各种培养基的制作方法
食用菌试管培养基配方
食用菌试管培养基配方
答案：
食用菌试管培养基的配方
PDA培养基
配方：土豆200克、葡萄糖18~20克、琼脂18~22克，水1000毫升。
制作方法：土豆去皮切块煮沸20~30分钟，过滤取滤液，加入琼脂加热溶解，再加入葡萄糖，冷却后分装。
综合马铃薯培养基
配方：马铃薯200克、葡萄糖20克、磷酸氢二钾3克、硫酸镁1.5克、维生素B1 10毫克、琼脂20克，水1000毫升。
制作方法：马铃薯煮沸15~20分钟，过滤取滤液，加入其他成分加热溶解。
合成培养基
配方：马铃薯20克、葡萄糖20克、磷酸二氢钾2克、蛋白胨5克、酵母膏5克、硫酸镁1克，水1000毫升。
制作方法：煮沸过滤后加入其他成分加热溶解。
大米培养基
配方：大米适量、磷酸二氢钾10克、硫酸镁5克，水1000毫升。
制作方法：大米加入营养液中，加热灭菌后接种。
制作方法
PDA培养基制作方法
将土豆切块煮沸20~30分钟，过滤取滤液。
加入琼脂加热溶解，再加入葡萄糖搅拌均匀。
冷却后分装，灭菌后制成斜面培养基。
综合马铃薯培养基制作方法
马铃薯煮沸15~20分钟，过滤取滤液。
加入其他成分加热溶解，分装灭菌。
合成培养基制作方法
煮沸过滤后加入其他成分加热溶解，分装灭菌。
大米培养基制作方法
大米加入营养液中，加热灭菌后接种。
培养基的制作方法
培养基的制作方法培养基是微生物学研究中常用的实验材料，用于培养和繁殖微生物。
正确的制备培养基对于保证实验结果的准确性和可重复性至关重要。
本文将介绍培养基的制作方法，以帮助读者掌握正确的制备技巧。
一、准备工作1. 清洗和消毒培养器具：包括量筒、容量瓶、烧杯、培养皿等。
使用去离子水或含0.1%次氯酸钠的消毒液进行清洗和消毒。
2. 准备所需试剂和培养基成分：包括碳源、氮源、无机盐、维生素、生长因子等。
根据实验需要选择合适的配方。
二、制备培养基步骤1. 按照配方计算所需试剂的质量或体积。
精确称量或计量试剂，避免误差。
2. 将所需试剂分别溶解于适量的去离子水中，搅拌均匀。
注意溶解过程中的温度和pH值控制。
3. 将溶解好的试剂倒入容量瓶中，加入适量的去离子水，使总体积达到容量瓶标记线。
再次搅拌均匀。
4. 用适当的容器（如烧杯）接收制备好的培养基。
注意避免污染，避免气泡的产生。
5. 进行高温高压灭菌，通常为121摄氏度，压力为15磅，时间为20分钟。
确保培养基的无菌性。
6. 灭菌后，将培养基倒入培养器具（如培养皿、试管等），根据实验需要分装适量的培养基。
7. 将培养器具密封，避免外界污染。
存放于冰箱或低温冷藏室中，避光保存。
三、常见培养基的制备方法1. 营养琼脂培养基制备方法：a. 按照配方计算所需琼脂的质量。
b. 将琼脂溶解于适量的去离子水中，加热至完全溶解。
c. 加入所需营养成分，如葡萄糖、胰蛋白酶胨等。
搅拌均匀。
d. 倒入容器中，高温高压灭菌后分装。
2. 非琼脂培养基制备方法：a. 按照配方计算所需试剂的质量或体积。
b. 将所需试剂溶解于适量的去离子水中，搅拌均匀。
c. 调整pH值至所需的范围，使用盐酸或氢氧化钠溶液进行调节。
d. 倒入容器中，高温高压灭菌后分装。
四、培养基制备中的注意事项1. 注意实验室的洁净环境，避免外界污染。
2. 注意试剂的质量和纯度，避免影响培养基的质量。
3. 注意培养基的pH值控制，不同微生物对pH值有不同的要求。
常用培养基配方汇总
常用培养基配方汇总1. 营养琼脂培养基 (Nutrient Agar)- 夏洛特奥康纳 (Charlote A. O'Connor) 配方:-蛋白胨:5克-麦芽提取物:3克-胰蛋白酶胨:1.5克-硫酸镁:0.2克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
