非发酵菌 微生物学检验

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非发酵菌及检验

非发酵菌及检验

氧化酶(+) 触酶(+) 不分解任何糖 动力、吲哚、 甲基红、VP 、DNA酶(-) 6.5%NaCL肉汤不生长
+ 二、微生物检验
+ 1.标本采集 + 2.方法与鉴定
+ 临床意义
人和动物黏膜上的正常菌群,也引起社 区和医内感染。本菌是呼吸道感染的主要 致病菌。大多菌株对青霉素、四环素、氨 基糖苷类敏感。
+ 1.标本采集 + 2.方法及鉴定
+ 临床意义
条件致病菌 医院感染常见菌 对广谱抗生素有耐药性,红霉素、克 林霉素、复方磺胺敏感。
鉴定试验
肠杆菌科
非发酵菌
弧菌科
氧化酶
葡萄糖氧化/ 发酵(O/F) 鞭毛

F

O/-

F
周鞭毛
单、丛、周
单、丛
+ 脑膜败血性黄杆菌 + 芳香黄杆菌 + 短黄杆菌
+ 水生黄杆菌
+ 嗜糖黄杆菌 + 嗜醇黄杆菌
+ 嗜温黄杆菌
+ F.yabuuchiae
+ 定义:氧化酶阳性、产黄色素、无动力、
吲哚阳性或阴性的非发酵革兰阴性菌。
+ 一、生物学性状 + 1.形态与染色 革兰阴性杆菌 菌体细长
两端略膨大 无动力 无芽胞
发 氧 产
+ 《伯杰系统细菌学手册》(1984)分类法
+ + + + + +
按rRNA和DNA同源性,分5个RNA Ⅰ 铜绿假单胞菌 Ⅱ 洋葱假单胞菌 鼻疽假单胞菌 Ⅲ 食醋假单胞菌 Ⅳ 微小假单胞菌 Ⅴ 嗜麦芽假单胞菌 腐败假单胞菌

dl第二十一章 非发酵菌及检验

dl第二十一章  非发酵菌及检验
新鲜标本(胸腹水、脑脊液、脓汁等),分离培养 可疑菌落可涂片镜检。
分离培养
BAP、SS、MAC
鉴定
初步鉴定(菌落、菌体特征,色素、氧化酶、 KIA),最后鉴定(系统生化、血清学)
药敏试验
粪便
胸腹水 离心 脑脊液 沉淀 尿液 分泌物 血液 (增菌) 体液
分离培养 (SS、MAC)
可 疑 菌 落 初 步 鉴 定
不动杆菌属
不动杆菌属(Acinetobater)为一群不发酵
糖类、氧化酶 - 、无动力的革兰阴性杆菌。 生化反应:氧化酶 - ,MIU - - - ,硝酸盐 还原试验 - 。 耐药性:对全部氨基青霉素、一代二代头 孢菌素和一代喹诺酮类抗生素天然耐药。
鲍曼不动杆菌在BAP上的生长现象
4 2 1
O-F
1
DNA
结果 总值
O
+ + — 6
+ — + 5
+ — — 4
鉴定值:1654
鉴定结果:铜绿假单胞菌
嗜麦芽窄食假单胞菌
嗜麦芽窄食假单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)为条件致病菌,常引起抵抗力
低下患者的各种感染,在假单胞菌的感染 中检出率仅次于铜绿假单胞菌。 生化反应特殊:氧化酶 - ;赖氨酸脱羧酶 +; 氧化分解麦芽糖;水解七叶苷。 耐药性:含有-内酰氨酶,对亚胺培南天然 耐药,临床治疗首选磺胺类(TMP/SMZ); 喹诺酮类:环丙沙星或替卡西林/克拉维酸。
铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)是假单胞
菌属的代表菌种,为条件致病菌,是医院 感染的主要病原菌。可经多种感染途径、 污染导致多种感染,且对多种抗生素天然 耐药,因此有很重要的临床意义。

