培养基的认识及选择ppt课件
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人教版高中生物选修一课件：2.1微生物的实验室培养 (共60张PPT)
专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
1
（一）培养基
1、定义：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制 出供其生长繁殖的营养基质。 2、培养基成分:碳源、氮源、水和无机盐等4类 ★另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,以及 氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。如:培养乳酸菌时需 添加维生素、霉菌PH调成酸性、细菌PH调成中性或微碱 性、厌氧微生物提供无菌条件。 ★ 4类成分齐全的培养基叫基本培养基，例如牛肉膏蛋白 胨培养基
根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指
示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的
微生物。
3
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
4
固体培养基：菌落
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定 形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
菌落特征是鉴定菌种的重要依据。
5
于计算平均值，因为它不接近真实值，应重新实验
并注意：将菌液摇匀后再接种 P22
35
㈤.微生物的培养与观察
培养不同微生物往往需要不同培养温度。 细菌：30～37℃培养1～2d 放线菌：25～28℃培养5～7d 霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。
在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。 选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止 因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动) 6
选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的细胞. 使之进行繁殖所用的培养基,称为选择培养基.
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌
课题1 微生物的实验室培养
1
（一）培养基
1、定义：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制 出供其生长繁殖的营养基质。 2、培养基成分:碳源、氮源、水和无机盐等4类 ★另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,以及 氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。如:培养乳酸菌时需 添加维生素、霉菌PH调成酸性、细菌PH调成中性或微碱 性、厌氧微生物提供无菌条件。 ★ 4类成分齐全的培养基叫基本培养基，例如牛肉膏蛋白 胨培养基
根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指
示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的
微生物。
3
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
4
固体培养基：菌落
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定 形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
菌落特征是鉴定菌种的重要依据。
5
于计算平均值，因为它不接近真实值，应重新实验
并注意：将菌液摇匀后再接种 P22
35
㈤.微生物的培养与观察
培养不同微生物往往需要不同培养温度。 细菌：30～37℃培养1～2d 放线菌：25～28℃培养5～7d 霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。
