荧光标记蛋白的发展
蛋白质荧光标记技术的应用
蛋白质荧光标记技术的应用：从基础研究到医学诊断蛋白质是生命体中重要的一种生物大分子，它是细胞组成和生命活动的基本单位。
了解蛋白质的识别、特征、结构和功能对于研究生命科学中的生物与环境相互作用，以及生物体内各种生物化学过程的完整表现和作用机制具有重要意义。
因此，蛋白质标记技术在生命科学及相关领域发挥了越来越重要的作用。
其中，蛋白质荧光标记技术是一种常用的生物分子定位、分析和图像研究技术，已广泛应用于生命科学、医疗诊断和药物开发等领域。
一、蛋白质荧光标记技术的基本原理蛋白质荧光标记技术是利用荧光分子对各种生物大分子的非共价、特异性结合，使其轻松快速地标记其在细胞或分子层面的分布、运动、交互和表达等过程的一种生物实验技术。
根据标记分子和标记物的不同组合，可分为两种类型：一种是利用具有荧光基团的标记物标记蛋白质，另一种是利用荧光标记的底物来进行标记。
常用的荧光染料包括荧光素（fluorescein, FITC）、（red fluorescent protein，RFP）、daunomycin(Dau)等。
二、蛋白质荧光标记技术在基础和应用研究中的应用蛋白质荧光标记技术在基础生物学和分子生物学中广泛应用，其中包括：1.单细胞分析：荧光标记技术可以用来研究单细胞及其亚细胞结构的细节，例如粘着分子和细胞分泌蛋白的过程等。
同时，在许多细胞过程中，荧光标记技术可用于确定胞质和核质之间的交互作用。
2.蛋白质互作研究：荧光标记可以用于研究蛋白质与其他生物分子之间的相互作用，例如荧光共振能量转移（FRET）技术。
FRET是一种能量传递过程，是利用荧光染料之间的荧光共振能量传递来研究分子间物理距离的技术。
3.细胞信号通路研究：荧光标记可以用于研究细胞信号通路研究，如蛋白质磷酸化、纳米结构的动力结构变化和受体活动等。
例如，可以将细胞蛋白标记为荧光，以观察其在活细胞内的运动和互动。
蛋白质荧光标记技术在人类疾病的诊断和治疗方面也有广泛应用，其中包括：1. 肿瘤荧光诊断：肿瘤细胞的荧光标记使其能够更容易地被发现并在早期诊断中进行特定的治疗计划。
自然界中的荧光蛋白和生物标记技术
自然界中的荧光蛋白和生物标记技术生物标记技术在生物科学研究中具有重要的地位，其中荧光蛋白作为一种常用的生物标记物，被广泛应用于研究细胞和生物体内部分子的运动和交互。
荧光蛋白本身也是一种很有趣的自然现象，本文将介绍自然界中的荧光蛋白及其在生物标记技术中的应用。
一、自然界中的荧光蛋白荧光蛋白最早是在薄皮海鲜(Aequorea victoria)中发现的。
在夜晚，当薄皮海鲜受到光的刺激时，会发出蓝色荧光，这是由海蛋白和荧光素两种物质共同作用而产生的。
其中荧光素是一种发生化学反应时能发出光的固体物质，而海蛋白则是一种蛋白质。
这两种物质的结合，使得薄皮海鲜具有了显著的荧光性质。
近年来，随着生物学研究的深入，越来越多的荧光蛋白被从不同的生物体中发现并提取出来。
这些荧光蛋白在生物中具有不同的功能，如调节进出细胞膜的离子通道(Cyhalothrin-resistance protein)、触发钾离子运输和调节胚胎发育(GFP-like protein from the sea anemone)，或是用于保护细胞免受氧化损伤(yellow fluorescent protein from Anthozoa)等。
二、荧光蛋白的应用荧光蛋白由于具有良好的荧光性质和广泛的分布，被广泛应用于生物研究中。
1. 在细胞内标记分子生物学家们通过将荧光蛋白与感光蛋白等分子结合，将其引入到细胞内进行标记，通过观察荧光蛋白的光学信号，可以了解这些分子的运动和分布情况。
