抗原抗体结合的影响因素
抗原抗体反应的基本原理
一、抗原抗体反应的基本原理：Ag与Ab的特异性结合是基于Ag决定簇与超变区分子间的结构互补性和亲和性。
二、Ag与Ab结合力有四种：静电引力，范德华力，氢键结合力，疏水作用力四种结合力的强弱。
疏水>氢键>静电>范德华力三、Ag与Ab反应特点：特异性，比例性，可逆性。
沉淀反应曲线的意义：曲线的高峰部分是AgAb分子比例合适的范围，称为AgAb的等价带。
在此范围内结合充分，沉淀物形成快而多。
当ab过量时称为前带，反之后带。
四、影响AgAb反应因素，主要有两方面，一、反应物自身因素。
环境因素，电解质，ph，温度。
五、佐剂：与Ag一起或预先注入机体内，可增强机体对该Ag免疫应答能力或改变应答类型的物质。
六、单克隆抗体：由一个B细胞克隆产生的，只能识别某一个抗原表位的高度特异性Ab称为单克隆抗体七、Ch50试验：即补体50%溶血试验，是根据补体能使致敏的SRBC发生溶血的原理而建立起测定补体活性的试验，该试验以50%溶血作为终点指标，因此称为ch50试验。
八、超敏反应：是指机体对某些抗原初次应答致敏后，再次接触相同抗原刺激时，所出现的一种以生理功能紊乱和组织细胞损伤为主的异常免疫应答。
九、M蛋白：单克隆免疫球蛋白，是B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成及顺序十分均一的异常单克隆免疫球蛋白；多见于多发性骨髓瘤、巨秋蛋白血症和恶性淋巴瘤，故命名为M蛋白。
十、AID：自身免疫性疾病：当机体免疫系统受某些内因、外因或遗传等因素作用产生针对自身正常或变性的自身抗原发生免疫应答，导致自身组织器官损伤或功能障碍所致的疾病称自身免疫性疾病。
十一、TAA:肿瘤相关抗原，非肿瘤细胞所特有的抗原成分，也少量存在于正常细胞，但是在肿瘤发生的机体可异常表达。
十二、GVHR：移植物抗宿主反应，由于移植物中的大量免疫活性细胞，受体免疫功能低下，供受体之间MHC抗原不符等引起杀伤宿主靶细胞的现象。
十三、包被：特异性抗原或抗体充分反应，形成固相抗体/载体复合物的过程。
简述抗原抗体反应的基本特点与影响因素
简述抗原抗体反应的基本特点与影响因素抗原抗体反应是指在机体内，抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物，从而触发免疫反应。
这种反应具有以下基本特点：1. 特异性：抗原抗体反应是高度特异的，即抗体只能与其所识别的特定抗原结合。
抗体通过其特异性的抗原结合位点与抗原结合，形成稳定的抗原抗体复合物。
2. 亲和力：抗体与抗原结合的亲和力直接影响抗原抗体反应的强度和稳定性。
亲和力越高，抗体与抗原结合越紧密，反应越强烈。
亲和力的高低取决于抗体的结构和抗原的特性。
3. 反应动力学：抗原抗体反应具有动态平衡的特点。
在反应初期，抗原与抗体结合的速率很快，但随着反应进行，反应速率逐渐下降，最终达到平衡。
平衡时，抗原抗体复合物的浓度达到一定的稳定值。
4. 反应强度：抗原抗体反应的强度取决于抗原和抗体的浓度。
当抗原浓度较低时，抗体与抗原结合的机会减少，反应弱；当抗原浓度较高时，抗体与抗原结合的机会增加，反应强。
5. 反应平台：抗原抗体反应的最佳pH和温度范围称为反应平台。
不同抗原抗体对反应平台的要求不同，有些在酸性环境中反应较强，有些在碱性环境中反应较强。
6. 影响因素：抗原抗体反应的强度受多种因素影响。
其中包括抗原和抗体的浓度、亲和力、结构、特异性，以及反应环境的pH、温度等。
此外，还有其他因素如反应时间、离子浓度、抗体的同种异种等也会对反应产生影响。
抗原抗体反应的特点和影响因素对于免疫学的研究和临床诊断有着重要意义。
抗原抗体反应的特异性使其成为检测和诊断疾病的重要手段。
通过设计特异性抗体，可以检测和鉴定特定抗原的存在与浓度变化，从而实现疾病的早期诊断和治疗监测。
抗原抗体反应的亲和力和反应动力学特性使其成为制备特定抗体和药物的重要手段。
通过调节抗原和抗体的结构和亲和力，可以提高抗体的亲和力和稳定性，从而更好地应用于药物研发和治疗。
了解抗原抗体反应的影响因素，可以优化反应条件，提高反应效率和特异性。
例如，调节反应的pH和温度，可以提高抗原抗体反应的效果；调节抗原和抗体的浓度，可以控制反应的强度和特异性。
免疫--抗原抗体反应
Avidity
• The overall strength of binding between an Ag with many determinants and multivalent Abs
Keq =
104
Affinity
106 Avidity
1010 Avidity
抗原抗体亲合力示意图
三、亲水胶体转化为疏水胶体
（三）绞链区
在IgＧ，IgＡ的CH1与CH2之间的区域称为绞链 区。
此区域含有大量脯氨酸，富有弹性及伸展性， 能使抗体分子与不同距离的抗原决定簇结合， 也利于暴露Ig分子上的补体C1q结合点而激活 补体。
第一节 抗原抗体反应的原理
抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间所发生 的特异性结合反应。 物质基础:
抗原 + 抗体
(亲水胶体) (亲水胶体)
抗原抗体复合物电解质 可见反应 (疏水胶体)
第二节 抗原抗体反应的特点
特异性 比例性
可逆性 阶段性
一、特异性
特异性：抗原与抗 体结合反应的专一 性
分子基础:抗原表位与抗体 分子高变区之间空间构型的 互补性
抗原抗体反应特异性示意图
交叉反应（cross reactions）
电解质: 生理盐水或缓冲液 酸碱度: pH6～pH9 温 度: 15℃～40℃，37℃最适
第四节 免疫学检测技术的类型
反应类型
实验技术
凝集反应 直接凝集试验
间接凝集试验
抗球蛋白试验
沉淀反应 液相沉淀试验
免疫电泳技术 补体参与 补体溶血试验 的反应
补体结合试验
结果判断 观察凝集现象 同上 同上 观察沉淀，检测浊度 观察扫描沉淀峰、沉淀弧 观察测定溶血现象
第一章抗原抗体反应讲解学习
三、亲水胶体转化为疏水胶体
抗体和大多数抗原同属蛋白质。在通常的 血清学反应条件下均带有负电荷，使极化 的水分子在其周围形成水化层，成为亲水 胶体，因此蛋白质不会自行凝集出现沉淀。 当Ag与Ab结合后，表面电荷减少，水化层 变薄；而且由于Ag-Ab复合物形成后，与水 接触的表面积减少，由亲水胶体转化为疏 水胶体。此时在电解质(如NaCl)的作用下， 使各疏水胶体之间进一步靠拢、沉淀，形 成可见的Ag-Ab复合物。
抗原抗体结合力示意图
l. 静电引力
➢ 抗原和抗体分子带有相反电荷的氨基和羧 基基团之间相互的引力，称为静电引力， 又称库伦引力。
➢例如，抗体分子上带电荷的碱性氨基酸的 游离氨基(-NH3+)和酸性氨基酸的游离羧基 (-COO-)可与抗原分子上带相反电荷的对应 基团相互吸引。这种引力的大小与两个相 互作用基团间的距离平方成反比。
2.范德华引力
➢ 抗原和抗体相互接近时，由于分子的极 化作用而出现的引力，称范德华引力。
➢结合力的大小与两个相互作用基团的极化 程度的乘积成正比、与它们之间距离的 7 次方成反比，键能约为4.2-12.5kJ/moL。 这种引力的能量小于静电引力。
3.氢键结合力
➢ 供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引 力。在抗原抗体反应中，羧基、氨基和 羟基是主要供氢体，而羧基氧、羧基碳 和肽键氧等原子是主要受氢体。
➢氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离 的6次方成反比，键能约20.9kJ/mol。
4.疏水作用力
➢ 两个疏水基团在水溶液中相互接触时，由 于对水分子排斥而趋向聚集的力称为疏水 作用力，或称为疏水键。
➢当抗原抗体反应时，抗原决定簇与抗体上 的结合点靠近，互相间正、负极性消失， 由静电作用形成的亲水层立即失去，从而 促进抗原与抗体的相互吸引而结合。疏水 作用力在抗原抗体反应中的结合是很重要 的。提供的作用力最大，约占总结合力的 50%。
(完整word版)抗原抗体结合的影响因素
转载某理工大学讲义，如果有更新的研究文章更好，呵呵第一节抗原抗体反应的原理抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇(表位)与抗体超变区的沟槽分子表面的结构互性与亲合性而结合的。
一、抗原抗体的结合力抗原抗体间结合为非共价键结合，有四种分子间引力参与。
(1)静电引力：是抗原抗体分子带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互吸引的力。
又称为库伦引力。
这种引力的大小与两电荷间的距离的平方成反比。
两个电荷距离越近，静电引力越强。
(2)范登华引力：是抗原与抗体两个大分子外层轨道上电子之间相互作用时，因两者电子云中的偶极摆动而产生吸引力。
能促使抗原抗体相互结合，这种引力的能量小于静电引力。
(3)氢键结合力：是抗体上亲水基团与相应抗原彼此接近时，相互间可形成氢键，使抗原抗体相互结合。
氢键结合力较范登华引力强。
(4)疏水作用力：是抗原表位与抗体超变区靠近时，相互间正、负极性消失，亲水层也立即失去，排斥了两者之间的水分子，使抗原抗体进一步相互吸引，促进其结合。
疏水作用力是这些力中最强的，对维系抗原抗体结合作用最大。
二、抗原抗体的亲合性和亲合力亲合性是指抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原表位之间相互适应而存在的引力，它是抗原抗体之间固有的结合力，可用平衡常数K 来表示：K=K1/K2，K 值越大，亲合性越高；亲合性越高，与抗原结合越牢。
抗体的亲合力是指抗体结合部位与抗原表位之间结合的强度，与抗体结合价直接相关，即所谓多价优势，如IgG 为两价，亲合力为单价的103倍，IgM 为5～10 价，亲合力为单价的107倍。
由于抗原抗体的结合反应是可逆的，若抗体的亲合力高，与抗原分子结合牢固，不易解离；反之即容易解离。
