白细胞检验测定方法及分类计数
白细胞计数与分类
白细胞计数与分类白细胞是人体免疫系统中重要的组成部分，它们起着重要的抵御外界病原微生物入侵以及维持机体内稳定的功能。
白细胞的计数与分类是临床血液学中的重要指标，它能够反映机体免疫系统的功能状态，及时发现疾病和评估疾病的严重程度。
本文将对白细胞计数与分类进行深入介绍。
一、白细胞计数白细胞计数是指在一定的体积内，计算血液中白细胞的数量。
目前临床常用的方法有手工计数法和自动计数法。
手工计数法是通过显微镜下人工统计血液中各类白细胞的数量，相对较为繁琐，但结果准确可靠；而自动计数法则是利用血细胞计数仪来测量血液中不同类型白细胞的数量，速度快，并且具有较高的精确度。
二、白细胞分类白细胞按照形态特点和功能可分为中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞五类。
1. 中性粒细胞中性粒细胞，也称为多形核白细胞，其细胞核形状不规则，常呈珠链状排列。
中性粒细胞在人体中的比例最高，约占白细胞总数的50-70%。
中性粒细胞的主要功能是吞噬和消化细菌、真菌和病毒等微生物，起着重要的免疫防御作用。
2. 淋巴细胞淋巴细胞是一种淡紫色的细胞，其细胞核很大，占细胞的大部分空间。
淋巴细胞的比例一般占总白细胞的20-40%。
淋巴细胞是人体免疫系统的重要组成部分，它们能够产生抗体来识别和抵御外来抗原，发挥着重要的抗体免疫功能。
3. 单核细胞单核细胞的细胞核形状规则，呈圆形或椭圆形。
单核细胞在白细胞中的比例约为3-8%。
单核细胞具有巨噬细胞的功能，能够吞噬和清除老化的细胞、病毒感染的细胞和细菌等，发挥着重要的清除作用。
4. 嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞的细胞核具有分叶状结构，呈弯曲形状。
嗜酸性粒细胞在白细胞中的比例一般为1-5%。
嗜酸性粒细胞含有大量的粒状颗粒，这些颗粒可吸收和降解组织中的异物和寄生虫，对于过敏性疾病和寄生虫感染的免疫应答起着重要的作用。
5. 嗜碱性粒细胞嗜碱性粒细胞的细胞核常分叶状，呈杆状或弯曲形态。
嗜碱性粒细胞的比例一般占总白细胞的0.5-1%。
白细胞计数分类实验报告
白细胞计数分类实验报告一、实验目的白细胞计数分类是临床检验中的一项重要常规检查，通过对血液中白细胞的种类和数量进行测定和分析，有助于了解机体的健康状况，诊断疾病，观察疗效以及判断预后。
本次实验的目的是熟练掌握白细胞计数分类的操作方法，准确识别各种白细胞的形态特征，并对实验结果进行准确的分析和报告。
二、实验原理血液经稀释液稀释后，在显微镜下计数一定范围内的白细胞总数，然后对白细胞进行分类计数，计算出各类白细胞所占的比例。
白细胞分类主要依据细胞的大小、形态、细胞核的形态和细胞质的染色特点等进行鉴别。
三、实验器材1、显微镜2、微量吸管3、计数板4、盖玻片5、血涂片6、瑞氏染液7、香柏油8、乙醇9、乙醚10、棉球11、生理盐水四、实验步骤1、准备工作清洁显微镜，检查其各部件是否正常。
准备好计数板和盖玻片，确保其干净、无划痕。
2、采血与稀释用微量吸管吸取末梢血20μl，加入 038ml 白细胞稀释液中，充分混匀。
3、充池将稀释后的血液小心地注入计数板的计数池中，注意避免产生气泡和液体溢出。
4、计数静置 2-3 分钟，待白细胞完全下沉后，在显微镜下用低倍镜观察计数池四角的 4 个大方格内的白细胞总数。
5、白细胞分类制备血涂片，待自然干燥后，用瑞氏染液进行染色。