【临床微生物实验】_非发酵菌概述、假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌

【临床微生物实验】_非发酵菌概述、假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌
专性需氧 营养要求不高 最适生长温度35℃ 最适pH7.0 有些菌生长过程中 产色素(水溶性)
表面生长
恶臭假单
胞菌在血 平板和中 国蓝平板 上菌落
脂溶性色素
水溶性黄绿色色素
Pseudomonas生化特征
氧化酶阳性
触酶阳性
Pseudomonas生化特征
氧化分解葡萄糖
VP、甲基红、吲哚均(- )
有单鞭毛 有菌毛 无芽孢 无荚膜
痰涂片中被吞噬的铜 绿假单胞菌
痰涂片中粘液型铜绿 假单胞菌
痰涂片中粘液型铜绿假单胞菌
Pseudomonas aureginosa 形态和培养特征
• 专性需氧(部分菌株可兼性厌氧)
• 营养要求不高
• 最适生长温度25~30℃,42℃生长, 4℃不生长
Pseudomonas aeruginosa
MexA-MexB-OprM及MecC-MexD-OprJ ④整合子携带耐药基因盒:1类,3类(多重耐药) ⑤生物膜形成阻碍抗菌药物进入
➢ 临床治疗假单胞菌感染常用抗菌药物 主要有:
β内酰胺类 氨基糖苷类 喹诺酮类
铜绿假单胞菌固有耐药种类 氨苄西林、阿莫西林、头孢噻肟、厄
他培南、四环素/替加环素、复方磺胺甲 恶唑、氯霉素等
KEY POINTS
➢ The term nonfermenting bacilli (NFB) describes a large group of aerobic,non-fermentative, nonsporeing, grame-negative bacilli belonging to taxonomically diverse genera, species that all share the common phenotypic features.

非发酵菌的检验(实验)

非发酵菌的检验(实验)
不发酵革兰阴性杆菌的检验
成都医学院 临床微生物学教研室
目的
❖ 1.掌握非发酵菌的形态、染色性和菌落特征。 ❖ 2.熟悉非发酵菌的主要生化反应。
器材
❖ 接种环、酒精灯、显微镜等
试剂
❖ 革兰染液、氧化酶试剂、非发酵菌编码生化 鉴定管及相关试剂、生理盐水等
标本
❖ 1#标本和2#标本
操作
❖ 1.标本涂片染色镜检 ❖ 2.接种、培养 ❖ 3.生化试验 ❖ (1)氧化酶试验 ❖ (2)非发酵菌编码生化鉴定管
1组 O-F试验 厌需 氧氧
01
2组 氧枸 麦 化橼 芽 酶酸 糖
42 1
3组 精甘木 氨露糖 酸醇
421
4组
硝D乙酸N酰盐 还Fra bibliotekA 酶
胺 酶

421

实验:非发酵菌的鉴定

实验:非发酵菌的鉴定
H2S产生 在42℃ 生长

- +
0
0 100
不动杆菌属主要菌种间的鉴别
醋酸钙 葡萄糖氧化 木糖氧化 乳糖氧化 精氨酸双水解酶 + - + + 鲍曼 + + + + 溶血 琼氏 约翰逊 洛菲 - - + -/+ - - + - +/- - +/- - - + + +
鸟氨酸脱羧酶
枸椽酸盐利用 明胶液化 生长温度: 37℃ 41℃ 42℃
实验:非发酵菌的鉴定
实验目的


1.掌握常见非发酵菌的形态、染色特性、生 化反应及鉴定依据; 2.熟悉常见的几种非发酵菌的鉴定程序及鉴 别方法。
器材和试剂


1.菌种:假单胞菌属细菌、不动杆菌属细菌 和窄食单胞菌属细菌; 2.鉴定试验:双糖管,葡萄糖OF管,枸椽 酸盐琼脂,尿素,鸟氨酸、精氨酸、赖氨 酸,明胶、七叶苷,DNA酶,硝酸盐,木 糖,乳糖,蔗糖。
方法:

1.形态观察; 2.菌落观察; 3.生化反应。
常见非发酵菌的鉴定依据

1.铜绿假单胞菌:
+ + + - +/- 97 97 98 0 85
单端鞭毛(三根以下) 动 力 氧化分解(O-F培养基) 葡萄糖 乳糖、蔗糖 木 糖
氧化酶
赖氨酸脱羧酶 精氨酸双水解酶