2. 肉蔗糖琼脂培养基 (Tryptic Soy Agar, TSA)- 条件反射琼脂 (孟德尔和赛尼·特鲁斯 ('Sneath and Tres') 配方):-牛肉蛋白胨:17克-大豆酪蛋白胨:3克-肉汤提取物:5克-葡萄糖:2.5克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
3. MAC琼脂培养基 (MacConkey Agar)- 麦康奈 (MacConkey) 配方:-紫胆杆菌胨:17克-葡萄糖:1.5克-硫酸盐:1.5克-中性红:0.03克-石蕊:0.3克-氯化钠:5克-地膜:10克-pH值调整到7.1-7.5-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
4. LB琼脂培养基 (Luria-Bertani Agar)- 古斯塔夫·诺维斯 ('Gustaf Novis') 配方:-研磨大豆饼粉:10克-酵母提取物:5克-部分脱脂酪蛋白:5克-氯化钠:1克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
5. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (Potato Dextrose Agar, PDA)- 林登麦卡蒂 ('Lindenmuth and McCarty') 配方:-马铃薯提取物:4克-葡萄糖:20克-地膜:15克-pH值调整到5.6-5.8-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
这些是一些常用的培养基配方，适用于细菌和真菌的培养。
如何制作母种培养基
如何制作母种培养基母种培养基用于制备微生物的母种菌液，是微生物学实验中必不可少的基础实验操作。
下面将介绍如何制作母种培养基。
材料准备：1.蛋白胨：作为碳氮源，提供微生物生长所需的营养物质；2.洋葱提取液：洋葱经过搅拌或榨汁机榨汁后，过滤得到的提取液中含有富含维生素B群等对微生物生长有促进作用的物质；3.水解酵母提取物：提供微生物生长所需的氮源等营养物质；4.葡萄糖：提供微生物生长所需的碳源；5.磷酸二氢钾：作为缓冲溶液的成分，稳定pH值；6.硫酸镁：提供微生物生长所需的镁离子；7.水：用于稀释和溶解固体试剂。
操作步骤：1.称取适量蛋白胨和洋葱提取液。
蛋白胨的质量可根据实验需求适量调整，一般建议取10g。
洋葱提取液的用量一般为蛋白胨的1/100至1/10倍，可根据实验需求酌情调整。
2.将蛋白胨和洋葱提取液分别加入两个不锈钢锅或烧杯中。
3.加入适量的水，搅拌均匀溶解。
4.将其中一个容器中的溶液转移到另一个容器中，反复搅拌至均匀混合。
5.加入适量的磷酸二氢钾和硫酸镁，继续搅拌均匀。
6.加入适量的葡萄糖，再次搅拌均匀。
7.将锅或烧杯中的溶液加热至沸腾，持续煮沸1分钟，以去除可能存在的微生物污染物。
8.关火后，继续搅拌溶液，待其冷却至室温。
9.将制备好的母种培养基倒入已经消毒干净的试管或培养皿中。
试管可用瓶塞或铝箔封口，培养皿可用锡纸包裹封口。
11.将制备好的母种培养基存放在冰箱或低温冷藏室中，以延长其保鲜期。
注意事项：1.操作过程中需要注意无尘环境，以防止微生物污染。
2.蛋白胨和洋葱提取液的质量与用量可以根据具体实验需求进行调整。
3.母种培养基的制备过程中，需要进行高压灭菌以杀灭可能存在的微生物污染。