在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。 选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止 因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动) 6
选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的细胞. 使之进行繁殖所用的培养基,称为选择培养基.
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌
《培养基的种类》课件
常用类型
单倍液体培养基
含有单倍营养物质，适用于快速生长 的微生物。
倍比液体培养基
天然液体培养基
以天然原料为基础，添加适量营养物 质和生长因子，适用于特定微生物的 培养。
含有倍比营养物质，适用于生长较慢 的微生物。
应用领域
工业发酵
用于生产各种酶、抗生素、氨基 酸和有机酸等生物制品。
医学研究
用于病毒、细菌和寄生虫的培养 、分离和鉴定。
环境监测领域
用于检测水体、土壤和空气中的微 生物污染情况，评估环境质量。
03
液体培养基
定义与特点
定义
液体培养基是一种不包含固体成分的培养基，完全呈液态。
特点
液体培养基可以提供微生物生长所需的水分、营养物质和生长因子，促进微生 物快速生长和繁殖。同时，液体培养基也便于搅拌和混合，有利于微生物的均 匀分布和氧气供应。
食品工业
在食品工业中，选择性培养基 用于检测食品中的微生物，如 大肠杆菌、沙门氏菌等。
医学领域
在医学领域，选择性培养基用 于临床诊断和治疗中，如结核 病的诊断和病原菌的分离培养 。
环境监测
在环境监测中，选择性培养基 用于检测水体和土壤中的特定
微生物，如总大肠菌群等。
05
其他培养基
高盐培养基
总结词
根据成分分类
根据培养基的成分，可分 为天然培养基、合成培养 基和半合成培养基。
根据物理状态分类
根据培养基的物理状态， 可分为液体培养基和固体 培养基。
02固体培养基源自定义与特点定义固体培养基是一种在微生物培养 中使用的凝固剂，使培养基保持 一定的形状和硬度。
特点
固体培养基具有较好的稳定性， 能够为微生物提供适宜的生长环 境，使微生物在生长过程中形成 可见的菌落。
高中生物 1.2 培养基对微生物的选择作用课件 中图版选
• 将火锥焰形瓶中的约15 mL左培手养液倒入培养皿。立即盖上右皿手 • 盖，待_________后备用。
平板冷却
3．接种 • 采mL稀用的释_土_涂_壤_布_稀__平释__板液__法滴__于__平进板行上接，种再，用用无__菌____吸____管_________吸_涂取布0.0。5 涂布时可___________ ，使涂布均匀无。菌用涂_布__器______取 _____转__动_覆培盖养于皿培养基上，并用涂布无器菌压镊平。子
• •
(选3)择意培义养基分离法是_________优__先的生一长种方法，在所需微生物
在混合样品中数量_____，不适宜直接采用___________或
______进行分离时，分该离法微仍生然物可用。通过这种方法，可以有选
择地_____和_____不同的微生物。
很少
平板稀释法 划线法
分离
培养
1．纤• (维1)素纤与维纤素维的素化酶学组成 • 由C、H、O三种元素组成， 是一种多糖。纤维素的基 本组成单位是葡萄糖，人体内没有分解纤维素的酶，所 以人体不能直接利用纤维素作为能源物质，但土壤中有 分解纤维素的微生物，最终把纤维素分解成二氧化碳和 水释放到无机环境中去。 • (2)纤维素的分布 • 棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木 材、作物秸秆等也富含纤维素。纤维素产生于植物的光 合作用，地球上的植物每年产生的纤维素超过70 亿吨。 研
_____其他微生物生长，从而特将定所需要的微生物从 抑制
____________ • _____中分离出来的培养基。
混杂的微生物
群体
• (2)配制方法
• •
①__配__制_要选求择，培加养入基_时__，__可__以__根或据除某去一__种__或__某__一__类__微_ ，生_物__的特_其_殊_他__
平板冷却
3．接种 • 采mL稀用的释_土_涂_壤_布_稀__平释__板液__法滴__于__平进板行上接，种再，用用无__菌____吸____管_________吸_涂取布0.0。5 涂布时可___________ ，使涂布均匀无。菌用涂_布__器______取 _____转__动_覆培盖养于皿培养基上，并用涂布无器菌压镊平。子
