血清总胆固醇(TCH)测定
血清总胆固醇的测定
实验原理
• 第一步：血清胆固醇酯可被胆固醇酯酶水 解为游离胆固醇和游离脂肪酸 。
• 第二步：胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作 用下生成△4-胆甾烯酮和H2O2。
• 第三步：H2O2在4-氨基安替比林和酚存在 时，经过氧化物酶催化，反应生成苯醌亚 胺非那腙的红色醌类化合物，其颜色深浅 与标本中TC含量成正比。
• 鱼类。乌鱼又称黑鱼性寒味甘，能补脾利水同时 它又是一种高蛋白低脂肪食品。青鱼性平味甘， 能补气健脾化湿。鳆鱼又称鲍鱼，肉性平味甘咸， 蛋白质含量极高，而脂肪含量很低的清补营养品。 黄鳝甘温，古代医家认为它有添精益髓，又有通 血脉、壮筋骨的作用同时它又是一种低脂食品。 另外，如黄瓜、海带、羊栖菜、海藻、槐花等食 物，均有降低血中胆固醇的效果。
试剂
• 基础液：100ml 0.1mol/L 磷酸缓冲液 （pH=6.7）(含胆酸钠129mg),4-氨基安替 比林16mg,苯酚132mg,TritionX-100 0.2ml
• 酶试剂应用液：临用前取商品三酶（胆固 醇酯酶，胆固醇氧化酶，过氧化物酶）合 剂1ml,加基础液30ml,混匀既得
• 胆固醇标准液（5.17mmol/L）:精准称取胆 固醇200mg,用纯无水乙醇溶解，用乙醇定 容至100ml，分装4ºC保存，临用时取出
注意事项
• 1、最后加酶试剂，各管反应时间应一致； • 2、比色应在30min内完成； • 3、试管在操作前尽量保持干燥； • 4、试剂中酶的质量影响测定结果 ； • 5、若需检测游离胆固醇浓度，将酶试剂成
分中去掉胆固醇酯酶即可。
• 此法中血红蛋白高于2g/L时引起正干扰；胆 红素高于0.1g/L时有明显负干扰；血中维生 素C与甲基多巴浓度高于治疗水平时，会使 结果降低。高TG血症对本法无明显影响。 检测TC的血清(浆)标本密闭保存时，在4℃ 可稳定1周，－20℃可稳定半年以上。
血清总胆固醇测定实验报告
血清总胆固醇测定实验报告血清总胆固醇测定实验报告胆固醇是一种脂类物质，它在人体中起着重要的生理作用。
然而，当胆固醇水平过高时，就会增加心血管疾病的风险。
因此，了解自己的胆固醇水平对于保持健康至关重要。
本实验旨在测定血清中的总胆固醇水平，并通过结果分析对参与者的健康状况进行评估。
实验材料和方法：1. 实验材料：- 血清样本- 高精度血清胆固醇测定试剂盒- 试剂盒使用说明书- 分光光度计- 定量移液器和移液枪- 试管和离心管2. 实验步骤：a. 收集参与者的血液样本，并将其离心分离血清。
b. 根据试剂盒使用说明书，准备所需试剂和标准品。
c. 将标准品和血清样本分别加入试管中，并按照说明书中的步骤进行试剂添加和混合。
d. 使用分光光度计测量各试管中的吸光度，并记录结果。
e. 根据标准曲线计算出各样本中的总胆固醇浓度。
实验结果：通过实验测定，我们得到了参与者血清中的总胆固醇浓度。
根据标准曲线和试剂盒提供的计算公式，我们可以将各样本的吸光度值转换为胆固醇浓度。
根据实验数据，我们将参与者的胆固醇水平分为以下几个等级：1. 理想范围：参与者的胆固醇水平在正常范围内，表明其心血管健康状况良好。
他们应继续保持健康的生活方式，包括均衡的饮食、适当的运动和定期体检。
2. 边缘范围：参与者的胆固醇水平略高于正常范围，但尚未达到危险水平。
他们应该注意饮食结构，减少高胆固醇食物的摄入，并增加运动量。
此外，定期监测胆固醇水平也是必要的。
3. 高风险范围：参与者的胆固醇水平明显升高，表明他们存在心血管疾病的风险。
他们应立即采取行动，改变生活方式，如低脂饮食、戒烟、减少酒精摄入等。
此外，医生可能会建议他们接受进一步的检查和治疗。
实验讨论：通过本实验，我们不仅可以测定参与者血清中的总胆固醇水平，还可以根据结果评估其心血管健康状况。
然而，需要注意的是，本实验只是初步评估，并不能替代专业医生的诊断和建议。
对于高风险范围的参与者，他们应该咨询医生，制定个性化的治疗方案。