4.母种培养基制备完成后，需严格密封，避免污染和水分蒸发。
以上就是母种培养基的制备方法。
制备母种培养基是微生物学实验的基础步骤，掌握好制备方法可以为后续的微生物培养和研究提供良好的基础。
如何制作母种培养基？
如何制作母种培养基？
母种培养基如何制作？
(1)马铃薯制备。
将马铃薯洗净，削去皮与芽眼，切成薄片。
加水1000毫升，煮沸后保持20分钟，用4~8层纱布过滤，取滤液补足水量至1000毫升。
(2)培养基制作。
继续用小火加热滤液，并准确称取其余各种药品。
过秤一种，校对一种，全部无误后，加入马铃薯汁中搅匀。
琼脂最后加入。
加入前先用冷水将琼脂条浸泡5~10分钟，捞起撕碎后慢慢加入锅中，边加入边搅动，直至完全溶化。
(3)分装试管。
将培养基趁热倒入漏斗中，分装试管。
每批要用大小一致的试管，装量要相同，约为试管长度的1/5。
分装时，注意不使管口沾上培养基。
分装好的试管立放在试管架上，待琼脂凝固后塞上棉塞。
然后每5~10支试管扎成一捆，棉塞部分用双层报纸包好防潮，竖着排放在手提式高压锅的消毒桶中准备灭菌。
(4)棉塞制作。
取一块完整的棉花，大小厚薄根据试管口直径而定。
做法是：左手握紧棉絮，从边缘往内卷成圆形，右手捏住棉絮光头，将毛头往试管口塞入2/3，外头留1/3，呈馒头形。
棉塞松紧适度，与管壁紧贴无缝隙。
- 1 -。
培养基的制作过程
培养基的制作过程培养基是细菌、真菌、细胞等生物体在实验室中进行培养和繁殖所必需的营养物质和环境条件的混合物。
制作培养基是生命科学实验中非常重要的一步，下面将从原材料、制备步骤、注意事项等方面详细介绍培养基的制作过程。
一、原材料1. 离子交换水或双蒸水：用于配制培养基时稀释各种试剂，保证试剂的纯度。
2. 蛋白胨：是从动物肉类或鱼虾等蛋白质含量高的食品中提取出来的，是常用的一种氮源，可供微生物生长使用。
3. 酵母提取物：是从酵母菌体中提取出来含有丰富氮源和多种维生素B族成分的营养液，常用于培养真菌和酵母等微生物。
4. 葡萄糖：是微生物进行代谢反应所必需的碳源。
5. 磷酸盐缓冲液：用于调节培养基pH值，以维持适宜的生长环境。
6. 硫酸镁：是微生物进行代谢反应所必需的微量元素，同时也可用于调节培养基pH值。
7. 染色剂：如溴甘酚、溴蓝等，用于检测微生物在培养基上的生长情况和形态特征。
二、制备步骤1. 称取所需试剂：按照配方要求，精确称取每种试剂，并将其分别加入离子交换水或双蒸水中。
2. 搅拌溶解：将试剂加入水中后，使用磁力搅拌器将其充分搅拌溶解，直至无明显沉淀出现。
3. 调节pH值：使用磷酸盐缓冲液调节培养基的pH值，通常在7.0-7.4之间为宜。
如果pH值过高或过低，会影响微生物的生长和代谢反应。
4. 灭菌：使用高压灭菌器或自制压力锅对培养基进行灭菌处理。
灭菌时间一般为20-30分钟，在121℃下进行高温高压处理。
灭菌后要及时冷却到室温。
5. 包装保存：将制好的培养基分装到无菌瓶中，并在瓶口处加上无菌棉塞或铝箔封口，避免外界污染。
储存温度通常为4℃，可保持较长时间的稳定性。
三、注意事项1. 原材料质量要求高：制备培养基的原材料必须是纯度较高、无污染的试剂，以避免影响微生物的生长和代谢反应。
2. 操作要严谨：在制备过程中要注意操作规范，遵守无菌操作规程，防止微生物污染。
3. 灭菌时间和温度要控制好：灭菌时间和温度是保证培养基无菌的关键因素之一，必须严格按照标准化程序进行操作。
各种培养基配方范文
各种培养基配方范文培养基是一种用于微生物培养的基础物质，能够为微生物提供所需的营养和环境条件。
不同的微生物在其生长过程中需要不同的养分和环境条件，因此培养基的配方需要根据微生物的需求来进行调整。