• •
(选3)择意培义养基分离法是_________优__先的生一长种方法，在所需微生物
在混合样品中数量_____，不适宜直接采用___________或
______进行分离时，分该离法微仍生然物可用。通过这种方法，可以有选
择地_____和_____不同的微生物。
很少
平板稀释法 划线法
分离
培养
1．纤• (维1)素纤与维纤素维的素化酶学组成 • 由C、H、O三种元素组成， 是一种多糖。纤维素的基 本组成单位是葡萄糖，人体内没有分解纤维素的酶，所 以人体不能直接利用纤维素作为能源物质，但土壤中有 分解纤维素的微生物，最终把纤维素分解成二氧化碳和 水释放到无机环境中去。 • (2)纤维素的分布 • 棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木 材、作物秸秆等也富含纤维素。纤维素产生于植物的光 合作用，地球上的植物每年产生的纤维素超过70 亿吨。 研
_____其他微生物生长，从而特将定所需要的微生物从 抑制
____________ • _____中分离出来的培养基。
混杂的微生物
群体
• (2)配制方法
• •
①__配__制_要选求择，培加养入基_时__，__可__以__根或据除某去一__种__或__某__一__类__微_ ，生_物__的特_其_殊_他__
《细菌的培养方法》课件
《细菌的培养方法》PPT 课件
细菌的培养是一项重要的实验技术，本课件将介绍细菌培养的各种方法和技 巧，以及培养过程中需要注意的条件和控制。
培养基的选择
培养基的种类和配方
了解不同种类和配方的培养基，选择适合特定细菌的培养基。
不同细菌所需的基本营养成分
掌握不同细菌所需的营养成分，为其提供合适的生长环境。
3
接种
学习不同接种方法，将细菌转移到培养基上进行生长。
4
培养箱的使用
了解培养箱的操作和使用技巧，提供稳定的培养环境。
常见细菌的培养方法
普通细菌的培养
介绍培养常见细菌的 方法和技巧，如大肠 杆菌等。
必需营养物细菌 的培养
了解必需营养物细菌 的培养方法，满足其 特殊的营养需求。
厌氧菌的培养
掌握培养厌氧菌的技 术，为其提供合适的 生长环境。
培养技术
1 纯培养
学习如何进行细菌的纯培养，以获得纯净的 细菌培养物进行研究。
2 混合培养
了解混合培养技术，用于培养多种细菌共存 的环境。
3 原代培养
学习如何进行原代培养，从样品中分离出单 个细菌菌落进行培养。
4 经过子代培养
掌握细菌的连续培养方法，保持菌株的稳定 性和可用性。
培养条件的控制
温度
难以培养细菌的 培养
解决难以培养细菌的 挑战，探索新的培养 方法和技术。
语
细菌培养的实际应用
探索细菌培养在科学研究、医学和工业中的实际应 用。
细菌培养的限制和进展
讨论细菌培养所面临的限制，并展望未来的发展和 创新。
了解细菌对温度的适 应性，并控制培养环 境的温度以促进生长。
pH值
掌握细菌生长所需的 最适pH范围，并调节 培养基的酸碱度。
细菌的培养是一项重要的实验技术，本课件将介绍细菌培养的各种方法和技 巧，以及培养过程中需要注意的条件和控制。
培养基的选择
培养基的种类和配方
了解不同种类和配方的培养基，选择适合特定细菌的培养基。
不同细菌所需的基本营养成分
掌握不同细菌所需的营养成分，为其提供合适的生长环境。
3
接种
学习不同接种方法，将细菌转移到培养基上进行生长。
4
培养箱的使用
了解培养箱的操作和使用技巧，提供稳定的培养环境。
常见细菌的培养方法
普通细菌的培养
介绍培养常见细菌的 方法和技巧，如大肠 杆菌等。
必需营养物细菌 的培养
了解必需营养物细菌 的培养方法，满足其 特殊的营养需求。
厌氧菌的培养
掌握培养厌氧菌的技 术，为其提供合适的 生长环境。
培养技术
1 纯培养
学习如何进行细菌的纯培养，以获得纯净的 细菌培养物进行研究。
2 混合培养
了解混合培养技术，用于培养多种细菌共存 的环境。
3 原代培养
学习如何进行原代培养，从样品中分离出单 个细菌菌落进行培养。
4 经过子代培养
掌握细菌的连续培养方法，保持菌株的稳定 性和可用性。
培养条件的控制
温度
难以培养细菌的 培养
解决难以培养细菌的 挑战，探索新的培养 方法和技术。
语
细菌培养的实际应用
探索细菌培养在科学研究、医学和工业中的实际应 用。
细菌培养的限制和进展
讨论细菌培养所面临的限制，并展望未来的发展和 创新。
了解细菌对温度的适 应性，并控制培养环 境的温度以促进生长。
pH值
掌握细菌生长所需的 最适pH范围，并调节 培养基的酸碱度。
