ １
４ 结 语
ｔｍｏ ｕ ｒｉ ｍｍｕ ｏｈｒｐ ［ ］Ｎｅ ｐａｉ，０８ １ （ ）９ ７９ ６ ｎ ｔｅａｙ Ｊ． ｏ ｌｓ ２０ ，０ ９ ：７ ８ ． ａ ［２ ｏ １］Ｓ ｍｍｅｆｌｔＮ， ｅｋ ｏｅＰ， ｅＹ，ｔａ． ｐ ｒｎｓ ： ｅ — ｒ ｄ Ｂ ｃｈ ｖ Ｇ ｅ １Ｈｅａａ ａｅ ａｎ ｗ ｍｅ ｅ
国际检验 医学 杂志 ２１ 年 ９月第 ３ 卷 第 １ ０１ ２ ５期
ｌｔ ａ ｄＳｐｅ ｅ ０１Ｖ ｉ ２Ｎ ．５ ｎ Ｌ ｂＭｅ ，ｅｔ ｒ２１，ｏ． ，ｏ１ Ｊ ｍｂ ３
且 主要 组 织 相 容 性 复 合体 （ ＭＨＣ 相 匹 配 的 肿 瘤 细 胞 具 有 明 显 ）
的杀 伤 效 应 。体 内研 究 表 明 ， 述 多 肽 表 位 对 肿 瘤 小 鼠具 有 明 上
关 键 词 ： 究 ； 基 质 辅 助 激 光 解 吸 电 离飞 行 质 谱 ； 病 原 菌 ； 血 培 养 研
Ｄ Ｉ １ ． ９ ９ ｊｉ ｎ １ ７ —１ ０ ２ １ ． ５ ０ １ Ｏ ： ０ ３ ６ ／． ｓ ． ６ ３ ４ ３ ． ０ １ １ ． ３ ｓ 文献 标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ６ ３ ４ ３ （ ０ １ １ － ７ ３０ １ ７ — １ ０ ２ １ ） ５１ ２ — ３
阿尔茨海默症脑组织基质辅助激光解吸电离质谱成像分析研究新进展
阿尔茨海默症脑组织基质辅助激光解吸电离质谱成像分析研究新进展作者：张阳阳韩超赵镇文来源：《分析化学》2019年第10期摘;要;阿爾兹海默症（Alzheimer's disease， AD）是影响全球数百万人并与年龄有关的神经退行性疾病，但确切病因仍不清楚。
基质辅助激光解吸电离质谱成像（MALDI MSI）分析技术不仅可进行物质鉴定，而且可对被分析物进行空间分布成像，近年来广泛应用于AD脑组织中淀粉样蛋白和脂质的分布研究，以探索该疾病的机理。
本文介绍了基质辅助激光解吸电离质谱成像（MALDI MSI）的原理、方法学以及在AD疾病机制方面的相关研究进展，并对其发展前景进行了展望。
关键词;阿尔兹海默症; 基质辅助激光解吸电离质谱成像; 评述1;引言阿尔兹海默症（Alzheimer's disease， AD）是一种神经退行性疾病，以中年和老年人的认知能力下降为主要特征。
随着全球老龄化进程加快，AD发病率近年来不断增加。
据2010年AD发病统计，全球大约3560万人患有AD，据估计到2050年，全球AD发病人数将高达1.15亿[1]。
AD类型多样，具有散发型和家族型两种形式。
绝大多数患者属于散发型或迟发性痴呆的家族型（晚于65岁），其余少数患者属于早发性痴呆的家族型（大约30～65岁），并且表现出不同的症状。
家族型患者在编码β;淀粉样蛋白（β;amyloid，Aβ）的淀粉样前体蛋白（Amyloid precursor protein，APP）、早老素1和2（Presenilin， PSEN1/2）3种基因之一时具有突变：其中早老素分泌酶复合体催化亚基的组分，负责APP的切割和Aβ的形成。
散发型AD的起源复杂，涉及多种遗传和环境影响因素，如携带载脂蛋白的E;ε4等位基因、线粒体功能障碍、头部损伤或脑血液屏障受损等[2]。
尽管AD是老年痴呆最常见的形式，并影响全球数百万人，但这种疾病的确切病因仍不清楚。
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱用于直接鉴定临床病理样本中微生物的研究
２ ２ 样 品 制 备 ＭＡＬ Ｉ ＯＦ ＭＳ是 一 种 非 常 灵 敏 的技 术 ， ． Ｄ— Ｔ
分 析 时 只 需 要 少 量 的 微 生 物 即 可 （ 菌 １ １ 。 Ｆ 。鉴 定 细 Ｏ ～ ０ Ｃ Ｕ）
微 生 物 时 ， 品和 １ Ｌ 的基 质 溶 剂 混 合 后 置 于 钢 制 靶 盘 表 面 样 晾 干 。基 质 溶 剂 与 样 品在 靶 盘 上 共 结 晶 。这 些 基 质 一 般 是 由
（ 速 去 除 白细 胞 ， 速 收 集 菌 体 ） 。 低 高 等
相 关 微 生 物 的活 性 代 谢 过 程 ， 因此 ， 般 需 要 一 个 较 长 的 培 养 一