油镜下观察血涂片，根据白细胞的形态特征进行分类计数。
通常将白细胞分为粒细胞（包括中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞）、淋巴细胞和单核细胞。
6、计算白细胞总数＝ 4 个大方格内白细胞数／ 4 × 10 × 20 × 10⁶＝白细胞数／ L各类白细胞所占比例＝各类白细胞数／白细胞总数 × 100%五、实验结果本次实验共计数了 4 个大方格内的白细胞总数为 200 个，经过计算，白细胞总数为 10×10⁹/L。
各类白细胞的分类计数结果及比例如下：｜白细胞类型|计数个数|比例（％）｜｜｜｜｜｜中性粒细胞|120|60|｜淋巴细胞|50|25|｜单核细胞|20|10|｜嗜酸性粒细胞|8|4|｜嗜碱性粒细胞|2|1|六、结果分析1、正常参考值成人白细胞总数：（40 100）× 10⁹/L中性粒细胞：50% 70%淋巴细胞：20% 40%单核细胞：3% 8%嗜酸性粒细胞：05% 5%嗜碱性粒细胞：0 1%2、本次实验结果分析白细胞总数在正常范围内，提示机体的免疫系统处于相对稳定的状态。
白细胞分类计数实验报告
白细胞分类计数实验报告实验目的，通过显微镜观察和计数白细胞，了解不同类型白细胞的形态特征和数量分布，掌握白细胞分类计数的实验方法。
实验仪器和试剂，显微镜、白细胞计数板、涂片、琼脂、血液标本。
实验步骤：1. 取一滴新鲜的血液标本，用吸管吸取血液滴在一块玻片上，再用另一块玻片迅速涂匀，制备涂片。
2. 将制备好的涂片放入琼脂中，用显微镜在高倍镜下观察和计数白细胞。
3. 随机选择视野，计数每个视野中不同类型白细胞的数量，并记录下来。
4. 统计多个视野的计数结果，计算出各类白细胞的平均数目。
实验结果：经过计数和统计，我们得到了不同类型白细胞的数量分布情况。
在本次实验中，我们观察到中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的数量分别为，中性粒细胞500个/μL，淋巴细胞200个/μL，单核细胞50个/μL，嗜酸性粒细胞20个/μL，嗜碱性粒细胞30个/μL。
实验分析：通过本次实验，我们可以清晰地观察到不同类型白细胞在血液中的数量分布情况。
中性粒细胞是最多的一类白细胞，占据了绝大多数；其次是淋巴细胞，单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞数量相对较少。
这些数据也符合正常血液中白细胞的数量分布规律。
实验总结：本次实验通过显微镜观察和计数白细胞，掌握了白细胞分类计数的实验方法，并且得到了不同类型白细胞的数量分布情况。
通过实验，我们对血液中白细胞的数量分布有了更清晰的认识，也提高了我们的实验操作能力和数据分析能力。
实验中也发现了一些问题，比如在制备涂片的过程中需要注意操作的快速和准确，以避免血液凝固导致涂片质量不佳。
在显微镜观察过程中，需要仔细观察和计数，避免出现计数错误。
这些问题在今后的实验中需要引起重视和改进。
通过本次实验，我们对白细胞分类计数有了更深入的了解，也为今后的相关实验打下了良好的基础。
结语：白细胞分类计数实验是一项重要的实验内容，通过本次实验，我们不仅掌握了实验方法，还对血液中白细胞的数量分布有了更加清晰的认识。
白细胞分类计数
白细胞分类计数白细胞（White Blood Cells，WBC）是人体内重要的免疫细胞之一，具有识别和消灭病原体的功能。
通过对白细胞的分类计数，可以了解人体免疫系统的健康状态，辅助医生判断是否存在炎症、感染、过敏等疾病。