《微生物的培养基》PPT课件
收获何物？ 收获菌体？收获产物？产物成分含氮如何？
例如枯草芽孢杆菌：
一般培养：肉汤培养基或LB培养基； 自然转化：基础培养基； 观察芽孢：生孢子培养基； 产蛋白酶：以玉米粉、黄豆饼粉为主的产酶培养基；
根据不同的工作目的，微生物不同的营养需 要，运用自己丰富的生物化学和微生物学知识来 配制最佳的培养基。
凝固剂必须具有的特点：
a. 不被微生物液化、分解和利用 b. 在微生物生长的范围内保持固体 状态 c. 凝固点的温度对微生物无害 d. 不因消毒灭菌的高温处理而破坏 e. 配制方便、价格低廉
常用的凝固剂
琼脂（agar）、 明胶（gelatin）、 海藻酸钠（alginate）、
琼脂是最优良的凝固剂，自1880年代开始用 于配制微生物培养基以来，至今经久不衰。
5.鉴别培养基：
用于鉴别某种或某一类微生物的培养基。 一般通过加入某些试剂，使某种或某类微生物 的菌落发生颜色变化，便于区别。
EMB培养基 伊红 美蓝------苯胺染料，抑制G+菌 低酸下----两种染料结合 大肠杆菌分解乳糖产酸
-----菌落深紫色、菌落表面有绿色金属光泽
鉴别培养基也具有选择革兰氏阴性菌的作用。
发酵生产谷氨酸时： 碳氮比为4/1时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少； 碳氮比为3/1时，菌体繁殖受到抑制，谷氨酸产量则大量增加。
培养基的配制4个原则
3、理化适宜 （1）pH （2）渗透压与水活度 （3）氧化还原电位
（1） pH
通常培养条件： 细菌： pH 7.0~8.0
放线菌：pH 7.5~8.5 酵母菌： pH 3.8~6.0 霉菌：pH 4.0~5.8 藻类： pH 6.0~7.0 原生动物： pH 6.0~8.0
实验室一般培养：普通常用培养基； 遗传研究：成分清楚的合成培养基；
例如枯草芽孢杆菌：
一般培养：肉汤培养基或LB培养基； 自然转化：基础培养基； 观察芽孢：生孢子培养基； 产蛋白酶：以玉米粉、黄豆饼粉为主的产酶培养基；
根据不同的工作目的，微生物不同的营养需 要，运用自己丰富的生物化学和微生物学知识来 配制最佳的培养基。
凝固剂必须具有的特点：
a. 不被微生物液化、分解和利用 b. 在微生物生长的范围内保持固体 状态 c. 凝固点的温度对微生物无害 d. 不因消毒灭菌的高温处理而破坏 e. 配制方便、价格低廉
常用的凝固剂
琼脂（agar）、 明胶（gelatin）、 海藻酸钠（alginate）、
琼脂是最优良的凝固剂，自1880年代开始用 于配制微生物培养基以来，至今经久不衰。
5.鉴别培养基：
用于鉴别某种或某一类微生物的培养基。 一般通过加入某些试剂，使某种或某类微生物 的菌落发生颜色变化，便于区别。
EMB培养基 伊红 美蓝------苯胺染料，抑制G+菌 低酸下----两种染料结合 大肠杆菌分解乳糖产酸
-----菌落深紫色、菌落表面有绿色金属光泽
鉴别培养基也具有选择革兰氏阴性菌的作用。
发酵生产谷氨酸时： 碳氮比为4/1时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少； 碳氮比为3/1时，菌体繁殖受到抑制，谷氨酸产量则大量增加。
培养基的配制4个原则
3、理化适宜 （1）pH （2）渗透压与水活度 （3）氧化还原电位
（1） pH
通常培养条件： 细菌： pH 7.0~8.0
放线菌：pH 7.5~8.5 酵母菌： pH 3.8~6.0 霉菌：pH 4.0~5.8 藻类： pH 6.0~7.0 原生动物： pH 6.0~8.0
实验室一般培养：普通常用培养基； 遗传研究：成分清楚的合成培养基；
常用基本培养基的特点 ppt课件
常用培养基的种类及 特基的组分，通常将培养基分为两个水平，一个是 基本培养基，包括大数量元素和微量元素、维生素和氨基 酸，还有糖和水等；而是完全培养基，即在基本培养基的 基础上，根据各种不同试验要求，添加各种植物生长调节 物质以及其他的复杂有机附加物，包括有些成分尚不完全 清楚的天然提取物。
常用基本培养基的特点
3
（3）White培养基：是1943年由White为培养番茄根尖而设 计的。1963年又做了改良，称做改良White培养基，提高了 MgSO4的浓度并增加了磞素。其特点是无机盐数量较低， 适于根培养。
（4）N6培养基：是1974年中科院植物所朱至清等为水稻 等禾谷累植物花药培养而设计的。其特点是成分较简单， KNO3和(NH4)2SO4的含量高。在国内已经广泛应用于小麦、 水稻及其他禾谷类植物的花药培养、细胞及原生质体培养。