这种进口荧光标记技术已经成为分子生物学研究中的一个重要的手段，如在细胞凋亡、分化、增殖等方面。
2. 在体外表达标签蛋白荧光蛋白还可以被用作标记蛋白质分子，在体外表达的时候使用。
这种方法可以帮助科学家们更好地理解其结构和功能，同时也可以帮助科学家们量化其含量并进行定量研究。
3. 基因的荧光标记经过基因工程改造的荧光蛋白可以直接被编码到生物体基因内。
这种方法具有创新性，可以跟踪基因的表达情况和位置，也可以帮助科学家们研究基因表达的调控机制以及疾病发生的原因等。
绿色荧光蛋白和其他荧光标记技术的应用
绿色荧光蛋白和其他荧光标记技术的应用荧光标记技术在现代生物科学中发挥着越来越重要的作用，其中绿色荧光蛋白（GFP）是最为常见和广泛应用的标记工具之一。
本文将介绍GFP以及其他荧光标记技术的原理及其在不同领域的应用。
一、绿色荧光蛋白GFP是由桶形水母（Aequorea victoria）体内自然产生的荧光蛋白，高度稳定并有良好的荧光特性。
GFP可以将外来蛋白分子与自身连通，在激发光的作用下，GFP会将能量转化为荧光，从而实现对蛋白分子内在动力学特性的跟踪和观察。
目前，GFP已广泛应用于不同的生物学研究领域，如生理学、遗传学、生物化学等。
“青蛙标记”技术以及“果蝇标记”技术都是基于GFP原理进行的。
除此之外，谷胱甘肽S-转移酶（GST）也能够发出亮绿色荧光，而GST和GFP的稳定性及荧光强度也有所不同。
因此，在一些特殊实验中，我们也可以选择GST进行蛋白标记。
二、其他荧光标记技术除了GFP，现代生物学中还有很多其他的荧光标记技术，下面我们将依次介绍其中的几种。
1. 荧光成像荧光成像技术是应用荧光标记蛋白对细胞进行可视化的技术。
与生物染色技术不同，通过生物荧光成像技术，我们可以实现对生命体系的实时追踪和监测。
利用荧光成像技术，可以更加准确地了解细胞内蛋白的分布和运动方式，甚至可以实现活体成像。
2. 荧光着色技术荧光着色技术是指将荧光染料着以于细胞内某些特定蛋白上，实现对生物分子分布和运动情况的跟踪。
与荧光成像技术类似，荧光着色技术也可以在实时监测细胞的同时精确地染色蛋白分子。
3. 荧光原位杂交技术荧光原位杂交技术可以将RNA分子特异地染成特定的颜色，从而更好地观察RNA分子在细胞中的行为和相关代谢途径。
同时，荧光原位杂交技术也为基因诊断、疾病诊断和药物研发等提供了重要的技术支撑。
三、应用荧光标记技术可以实现对细胞活体的实时监测，对RNA分子和蛋白分子的行为进行追踪和分析，同时也可以应用于生物化学实验中的药效评估等多种方向。
蛋白质荧光标记技术简介
蛋白质荧光标记技术简介蛋白质荧光标记技术是一种重要的生物化学技术，用于研究蛋白质的位置、表达和相互作用。
它通过将荧光染料或荧光蛋白与目标蛋白结合，从而使其在实验过程中能够被可视化和检测。
本文将介绍蛋白质荧光标记技术的原理、应用领域以及最常用的几种标记方法。
一、蛋白质荧光标记技术的原理蛋白质荧光标记技术的原理基于荧光现象，即某些物质在受到一定波长的光照射后，会发出可见光的特性。
这种技术利用具有荧光特性的染料或蛋白质与目标蛋白质发生特异性结合，从而实现对目标蛋白质的可视化和检测。
二、蛋白质荧光标记技术的应用领域1. 蛋白质定位和分布研究：蛋白质荧光标记技术可以帮助研究人员确定特定蛋白质在细胞或组织中的位置和分布情况，从而了解其功能和作用机制。
2. 蛋白质表达研究：通过标记目标蛋白质的荧光染料或蛋白质，可以追踪和监测蛋白质在细胞或组织中的表达水平和动态变化。
3. 蛋白质相互作用研究：蛋白质荧光标记技术可以用于研究蛋白质之间的相互作用关系，如蛋白质的复合物形成、酶促反应等。