- +
100
0 99
鸟氨酸脱羧酶

+ - + - -

+ - + + +

+ + + - -

- + + -

- - - -

- - + - -
+/- +
嗜麦芽窄食单胞菌
氧化酶 动力 明胶 42゚C 七叶苷 赖氨酸 – + + +/+ +

微生物学--非发酵菌检验

微生物学--非发酵菌检验

(二)、微生物特性
❖ G-直或微弯曲杆菌,具有端鞭毛1-8根2根或 多根极端丛鞭毛,有动力,无芽孢。
❖ 该菌专性需氧,营养要求不高,可在普通平 板血平板和MAC上生长。血平板上培养1824小时,形成圆形、光滑、湿润、浅黄色菌 落;培养48小时菌落,可呈黄色、绿色或灰 白色,菌落中心可有变透明的趋势,称为“猫 眼”现象。
光滑、半透明、边缘整 齐不溶血的菌落。
(四)、微生物学检验
鉴定: ❖ 氧化酶阳性 ❖ 触酶阳性 ❖ 无动力 ❖ 不分解任何糖类 ❖ 吲哚试验阴性
(五)、药物敏感试验及结果解释
❖ 对青霉素类敏感 ❖ 对头孢类、四环素类、喹诺酮类、氨基糖
甙类药物均为敏感 ❖ 脑炎或脑膜炎、脑脓肿应注意药物通过血
脑屏障的问题
(二)、临床意义
❖ 引起眼结膜炎、气管炎、肺炎、脑膜炎、 脑脓肿、心包炎、心内膜炎及泌尿生殖系 统炎症
(三)、微生物特性
❖ 革兰阴性球杆菌 ❖ 呈双短链状排列,
具有多形性
(四)、微生物学检验
分离培养: ❖ 营养要求较高 ❖ 生长温度32~35℃ ❖ 血琼脂平板上生长良好 ❖ 针尖大小的圆形凸起、
生物学特性
G-杆菌,无芽孢,无荚膜,多数菌有端鞭毛或 丛鞭毛,专性需氧菌,生长温度范围广,最适 30-37度,普通培养基上可以生长,可产各种水 溶性色素。抵抗力强,多种抗生素耐药。
微生物检验
2.鉴定:氧化分解葡萄糖、产酸不产气,触酶 氧化酶阳性,吲哚 、甲基红、VP阴性。
❖分型
1.噬菌体分型 2.血清分型 3.核糖体分型 4.PFGE分型
(二)、微生物检验
❖ 鉴定:氧化酶(-),明胶液化试验(+), 七叶苷(+),赖氨酸脱羧酶(+), 氧化分解葡萄糖。

《微生物学检验》课件——第十章 非发酵革兰阴性杆菌

《微生物学检验》课件——第十章 非发酵革兰阴性杆菌

所致疾病: 条件致病菌 医院感染的重要病 原菌 大面积烧伤创面感 染的重要病原菌
铜绿假单胞菌——检验程序
涂片 染色镜检
标本
分离培养 (血平板)
血标本 增菌
涂片镜检 氧化酶 菌落特征 绿脓素 气味
可疑菌落(性状、色素)
初步鉴定 最后鉴定
色素鉴定 生化反应 42℃生长 分型
O/F:O 枸櫞酸盐利用+ 精氨酸双水解+ 乙酰胺酶+ 明胶液化+
氧化酶+; O/F:O;卵磷 脂酶+;明胶液 化+; 嗜冷性。
恶臭假单胞菌
G-b,单端丛鞭毛, 专性需氧, 最适温度25~30℃,4℃生长,35℃、42℃不长。

物 学 特
产生水溶性荧光素(青脓素),不产绿脓素; 陈旧培养物有腥臭味。

氧化酶:+; O/F:O;卵磷脂酶:-; 明胶液化:-。
指示剂:溴麝香草酚蓝
培养基pH:7.0
O/F:F
葡萄糖氧化发酵试验(O/F)
O/OF:/F:O F O/F:-
肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别
鉴定试验 OX
肠杆菌科 非发酵菌 弧菌科