（5）KM-8P培养基：它是1974年为原生质体培养而设计的。 其特点是有机成分较复杂，包括了所有的单糖和维生素， 广泛用于原生质体融合培养。
（6）ER培养基：1965年由Eriksson设计。与MS培养基相 似，其中磷酸盐的含量比MS高一倍，但微量元素含量较低， 适合于细胞培养
（7）NT培养基：1970年为培养烟草原生质体而设计，适 合烟草叶肉原生质体培养
（8）DKW培养基：由Driver和Kuniyuki于1984年开发的中 等养分弄得的培养基，适用于多种木本植物组织培养。
常用基本培养基的特点
4
迄今为止，基本培养基有几百种，但较常用的仅一二十种， 如MS、White、改良White、Nitsch、N6、SH、HE、ER、 NT、LS、RM、Miller、B5、DKW、WPM等。
常用基本培养基的特点
2
常用培养基的特点
常用基本培养基的特点
3
（3）White培养基：是1943年由White为培养番茄根尖而设 计的。1963年又做了改良，称做改良White培养基，提高了 MgSO4的浓度并增加了磞素。其特点是无机盐数量较低， 适于根培养。
（4）N6培养基：是1974年中科院植物所朱至清等为水稻 等禾谷累植物花药培养而设计的。其特点是成分较简单， KNO3和(NH4)2SO4的含量高。在国内已经广泛应用于小麦、 水稻及其他禾谷类植物的花药培养、细胞及原生质体培养。
（5）KM-8P培养基：它是1974年为原生质体培养而设计的。 其特点是有机成分较复杂，包括了所有的单糖和维生素， 广泛用于原生质体融合培养。
（6）ER培养基：1965年由Eriksson设计。与MS培养基相 似，其中磷酸盐的含量比MS高一倍，但微量元素含量较低， 适合于细胞培养
（7）NT培养基：1970年为培养烟草原生质体而设计，适 合烟草叶肉原生质体培养
（8）DKW培养基：由Driver和Kuniyuki于1984年开发的中 等养分弄得的培养基，适用于多种木本植物组织培养。
常用基本培养基的特点
4
迄今为止，基本培养基有几百种，但较常用的仅一二十种， 如MS、White、改良White、Nitsch、N6、SH、HE、ER、 NT、LS、RM、Miller、B5、DKW、WPM等。
常用基本培养基的特点
2
常用培养基的特点
05_培养基的选择
发酵培养基的设计和注意事项
1. 提供必要的营养成分： 提供必要的营养成分：
培养基成分必须满足细胞生长， 培养基成分必须满足细胞生长，代谢活动和合成产 物所需的基本要求。 物所需的基本要求。
2. 配制合适的浓度： 配制合适的浓度：
可以从发酵动力学有关生长、 可以从发酵动力学有关生长、产物合成和基质利用 物料平衡的关系中大致推算所需原料或大致计算出 所需主要原料的需要量。 所需主要原料的需要量。
（2）合成培养基 ）
是用化学成分和数量完全了解的物质配制 而成的。成分精确，重复性强， 而成的。成分精确，重复性强，可以减少不 能控制的因素。 能控制的因素。 适用于在实验室范围作有关营养、代谢、 适用于在实验室范围作有关营养、代谢、 分类鉴定、生物测定及选育菌种、 分类鉴定、生物测定及选育菌种、遗传分析 等定量研究工作。 等定量研究工作。 但一般微生物在合成培养基上生长较慢， 但一般微生物在合成培养基上生长较慢， 有些微生物营养要求复杂， 有些微生物营养要求复杂，在合成培养基上 不能生长。 不能生长。
发酵培养基的各种营养物质的浓度应尽可能高些， 发酵培养基的各种营养物质的浓度应尽可能高些，这样 在同等或相近的转化率条件下有利于提高单位容积发酵 罐的利用率，增加经济效益。 罐的利用率，增加经济效益。 发酵培养基需耗用大量原料，因此，原料来源、 发酵培养基需耗用大量原料，因此，原料来源、原材料 的质量以及价格等必须予以重视。 的质量以及价格等必须予以重视。
生理代谢 菌种筛选 种子培养
发酵培养
（5） 固体培养基 ）
分类：斜面试管、 分类：斜面试管、平板 等 作用： 作用： 固体培养基在菌种的分离、 固体培养基在菌种的分离、保 菌落特征的观察、 藏、菌落特征的观察、活菌计数和 鉴定菌种方面是不可缺少的。 鉴定菌种方面是不可缺少的。 在制曲、酶制剂、 在制曲、酶制剂、柠檬酸等生 产中， 产中，用来培养霉菌等的固体种子 和发酵培养基是由麸皮等农作物加 无机元素等制成的。 无机元素等制成的。
培养基的使用和管理.ppt
●斜面培养基：将培养基分装试管。灭菌后摆放成高层斜 面（斜面与底层高度约为2:3）和普通斜面（斜面与底层 高度约为3:2），冷却后备用。高层斜面培养基：用接种 针挑取菌苔穿刺接种至琼脂高层，穿刺接种完毕后，再在 斜面上划“之”字形接种；比如三糖铁琼脂斜面。斜面培 养基：用接种环挑取菌苔在斜面上划“之”字形接种，如 营养琼脂斜面。