4. 药物研发与筛选：蛋白质荧光标记技术可用于评估药物与目标蛋白质之间的结合能力和影响，有助于药物研发和筛选过程。
三、常用的蛋白质荧光标记方法1. 化学标记法：化学标记法是通过将荧光染料或某些具有荧光性质的化合物与目标蛋白质反应来实现标记。
常用的化学标记剂有荧光同位素、闪烁染料和化学选择性染料等。
2. 基因工程标记法：基因工程标记法是通过将荧光蛋白基因与目标蛋白质基因相连接，使得目标蛋白质能够表达出与荧光蛋白相结合的融合蛋白，从而实现标记。
其中最为常见的是绿色荧光蛋白（GFP）。
3. 免疫标记法：免疫标记法是利用抗体的特异性与目标蛋白质发生结合，再将带有荧光标记的二抗与抗原-抗体复合物相结合，从而实现对目标蛋白质的标记。
四、对蛋白质荧光标记技术的观点和理解蛋白质荧光标记技术是一种非常强大和广泛应用的技术，在生物学研究领域中起到了至关重要的作用。
荧光蛋白在细胞示踪和分析中的应用
荧光蛋白在细胞示踪和分析中的应用随着人类对细胞生命活动的认识不断深入，对细胞内部动态过程的研究需要寻找一种有效的标记方法。
而荧光蛋白标记技术由于其非侵入性、无需外加工具等多种优点得到了广泛的应用，成为了研究细胞功能、设计药物、病毒和细胞治疗的重要工具之一。
本文将从荧光蛋白的基本结构、荧光原理入手，说明其在细胞示踪和分析中的应用。
一、荧光蛋白的基本结构和发现历程荧光蛋白（Fluorescent Protein，FP）是一类富含α螺旋、β折叠片段的酸性蛋白质，是一种自然存在的荧光分子。
它们通常是从许多种动物的变色龙、鬣蜥和珊瑚等生物体中发现。
其基本结构由11肽键组成的β桶形状，肽键之间的共振作用区使得氨基酸残基的电子能级发生变化，从而激发荧光分子发出特定波长的光。
最早发现的荧光蛋白是由美国生物物理学家Osamu Shimomura在1962年从发光珊瑚中分离出的大肠杆菌（Escherichia coli）亚稳态蛋白质(Green Fluorescent Protein, GFP)。
在1990年代，夫妇芬迪克和马丁·查尔芬发现了GFP基因，并运用此技术标记了其他生物体的细胞，从而打开了“荧光标记细胞”的先河。
二、荧光蛋白的荧光原理荧光蛋白之所以能够发出各种颜色的荧光，是因为在受到外部激发波长的激发后，其分子结构会发生一系列的电子跃迁过程，最终导致荧光分子自发地向周围发射出单色的光线。
这个电子跃迁过程分为两步：第一步是激发。
荧光蛋白分子会吸收一个激发波长的光子，使其中的电子透过分子的色素链向高能态跃迁，这个光度量和荧光的颜色有关。
第二步是荧光发射。
同样的电子会原路返回到基态或者较低的能态，这个过程中也释放出一个光子。
这个光子的颜色具有所谓的“荧光光谱”——即最大发射波长和荧光相对量的集合，通常是荧光蛋白的一个重要特征。
三、荧光蛋白在细胞示踪中的应用1.实现细胞标记荧光蛋白能够被植入到新生的胚胎细胞中，也能够被引入到已经成熟的细胞中。
荧光蛋白标记原理
荧光蛋白标记原理
荧光蛋白标记原理是利用荧光蛋白与目标蛋白的相互作用，通过将荧光蛋白融合到目标蛋白的结构上来实现对目标蛋白的可视化标记。
荧光蛋白是一类具有自发发射荧光的蛋白质，最常见的是绿色荧光蛋白（GFP）。
通过插入荧光蛋白基因序列到目标蛋白的编码基因序列中，可以使目标蛋白合成成为一个荧光蛋白-目标蛋白融合蛋白。
这种融合蛋白可以保留目标蛋白的功能，在荧光显微镜下通过荧光信号观察目标蛋白的定位、表达水平以及相互作用等。
荧光蛋白的发射波长可以通过在原有蛋白的氨基酸序列中进行相应的突变来改变，从而实现多种颜色的标记。