过 程 。而 临 床 微 生 物 检 测 需 要 对 感 染 患 者 的 检 测 样 本 进 行 快 速 鉴 定 以及 时 给 予 适 当 的对 症 治 疗 ， 以传 统 方 法 明显 不 能 满 所 足 临 床 检 测 需 要 。分 子 诊 断 方 法 ， 要 是 １Ｓ核 糖 体 Ｒ 主 ６ ＮＡ 测 序 或 实 时 Ｐ Ｒ基 因 检 测 方 法 。经过 多年 的发 展并 已被 普 遍 应 Ｃ 用 于 微 生 物 的鉴 定 ， 一种 重要 的微 生 物 鉴 定 方 法 。但 是 这 些 是
种是独特的。
技 术 作 为 最 新 发 展 起 来 的一 种 简 便 、 速 、 快 准确 、 济 的病 原 微 经
生物 鉴定 方法 ， 好 满 足 临 床 微 生 物 实验 室对 病 原 微 生 物 快 速 正 经济 的诊 断需 求 。相 信 随 着 该 方 法 的 发 展 和 在 临 床 微 生 物 实 验 室 的 广 泛 应 用 ， 显 著 改 变 现 在 微 生 物 实 验 室 的 工作 模 式 和 将 流程 ， 临床科研工作人员带来更多便利。 给
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
基质辅助激光解吸附电离-回复
基质辅助激光解吸附电离（MALDI-TOF）是一种广泛应用于生物大分子质谱分析的技术。
它通过将待测样品与一种基质混合，然后利用激光加热的方式将样品中的分子从基质中解吸出来，并在质谱仪中进行电离和分析。
本文将详细介绍MALDI-TOF的原理、步骤和应用。
一、MALDI-TOF的原理
MALDI-TOF的原理是将待测样品与一种吸附基质混合后，通过激光加热使分子从基质中解吸出来，并在质谱仪中进行电离和分析。
MALDI-TOF常用的基质有辅酶NADH、DHB等。
首先，样品和基质混合后，形成一个均匀的混合液滴。
然后，将混合液滴放置在一个金属或者玻璃板上，使其干燥，形成一个固体基质。
接下来，使用激光对基质进行加热，使基质快速升温，并将样品中的分子从基质中解吸出来。
这个过程被称为解吸。
在解吸的过程中，分子将被电离成带电的分子离子，这些带电的分子离子会被加速器加速，然后通过静电分析器在不同时间上的离子飞行时间（TOF）进行分析，从而得到样品的质谱图谱。
二、MALDI-TOF的步骤
MALDI-TOF分析需要经历样品制备、基质辅助解吸、离子飞行和信号检测等步骤。
下面将逐一介绍这些步骤。
1. 样品制备：待测样品需要与基质进行混合。
样品可以是蛋白质、核酸或者其他生物大分子。
样品与基质的比例需要根据具体试验要求进行优化。
2. 基质辅助解吸：将混合的样品和基质溶液滴在金属或者玻璃板上，待混合液干燥形成固体基质。
然后使用激光加热基质，使样品从基质中解吸出来，形成带电的分子离子。
3. 离子飞行：带电的分子离子被加速器加速，然后在电场作用下，在质谱仪中进行离子飞行。
离子的飞行时间与其质量有关，质量越大飞行时间越长。
4. 信号检测：离子飞行到检测器后，会产生电信号，这些信号会被放大、转换为数字信号，并进行处理，最终得到质谱图谱。
三、MALDI-TOF的应用
MALDI-TOF由于其快速、高灵敏度和高分辨率等优点，在生物医学研究领域得到了广泛的应用。
1. 蛋白质质谱分析：MALDI-TOF可以用于鉴定和定量蛋白质样品。
通过测量样品质谱图谱，可以得到蛋白质的分子量信息，从而对蛋白质进行鉴定和定量。
2. 核酸质谱分析：MALDI-TOF可以用于分析DNA或RNA样品。
通过对核酸质谱的测量，可以研究核酸的序列、修饰和结构等信息。
3. 糖类质谱分析：MALDI-TOF可以用于分析糖类样品。
通过对糖类质谱的测量，可以研究糖类的结构和修饰等信息，从而了解其在生物体内的功能和代谢。
4. 药物研发：MALDI-TOF可以用于药物代谢和药物靶标鉴定等研究。
通过对药物样品的质谱测量，可以研究药物在体内的代谢途径和代谢产物，从而为药物研发提供重要的信息。
综上所述，MALDI-TOF是一种重要的生物大分子质谱分析技术。
它在蛋白质、核酸、糖类等领域的研究中发挥着重要的作用。
相信随着技术的进一步发展，MALDI-TOF将在更多的领域展示其应用潜力。