பைடு நூலகம்
培养基的贮存
● 脱水合成培养基：脱水合成培养基一般为粉末或颗粒状形式 包装于密闭的容器中。使用时要按先购先用的原则。实验室应 保存有效的培养基目录清单，应包括以下内容：容器密闭性检 查、记录首次开封日期、内容物的感官检查。开封后的脱水合 成培养基，其质量取决于贮存条件。通过观察粉末的流动性、 均匀性、结块情况和色泽变化等判断脱水培养基的质量的变化。 若发现培养基受潮或物理性状发生明显改变则不应再使用。 ● 商品化即用型培养基：应严格按照供应商提供的贮存条件、 有效期和使用方法进行培养基的保存和使用。 ●自配培养基：避光、干燥保存，必要时在5 ℃±3 ℃冰箱中 保存，通常建议平板不超过2周~4周，瓶装及试管装培养基不 超过3个月~6个月，除非某些标准或实验结果表明保质期比上 述的更长。建议在培养基中添加的不稳定的添加剂应即配即用。 当培养基发生这些变化时（颜色改变、蒸发（脱水）、微生物 生长等）应禁止使用。
培养基的使用和管理
培养基的定义和分类
●按状态分类 1）固体培养基：在液体培养基中加入一定量固化物（如：琼脂、 明胶等），加热至100℃溶解，冷却后凝固成固体状态的培养基。 倾注到平皿内的固体培养基一般称之为“平板”；倒入试管并摆放 成斜面的固体培养基称作“斜面”。 2）半固体培养基：在液体培养基中加入极少量固化物（如：琼 脂、明胶等），加热至100℃溶解，冷却后凝固成半固体状态的 培养基。 3）液体培养基：是相对固体培养基而言的，是微生物或动植物 细胞的液状培养基。 ●按用途分类 1）鉴别培养基（特异性培养基）：能够进行一项或多项微生物 生理和（或）生化特性鉴定的培养基。（例如：麦康凯琼脂）
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扁平，带有黏性不易挑起 副溶血弧菌不分解蔗糖，菌落呈蓝绿色半透明，大
而扁平，带有黏性
15
M-H平板
水解酪蛋白琼脂
用于细菌药敏试验琼脂扩散法（K-B法） 胸腺嘧啶核苷酸含量低，不干扰磺胺类药物测定 控制钙、镁离子浓度，不干扰氨基糖苷类药物测定
16
M-H血平板
M-H琼脂中加入5%脱纤维羊血 用于链球菌药敏试验
合物，有时呈金属光泽 不分解乳糖的细菌菌落为无色或灰白色 有的细菌产碱过多而出现蓝色菌落
14
TCBS平板
硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基
霍乱弧菌和副溶血弧菌分离培养 碱性琼脂 胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的
pH可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群 氯化钠可刺激弧菌的生长 以麝香草酚兰和溴麝香草酚兰为指示剂 霍乱弧菌分解蔗糖产酸，菌落呈黄色半透明，圆形
19
培养基接种划线
方法：平板分区划线
沾取标本均匀涂布于平板培养 基边缘一小部分（为一区）；然后 将接种环火焰灭菌，待冷后只通过 一区2 ～3 次后连续划线（为二 区）；依次可供划线3 ～5 区，火 焰灭菌接种环。
目的：分离出单个菌落
20
培养基接种划线
方法：穿刺接种
用经灭菌后的接种针挑取菌落或培养物，由培养基中央刺到距管底约 0．3 ～0．5cm 处，然后沿穿刺线退出接种针。
鉴别培养基：糖发酵管、MIU、KIA、TSI等 特殊培养基：厌氧培养基、高渗培养基等
6
常用的培养基
血琼脂平板 巧克力平板 淋球菌平板 念珠菌显色平板 MAC平板 SS平板 EMB平板 TCBS平板 M-H平板 M-H血平板 转运培养基
7
血琼脂平板
适用于各类细菌生长 观察细菌菌落形态 判断溶血情况
10
念珠菌显色平板
分离酵母样真菌 鉴别培养基：不同的真菌显示出不同颜色的菌落
11
MAC平板
选择性培养基：供肠道致病菌分离培养 非发酵菌鉴别
抑制剂——胆盐：抑制革兰阳性菌 指示剂——中性红：区分分解乳糖和不分解乳糖的
细菌 肠道致病菌不分解乳糖，非致病菌分解乳糖
12Biblioteka SS平板强选择性培养基：用于志贺菌和沙门菌的分离 抑制剂——枸橼酸钠、胆盐、硫代硫酸钠协同作用与煌
17
转运培养基
阿米斯转运培养基：支原体培养 拭子 Cary-Blair运送培养基：弯曲菌、沙门菌、志贺菌的
标本采集和保存 缓冲甘油盐水保存液：粪便标本保存 改良Cary-Blair运送培养基：厌氧菌标本
18
培养基的选择
大部分细菌培养标本：血平板、巧克力平板 大便培养标本：EMB、SS、MAC、TCBS 酵母样真菌培养标本：念珠菌显色平板 淋球菌培养标本：淋球菌平板 中段尿标本：血平板