利用荧光蛋白的这种特性，可以同时标记多个目标蛋白，通过不同颜色的荧光标记来观察多个蛋白的亚细胞定位、相互作用等。
荧光蛋白标记技术在生物科学研究中具有重要的应用价值，特别是在细胞生物学、分子生物学、生物化学等领域。
它提供了一种非侵入性、高分辨率的观察和分析方法，使得研究人员能够更好地理解细胞的结构和功能。
同时，荧光蛋白标记技术还有助于研究蛋白质在疾病发展中的变化，以及筛选和评估药物的效果。
蛋白质功能研究中荧光标记技术的突破可视化运动轨迹揭秘
蛋白质功能研究中荧光标记技术的突破可视化运动轨迹揭秘引言：蛋白质是生物体内的基本组成单位之一，扮演着许多生物学过程的重要角色。
为了揭示蛋白质的功能和相互作用机制，科学家们一直致力于发展新的技术和方法。
其中，蛋白质荧光标记技术成为了研究蛋白质功能的重要工具之一。
随着技术的不断突破，荧光标记技术在蛋白质功能研究中的应用也取得了显著的进展。
本文将介绍荧光标记技术的原理和应用，重点关注其在可视化运动轨迹揭秘方面的突破。
一、荧光标记技术的原理和发展1.1 荧光标记技术的原理荧光标记技术基于蛋白质与荧光染料或荧光标记物的非共价结合。
在标记后的蛋白质内，荧光染料可以发出特定波长的荧光，从而实现蛋白质的可视化。
荧光标记技术具有高灵敏度、高空间分辨率和保真性等优点，已成为生物学研究中不可或缺的方法之一。
1.2 荧光标记技术的发展历程荧光标记技术自20世纪60年代起便开始发展，并经历了多个重要突破。
早期的荧光染料限制了技术的应用范围，荧光强度低、光稳定性差等问题也制约了技术的发展。
然而，随着新的染料和标记方法的引入，荧光标记技术逐渐取得了突破。
1.3 荧光标记技术的改进近年来，科学家们通过改进染料的化学结构和标记方法，使荧光标记技术在蛋白质功能研究中展现出更强大的应用潜力。
例如，引入了更稳定的染料、加强了荧光信号的强度和稳定性，并通过控制标记位置来减小对蛋白质功能的影响等。
二、荧光标记技术在蛋白质功能研究中的应用2.1 蛋白质定位与运动轨迹研究荧光标记技术可用于观察蛋白质在细胞内的定位和运动轨迹。
通过将荧光标记物标记到特定的蛋白质上，科学家们可以追踪其在细胞内的运动，揭示蛋白质参与的生物学过程。
2.2 蛋白质-蛋白质相互作用研究荧光标记技术还可以用于研究蛋白质与其他蛋白质的相互作用。
通过标记不同的蛋白质，科学家们可以观察它们在细胞内的相互作用情况，并了解蛋白质相互作用网络的结构和功能。
2.3 蛋白质功能调控机制研究荧光标记技术也被广泛用于研究蛋白质功能调控机制。
荧光蛋白标记技术在细胞成像中的新应用
荧光蛋白标记技术在细胞成像中的新应用随着科技的不断发展，越来越多的科学家开始关注细胞的结构和功能，荧光蛋白标记技术为进行细胞成像提供了很好的手段。
荧光蛋白是生物体内天然存在的一种蛋白质，通过基因工程可以将该蛋白标记在所需要成像的细胞上，以便于对细胞的动态变化和功能进行观察和研究。
一、荧光蛋白标记技术的优势相对于其他用于细胞成像的技术，荧光蛋白标记技术具有很明显的优势。
首先，荧光蛋白标记技术不需要进行染色等特殊的前处理操作，可以直接在活细胞中标记目标蛋白，保证了细胞活性的完整性，有利于对细胞动态变化的观察。
其次，荧光蛋白标记技术可以提供连续的成像时间序列，有利于对细胞动态过程的精细观察。
此外，荧光蛋白标记技术还可以与其他分子标记技术结合使用，实现多种标记观察，更加全面和详细地研究细胞结构和功能。
二、荧光蛋白标记技术在细胞内运输和融合机制的研究中的应用细胞内运输和融合机制是细胞生命活动的基础，荧光蛋白标记技术可以很好地应用于这些领域的研究。
例如，利用荧光蛋白标记技术可以观察到内质网和高尔基体等内膜系统的运行和相互作用；分子骨架的重组和细胞内分子的转运等动态过程也可以通过荧光蛋白标记技术进行观察和研究。