本文将介绍常见的白细胞分类及计数方法。
一、嗜中性粒细胞（Neutrophil）嗜中性粒细胞是最常见的一类白细胞，占据总白细胞数的60-70%。
它们是人体最重要的防御细胞，能通过吞噬和杀死病原体来保护机体免受感染。
计数嗜中性粒细胞的常用方法包括：1. 血液常规检查：通过自动化检测仪器对血液样本中的白细胞进行分类和计数。
结果以绝对计数（白细胞计数）或百分比（白细胞分类百分比）的形式呈现。
2. 酶标仪法：利用特定抗体标记嗜中性粒细胞表面的抗原，然后测定抗原与抗体的反应来计数嗜中性粒细胞。
3. 流式细胞术：使用流式细胞仪检测样本中嗜中性粒细胞的数量和性质。
二、淋巴细胞（Lymphocyte）淋巴细胞是免疫系统的重要成员，占据总白细胞数的20-30%。
它们在人体的免疫反应中起到关键作用，能生成抗体来识别和攻击具体的病原体。
计数淋巴细胞的方法包括：1. 流式细胞术：将样本中的淋巴细胞与特定抗体结合，然后使用流式细胞仪测量相应的细胞群体，从而计数淋巴细胞的数量。
2. 酶标仪法：与嗜中性粒细胞类似，使用特定抗体标记淋巴细胞并测定抗原与抗体的反应来计数淋巴细胞。
三、单核细胞（Monocyte）单核细胞占据总白细胞数的3-8%，是一类具有吞噬能力的免疫细胞。
它们主要负责清除细菌和死亡细胞，同时参与调节炎症反应。
计数单核细胞的常见方法有：1. 静态显微镜法：将血液样本涂片制备后，在显微镜下观察和计数单核细胞的数量。
2. 自动化细胞计数仪：通过自动化检测仪器对血液样本中的白细胞进行分类和计数，其中包括单核细胞的计数。
四、嗜酸性粒细胞（Eosinophil）嗜酸性粒细胞占据总白细胞数的1-4%，主要参与过敏反应和抗寄生虫感染的免疫反应。
一、白细胞计数(White Blood Cell count WBC)及白细胞 ...
四大格所见WBC平均值 判断标准： WBC ≤4×109/L ,RCS ＜30% WBC (4.1--14.9)×109/L, RCS ＜20% WBC≥ 15×109/L, RCS ＜15%
三、变异百分率(v)评价法
V= I Xi-Xm l ×100
中性粒细胞neutrophil：
2）中性粒细胞增多（neutrophilia）：
反应性： 急性感染或炎症 严重的组织损伤或坏死 急性溶血、急性失血 急性中毒 恶性肿瘤
异常增生性：白血病 骨髓增殖性疾病
3）中性粒细胞减少（neutropenia）：
感染 血液系统疾病 理化损伤 单核-吞噬细胞系统功能亢进 自身免疫性疾病
（二）白细胞分类计数
淋巴细胞lymphocyte：
★淋巴细胞
1）增多（lymphocytosis）： 感染性疾病 淋巴细胞性恶性疾病 其他 ：免疫性疾病、急性传染病恢复期 相对增多 2）减少（lymphocytopenia）： 相对减少 绝对减少（接触放射线、应用肾上腺皮质激素、
DC percent（%） Absolute value（ ×109/L）
二、白细胞计数及分类计数的临床意义：
1．白细胞数量的变化： （1）生理变化：
年龄、时间、环境、身体状况等 （2）病理变化：
leukopenia leukophilia 主要受中性粒细胞等各类细胞数量的影响
（二）白细胞分类计数
Cellular morphology
一． The lymphocyte is smaller than neutrophil and possesses an ellipsoidal, slightly eccentrical nucleus.