三、亲水胶体转化为疏水胶体大多数抗原为蛋白质，抗体是球蛋白，它们溶解在水中皆为胶体溶液，不会发生自然沉淀。
这种亲水胶体的形成机制是因蛋白质含有大量的氨基和羧基残基，在溶液中这些残基带有电荷，由于静电作用，在蛋白质分子周围出现了带相反电荷的电子云并形成了水化层，由于电荷的相斥，就避免了蛋白质分子间靠拢、凝集和沉淀。
临床免疫学检验练习题库(附参考答案)
临床免疫学检验练习题库（附参考答案）一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、因使用外用药物发生的接触性皮炎属于A、迟发型超敏反应B、免疫复合物型超敏反应C、细胞溶解型超敏反应D、Ⅲ型超敏反应E、速发型超敏反应正确答案：A2、影响抗原抗体反应的因素有：A、电解质、pH值和温度B、温度、电解质和反应体积C、电解质与温度D、温度、pH值和反应体积E、电解质、pH值和反应体积正确答案：A3、下列哪一种物质可以引起Ⅲ型超敏反应A、补体B、单核吞噬细胞C、免疫复合物D、免疫球蛋白E、细胞因子正确答案：C4、金免疫层析试纸条测HCG，出现质控处和检测区均无红色线条，诊断为A、HCG阳性B、HCG阴性C、试纸条无效D、HCG强阳性E、HCG弱阳性正确答案：C5、免疫防御功能是指A、清除、杀灭病原微生物，防止感染B、清除体内突变的细胞，防止肿瘤发生C、清除体内衰老的细胞D、防止自身免疫病的发生E、清除体内变性和损伤的细胞正确答案：A6、防止自身免疫病发生的免疫功能是A、变态反应B、免疫识别C、免疫监视D、免疫防御E、免疫自稳正确答案：E7、下列五类Ig的特性哪项是错误的A、IgG是唯一通过胎盘的免疫球蛋白B、SIgA多为双聚体C、IgM分子量最大D、免疫应答过程中产生最早的是IgGE、正常血清中IgE含最量少正确答案：D8、人类IgG不同亚类中血浆半衰期，最短的是A、IgG3B、IgG2C、IgG4D、IgGlE、IgG5正确答案：A9、发生毛细血管扩张性共济失调综合征的主要免疫学表现是：A、B细胞减少B、T细胞减少C、补体减少D、白细胞粘附功能降低E、红细胞易被溶解正确答案：B10、用来去除未结合的游离的荧光素最好用A、透析法B、离子交换层析法C、搅拌法D、盐析法E、凝胶过滤法正确答案：B11、关于温度的说法，下列哪项正确A、温度低于56℃时，可导致复合物解离B、温度越高，抗原抗体反应速度越快C、温度越低，抗原抗体结合越牢固D、温度越高，抗原抗体反应速度越慢E、温度越高，抗原抗体分子运动越慢正确答案：B12、必须与蛋白质载体结合才具有免疫原性的是A、耐受原B、完全抗原C、变应原D、半抗原E、超抗原正确答案：D13、结核菌素皮试属于下列哪一型超敏反应A、迟发型超敏反应B、速发型C、免疫复合物型D、Ⅵ型E、细胞毒型正确答案：A14、关于公式K=K1／K2，下列说法错误的是A、K2固定，K1越大，亲和性越低B、K1固定，K2越大，亲和性越低C、K1越大，与抗原结合越牢固D、K2固定，K1越大，亲和性越高E、K越大，亲和性越高正确答案：A15、下列哪一项属于长臂活化生物素A、BCNHSB、BNHSC、BHZD、BCHZE、MPB正确答案：A16、下列哪项描述类风湿关节炎的特征是错误的A、外周血白细胞下降B、RF乳胶凝集定性试验阳性C、血清中可检出RFD、多发于青壮年，女多于男E、关节病变为主的慢性自身免疫性疾病正确答案：A17、B细胞作为抗原提呈细胞，其表面主要具有的第二信号作用的分子是:A、CD28B、CD40C、CD40LD、B7E、MHC-II类分子正确答案：D18、T细胞分化抗原主要是检测A、CD9B、CD10C、CD3、CD4、CD8D、CD19E、CD20正确答案：C19、关于补体旁路(替代)途径的激活,下列哪项是错误的A、由细菌脂多糖及凝聚的IgG4、IgA所激活B、D、P因子参与作用C、C3转化酶是C3bBb3bD、在感染早期发挥作用E、可通过C3b的正反馈途径产生更多的C3b正确答案：C20、对流免疫电泳中，泳向正极侧的Ig是A、IgG1，IgG3B、IgG1，IgG2C、IgG3，IgG4D、IgG1，IgG4E、IgG2，IgG4正确答案：C21、CD4分子主要表达在哪种细胞上A、辅助性T细胞（Th）B、细胞毒T细胞（CTL或Tc）C、NK细胞D、B细胞E、中性粒细胞正确答案：A22、广泛放射免疫技术不包括A、免疫放射分析B、放射免疫分析C、放射受体分析D、放射配体分析E、放射供体分析正确答案：E23、血清中补体分子含量最低是A、C1B、C2C、C3D、C4E、C5正确答案：B24、荧光效率是指A、物质产生荧光的效率B、表示荧光色素即吸收的光能转变为荧光的百分率C、是指接受激发光后，荧光物质所产生的荧光的色调D、是指接受激发光后，荧光物质所产生的荧光的色调E、是指荧光色素产生荧光的强度正确答案：B25、肿瘤疫苗与传统疫苗的主要区别是：A、肿瘤疫苗是人工被动免疫疗法B、肿瘤疫苗主要用于肿瘤的治疗C、肿瘤疫苗属于过继性免疫D、传统疫苗主要用于疾病的治疗E、肿瘤疫苗主要用于肿瘤的预防正确答案：B26、临床上最常见