此外，荧光蛋白标记技术还可以研究蛋白质合成之后的成熟过程，这些研究在药物研发和生物学研究中具有重要的实际应用价值。
三、荧光蛋白标记技术在癌症细胞研究和药物筛选中的应用荧光蛋白标记技术在癌症细胞研究和药物筛选中也具有很好的应用前景。
癌症细胞的研究需要对细胞的活性、膜通透性、信号转导等方面进行详细的观察和分析，而荧光蛋白标记技术的应用可以使这些观察更加精细和直观。
同时，荧光蛋白标记技术也可以用于药物筛选，可以快速和直观地观察药物对癌症细胞的影响，为药物研究提供非常有效的工具。
四、荧光蛋白标记技术的进一步发展虽然荧光蛋白标记技术已经被广泛应用于细胞成像领域，但是其在实际应用中仍然存在一些问题和限制。
例如，荧光蛋白标记技术的标记效率和标记挑选性还需要进一步提高，部分荧光蛋白标记对细胞的生长和发育也具有一定的影响。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
Hale Waihona Puke 荧光标记蛋白的发展华中农业大学 工商管理0901 李佳佳
荧光标记蛋白技术实际上是也是一种标记技术。就如同最早用P标记脱氧核糖核 酸用S标记蛋白质是一样。
左图所示为验证 DNA和蛋白质谁 是遗传物质的实 验
Tuesday, March 29, 2011
可 作 为 报 告 基 因 ， 提 供 细 胞 内 物 质 的 跟 踪 定 位
Tuesday, March 29, 2011
PRIME技术 技术
开发此技术的原因 原因：无论是GPAC 原因 还是GFP，他们都有一个缺点，蛋 白过大。一旦荧光探针过大，它们 就有可能干扰蛋白的正常功能，或 妨碍它们到达目的地。 如：238个氨基酸的GFP干扰了一 些蛋白的功能，比如肌动蛋白actin。 此蛋白参与了细胞分裂、运动及通 讯。然而研究人员发现，与GFP的 融合对肌动蛋白的功能和运输有着 不利影响。
Tuesday, March 29, 2011
3，与其他报告基因不同的性质 性质 ①从生化角度来讲, 所有已知的荧光素 酶都是氧化酶, 它利用分子氧来氧化底 物, 使产物分子处于一种激发态而发光。 这种酶/底物的相互作用是生物发光的普 遍模式。 而GFP 是第一个例外, 它的27kDa 的单 体由238 个氨基酸构成, 本身就是一个 生物发光系统。其荧光机制是自身含有 的, 绿色荧光的发射仅需分子氧的存在, 而无需其他外源辅因子 无需其他外源辅因子 ②GFP 的表达无种属特异性 无种属特异性。不管细胞 无种属特异性 的种类和位置如何, 都能够自主表达; ③GFP 还能克服穿透、毒素、光漂白等 不利因素[1]。GFP 的荧光可以耐受福尔 马林的固定, 因而可以制成长期保存的 标本; ④对细胞内GFP 的检测非常简单 用显 检测非常简单, 检测非常简单 微镜、荧光计、荧光激活细胞分选仪等 就可实现
荧 光 标 记 蛋 白 在 生 物 研 究 反 面 的 作 用 荧 光 标 记 蛋 白 的 基 因
所以，如若 一开始便把 荧光标记蛋 白的基因插 入到某一特 定基因内， 则新的基因 会合成荧光 融合蛋白 肽链经过 弯曲、折 叠、多条 肽链的重 叠等形成 蛋白质。 如图所示为肽链的形成过程
Tuesday, March 29, 2011
Tuesday, March 29, 2011