O/F 鞭毛
F
O/-
F
周鞭毛 单、丛、周 单、丛
假单胞菌属共同点
产生水溶性色素
G-b,有鞭毛
MAC:+
共同点
产碱杆菌属——主要特征
1.革兰阴性杆菌、有周鞭毛、无芽孢、无荚膜; 2.专性需氧; 3.营养要求不高,普通平板和Mac平板上可生 长; 4.氧化酶+、O/F:K、不分解任何糖; 5.是医院感染病原菌之一,粪产杆菌多见。
不动杆菌属——主要特征
1.现已命名6个生物种,代表菌为醋酸钙不动杆 菌; 2.革兰阴性球杆菌,成双排列,无鞭毛,动力 阴性; 3.专性需氧,营养要求不高,普通平板、Mac 平板上可生长; 4.氧化酶-;O/F:O/-;硝酸盐还原-; 5.临床标本分离率仅次于铜绿假单胞菌。

非发酵菌及检验

非发酵菌及检验
1、标本采集:血液、脑脊液、胸腹水、尿 液、痰液、脓汁等。医院环境监控:可采空气、 水、物体表面等。 2、检验程序
3、检先增菌,再转 种血平板和麦康凯平板分离;脓汁、分泌物、 尿可直接种于上述培养基分离培养。
(3)鉴定:根据菌落特征、色素、 生姜气味、菌体形态、氧化酶试验等 作出鉴定。对无色素的菌株应与其他 假单胞菌鉴别。
铜绿假单胞菌的检验程序:
血液 体液
脑脊液、胸腹水、脓汁、痰、尿液 粪便
分离培养 血、麦康凯
增 菌 营养肉汤
直接涂片染色
分离培养 SS、麦康凯
初步鉴定 菌落特征,色 素 菌体形态、氧化酶
最后鉴定
生化反应
分型:血清学
噬菌体
铜绿假单胞菌的鉴定要点及与其他假单胞菌的区别
试 验 铜绿假 单胞菌 + 荧光假 单胞菌 + 恶臭假 单胞菌 + 斯氏假 单胞菌 + 嗜麦芽 假单胞 _ 鼻疽假 单胞菌 +/_ 类鼻疽 假单胞 +
挑选可疑菌落
最后鉴定 生化反应
初步鉴定 KIA:底层、斜面不变 硝酸盐还原、氧化酶、 动力
不动杆菌属主要菌种生化反应特征
醋酸钙不 动杆菌 鲍曼不 动杆菌 溶血不 动杆菌 琼氏不 动杆菌 约翰逊 不动杆菌 洛菲不 动杆菌
葡萄糖氧化
木糖氧化 乳糖氧化 精氨酸双水解酶

_ + +

+ + +
+/_
+/_ _ +
琼氏不动杆菌
约翰逊不动杆菌
一、生物学性状
形态与染色 革兰阴性球杆菌,常成双排列, 不易退色,多数有荚膜、无芽孢、无鞭毛。 培养特性 专性需养,营养要求不高。
最适温度35℃ ,鲍曼不动杆菌42℃可生长。 血平板上 圆形凸起、2~3 mm ,光滑、边 缘整齐、灰白色的菌落,部分菌落呈黏液状(溶 血不动杆菌可形成 β -溶血环); 不产生色素。 麦康凯平板 形成粉红色菌落。
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非发酵G-杆菌(nonfermentative G- Bacilli)1. 非发酵菌是一群需氧、无芽孢、不利用糖或仅能氧化分解糖类是做为能量来源的G-杆菌。

(1)通常所讲的非发酵菌指在KIA中24小时内表面能够生长,在底部不生长的需氧G-杆菌。

(2)非发酵菌与其它苛养或非糖发酵的G-杆菌之间的界限只是传统意义上的,并不是根据明确的遗传或表型特点来划分。

(3)多为条件致病菌,近年来日益增多,尤其是医院感染。

2. 分类与命名:主要的非发酵G-杆菌属被分成6个科:(1)假单胞菌科:根据rRNA-DNA同源性分为5个rRNA群①rRNAⅠ群/假单胞菌属;②rRNAⅡ群/伯克霍尔德菌属;③rRNAⅢ群/丛毛单胞菌属、食酸菌属;④rRNAⅣ群/短波毛单胞菌属;⑤rRNAⅤ群/窄食单胞菌属;⑥其它:鞘氨醇单胞菌属、希瓦菌属等(2)产碱杆菌科:产碱杆菌属;(3)黄杆菌科:华丽杆菌属(4)莫拉菌科:不动杆菌属、莫拉菌属;(5)甲基球菌科;(6)根瘤菌科3. 非发酵菌的基本鉴定要求(1)缺少糖发酵的证据,通常是在KIA或TSI培养基中无酸产生,斜面和底部均呈红色。