的移植类型是A、自体移植B、同种同基因移植C、同种异基因移植D、异种移植E、以上均不是正确答案：C27、属于自身抗原的是A、ABO血型抗原B、肺炎球菌荚膜多糖C、类脂D、眼晶体蛋白E、破伤风类毒素正确答案：D28、检测颗粒型抗原的血清学试验是A、直接凝集反应B、火箭免疫电泳C、对流免疫电泳D、琼脂扩散试验E、协同凝集试验正确答案：A29、T细胞活化时，只有第一信号，缺乏第二信号，其结果是A、导致T细胞分裂B、T细胞立即死亡C、T细胞处于免疫应答无能状态D、导致T细胞克隆扩增E、以上都不是正确答案：C30、单倍型HLA包括或指的是A、控制一个HLA特异性的基因，例如HLA-A或HLA-DPB、同一家族中膜表面所有的同种异型特异性的一半C、同一家族中在一个孩子而不是其他孩子身上发现的基因D、由一条染色体上基因决定的一组抗原表型特异性E、人类第六对染色体的一半基因正确答案：D31、荧光色素中呈现明亮黄绿色荧光的是A、异硫氰酸荧光素B、四甲基异硫氰酸罗丹明C、亮绿D、藻红蛋白E、四乙基罗丹明正确答案：A32、NK细胞活性测定时，使用以下哪种细胞作为靶细胞A、B细胞B、T细胞C、神经细胞D、肿瘤细胞E、单核细胞正确答案：D33、目前，常用来作为直肠癌、结肠癌治疗后的随访项目，检测肿瘤扩散和复发的非创伤性指标是A、AFPB、CA125C、CEAD、CA19-9E、PSA正确答案：C34、具有调理作用的主要Ig是A、IgAB、IgMC、IgGD、IgDE、IgE正确答案：C35、下列哪一种膜分子有关与B淋巴细胞摄取抗原A、BCRB、FcRC、MHC I类分子D、黏附分子E、以上均不是正确答案：A36、对流免疫电泳中，若待测抗原在阳极侧孔，已知抗体在阴极侧孔，抗原、抗体泳动方向分别是A、抗原向阳极侧泳动，抗体向阴极侧泳动B、抗原向阴极侧泳动，抗体一部分向阴极侧泳动，一部分向阳极侧泳动C、抗原、抗体均向阴极侧泳动D、抗原、抗体均向阳极侧泳动E、抗原向阴极侧泳动，抗体向阳极侧泳动正确答案：B37、最常见的自身抗体检测方法为A、ELISAB、免疫荧光法C、固相免疫电泳D、RIAE、Farr法正确答案：B38、哪一种HLA抗原不用血清学方法鉴定A、HLA-A抗原B、HLA-B抗原C、HA-C抗原D、HLA-D抗原E、HLA-DR抗原正确答案：D39、介导Ⅰ型超敏反应的生物活性物质主要是由下列哪一种细胞释放A、巨噬细胞B、单核细胞C、肥大细胞D、B细胞E、中性粒细胞正确答案：C40、下列哪些细胞间作用时受MHC限制A、CTL细胞与肿瘤细胞B、NK细胞与肿瘤细胞C、NK细胞与肿瘤细胞D、Th细胞与B细胞E、朗格汉斯细胞与巨噬细胞正确答案：D41、补体固有成分中，含量最高的是A、C1B、C2C、C3D、C4E、C5a正确答案：C42、终点法散射比浊应保证A、抗原过量B、抗体过量C、抗原：抗体为1：2D、抗体与抗原处于最适比E、抗原：抗体为2：1正确答案：B43、初次应答时，B细胞活化的第二信号产生主要是：A、BCR识别抗原肽-MHC I类分子复合物B、BCR识别抗原肽-MHC II类分子复合物C、B细胞上的CD40与Th细胞上的CD40L结合D、B细胞上的B7与Th细胞上的CD28结合E、BCR与抗原结合正确答案：C44、男性患者，1岁，反复感染4个月，血型为AB型，E花环试验Et值为70％，可初步排除下列何种疾病A、Bruton型丙种球蛋白缺乏症B、体液免疫缺陷症C、DIGeorge综合征D、原发性联合免疫缺陷症E、选择性IgA缺乏症正确答案：C45、遗传性血管神经性水肿的发生机制是：A、C2a过多B、C3a过多C、C3转化酶过多D、C5转化酶过多E、C4a过多正确答案：A46、与其他标记技术相比，免疫组化技术最大的优点是A、形态学观察B、精密度高C、高特异性D、重复性好E、高敏感性正确答案：A47、木瓜蛋白酶水解IgG所获片段中，能与抗原特异结合的是A、Fab段B、Fc段C、F(ab)2D、pFc’段E、以上均不对正确答案：A48、关于第二抗体沉淀法，说法不正确的是A、反应结束时只需加入二抗B、反应结束时只需加入一抗C、反应结束时只需加入一抗同种动物的血清D、反应结束时只需加入一抗同种动物的IgGE、以上说法都对正确答案：E49、产生浆细胞瘤的因素之一，是异常分泌高水平的A、IL-6B、IL-4C、IL-3D、IL-5E、IL-7正确答案：A50、关于抗原的说法不正确的是A、所有抗原均需T细胞辅助才能产生抗体应答B、为任何可诱发免疫反应的物质C、抗原与耐受原可能是等同物D、宿主对抗原应答的控制是通过免疫应答基因表现出来的E、超抗原连接MHCⅡ类分子又连接T细胞受体正确答案：A51、在骨髓中，自身反应性B 细胞克隆被消除是由于A、自身反应性B细胞缺乏辅助细胞而不能激活B、自身反应性B细胞缺乏辅助细胞而不能激活C、大量多价抗原使未成熟B细胞表面受体交联“冻结”D、细胞表面受体封闭E、缺乏协同刺激信号正确答案：A52、既具有吞噬杀菌作用又具有抗原加工提呈作用的细胞是A、中性粒细胞B、巨噬细胞C、树突状细胞D、B细胞E、NK细胞正确答案：B53、下列哪个属于中枢免疫器官A、皮下组织B、胸腺C、脾脏D、淋巴结E、粘膜相关淋巴组织正确答案：B54、TCR识别抗原的信号传递是通过下列哪个分子？