血清总胆固醇的测定
八、思考题
本次测定的血清样本Ch值是否正腹血清胆固醇浓度为2.6—6.5mmol/L
七、注意事项 1．测定标本要求空腹抽血。 2. 酶法测定胆固醇的前二步反应特异性高，而指 示反应（第三步反应）特异性则较差，干扰反应 往往发生在指示反应。溶血标本、黄疸标本及高 血脂标本均不影响测定结果，但血液中一些还原 性物质，如维生素C、谷胱甘肽及左旋多巴可与 色原性氧受体竞争H2O2，使结果出现偏差。 3．胆固醇酯酶对胆固醇酯的水解不完全，造成结 果偏低。
• 工作液：临用时按需要量将试剂1和2按9：1的比例混匀 即成，其他工作液置4℃冰箱一周内稳定。
• 标准胆固醇液一支：1ml，浓度为4.09 m mol /L (100mg/dl)。
四、器材
试管、微量加样器、 恒温水浴箱、分光光度计等。
五、操作 • 取试管3支，编号，按下表依次操作：
六、计算
• 胆固醇浓度（mmol/L）= A测/A标×C标 • C标为4.09mmol/L
一、目的
了解胆固醇的测定方法 掌握胆固醇测定临床意义
二、原理
胆固醇酯加水在胆固醇酯酶的作用下生成游离胆固醇和脂肪酸。 游离胆固醇加氧在胆固醇氧化酶的作用下生成胆脘-4-烯-3-酮和过氧 化氢，过氧化氢再加4-氨基氨替比林和酚在过氧化物酶的作用下生成 红色的苯醌亚胺。其反应如下：
三、试剂 宁波慈城生化试剂厂生产的胆固醇测定试剂盒中包括： • 缓冲液二瓶：90ml×2 • 酶溶液一瓶：10ml×2
总胆固醇实验报告
实验名称：血清总胆固醇测定实验目的：通过本实验，掌握血清总胆固醇的测定方法，了解血清总胆固醇在临床诊断和预防治疗中的重要性。
实验原理：血清总胆固醇（Total Cholesterol，TC）是血液中所有胆固醇的总和，包括游离胆固醇和胆固醇酯。
血清总胆固醇的测定方法主要有酶法、比色法、沉淀法等。
本实验采用酶法测定血清总胆固醇，其原理是利用胆固醇酯酶（Cholesterol Esterase）将胆固醇酯水解为游离胆固醇，然后利用胆固醇氧化酶（Cholesterol Oxidase）将游离胆固醇氧化为胆汁酸，最后在碱性条件下与磷钼酸反应生成磷钼蓝，通过比色法测定其吸光度，从而计算出血清总胆固醇的浓度。
实验材料：1. 血清样品：取自健康志愿者，经离心分离后获得。
2. 胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、磷酸盐缓冲液、磷钼酸、抗坏血酸、硫酸铜、邻苯二甲酸氢钾、氯仿、无水乙醇等试剂。
3. 仪器：酶标仪、移液器、恒温水浴锅、离心机等。
实验步骤：1. 样品处理：取血清样品1.0ml，加入氯仿和无水乙醇（1:2，V/V）混合液5.0ml，涡旋混合，离心10分钟，取上清液待测。
2. 标准曲线绘制：将胆固醇标准品配制成一系列浓度梯度的标准溶液，分别加入胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、磷酸盐缓冲液、磷钼酸等试剂，按照实验步骤进行操作，测定吸光度。
以胆固醇浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 样品测定：取处理后的血清样品，按照标准曲线绘制步骤进行操作，测定吸光度。
根据标准曲线，计算样品中血清总胆固醇的浓度。
实验结果：1. 标准曲线绘制：以胆固醇浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
结果显示，胆固醇浓度在0.5-10.0mg/dl范围内，吸光度与胆固醇浓度呈线性关系。
2. 样品测定：根据标准曲线，计算样品中血清总胆固醇的浓度为X mg/dl。
实验讨论：1. 血清总胆固醇是人体内重要的脂质成分，其浓度异常与心血管疾病、动脉粥样硬化等疾病密切相关。
高质量体检项目解读血清总胆固醇高密度脂蛋白胆固醇比值(TCHDLC)异常指标的分析
高质量体检项目解读血清总胆固醇高密度脂蛋白胆固醇比值（TCHDLC）异常指标的分析血清总胆固醇高密度脂蛋白胆固醇比值（TCHDLC）是体检中常见的血脂指标之一，能够反映人体内脂质代谢状况和患心血管疾病的潜在风险。