(2)氧化酶+(不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、唐菖蒲伯克菌、浅黄华丽单胞菌、栖稻黄素单胞菌-),但并非所有氧化酶+的G-杆菌都是非发酵菌。

(3)麦康凯上生长很差或不生长。

(4)动力:多为+,但多为专性需氧,故半固体培养基中不明显,宜用直接动力观察或染色法。

4. 重要的鉴定试验(1)葡萄糖利用(O/F试验):O/F培养基:蛋白胨和糖类的比例为1:5而不同于发酵菌的1:2。

(2)氧化酶试验:(3)动力:半固体培养基:应只穿刺培养基顶部4mm,在培养4-6小时后首次观察结果,24和48小时后再次观察结果。

更准确的方法是湿片法和鞭毛染色。

(4)色素形成:非发酵菌可形成多种色素,有助于菌种的鉴定。

(5)硝酸盐还原/产气:将硝酸盐还原成亚硝酸盐,进而释放氮的生化过程。

(6)吲哚试验:需用含色氨酸丰富的培养基,产吲哚黄杆菌、脑膜败血黄杆菌、食酸丛毛单胞菌等+。

(7)硫化氢:腐败希瓦菌是非发酵菌中唯一在KIA和TSI上产硫化氢的菌种。

5. 常见不发酵G-杆菌的初步分群鉴定6.O-F试验:O/F培养基(蛋白胨和糖类的比例为1:5),溴甲酚紫指示剂,其中一管用石蜡密封,另一管暴露于空气中。

(一)、. rRNAⅠ群/ 假单胞菌属(Pseudomonas)1.(1)直或微弯无芽孢G-杆菌,OXI+,动力+(一个或多个极鞭毛),严格需氧,氧化利用葡萄糖、触酶+、McC生长,水溶性色素。

(2)本属包括铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、斯氏假单胞菌、门多萨假单胞菌、产碱假单胞菌和类产碱假单胞菌。

2. 铜绿假单胞菌(1)分布广泛,是非发酵菌中最具临床意义的细菌,也是医院内感染最多见的细菌,主要引起条件感染。

(2)感染多发生于烧伤、急性白血病、器官移植病人及静脉药瘾者,感染多位于潮湿部位,如气管造口、留置的导管、创面、外耳道、角膜和渗出性皮肤伤口处(3)囊性纤维化病人呼吸道分离的铜绿假单胞菌具有生物膜(其产生的大量藻酸盐包围了菌体所致),导致本病的治疗困难和高死亡率。

(4)其淡蓝色脓性渗出物及绿脓素的生姜样气味具有特征性。

3. 铜绿假单胞菌的耐药性(1)本菌对氨苄西林、安美汀、四环素、优力新、一、二代头孢菌素、头霉素、大环内酯类、磺胺等天然耐药(2)各种抗生素治疗过程中都可能产生耐药,耐药率及多重耐药株上升较快。

(3)耐药机制:生物膜及外膜障碍、胞外灭活或钝化酶、主动外排系统将抗生素泵出胞外、抗菌药物作用靶位改变4. 生物膜(1)生物膜由依靠胞外产物而吸附于固体表面的微生物集落构成,并能结合有机和无机成分,形成包含复杂的理化过程和生物群落的相互作用。

(2)如正常菌群与上皮细胞表面受体结合而黏附,并分泌胞外多糖聚合物,使细菌以非常精细的方式相互粘连,形成膜状物,能发挥屏障和占位性保护作用,使外来病菌不能定植而通过侵入门户侵袭机体。