A、CD3B、CD2C、CD4D、Igα、IgβE、CD8正确答案：A55、三条补体激活途径的共同点是A、参与的补体成分相同B、所需离子相同C、C3转化酶的组成相同D、激活物质相同E、膜攻击复合物的形成及其溶解细胞效应相同正确答案：E56、补体系统各成分中，分子量最小的是A、C1B、C2C、C3D、C4结合蛋白(C4bpE、D因子正确答案：E57、结合肥大细胞和嗜碱性粒细胞的Ig是A、IgMB、IgGC、IgAD、IgDE、IgE正确答案：E58、单克隆抗体的应用不包括A、肿瘤的诊断B、肿瘤的治疗C、血清Cl－含量测定D、激素水平测定E、细胞受体测定正确答案：C59、火箭免疫电泳的特点是A、电流方向有规律地改变B、单项免疫扩散和电泳相结合的检测技术C、电流逐渐减小D、电泳时间大大缩短E、灵敏度有极大的提高正确答案：B60、选择性IgA患者一般不采用下列治疗方法：A、骨髓移植B、基因治疗C、输入免疫球蛋白D、用抗生素治疗感染E、长期预防感染的发生正确答案：C61、在火箭免疫电泳中，抗原、抗体的泳动方向是A、琼脂凝胶中的抗体不移动，样品孔抗原向阳极泳动B、琼脂凝胶中的抗体不移动，样品孔抗原向阴极泳动C、琼脂凝胶中的抗原不移动，样品孔抗原向阳极泳动D、琼脂凝胶中的抗原不移动，样品孔抗原向阴极泳动E、抗原、抗体均向正极泳动正确答案：A62、下列属于非标记免疫技术的是A、放射性核素标记免疫技术B、免疫电泳技术C、荧光标记免疫技术D、酶标记免疫技术E、发光免疫技术正确答案：B63、以下哪种不是专职抗原提呈细胞：A、巨噬细胞B、树突状细胞C、B淋巴细胞D、内皮细胞E、朗格汉斯细胞正确答案：D64、可以寻找过敏原并从嗜碱性粒细胞水平研究I型变态反应的试验是A、RASTB、皮内试验C、HBDTD、ELISAE、支气管激发试验正确答案：C65、发育早期的NK 细胞的特有标志是A、CD3 分子B、IKAROS 基因C、CD16 分子D、CD56 分子E、CD15 分子正确答案：D66、B细胞表面特有的标志是A、E受体B、pHA受体C、C3b受体D、IL-2受体E、抗原受体(mIgM和mlgD)正确答案：E67、下列各项用于反映B细胞功能的试验是A、淋巴细胞转化B、血清免疫球蛋白检测C、迟发型超敏反应D、移动抑制试验E、以上都不正确正确答案：B68、与内源性抗原降解为多肽有关的分子是A、HLA-DM分子B、TAPC、蛋白酶体D、ERE、Ia相关恒定链(Ii)正确答案：C69、以下关于IgG 生物学特性的错误叙述是A、能通过胎盘B、能激活补体C、是参与I型超敏反应的主要IgD、能发挥调理作用E、能发挥ADCC作用正确答案：C70、在DC细胞内抗原肽与MHCⅡ类分子的结合部位主要是A、吞噬小体B、MCⅡC、溶酶体D、内质网E、蛋白酶体正确答案：B71、前向散射光（FSC）信号的强弱与下述哪项成正比：A、细胞性状B、体积大小C、颗粒多少D、位移速度E、荧光强弱正确答案：B72、实验本身即可避免内源性非特异荧光干扰的检测方法为A、TRFIAB、FPIAC、荧光酶免疫分析D、直接法荧光抗体染色E、直接法荧光抗体染色正确答案：A73、TCR的双识别是指A、同时识别MHCⅠ类分子和MHCⅡ类分子B、同时识别抗原分子的T细胞表位和B细胞表位C、同时识别抗原肽和mIg的复合物D、同时识别抗原肽和MHC分子E、同时识别Igα和Igβ正确答案：D74、关于ELISA竞争法，正确的是A、用于检测抗原B、被测物与酶标记物的免疫活性各不相同C、被测物少则标记物被结合的机会多D、待测管的颜色比参照管的淡表示被测物量少E、结合于固相的酶标抗原量与样品中被测抗原量成正比正确答案：C75、使用流式细胞术对细胞群体进行分析，可在多长时间内完成A、8-10minB、4-5minC、10-12minD、1-2minE、6-7min正确答案：D76、定时散射比浊分析时，如果待测标本抗原浓度过高，则应A、增加抗体的浓度后重新检测B、将待测标本稀释后重新测定C、照常进行反应D、进行全量样本检测E、测量结果更可靠正确答案：B77、以下哪类疾病是由于CD40L缺陷引起的A、性联无丙种球蛋白血症B、重症联合免疫缺陷C、性联高IgM综合征D、DiGeorge综合征E、慢性肉芽肿病正确答案：C78、AIDS属于哪种免疫缺陷病A、原发性T细胞缺陷病B、获得性免疫缺陷病C、原发性免疫缺陷病D、原发性B细胞缺陷病E、原发性联合免疫缺陷病正确答案：B79、人类免疫缺陷病毒（HIV）的受体是A、CD2B、CD3C、CD4D、CD8E、CD28正确答案：C80、通常的流式细胞仪结构组成，不包括下述哪一项结构系统：A、流体系统B、温度控制系统C、数据处理系统D、光学系统E、分选系统正确答案：B81、FITC的荧光寿命约为A、15nsB、20nsC、30nsD、45nsE、60ns正确答案：D82、有关半抗原(hapten)论述正确的是A、只能引起体液免疫应答B、本身不具有免疫原性C、