下面是几种常见的培养基配方。
1.大肠杆菌液体培养基配方：-蛋白胨或复合氮源：10g-酵母浸出物：5g-葡萄糖：1g-NaCl：5g-K2HPO4：2g-MgSO4：0.2g-pH调节至7.0后加水至1000mL2.牛心提取物琼脂糖培养基配方：-牛心提取物：3g-高级琼脂糖：15g-葡萄糖：10g-NaCl：5g-pH调节至7.0后加水至1000mL3.玉米浸出物琼脂糖培养基配方：-玉米浸出物：4g-高级琼脂糖：15g-酵母浸出物：1g-NaCl：5g-pH调节至7.0后加水至1000mL4.LB琼脂糖培养基配方：-液体LB培养基：10mL-高级琼脂糖：15g-NaCl：5g-pH调节至7.0后加水至1000mL 5.血寒养基配方：-羊血：50mL-肉浸出物：3g-酵母浸出物：3g-肉汤培养基：1L-红细胞素：5g-高级琼脂糖：3g-pH调节至7.0后加水至1000mL6.厌氧培养基配方：-肉浸出物：5g-酵母浸出物：5g-NaCl：5g-蒸馏水：900mL- 加入0.1%的L-cysteine：10mL-pH调节至7.0后用氮气替换空气注意事项：-培养基中的成分应严格按照配方比例加入，并保持无菌。
-配制好的培养基需要高温高压灭菌以保证无菌。
-不同的微生物可能对一些成分非常敏感，需要根据实际情况进行微调。
-培养基的pH值应根据微生物环境要求进行调整，一般在7.0左右。
-配好的培养基应存放在4℃的冰箱中，避免阳光直射以防止成分分解。
这只是一些常见的培养基配方，不同的微生物有不同的需求，可以根据具体的情况进行配方的调整。
在实际使用中，还需要根据微生物的特性和实验目的来选择合适的培养基。
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法实验室中常用的培养基有很多种，包括通用培养基、选择性培养基、富集培养基等。
下面以常用的LB培养基和M9培养基为例，介绍它们的配制方法。
1. LB培养基（Luria-Bertani agar）LB培养基是一种通用培养基，适用于许多不同类型的细菌。
它由三种主要成分组成：蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
配方如下：-蛋白胨：10克-酵母提取物：5克-NaCl：10克-精制水：1000毫升步骤如下：1)在一个大容量烧杯中加入蛋白胨、酵母提取物和NaCl。
2)加入适量的精制水，搅拌溶解。
3) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
4)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
2.M9培养基M9培养基是一种无机盐培养基，常用于细菌的生长和培养。
它的配方相对简单，由无机盐、葡萄糖和维生素B1组成。
配方如下：-Na2HPO4：6克-KH2PO4：3克-NaCl：0.5克-NH4Cl：1克-葡萄糖：0.4克-维生素B1：0.1克-精制水：1000毫升步骤如下：1)在一个大容量烧杯中加入Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和NH4Cl。
2)加入一部分的精制水，搅拌溶解。
3)加入葡萄糖和维生素B1，搅拌均匀。
4) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
5)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
以上是LB培养基和M9培养基的配制方法的简要介绍。