本文将对TCHDLC异常指标的含义及其可能的健康影响进行详细解读。
一、TCHDLC的正常范围和意义TCHDLC是总胆固醇（TC）与高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）之比值，其正常范围通常为2.5-4.5。
当TCHDLC低于2.5时，说明总胆固醇含量较低，可能意味着患有营养不良、吸收障碍等问题；而当TCHDLC高于4.5时，表示总胆固醇含量相对较高，可能存在心血管疾病的潜在风险。
二、TCHDLC异常指标的分析1. TCHDLC偏低：当TCHDLC低于正常范围时，主要可能原因如下：①脂肪吸收障碍：部分人由于消化系统疾病等原因，会导致脂肪吸收障碍，使得总胆固醇含量降低，从而使TCHDLC偏低。
②营养不良：长期摄入不足的总能量或脂肪含量低的食物，可能会导致总胆固醇水平下降，进而导致TCHDLC异常。
③甲状腺功能亢进：甲状腺功能亢进会导致人体代谢加快，包括脂代谢也会加速，从而导致总胆固醇水平降低。
2. TCHDLC偏高：当TCHDLC高于正常范围时，主要可能原因如下：①高胆固醇摄入：长期高胆固醇饮食（如大量摄入动物内脏、黄油等食物）会增加总胆固醇水平，引发TCHDLC偏高。
②缺乏运动：缺乏体育锻炼会使脂代谢紊乱，增加总胆固醇含量，导致TCHDLC异常升高。
③高脂饮食：长期高脂饮食（如过多食用油炸食品、烧烤食品等）会导致血脂升高，进而引发TCHDLC异常。
三、TCHDLC异常指标的潜在健康影响1. TCHDLC偏低的健康影响：TCHDLC偏低可能暗示机体存在隐性的营养不良、吸收障碍等问题，需要及时寻找原因并进行调整。
此外，TCHDLC偏低还可能增加心血管疾病的风险，需要进一步关注血脂水平，并采取合适的调控措施。
检验科生化总胆固醇TCH测定的标准操作规程
检验科生化总胆固醇（TCH ）测定的标准操作规程【目的】体外检测血清总胆固醇(TC)含量。
【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP ，室负责人监督落实。
2.本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h ，不饮酒24h 后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理上海科华生物工程股份有限公司生产的总胆固醇测定试剂盒采用的是氧化酶法。
OH ESPAS O H O H O O H 222222244+−−−→−+-+-∆+−−−−→−++−−−→−+醌亚胺氨基安替比林胆甾烯酮游离胆固醇脂肪酸游离胆固醇总胆固醇过氧化物酶胆固醇氧化酶胆固醇酯酶ESPAS:N-乙基-N-(3-磺丙基)-间-茴香胺血清中的总胆固醇在胆固醇酯酶的作用下水解成游离胆固醇和脂肪酸,游离胆固醇在胆固醇氧化酶的催化下,氧化成Δ4-胆甾烯酮和双氧水,最后双氧水在过氧化物酶的催化下与色原底物4-氨基安替比林和ESPAS 反应生成红色化合物醌亚胺。
由于醌亚胺在波长550nm处有吸收峰,所以在一定底物浓度范围内，550nm处吸光度的变化值与样本中总胆固醇的含量成正比.二、试剂1.试剂试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供R1：胆固醇酯酶、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶、ESPAS（ADPS）；R2：胆固醇氧化酶、 -氨基安替比林；。
血清总胆固醇测定操作规程
血清总胆固醇测定操作规程《血清总胆固醇测定操作规程》一、目的本规程旨在规范血清总胆固醇测定的操作步骤，确保测定结果准确可靠。
二、适用范围本规程适用于各医疗机构进行血清总胆固醇测定的操作。
三、仪器与试剂1. 仪器：分光光度计2. 试剂：血清总胆固醇测定试剂盒四、操作步骤1. 准备工作a. 开机预热分光光度计，确保仪器处于工作状态。