白细胞分类计数参考方法
白细胞分类计数参考方法白细胞是人体免疫系统中的重要成分，通过对白细胞的分类计数可以了解人体的免疫状况。
白细胞分类计数参考方法是一种常用的检测手段，下面将介绍几种常见的白细胞分类计数参考方法。
一、血液细胞分类计数血液细胞分类计数是一种常见的白细胞分类计数方法，通过对血液中的白细胞进行计数和分类，可以了解人体的免疫功能和炎症反应情况。
常用的血液细胞分类计数方法有血细胞分析仪和血片染色法。
1. 血细胞分析仪血细胞分析仪是一种先进的仪器设备，可以自动对血液中的细胞进行计数和分类。
通过血细胞分析仪，可以快速得到各种类型白细胞的数量和比例。
这种方法快速、准确，且可以同时检测多种血细胞参数，是目前临床常用的白细胞分类计数方法之一。
2. 血片染色法血片染色法是一种传统的白细胞分类计数方法，通过染色血片并在显微镜下观察和计数白细胞的种类和数量。
常用的染色方法有吉姆萨染色和偏碱性染色。
这种方法操作简便，成本较低，但相对于血细胞分析仪，它的计数速度较慢且存在主观性。
二、骨髓细胞分类计数骨髓细胞分类计数是一种更细致的白细胞分类计数方法，通过对骨髓细胞进行计数和分类，可以了解人体造血系统的功能和疾病情况。
常用的骨髓细胞分类计数方法有骨髓涂片染色法和骨髓细胞流式细胞术。
1. 骨髓涂片染色法骨髓涂片染色法是一种常见的骨髓细胞分类计数方法，通过染色骨髓涂片并在显微镜下观察和计数骨髓细胞的种类和数量。
这种方法可以更准确地反映骨髓细胞的分布和比例，对于一些骨髓疾病的诊断和治疗具有重要意义。
2. 骨髓细胞流式细胞术骨髓细胞流式细胞术是一种先进的骨髓细胞分类计数方法，通过利用流式细胞仪对骨髓细胞进行染色和分析，可以快速准确地得到骨髓细胞的种类和数量。
这种方法具有高灵敏度、高准确性和高通量的优点，适用于复杂骨髓细胞疾病的检测和研究。
三、尿液细胞分类计数尿液细胞分类计数是一种非侵入性的白细胞分类计数方法，通过对尿液中的细胞进行计数和分类，可以了解泌尿系统的炎症和感染情况。
白细胞分类计数参考方法
白细胞分类计数参考方法白细胞分类计数是一项重要的检验指标，用于评估人体免疫功能和诊断炎症、感染等疾病。
白细胞的分类计数需要准确可靠的方法和标准参考值，以确保结果的科学性和可比性。
本文将介绍白细胞分类计数的参考方法，帮助读者更好地理解和运用相关的检验结果。
一、白细胞分类计数的方法目前，常用的白细胞分类计数方法有手工计数法和自动计数法两种。
手工计数法是最传统的方法之一，通过显微镜观察染色后的血液标本，手动计数各类白细胞数量。
这种方法操作简单，成本较低，适用于小样本量和基础设备薄弱的实验室。
然而，手工计数法存在操作者主观性强、计数误差和速度较慢等缺点，容易产生结果的不稳定性。
自动计数法则是近年来快速发展的技术，主要利用血液细胞分析仪（Hematology Analyzer）实现白细胞的分类和计数。
该方法通过光学、流式细胞术等原理，自动识别和计算不同类型白细胞的比例和绝对值。
相比手工计数法，自动计数法具有高精度、高通量、快速便捷等优势，大大提高了检验效率和结果的准确性。
二、白细胞分类计数的参考值白细胞分类计数的参考值是指正常人群中不同类别白细胞的数量范围。
这些参考值是通过大样本的健康人群进行统计，经过相关统计学分析和计算得出的。
一般来说，白细胞分类计数的参考值包括中性粒细胞（Neutrophils）、淋巴细胞（Lymphocytes）、单核细胞（Monocytes）、嗜酸性粒细胞（Eosinophils）和嗜碱性粒细胞（Basophils）等五种白细胞的比例和绝对数量。
不同实验室或不同地区的参考值可能存在差异，因此在运用时需要结合具体情况进行解读。
同时，个体差异、年龄、性别、生理状态等因素也可能对白细胞分类计数的参考值产生影响，因此需综合分析结果，避免过度解读或片面评估。
三、进一步优化白细胞分类计数方法为了进一步提高白细胞分类计数的准确性和可比性，一些方法和技术逐渐得到应用。
1. 高级染色技术：传统的白细胞分类计数主要依靠各类染色液的着色效果区分细胞类型。
3白细胞分类和计数
一.白细胞计数 试验目的及要求：
1.掌握改良牛鲍计数板计数池的结构原理及技 术方法。 2.熟练使用一次性微量定量吸管。 3.掌握目视法计数白细胞的原理及方法。
1.改良牛鲍计数板计数池计数原理
一定稀释倍数的血液或者体液,混匀后滴 入具有固定体积和精密划分刻度的血细胞计 数板中,在显微镜下对所选择区域中的细胞 进行计数,再乘以稀释倍数,即可换算成单位 体积内的细胞数.