是大分子物质D、通常是多肽E、只有与载体偶联后才能与抗体分子结合正确答案：B83、属于I型超敏反应的疾病是A、青霉素过敏性休克B、新生儿溶血症C、系统性红斑狼疮性肾炎D、接触性皮炎E、输血反应正确答案：A84、下列不属于自身免疫性疾病的是：A、系统性红斑狼疮B、类风湿性关节炎C、自身免疫性溶血性贫血D、性联无丙种球蛋白E、特发性血小板减少症正确答案：D85、与放射免疫分析法比较，免疫放射分析法的特点是A、分析误差大B、反应模式为竞争抑制C、灵敏度高D、特异性较低E、标记简单正确答案：C86、包膜蛋白部分包括A、跨膜蛋白gp41B、外膜蛋白gp120C、信号肽D、外膜刺突上嵌有与细胞受体结合位点E、以上都包括正确答案：E87、随机误差是由下述哪项造成的A、人为失误B、校准品C、仪器设备D、标准品E、试剂正确答案：A88、免疫细胞间相互作用受小鼠H-2复合体中哪一区域的基因所调控A、K区B、D区C、I区D、S区E、以上都不是正确答案：C89、抗人球蛋白试验不能用于A、溶血性贫血的研究B、细菌或立克次体的抗原检查C、输血配型D、血型抗原抗体的检查E、新生儿溶血性贫血疾病的诊断正确答案：B90、吞噬细胞主要包括A、NK 细胞和单核-巨噬细胞B、单核-巨噬细胞和中性粒细胞C、中性粒细胞和树突状细胞D、NK 细胞和中性粒细胞E、中性粒细胞和APC正确答案：B91、实验动物切除胸腺后,对淋巴结产生的影响是A、深皮质区缺乏T细胞B、生发中心生成受影响C、胸腺依赖区T细胞数目和生发中心均不受影响D、深皮质区T细胞缺乏，同时生发中心形成也受影响E、浅皮质区无明显影响正确答案：A92、疫苗注射并非完全无害，最适用于免疫缺陷宿主的疫苗是A、萨宾脊髓灰质炎疫苗B、麻疹疫苗C、卡介苗D、肺炎球菌疫苗E、腮腺炎疫苗正确答案：D93、下列关于正向间接凝集试验的说法中正确的是A、抗体致敏载体，以检验标本中相应抗原B、用于检测标本中抗原C、形成肉眼可见凝集块者为阴性D、临床用于检测HBsAg、AFP等E、抗原致敏载体，以检测标本中相应的抗体正确答案：E94、BCR能识别:A、天然蛋白质抗原决定簇B、线性决定簇C、连续决定簇D、Ag肽-MHC复合物E、特异性坑原正确答案：A95、CTL细胞杀伤靶细胞时下列哪项是正确的？A、CTL细胞无需与靶细胞接触B、靶细胞被溶解时，CTL细胞同时受损C、CTL细胞具特异性杀伤作用D、穿孔素诱导靶细胞凋亡E、一个CTL细胞只能杀伤一个靶细胞正确答案：C96、下列哪项不是死疫苗的特点？A、一般需接种2-3次B、不能诱导局部免疫C、免疫效果好D、疫苗较易保存E、接种剂量较大正确答案：C97、下列哪类细胞的功能用溶血空斑试验检测：A、粒细胞B、B细胞C、T细胞D、NK细胞E、巨噬细胞正确答案：B98、与抗原结合后，可激活补体经典途径的Ig是A、IgM和IgEB、IgD和IgMC、IgA和IgGD、SIgA和IgGE、IgG和IgM正确答案：E99、机体内功能最强的抗原提呈细胞是A、B淋巴细胞B、NK细胞C、巨噬细胞D、树突状细胞E、内皮细胞正确答案：D100、在B细胞上不出现下列哪一个标志A、SmlgB、MHCI类抗原C、MHCl类抗原D、C3受体E、CD3抗原正确答案：E。
抗体抗原反应缓冲液
尿素、乙醇、丙酮：它们可以提供自己的羟基或羰基上的氢或氧去形成氢键，从而破坏了蛋白质中原有的氢键，使蛋白质变性。但氢键不是化学键，因此在变化过程中没有化学键的断裂和生成，所以是一个物理变化。
加热、紫外线照射、剧烈振荡等物理方法：主要是破坏蛋白质分子中的氢键，在变化过程中也没有化学键的断裂和生成，没有新物质生成，因此是物理变化。
二、影响抗原抗体反应的因素
1.自身因素
抗原
抗原的理化性状、表面抗原决定簇的种类和数目等均可影响抗原抗体
抗体
抗体对抗原抗体反应的影响主要有以下三个方面：
来源：不同动物来源的免疫血清，其反应性存在差异。
浓度：抗体的浓度是相对于抗原而言的，二者浓度合适时才易出现可见的反应结果
特异性与亲合力：特异性与亲合力是影响抗原抗体反应的关键因素，它们共同影响试验结果的准确度。试验试剂应尽可能选择高特异性、高亲合力的抗体，以保证试验的可靠性。
2.抗原抗体的亲合性和亲合力
亲合性是指抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原表位之间相互适应而存在的引力，它是抗原抗体之间固有的结合力，可用平衡常数 K 来表示：K=K1/K2 ，K值越大，亲合性越高；亲合性越高，与抗原结合越牢。抗体的亲合力是指抗体结合部位与抗原表位之间结合的强度，与抗体结合价直接相关，即所谓多价优势，如 IgG 为两价，亲合力为单价的 103 倍， IgM 为 5～ 10 价，亲合力为单价的 107 倍。由于抗原抗体的结合应是可逆的，若抗体的亲合力高，与抗原分子结合牢固，不易解离；反之即容易解离。
抗原抗体反应的特点、影响因素和制备
抗原抗体反应的特点、影响因素和制备抗原与相应抗体相遇可发生特异性结合，并在外界条件的影响下呈现某种反应现象，如凝集或沉淀，藉此可用已知抗原(或抗体)检测未知抗体(或抗原)。