b. 取出血清总胆固醇测定试剂盒，检查试剂有效期和存储条件。
c. 准备标准品和样本待测血清。
2. 操作流程a. 取出试剂盒中的标准品，按照说明书稀释成不同浓度。
b. 加标准品和待测血清分别加入试剂管中，混匀后置于恒温水浴中反应一定时间。
c. 反应结束后，使用分光光度计在特定波长下测定吸光值。
3. 结果计算a. 使用标准品的吸光值绘制标准曲线。
b. 读取待测血清的吸光值，根据标准曲线计算出血清总胆固醇的浓度。
五、结果判定根据患者血清总胆固醇的测定值，参照相关标准进行结果判定和医疗建议。
六、注意事项1. 操作人员应熟练掌握仪器和试剂使用方法，严格按照操作规程进行操作。
2. 试剂及仪器的质量控制应在每次实验前进行验证。
3. 操作过程中应注意个人防护，避免污染试剂和样本。
七、记录与保存1. 对每次测定的操作步骤、结果和质控记录进行详细记录，确保测定结果可追溯。
2. 相关记录资料应按规定保存，以备查。
八、附则对于特殊情况的处理和异常结果的分析，应根据实际情况进行相应操作，并记录详细的处理过程。
以上即为《血清总胆固醇测定操作规程》，希望操作人员严格按照规程执行，确保测定结果的准确性和可靠性。
总胆固醇测定概述
总胆固醇测定概述
总胆固醇测定：血浆胆固醇包括胆固醇酯(70%)和游离胆固醇(30%)两种。
血浆和组织中所含胆固醇经常处于交换状态。
由于胆固醇不断进、出血液，所以血浆胆固醇不仅反映胆固醇摄取与合成情况，还反映携
带胆固醇的各种脂蛋白的合成速度，以及影响脂蛋白代谢的受体情况。
血浆胆固醇主要存在于LDL中，其次为HDL和VLDL，CM中含量最少。
胆固醇在维持机体正常功能上是非常重要的。
其主要功能有：①
胆固醇是所有细胞膜和亚细胞器膜上的重要组成成分;②是胆汁酸的唯
一前体;③是所有类胆固醇激素，包括性腺和肾上腺激素的前体等。
参考值：TC水平因生活条件(饮食、运动等)而异，随年龄上升。
中青年男性略高于女性，老年女性高于男性。
我国血脂异常防治建议
中以≤5.17mmol/L(200mg/dl)为合适水平，5.20-5.66 mmol/L(201-21
9mg/dl)为临界范围(或边缘升高)，≥5.69 mmol/L(220mg/dl)为升高。
美国以≥6.21 mmol/L(240mg/dl)为高胆固醇血症。
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授课对象：06级检验1-5班 课 时：2学时
血清总胆固醇（TCH ）测定
目 标：1.掌握酶法测血清TCH 的基本原理及注意事项。
2.熟练操作步骤。
3.了解TCH 测定的主要临床意义。
实验用品：总胆固醇酶试剂盒（3v ），，721型分光光度计，YZ-602稀释器，血
清等。
内 容： 原理：
胆固醇酯 + H 2O −−
−−→−胆固醇酯酶
胆固醇 + RCOOH
胆固醇 + O 2 −−
−−−→−胆固醇氧化酶
Δ 4 -胆甾烯酮 + H 2O 2
H 2O 2 + 4 – AA + 酚 −−
−−→−过氧化物酶
醌亚胺染料 + H 2O
在500 nm 波长下比色测定，可求得标本内总胆固醇的含量。
操作步骤：
加入物 R S B 血清（μl ） 15 — 标准液(μl) — 15 — 蒸馏水 — — 15 酶工作液(ml)
1.5
1.5
1.5
混匀，置37℃水浴6～10分钟。
以B 管校“0”，500 nm 波长比色，取A 值。
结果计算：
TCH (mmol/L) = A R / A S × 5.17
结果报告：
TCH：mmol/L
正常参考值： 2.33～5 .69mmol/L
临床意义：
TCH↑：常见于动脉粥样硬化等。
TCH↓：甲亢、严重贫血、急性感染等。
注意事项：
1.试剂与样品的用量可按其比例放大缩小，计算公式不变。
2.溶血标本胆红素引起正偏差，维生素C、谷胱甘肽、氟化物引起负偏差。
3.样品中的总胆固醇＞15.5mmol/L, 用生理盐水稀释后再重新测定，结果乘以稀释倍数。
课后小结：。