操作步骤：
1.加入稀释液：0.38ml。 2.吸取血液20ul加入到稀释液中混匀。 3.充池。 4. 计数：在低倍镜下计数四角4个大方格内的白 细胞总数。 5.计算：
白细胞＝[4个大方格内白细胞数量（N） /4]x10x20x106＝(N/20)x109/L
注意事项：
1.充池不能有气泡，充好后不能随意移动。 2.计数池内细胞应该分布均匀，各大方格细胞数相 差不应大于8个，两次重复计数误差不超过10%。 3.细胞数量过多或者过少时应增大或减少稀释倍数。
牛鲍计数板的结构
大方格
中方格
1个大方格容积=1mm x 1mm x0.1mm=0.1mm3=0.1ul
中方格
计数时应遵循的原则及注意事项：
1.细胞充池后应充分沉淀后再计数.
2.凡压线的细胞按照数上不数下、数左不数右的原 则，避免漏数或重复计数。注意识别非细胞成分。
2. 微量吸管的使用及注意事项：
直接流水冲洗3-5分钟 （切勿先倒掉染液）
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涂片经水洗干燥后用油镜 分类计数100个白细胞
李 四
血涂片的观察
低倍镜观察 1.染色情况(满意、偏酸、偏碱） 2. 细胞分布情况 油镜下分类计数：体尾交界处。 油镜分类时应按一定走向，不要重复计数。
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显微镜计数法
3.计数池
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显微镜计数法
3.计数池 各池 刻划有9ｍｍ2面积 的刻度，分为 9个 大方格，每格长、 宽各1ｍｍ，面积1 ｍｍ2，体积为 0.1 ｍｍ３，容量 0.1μl 。
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计数白细胞的四个大方格
四个角的大 方格都用单线划 分为16个中方格 ，为计数密度小 的（白）细胞用 。
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稀释液中各组分的作用
蒸馏水— 低渗溶解红细胞， 乙 酸— 可加速红细胞溶解，同时乙酸能固
定核蛋白，使白细胞核显现，便于辨 认。 染 料— 使核略着色，且易与红细胞稀释液 区别。
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显微镜计数法
【操作】 １．取小试管１支，加入白细胞稀释液0.38ｍｌ。 ２．用微量吸管准确吸取外周血20ul。 ３．擦去管尖外部余血，立即将吸管插入盛有稀释液的试
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显微镜计数法
【器材】 1.显微镜（目镜10×；物镜10×） 2.微量吸管（Hb吸管） 传统的Hb吸管玻璃
上有10µl和20µl（误差＜±1%）两个刻度 。使用前应经严格校正。橡胶乳头提供负 压
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Hb吸管的消毒清洗
每次使用后，应 经2ｇ/Ｌ过氧乙酸浸 泡2ｈ消毒。然后依 次用蒸馏水冲洗， →0.95Ｌ/Ｌ乙醇除 脂脱水，→乙醚干燥 后，才能再次使用。 注意清洗的顺序不可 颠倒。
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镜下白细胞形态
似成熟蚕卵 ，中央核深染， 胞质色淡。
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显微镜计数法
5.计数方法 用低倍镜依次计数四
角的四个大格内的白细胞 数。对于压线的白细胞， 应采取数上不数下；数左 不数右（左、上计入，右 、下弃去）的原则，保证 计数域的一致性，使计数 准确。
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外周血常见白细胞的种类与功能 白细胞的寿命和归宿
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学习目标
1.叙述白细胞显微镜计数法的原理、试剂组 成、注意事项
2.学会白细胞显微镜计数法的操作方法 3.准确识别外周血常见正常和异常白细胞形
态 4.学会白细胞分类计数方法
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外周血常见白细胞的种类与功能
(一)外周血常见白细胞的种类 1.白细胞的形态：
白细胞检验测定方法及 分类计数
2020年4月29日星期三
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
本章目录
第一节 白细胞生理概要 第二节 白细胞计数 第三节 白细胞分类计数 第四节 中性粒细胞常见的形态变化 第五节 白细胞计数和白细胞分类计数的临床意义 第六节 嗜酸性粒细胞计数 第七节 红斑狼疮细胞检验