试验所采用的抗体常存在于血清中，因此又称之为血清学反应(serological reaction)。
一、抗原抗体反应的特点(一)抗原抗体结合的特异性抗原借助表面的抗原决定簇与抗体分子超变区在空间构型上的互补，发生特异性结合。
同一抗原分子可具有多种不同的抗原决定簇，若两种不同的抗原分子具有一个或多个相同的抗原决定簇，则与抗体反应时可出现交叉反应(cross reaction)。
(二)抗原抗体结合的可逆性抗原抗体结合除以空间构型互补外，主要以氢键、静电引力、范德华力和疏水键等分子表面的非共价方式结合，结合后形成的复合物在一定条件下可发生解离，回复抗原抗体的游离状态。
解离后的抗原和抗体仍保持原有的性质。
抗原抗体复合物解离度在很大程度上取决于特异性抗体超变区与相应抗原决定簇三维空间构型的互补程度，互补程度越高，分子间距越小，作用力越大，两者结合越牢固，不易解离；反之，则容易发生解离。
(三)抗原抗体结合的比例性与结合物的可见性抗原与抗体的结合能否出现肉眼可见的反应，取决于两者的比例。
若比例合适，则可形成大的抗原抗体结合物，出现肉眼可见反应现象；反之，虽能形成结合物，但体积小，肉眼不可见。
由于这种分子比例的差异，分别形成了三种区带现象。
等价带表示抗原与抗体比例最合适，形成大而多的结合物，此时在反应体系中测不出或有极少游离的抗原或抗体；抗体过剩带(前带)和抗原过剩带(后带)皆表示抗原与抗体的比例不合适，所形成的结合物少且小，其反应体系中存在着游离的抗原或抗体。
抗原抗体分子的比例与结合物大小的关系如图18.1所示。
小分子可溶性抗原，因其表面积大，容易导致后带现象；而细胞等颗粒性抗原，在与抗体反应时则易出现前带现象。
因此在抗原抗体检测中，为能得到肉眼可见的反应，在了解抗原的物理性状之后，对抗原或抗体进行稀释，以调整二者的比例。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
转载某理工大学讲义，如果有更新的研究文章更好，呵呵
第一节抗原抗体反应的原理
抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇 ( 表位 )与抗体超变区的沟槽
分子表面的结构互性与亲合性而结合的。
一、抗原抗体的结合力
抗原抗体间结合为非共价键结合，有四种分子间引力参与。
(1)静电引力：是抗原抗体分子带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相
互吸引的力。
又称为库伦引力。
这种引力的大小与两电荷间的距离的平方
成反比。
两个电荷距离越近，静电引力越强。
(2)范登华引力：是抗原与抗体两个大分子外层轨道上电子之间相互作
用时，因两者电子云中的偶极摆动而产生吸引力。
能促使抗原抗体相互结
合，这种引力的能量小于静电引力。
(3)氢键结合力：是抗体上亲水基团与相应抗原彼此接近时，相互间可
形成氢键，使抗原抗体相互结合。
氢键结合力较范登华引力强。
(4)疏水作用力：是抗原表位与抗体超变区靠近时，相互间正、负极性
消失，亲水层也立即失去，排斥了两者之间的水分子，使抗原抗体进一步
相互吸引，促进其结合。
疏水作用力是这些力中最强的，对维系抗原抗体
结合作用最大。
二、抗原抗体的亲合性和亲合力
亲合性是指抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原表位之间相互适
应而存在的引力，它是抗原抗体之间固有的结合力，可用平衡常数K 来表示： K=K1/K2 ， K 值越大，亲合性越高；亲合性越高，与抗原结合越牢。
抗体的亲合力是指抗体结合部位与抗原表位之间结合的强度，
与抗体结合价直接相关，即所谓多价优势，如IgG为两价，亲合力为单价
的 103 倍， IgM为5～10价，亲合力为单价的107 倍。
由于抗原抗体的结合反应是可逆的，若抗体的亲合力高，与抗原分子结合牢固，不易解离；反
之即容易解离。
三、亲水胶体转化为疏水胶体
大多数抗原为蛋白质，抗体是球蛋白，它们溶解在水中皆为胶
体溶液，不会发生自然沉淀。
这种亲水胶体的形成机制是因蛋白质含有大量
的氨基和羧基残基，在溶液中这些残基带有电荷，由于静电作用，在蛋白质
分子周围出现了带相反电荷的电子云并形成了水化层，由于电荷的相斥，就
避免了蛋白质分子间靠拢、凝集和沉淀。
当抗原抗体结合后，使水化层表面
电荷减少或消失，水化层变薄，电子云也消失，蛋白质由亲水胶
体转化为疏水胶体。
再加入电解质，如NaCl，则进一步使疏水胶体物相互靠拢，形成可见的抗原抗体复合物。
第二节抗原抗体反应的特点
一、特异性
抗原抗体的特异性是指抗原分子上的抗原决定簇和抗体分子超变区结
合的特异性，由两者之间查问结构互补决定的。
抗体分子 VH 区和 VL 区上各自具有的三个高变区共同组成抗原结合部位，该部位形成一个与抗原决
定簇互补的槽沟，决定了抗体的特异性。
因此，在抗原抗体反应的免疫学实
验中，可以用已知的抗原或抗体来检测相应的抗体或抗原。
但较大分子