绿共同抑制肠道非病原菌及大部分大肠埃希菌。其中 胆盐还能抑制革兰阳性菌。 指示剂——中性红 沙门菌菌落特点：无色半透明，产H2S与培养基内三价 铁离子反应呈黑色中心。 志贺菌菌落特点：无色不透明或透明，边缘整齐
13
EMB平板
弱选择性培养基 抑制革兰阳性菌 伊红和美蓝两种染料一酸一碱作为指示剂 细菌分解乳糖时产酸，使伊红美蓝结合成紫红色化
目的：细菌增菌及保存
22
培养基接种划线
方法：涂布接种
用无菌棉签浸满菌液，在试管壁上挤去少量菌液后均匀涂布于平板上。
目的：用于纸片扩散法药敏试验、院感监测
23
斜面接种 倾注平板 定量接种
培养基接种划线
24
培养基的认识及选 择
1
培养基的成分
碳源和能源
无糖
氮源
氮源和碳源
营养物质：水、蛋白胨、肉浸液、 牛肉膏、糖醇类、血液、无机 盐、鸡蛋、动物血清、生长因 子（Vit、aa、嘌呤、嘧啶等）。
氯化钠：维持酶的活性、调节菌体内外 磷酸盐：缓冲作用
2
培养基的成分
凝固物质：最常用的为琼脂(agar)，它是从石花菜中 提出来的一种半乳糖胶，100℃溶解，40℃凝固， 可利用琼脂来改变培养基的物理性状(固体或半固 体)，它是理想的固体培养基的赋形剂，其本身不 被细菌分解利用，也无营养作用。
α-溶血环：菌落周围呈绿 色，红细胞不完全溶解
β-溶血环：菌落周围的培 养基内红细胞完全被破坏
γ溶血：不溶血
8
巧克力平板
主要用于嗜血杆菌的分离：含有Ⅴ、Ⅹ因子 添加万古霉素抑制革兰阳性菌，但有时α-溶血的链
球菌会形成草绿色溶血环 大多数革兰阴性菌都会生长
9
淋球菌平板
用于分离淋病奈瑟菌 加入万古霉素和多粘菌素B溶液 抑制革兰阳性菌和真菌生长
目的：用于微量生化管接种
21
培养基接种划线
方法：液体接种
用左手持培养基与菌种管，右手持接种环，其小指与无名指及无名指 与中指之间各拔取并夹持一个棉塞，火焰灭菌试管口， 以灭菌冷却后 的接种环沾取菌种，倾斜液体培养基管，先在管壁与液面交界处研磨 （研磨处以试管直立后液体能淹没接种物为主），然后再在液体中摆 动2 ～3 次接种环，塞好棉塞后轻轻混合即可。
3
培养基的成分
抑菌剂和指示剂： 不是细菌生长繁殖的必需物质，是制备细菌的
选择、鉴别培养基和判断结果的需要。 常用的指示剂有：酚红、中性红、甲基红、溴
甲酚紫、溴麝香草酚蓝、中国兰等酸碱指示剂， 美兰为常用的氧化还原指示剂。
常用的抑菌剂有：胆盐、煌绿、亚硫酸钠、亚 硒酸钠及一些染料和某些抗生素等。
4
培养基的分类
液体培养基：牛肉汤(牛肉浸液+1%蛋白胨
按 物
+0.5%NaCl pH7.4)
理 性
半固体培养基：液体培养基+0.2~0.5% agar
状
固体培养基：液体营养物+ 2% agar
5
培养基的分类
基础培养基：是其他培养基的基础，如普通肉 汤、 普通琼脂平板、斜面、高层
按 营养培养基：BAP、罗—琴培养基、吕氏血清斜面 用 途 选择培养基：SS平板、BS平板、Mac平板等
而扁平，带有黏性
15
M-H平板
水解酪蛋白琼脂
用于细菌药敏试验琼脂扩散法（K-B法） 胸腺嘧啶核苷酸含量低，不干扰磺胺类药物测定 控制钙、镁离子浓度，不干扰氨基糖苷类药物测定
16
M-H血平板
M-H琼脂中加入5%脱纤维羊血 用于链球菌药敏试验
合物，有时呈金属光泽 不分解乳糖的细菌菌落为无色或灰白色 有的细菌产碱过多而出现蓝色菌落
14
TCBS平板
硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基
霍乱弧菌和副溶血弧菌分离培养 碱性琼脂 胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的
pH可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群 氯化钠可刺激弧菌的生长 以麝香草酚兰和溴麝香草酚兰为指示剂 霍乱弧菌分解蔗糖产酸，菌落呈黄色半透明，圆形
19
培养基接种划线
方法：平板分区划线
沾取标本均匀涂布于平板培养 基边缘一小部分（为一区）；然后 将接种环火焰灭菌，待冷后只通过 一区2 ～3 次后连续划线（为二 区）；依次可供划线3 ～5 区，火 焰灭菌接种环。
目的：分离出单个菌落
20
培养基接种划线
方法：穿刺接种
用经灭菌后的接种针挑取菌落或培养物，由培养基中央刺到距管底约 0．3 ～0．5cm 处，然后沿穿刺线退出接种针。
鉴别培养基：糖发酵管、MIU、KIA、TSI等 特殊培养基：厌氧培养基、高渗培养基等
6
常用的培养基
血琼脂平板 巧克力平板 淋球菌平板 念珠菌显色平板 MAC平板 SS平板 EMB平板 TCBS平板 M-H平板 M-H血平板 转运培养基