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第一节 白细胞生理概要
容量： 0.1μl/大方格
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计数红细胞的五个中方格
中央的一个大方格 ，用双线划分为25 个中方格，每个中 方格又被单线划分 为16个小方格，共 有400个小方格， 供计数密度大的（ 红）细胞用。
容量： 0.1μl/大方格 0.004μl/中方格
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４.盖玻片
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稀释倍数的确认
稀释倍数＝（溶质＋溶剂）/溶质 注意：体积单位需一致后方能运算。
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白细胞的寿命
粒细胞： 10～15天 淋巴细胞：数天～20余年 单核细胞：数月
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白细胞的归宿
衰老的粒细胞被单核-吞噬细胞系统清除，也 有一部分从口腔、气管、消化道和泌尿生殖道排 出。
B淋巴细胞经抗原刺激后分化为浆细胞，产生特 异性抗体，参与体液免疫。T淋巴细胞经抗原致敏 后，可产生多种免疫活性物质，参与细胞免疫。 粒-单核系祖细胞在骨髓经分化成原始单核细胞 后发育为成熟单核细胞，释放入血液。
无色有核，球形，直径7μm～25μm。 2.白细胞的种类（形态分类）：
三类五种--------
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中性粒细胞（N） 粒细胞 嗜酸粒细胞（E）
嗜碱粒细胞（B）
白细胞 淋巴细胞 （L）
单核细胞 （M）
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白细胞的发育
起源于骨髓多能造血干细胞。
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白细胞的功能
中性粒细胞：具有较强的运动能力和吞噬活性。胞 内酶有复杂的杀菌系统。
嗜酸粒细胞：可作变形运动，吞噬抗原抗体复合物 ，灭活组织胺减轻过敏反应。
嗜碱粒细胞：与IgE具有较强的结合力，脱粒释放组 胺导致速发性变态反应。
淋巴细胞：参与体液免疫和细胞免疫。 单核细胞：有强大的吞噬功能，传递抗原信息。
让我们共同计数下列大格的细胞
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让我们再试一次：
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显微镜计数法
【计算 】
四个大格白细胞数
白细胞数／Ｌ＝ ———————— × 10× 20× 106
4
式中：÷４ 得每个大格（即 0.1µl）内白细胞平均数 ×10 因一大格容积为0.1µl，换算为1µl ×20 血液稀释倍数。 ×106 将1µl换算为 1Ｌ。
特制的计数池专用盖片，要求玻璃表面 平整光滑，有一定重量，不被细胞悬液所抬 浮，厚度应为0.4ｍｍ～0.7ｍｍ。盖玻片两 面的平整度是：0.002ｍｍ以内，
大小: 24mm×20mm×0.6mm。
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显微镜计数法
【试剂】 白细胞稀释液
冰乙酸 2.0ｍｌ 10g／Ｌ亚甲蓝（或结晶紫）数滴 蒸馏水加至100ｍｌ
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学习目标
1.叙述白细胞显微镜计数法的原理、试剂 组成、注意事项。
2.学会白细胞显微镜计数法的操作方法 3.准确识别外周血常见正常和异常白细胞 形态。 4.学会白细胞分类计数方法。
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显微镜计数法
【原理】 用白细胞计数稀释液，将血液稀释一定倍 数并破坏红细胞后，混匀充入计数池中，在 显微镜下计数一定容积内的白细胞数，经换 算即可求得每升血液中白细胞的总数。
管底部，轻轻将血放出，并吸取上清液漱洗吸管２次～３次 ，注意每次不能冲浑稀释液，最后用手振摇试管混匀。
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操作
４.充液 将计数 板和盖玻片擦净，盖片 盖在计数池上，用毛细 滴管或玻璃棒取已混匀 的细胞悬液1滴，充入 计数池与盖玻片间的缝 隙中，静置2min～ 3min，待白细胞下沉 。