的蛋白质常含有多种抗原表位。
如果两种不同的抗原分子上有相同的抗原
表位，或抗原、抗体间构型部分相同，皆可出现交叉反应。
二、比例性
比例性是指抗原抗体特异性结合时，生成结合物的量与反应物浓度的
关系，只有当二者浓度比例适当时，才出现可见的反应。
因此在进行抗原
抗体试验时，抗原抗体反应比例最合适的范围，称为抗原抗体反应的等价
带。
当抗体过量时，称为前带，抗原过量时，称为后带。
三、可逆性
抗原与抗体结合形成复合物后，在一定条件下，有可以解离为游离的
抗原与抗体，这种特性称为抗原抗体反应的可逆性(renersibility)。
抗原
抗体的结合是分子表面的非共价键结合，形成的复合物是不牢固的，在一定
条件下可以解离，因此抗原抗体反应形成复合物的过程是一个动态平衡。
抗
原抗体复合物解离取决于两方面的因素：一是抗体对应抗原的亲合
力；二是环境因素对复合物的影响。
高亲合力抗体的抗原结合点与抗原表位
的空间构型上非常适合，两者结合牢固，不容易解离；反之，低亲合力
抗体与抗原形成的复合物较易解离。
环境因素中pH 过高或过低均可破坏离子间静电引力，降低抗原抗体的结合力，促使其解离。
免疫技术中的亲合
层析法，常用改变 pH 和离子强度促使抗原抗体复合物解离，从而纯化抗原或
抗体。
四、反应阶段性
抗原抗体反应可分为两个阶段。
第一阶段为抗原与抗体发生特异性结
合的阶段，此阶段反应快，仅须数秒至数分钟，但不出现可见反应；第二
为可见反应阶段，这一阶段抗原抗体复合物在环境因素 (如电解质、 pH 、温度、补体 )的影响下，进一步交联和聚集，表现凝集、沉淀、溶解、补体结
合介导的生物现象等肉眼可见的反应。
此阶段反应慢，往往需要数分钟至
数小时。
实际上这两个阶段难以严格区分，所需时间亦受多种因素和反应条件的影
响，如反应开始时抗原抗体浓度较高，且两者比例恰当，则很快能形成可
见反应。
第三节影响抗原抗体反应的因素
影响抗原抗体反应的因素很多，主要有两个方面：一是抗原抗体本身
的因素；另一方面是反应环境因素。
一、反应物自身因素
抗原抗体反应中，抗原和抗体是反应的主体，所以它们的特性直接影
响其结合情况。
(一 )抗原
抗原的理化性状、表面抗原决定簇的种类和数目等均可影响抗原抗体
反应的结果。
(二 )抗体
抗体对抗原抗体反应的影响主要有以下三个方面：
(1)来源：不同动物来源的免疫血清，其反应性存在差异。
如家兔等大
多数动物的免疫血清，由于具有较宽的等价带，与相应抗原结合易出现可
见的抗原抗体复合物。
马、人的免疫血清等价带窄，抗原不足或过剩，均
易形成可溶性复合物。
而单克隆抗体一般不用于沉淀或凝集反应。
(2)浓度：抗体的浓度是相对于抗原而言的，二者浓度合适时才易出现
可见的反应结果，所以在试验前应先进行预试验，滴定抗原抗体最佳反应
浓度。
(3)特异性与亲合力：特异性与亲合力是影响抗原抗体反应的关键因
素，它们共同影响试验结果的准确度。
试验试剂应尽可能选择高特异性、
高亲合力的抗体，以保证试验的可靠性。
二、环境条件
(一 )电解质
抗原与抗体发生结合后，由亲水胶体变为疏水胶体的过程中须有电解
质参与才能进一步使抗原抗体复合物表面失去电荷，水化层破坏，复合物
相互靠拢聚集，形成大块的凝集或沉淀。
若无电解质参加，则不出现可见
反应。
为了促使沉淀物或凝集物的形成，常用O.85 ％氯化钠或各种缓冲液
作抗原及抗体的稀释液及反应液。
但电解质的浓度不宜过高，否则会出现
盐析现象。
(二 )酸碱度
蛋白质具有两性电离性质，因此每种蛋白质都有固定的等电点。
抗原抗体
反应必须在合适的pH 环境中进行，pH 过高或过低都将影响抗原与抗体的理
化性质。
抗原抗体反应一般在pH为6～ 9进行。
(三 )温度
抗原抗体反应必须在合适的温度中进行，一般以15 ～ 40 ℃为宜，最适
反应温度为37 ℃。
某些特殊的抗原抗体反应，对温度有
一些特殊的要求，例如冷凝集素在4℃左右与红细胞结合最好，20 ℃以上反而解离。
此外，适当振荡和搅拌也能促进抗原抗体分子的接触，加速反应，其
作用与反应物粒子大小成正比。
第四节抗原抗体反应的类型
随着免疫学技术的飞速发展，在原有经典免疫学实验方法的基础上，
新的免疫学测定方法不断出现，使免疫学实验技术更特异、更敏感和更稳
定。
目前根据抗原和抗体性质的不同和反应条件的差别，抗原抗体反应出
现的现象和结果不同，以及反应时参与的其他条件不同，可将抗原抗体反
应分为五种类型：①颗粒性抗原与相应抗体结合所产生的凝集反应(agglutination) ；②可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应(precipitation) ；③抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应
(cytolysis) ，细菌抗原表现为溶菌反应，红细胞抗原表现为溶血反应；④
细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应；⑤免疫标记的抗原抗
体反应等。