7
血琼脂平板
适用于各类细菌生长 观察细菌菌落形态 判断溶血情况
10
念珠菌显色平板
分离酵母样真菌 鉴别培养基：不同的真菌显示出不同颜色的菌落
11
MAC平板
选择性培养基：供肠道致病菌分离培养 非发酵菌鉴别
抑制剂——胆盐：抑制革兰阳性菌 指示剂——中性红：区分分解乳糖和不分解乳糖的
细菌 肠道致病菌不分解乳糖，非致病菌分解乳糖
12Biblioteka SS平板强选择性培养基：用于志贺菌和沙门菌的分离 抑制剂——枸橼酸钠、胆盐、硫代硫酸钠协同作用与煌
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转运培养基
阿米斯转运培养基：支原体培养 拭子 Cary-Blair运送培养基：弯曲菌、沙门菌、志贺菌的
标本采集和保存 缓冲甘油盐水保存液：粪便标本保存 改良Cary-Blair运送培养基：厌氧菌标本
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培养基的选择
大部分细菌培养标本：血平板、巧克力平板 大便培养标本：EMB、SS、MAC、TCBS 酵母样真菌培养标本：念珠菌显色平板 淋球菌培养标本：淋球菌平板 中段尿标本：血平板
绿共同抑制肠道非病原菌及大部分大肠埃希菌。其中 胆盐还能抑制革兰阳性菌。 指示剂——中性红 沙门菌菌落特点：无色半透明，产H2S与培养基内三价 铁离子反应呈黑色中心。 志贺菌菌落特点：无色不透明或透明，边缘整齐
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EMB平板
弱选择性培养基 抑制革兰阳性菌 伊红和美蓝两种染料一酸一碱作为指示剂 细菌分解乳糖时产酸，使伊红美蓝结合成紫红色化
目的：细菌增菌及保存
22
培养基接种划线
方法：涂布接种
用无菌棉签浸满菌液，在试管壁上挤去少量菌液后均匀涂布于平板上。
目的：用于纸片扩散法药敏试验、院感监测
23
斜面接种 倾注平板 定量接种
培养基接种划线
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培养基的认识及选 择
1
培养基的成分
碳源和能源
无糖
氮源
氮源和碳源
营养物质：水、蛋白胨、肉浸液、 牛肉膏、糖醇类、血液、无机 盐、鸡蛋、动物血清、生长因 子（Vit、aa、嘌呤、嘧啶等）。
氯化钠：维持酶的活性、调节菌体内外 磷酸盐：缓冲作用
2
培养基的成分
凝固物质：最常用的为琼脂(agar)，它是从石花菜中 提出来的一种半乳糖胶，100℃溶解，40℃凝固， 可利用琼脂来改变培养基的物理性状(固体或半固 体)，它是理想的固体培养基的赋形剂，其本身不 被细菌分解利用，也无营养作用。
α-溶血环：菌落周围呈绿 色，红细胞不完全溶解
β-溶血环：菌落周围的培 养基内红细胞完全被破坏
γ溶血：不溶血
8
巧克力平板
主要用于嗜血杆菌的分离：含有Ⅴ、Ⅹ因子 添加万古霉素抑制革兰阳性菌，但有时α-溶血的链
球菌会形成草绿色溶血环 大多数革兰阴性菌都会生长
9
淋球菌平板
用于分离淋病奈瑟菌 加入万古霉素和多粘菌素B溶液 抑制革兰阳性菌和真菌生长
目的：用于微量生化管接种
21
培养基接种划线
方法：液体接种
用左手持培养基与菌种管，右手持接种环，其小指与无名指及无名指 与中指之间各拔取并夹持一个棉塞，火焰灭菌试管口， 以灭菌冷却后 的接种环沾取菌种，倾斜液体培养基管，先在管壁与液面交界处研磨 （研磨处以试管直立后液体能淹没接种物为主），然后再在液体中摆 动2 ～3 次接种环，塞好棉塞后轻轻混合即可。
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培养基的成分
抑菌剂和指示剂： 不是细菌生长繁殖的必需物质，是制备细菌的
选择、鉴别培养基和判断结果的需要。 常用的指示剂有：酚红、中性红、甲基红、溴
甲酚紫、溴麝香草酚蓝、中国兰等酸碱指示剂， 美兰为常用的氧化还原指示剂。
常用的抑菌剂有：胆盐、煌绿、亚硫酸钠、亚 硒酸钠及一些染料和某些抗生素等。
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培养基的分类
液体培养基：牛肉汤(牛肉浸液+1%蛋白胨
按 物
+0.5%NaCl pH7.4)
理 性
半固体培养基：液体培养基+0.2~0.5% agar
状
固体培养基：液体营养物+ 2% agar
5
培养基的分类
基础培养基：是其他培养基的基础，如普通肉 汤、 普通琼脂平板、斜面、高层
按 营养培养基：BAP、罗—琴培养基、吕氏血清斜面 用 途 选择培养基：SS平板、BS平板、Mac平板等