常用溶液的配置

试剂配制

（1）液体LB培养基（-）1000ml

蛋白胨10g

酵母提取物5g

氯化钠10g

去离子水溶解并定容至1000ml

高压灭菌，4℃保存。

（2）氨苄青霉素溶液（100mg/ml）10ml

氨苄青霉素1g

去离子水溶解并定容至10ml

过滤除菌，-20℃分装保存。

（3）卡那霉素溶液（100mg/ml）10ml

卡那霉素1g

去离子水溶解并定容至10ml

过滤除菌，-20℃分装保存。

（4）固体LB培养基（-）1000ml

蛋白胨10g

酵母提取物5g

氯化钠10g

琼脂糖粉15g

去离子水溶解并定容至1000ml

高压灭菌后铺平板（6cm培养皿），冷却后4℃保存。

（5）含抗生素LB 固体培养基1000ml

固体LB培养基溶液1000ml

高压灭菌, 当培养基降温至50℃左右，加入终浓度为100μg/ml的氨苄青霉素或100μg/ml 卡那霉素，并铺平板（6cm培养皿），冷却后，4℃保存。

（6）0.1M CaCl2溶液—制备感受态1000ml

氯化钙11.099g

去离子水溶解，定容至1000ml

高压灭菌后4℃保存。

（7）0.1M MgCl2溶液---制备感受态1000ml

氯化镁9.521g

去离子水溶解，定容至1000ml

高压灭菌后4℃保存。

（8）0.1M CaCl2-15%甘油溶液----制备感受态1000ml

氯化钙9.521g

50%甘油300ml

去离子水溶解，定容至1000ml

高压灭菌后4℃保存。

（9）50％甘油溶液100ml

甘油50ml

去离子水50ml

（10）0.5M EDTA溶液(PH=8.0) 500ml

EDTA 93.05g

去离子水溶解，NaOH调PH至8.0，定容至500ml。

（11）10%SDS溶液100ml

SDS 10g

去离子水溶解，定容至100ml。

（12）5M乙酸钾溶液100ml

5M乙酸钾49.07g

去离子水溶解，定容至100ml，室温保存。

（13）1MTris-HCl溶液（pH=8.0）100ml

Tris碱12.1g

去离子水溶解，定容至100ml，浓盐酸调pH值至8.0，室温保存。（14）50×TAE溶液100ml

Tris碱242g

冰乙酸51.7ml

0.5M EDTA 100ml

加去离子水溶解定容至100ml，室温保存。

（15）1% 琼脂糖凝胶溶液500ml

琼脂糖粉5g

1×TAE 500ml

微波炉中高火加热3-5min，存放于50℃电热鼓风干燥箱。

（16）碱裂解液I（P1 液）200ml

葡萄糖 1.8g

1MTris-HCl（pH=8.0）5ml

0.5M EDTA（pH=8.0）4ml

加去离子水至200ml

高压灭菌后4℃保存。

（17）碱裂解液II（P2 液）200ml

10M NaOH 4ml

10%SDS 20ml

高压灭菌后4℃保存。

（18）碱裂解液III（P3 液）200ml

5M 乙酸钾120ml

冰乙酸23ml

加去离子水至200ml

高压灭菌后4℃保存。

（19）溴化乙锭（EB）溶液（10mg/ml）10ml

EB 100mg

去离子水溶解，定容至10ml，避光室温保存。

（20）1×PBS溶液1000ml

NaCl 8g

KCl 0.2g

Na2HPO4 1.44g

KH2PO40.24g

去离子水溶解，10M NaOH调PH=7.4，定容至1000ml，灭菌后室温保存。（21）细胞培养基500ml

高糖DMEM培养基450ml

FBS 50ml

青霉素/链霉素5ml，4℃保存。

（22）2×SDS蛋白裂解液10ml

1MTris-HCl（pH=6.8）1ml

甘油2ml

10％SDS 4ml

加去离子水至10ml，室温保存。

（23）2×SDS上样缓冲液10ml

1MTris-HCl（pH=6.8）1ml

甘油2ml

10％SDS 4ml

1％溴酚蓝2ml

β-巯基乙醇0.15ml

加去离子水至10ml，分装后室温保存。

（24）1.5MTris-HCl溶液（PH=8.8）100ml

Tris碱18.2g

加入10M HCl 7ml调整PH到8.8，加去离子水定容到100ml，室温储存。（25）1.0MTris-HCl溶液（PH=6.8）100ml

Tris碱12.1g

加入10MHCl 12ml调整PH到6.8，加去离子水定容到100ml，室温储存。（26）10%APS溶液10ml

APS 1g

去离子水10ml，4℃保存。

（27）10％SDS溶液100ml

SDS 10g

加去离子水定容至100ml，室温保存

（28）30%丙烯酰胺溶液100ml

丙烯酰胺29g

N,N-亚甲基双丙烯酰胺1g

加去离子水定容至100ml，4℃避光保存（29）10×电泳缓冲液1000ml

Tris碱30g

甘氨酸108g

SDS 10g

加入10M HCl 9ml调整PH值到8.3，加去离子水定容到1000ml，室温保存。（30）10×转膜液1000ml

甘氨酸144g

Tris碱30g

加入HCl调整PH值到8.3，加去离子水定容到1000ml，室温保存。

（31）1×转膜液1000ml

10×转膜液100ml

甲醇200ml

去离子水700ml，室温保存。（32）10×TBS溶液1000ml

Tris碱25.6g

NaCl 87.5g

加入HCl调整PH到7.4，加去离子水定容到1000ml，室温保存。

（33）0.1%TBST溶液1000ml

1×TBS 1000ml

Tween-20 1ml，室温保存。

（34）5%脱脂奶粉40ml