当然，实验室中还有很多其他种类的培养基，它们的配制方法也各有不同，需要根据具体的实验目的和细菌类型进行调整。
在培养基配制过程中，应当注意严格按照配方比例配制，保持清洁卫生，避免污染，并注意高压灭菌的操作安全。
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配方一萨氏(Sabouraud's)培养基
蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升
先把蛋白胨、琼脂加水后,加热,不断搅拌,待琼脂溶解后,加入40克麦芽糖(或葡萄糖),搅拌,使它溶解,然后分装,灭菌,备用。
1、营养肉汤培养基
牛肉膏 0.3克
蛋白胨 1.0克
NaCl 0.5克
水 100毫升
pH 7、0～7、2
在烧杯中加水,称取牛肉膏、蛋白胨与NaCl,加热溶化后,调节pH值至7、0～7、2。
分装,加棉塞,高压蒸汽灭菌即成。
常用于培养细菌。
2、营养琼脂培养基
在营养肉汤培养基中增加20克琼脂即成。
常用于培养细菌。
3、肉汁蛋白胨液体培养基
牛肉 500克
蛋白胨 10克
NaCl 5克
pH 7、1～7、2
取新鲜牛肉500克,去净脂肪、筋腱后,绞碎或剁碎,加水1000毫升浸泡,15℃下放置12小时或50℃下放置半小时。
用纱布将肉汁过滤,补足失水。
向肉汁中加入蛋白胨与食盐。
将肉汁加热,放入苏打(碳酸钠)至红色,调整pH值。
分装,高压蒸汽灭菌。
将上述已灭菌得培养基用棉花滤去凝集得蛋白质,制成液体培养基,如需制成固体培养基,可在每100毫升液体中加入2克琼脂,加热溶化后,分装,再次进行高压蒸汽灭菌。
常用于培养细菌。
4、高氏一号培养基(淀粉琼脂培养基)
可溶性淀粉 2克
K2HPO4 0.05克
MgSO4·7H2O 0.05克
KNO3 0.1克
NaCl 0.05克
FeSO4 0.001克
琼脂 2克
水 100毫升
pH 7、2～7、4
在烧杯中加水95毫升,加热至沸腾,取可溶性溶粉2克,用5毫升水调成糊状,倒入沸水中与匀。
再称取其它药品,陆续加入烧杯内(待一种药品溶解后,再加入第二种药品)。
待全部药品溶解后,停止加热,补足失水,调pH值至7、2～7、4。
分装后,高压蒸汽灭菌。
本培养基常用于培养放线菌。
5、马铃薯蔗糖培养基
马铃薯 200克
蔗糖 10克
琼脂 20克
水 1000毫升
自然pH
称取200克马铃薯片,加水1000毫升,煮沸半小时,用纱布过滤,补足失水。
在上述滤汁中加入10克蔗糖、20克琼脂,加热使琼脂熔化。
分装后,高压蒸汽灭菌。
常用于培养酵母菌。
6、麦芽汁培养基
将从啤酒厂买来加有啤酒花得麦芽汁,装入锥形瓶中,加塞高压蒸汽灭菌。
常用于培养酵母菌。
7、察氏培养基
NaNO3 2克
K2HPO4 1克
KCl 0.5克
MgSO4 0.5克
FeSO4 0.01克
蔗糖 30克
琼脂 15～20克
水 1000毫升
自然pH
分装,加棉塞,高压蒸汽灭菌。
常用于培养霉菌。
8、豆芽汁葡萄糖(或蔗糖)培养基
黄豆芽 100克
葡萄糖 50克
琼脂 15克
水 1000毫升
称取新鲜黄豆芽100克,放入烧杯中,加1000毫升水,煮沸30分钟,用纱布过滤,补足失水。
再加葡萄糖(或蔗糖)50克,琼脂15克,加热至融化,补足失水。
分装,加棉塞,高压蒸汽灭菌。
常用于培养霉菌。
9、伊红美蓝培养基(E、M、B培养基)
乳糖 10克
蛋白胨 5克
NaCl 5克
K2HPO4 2克
2%伊红水溶液 20毫升
0、35%美蓝水溶液 20毫升
琼脂 20克
水 1000毫升
pH 7、2
1、配制溶液