5. 铜绿假单胞菌感染的控制:(1)易感危重病人不应安排在已有过铜绿假单胞菌感染的病房;各种抗菌药物、溶液、软膏、器械等应避免被铜绿假单胞菌污染;采取适当的分型方法对感染菌株进行流行病学调查和监控;噬菌体治疗:6. 铜绿假单胞菌的检验(1)标本采集:按疾病和检查目的,分别采取不同的标本:患者的血液、脑脊液、胸(腹)水、脓液、分泌液、痰、尿液、十二指肠引流液、粪便等;(2)医院病区或手术室的空气、水、地面、把手、医疗诊断器械及生活用品。

(3)标本镜检为G-,有动力的杆菌(4)分离培养:普通培养基经18-24h形成圆形、扁平隆起、光滑湿润菌落。

大多数产生绿脓素或荧光素。

少数可产生其他颜色色素,如红脓素(红色),黑脓素(棕色到黑色),青脓素(黄色)。

McC经18-24h形成微小无光泽半透明菌落,48h菌落中心呈棕绿色。

(5)生化鉴定:氧化酶+,氧化分解葡萄糖、木糖产酸不产气,液化明胶,还原硝酸盐产生氮气,吲哚-,利用枸橼酸盐,精氨酸双水解酶+。

(1)形态学特性:细长G-杆菌,极单鞭毛,(2)培养特性:A. 严格需氧,氧化利用葡萄糖、McC生长,最适生长温度35℃,4℃不生长,42℃可生长;B. 在普通琼脂平板上产生特征性的蓝绿色水溶性绿脓素和黄绿色青脓素(荧光假单胞菌和恶臭假单胞菌也可产生);C. 血平板上形成大而扁平,湿润,边缘不齐,有金属光泽,有生姜气味的灰绿色菌落,并形成透明溶血环;D. 有时可产生水滴样菌落,无色素不溶血(囊性纤维化病人);(3)铜绿假单胞菌的分型:药敏分型、血清学分型:菌体O及H抗原、噬菌体分型、质粒指纹图谱分析、重复序列PCR、脉冲场凝胶电泳;(4)检验结果分析与报告:结合临床感染症状进行分析;患者血、尿液及无菌体液中分离到铜绿假单胞菌,特别是反复检出即可确定是感染病原菌;如无感染的临床表现,应作为正常菌群。

7. 荧光假单胞菌(1)见于水和土壤中,都可作为咽部的正常菌群存在,是人类少见的条件致病菌(2)荧光假单胞菌和污染的血液制品关系密切,可见于近期接受过血液制品而致菌血症的患者。

(3)丛极鞭毛,产青脓素,但不能产绿脓素,4℃生长, 42℃不生长, 最适温度25-30℃。

(二)、rRNAⅡ群/ 伯克霍尔德菌属1.(1)所有rRNAⅡ群的细菌都被归入一个新属,伯克霍尔德菌属(Burkholderia)。

(2)本属菌包括13个种,其中伪马勒伯克霍尔德菌B. pseudomallei、洋葱伯克菌B. cepacia、唐菖蒲伯克氏菌B. gladioli和皮氏伯克菌B. pickettii与人类疾病相关(3)本属其他菌种与植物或动物有关而与人类疾病无关。

2. 伪马勒伯克霍尔德菌(1)生长有特定的生态区域,存在于赤道南北纬20度之间的土壤和不流动的水中,主要在泰国和越南。

本菌在美国主要是从越战士兵和去东南亚的旅游者中发现,可致人或动物类鼻疽。

(2)大多数感染无症状,只能通过血清学诊断。

(3)本菌的一个特点是可潜伏感染,首次接触多年后复发。

传播主要是通过呼吸道或破损的皮肤的直接接触,对类鼻疽的明确诊断依(4)本菌在大多数实验室常规培养基中易生长,并产生皱缩形菌落,呈红棕色,在形态上同斯氏假单胞菌有些相似,另外本菌还可产生刺激性泥土气味3. 洋葱伯克霍尔德菌(1)是一种植物病原菌,从80年代早期开始本菌作为条件致病菌出现,在慢性肉芽肿和囊性纤维化的病人中常引起高死亡率和肺功能的全面下降。

(2)本菌是非发酵菌中仅有的两种赖氨酸脱羧酶+的细菌之一(另一种是嗜麦芽窄食假单胞菌)。

(3)可从各种水源和潮湿表面分离到,能在某些消毒剂(如铵盐、聚维酮碘、洗必泰等)中生长,也可生长于有氮源的蒸馏水中(4)本菌对氨基糖苷类抗生素耐药,对TMP/SMZ敏感,因此常用此药治疗洋葱伯克菌感染。