向容器内加入所需水量得一部分,按照培养基得配方,称取各种原料,依次加入使其溶解,最后补足所需水分。
对蛋白胨、肉膏等物质,需加热溶解,加热过程所蒸发得水分,应在全部原料溶解后加水补足。
配制固体培养基时,先将上述已配好得液体培养基煮沸,再将称好得琼脂加入,继续加热至完全融化。
并不断搅拌,以免琼脂糊底烧焦。
2、调节pH值
用pH试纸(或pH电位计、氢离子浓度比色计)测试培养基得pH值,如不符合需要,可用10%HCl或10%NaOH进行调节,直到调节到配方要求得pH值为止。
3、过滤
用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好得培养基过滤。
用纱布过滤时,最好折叠成六层,用滤纸过滤时,可将滤纸折叠成瓦棱形,铺在漏斗上过滤。
4、分装
已过滤得培养基应进行分装。
如果要制作斜面培养基,须将培养基分装于试管中。
如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基,则须将培养基分装于锥形瓶内。
分装时,一手捏松弹簧夹,使培养基流出,另一只手握住几支试管或锥形瓶,依次接取培养基。
分装时,注意不要使培养基粘附管口或瓶口,以免浸湿棉塞引起杂菌污染。
装入试管得培养基量,视试管与锥形瓶得大小及需要而定。
一般制作斜面培养基时,每只15×150毫米得试管,约装3～4毫升(1/4～1/3试管高度),如制作深层培养基,每只20×220毫米得试管约装12～15毫升。
每只锥形瓶装入得培养基,一般以其容积得一半为宜。
5、加棉塞
分装完毕后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。
堵棉塞得主要目得就是过滤空气,避免污染。
棉塞应采用普通新鲜、干燥得棉花制作,不要用脱脂棉,以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。
制作棉塞时,要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度,揪取手掌心大小一块,铺在左手拇指与食指圈成得圆孔中,用右手食指插入棉花中部,同时左手食指与姆指稍稍紧握,就会形成1个长棒形得棉塞。
棉塞作成后,应迅速塞入管口或瓶口中,棉塞应紧贴内壁不留缝隙,以防空气中微生物沿皱折侵入。
棉塞不要过紧过松,塞好后,以手提棉塞、管、瓶不下落为合适。
棉塞得2/3应在管内或瓶内,上端露出少许棉花便于拔取。
塞好棉塞得试管与锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札,准备灭菌。
6、制作斜面培养基与平板培养基
培养基灭菌后,如制作斜面培养基与平板培养基,须趁培养基未凝固时进行。
(1)制作斜面培养基。
在实验台上放1支长0、5～1米左右得木条,厚度为1厘米左右。
将试管头部枕在木条上,使管内培养基自然倾斜,凝固后即成斜面培养基。
(2)制作平板培养基。
将刚刚灭过菌得盛有培养基得锥形瓶与培养皿放在实验台上,点燃酒精灯,右手托起锥形瓶瓶底,左手拔下棉塞,将瓶口在酒精灯上稍加灼烧,左手打开培养皿盖,右手迅速将培养基倒入培养皿中,每皿约倒入10毫升,以铺满皿底为度。
铺放培养基后放置15分钟左右,待培养基凝固后,再5个培养皿一叠,倒置过来,平放在恒温箱里,24小时后检查,如培养基末长杂菌,即可用来培养微生物。
改良得Fries氏液体培养液:蔗糖30g、酒石酸铵5g、NH4NO3 0、5g、KH2PO4 1g、MgSO4·7H2O 0、5g、CaCl2 0、1g、酵母浸汁0、5g、蒸馏水1000mL。