3. 伯克霍尔德菌属微生物学检查法(1)标本:脓液、血液、鼻液等;(2)直接涂片镜检:荧光染色法;(3)分离培养与鉴定:BAP、MAC;(4)抗原检测:LPS、蛋白共同Ag;(三)、rRNAⅢ群(1)包括两个菌属:丛毛单胞菌属Comamonas和食酸菌属Acidovorax;(2)食酸丛毛单胞菌是本属菌中最常从临床标本中分离到的,可通过OF果糖和甘露醇产酸、乙酰胺+而与其他菌相区别,还是产生桔黄色吲哚反应的唯一细菌;(四)、rRNAⅣ群/ 短波毛单胞菌属(1)短波毛单胞菌属B. revundimonas包括两个菌种:缺陷短波毛单胞菌B. diminuta和泡囊短波毛单胞菌B.vesicularis(2)具有一条短波(0.6-1μm)紧密螺旋的单极鞭毛。

对大多数碳水化合物无反应或反应很弱,属于产碱的假单胞菌。

(3)泡囊短波毛单胞菌生长缓慢,通常需培养48小时才可见菌落,并产生深黄到桔黄的色素,通过七叶苷水解+而易与其他假单胞菌区别。

(五)、rRNAⅤ群/窄食单胞菌属(1)窄食单胞菌属(Stenotrophomonas)是一个新命名的菌属,有2个菌种,嗜麦芽窄食单胞菌S. maltophilia和S. Africana。

(2)在1961年根据其鞭毛特征命名为嗜麦芽假单胞菌,1983年根据核酸同源性和细胞脂肪酸组成等归入黄单胞菌属,命名为嗜麦芽黄单胞菌,但由于其无黄单胞菌素,无植物病原性,能在37℃生长,且为极丛鞭毛,与其他黄单胞菌不同。

(3)1993年此菌命名为嗜麦芽窄食单胞菌1. 嗜麦芽窄食单胞菌(1)分布广泛,可引起条件感染,是临床第三位最常见的非发酵菌,是一种重要的医院获得性病原体,本菌可分离于几乎所有部位,最常见的是呼吸道。

(2)可致多种疾病,包括肺炎、菌血症、心内膜炎、胆管炎、脑膜炎、尿道感染和严重的伤口感染等。

(3)危险因素:机械通气、广谱抗生素的预防性应用、化疗、插管和中性粒细胞减少等。

嗜麦芽窄食单胞菌(4)下列特征可用来推测性鉴定:①在血平板或麦康凯平板上生长良好;②氧化酶-;③O/麦芽糖产酸,但O/葡萄糖可-;④赖氨酸脱羧酶+;⑤一些菌株产黄色色素;⑥抗生素敏感方式:对大多数抗生素耐药,包括氨基糖苷类和碳青霉烯类,但对TMP/SMZ敏感。

(5)嗜麦芽窄食单胞菌为有动力杆菌,具有丛极鞭毛,血平板上菌落粗糙呈淡黄色或浅绿色,有氨气味。

(6)根据赖氨酸脱羧酶试验+和DNA酶+、氧化酶-可很容易与其他假单胞菌区别,本菌葡萄糖氧化缓慢,可快速氧化分解麦芽糖。

(7)本菌的一个重要特征是对氨基糖苷类抗生素、碳青霉烯类天然耐药,但TMP/SMZ天然敏感。

不动杆菌属1. 开始被归于奈瑟菌科,但最近又被归入莫拉菌科。

根据DNA-DNA杂交和营养特征将不动杆菌属分为25个基因种,但只有10个基因种有菌名:乙酸钙不动杆菌,主要分离自土壤、鲍曼不动杆菌、溶血不动杆菌、琼氏不动杆菌、约翰逊不动杆菌、洛菲不动杆菌2. 鲍曼不动杆菌(1)广泛分布于自然和医院环境中,能在潮湿和干燥的表面生存,也可存在于健康人的皮肤,通常不致病,但对体弱者可引起感染。

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