2,GPAC 构成： 构成： 这是一个融合蛋白，它融合了红色荧光蛋白（RFP）单体Cherry和GFP的光激 活变异体。这种融合蛋白能够在表达标志物的细胞中持续发出红色荧光，而绿 色荧光只有在405-nm光激发下才会发出。 特点： 特点 ①表达GPAC的细胞在光激活前后都表现出强的红色信号，而绿色荧光只持续 数小时。 ②将某一特定蛋白放置在GPAC的N端或C端，均不影响其活性，也不会显著 影响胞内蛋白的定位或功能。即便融合伴侣需要大量的翻译后加工和修饰， GPAC仍可容忍。 不足：荧光标签相对较大，超过了50 kDa，这样，与GPAC融合的蛋白在用于 不足 功能研究前就必须进行仔细的验证 其杰出性 杰出性体现在：在时空动力学监测中突出了光转换的部分。 杰出性
概述：PRIME技术使用一种比GFP小 概述 得多的蓝色荧光探针。与GFP不同的是， 新探针一开始并不与目的蛋白相连。它 是在后来通过一种全新的酶而附在蛋白 上。这种全新的酶被称为荧光基团连接 酶。
Tuesday, March 29, 2011
当7-香豆素这 种蓝色荧光探 针进入细胞后， 连接酶将它与 目的蛋白上的 短标签相连。 这便使融合荧 光蛋白发出可 见荧光
Tuesday, March 29, 2011
FHP（fluorescent highlighter proteins光激活蛋白即第二类荧光蛋白）
及
GPAC （Green
＿photoactivatable ＿ Cherry光激活绿樱桃）
1，第二类荧光蛋白，FHP ①特点 特点 这些荧光蛋白在适当的刺激下会经历结构的改变，从而打开荧光这个开关，或者荧 光发射波长改变。 与第一代荧光蛋白相比，它们的优势在于能脉冲标记细胞或分子亚群，从而实现复 杂的动力学时空分析 ②典例：PAGFP，mRFP1，KFP1，Dronpa等 ③缺点 缺点：其中一些蛋白光转换效率不高，亮度较低，会迅速淬灭，或者需要多聚化。 缺点 此外，光转换通常伴随着第一种颜色的丧失，这样不得不借助计算机方法来查 看整个群体。
4，GFP目前存在的不足 不足 ( 1) 检测灵敏度还有待提高, 而且其 荧光信号强度方面的非线性性质使得 定量非常困难。 ( 2) 新生GFP 折叠和加工 折叠和加工成为具有荧 光活性形式的过程十分缓慢 使得某 过程十分缓慢, 过程十分缓慢 些快速过程如转录的激活过程还难以 用该方法进行研究。 ( 3) 紫外激发对某些GFP 有光漂白和 光破坏作用, 导致荧光信号快速丧失。 ( 4) 多数生物具有微弱的自发荧光现 象, 并有着类似的激发和发射波长, 这 些荧光背景会影响某些GFP 的检测。
Tuesday, March 29, 2011
原 理 ：
原理：在导入目的 原理 基因的同时也将编 码这种酶的基因导 入细胞。还在目的 基因上加上了一个 短的标签（13个 氨基酸），此标签 让连接酶识别蛋白 随后，目的蛋白质与 荧光基团蛋白质同时 产生
Tuesday, March 29, 2011
优点： 优点 ①使用这种方法后，标有荧光探针的肌动 蛋白能在细胞中自由游走，并穿过细胞核。 ②此方法能应用于细胞内特定区域的蛋白， 比如细胞核、细胞膜或细胞溶质。在连接 酶上加入一段信号肽，指导它到达特定区 域。之后，酶将荧光探针与此区域的蛋白 相连。
如左图所示，当体内物质融合了荧光蛋 白后会发出荧光，用显微镜、荧光计、 荧光激活细胞分选仪等就可以看见，若 在靠近体表处且光源强烈则肉眼可视。
例如，要研究细胞内某蛋白质的 游走状态，则用荧光蛋白标记后， 其所处位置清晰可见。
Tuesday, March 29, 2011
技术变革
①最早为水母体中提取的GFP ②在适当刺激下会改变结构从而发出或改变荧光 的第二类荧光蛋白FHP及其典例GPAC
Tuesday, March 29, 2011
2，GFP发光原理 发光原理 GFP控制光的部位是其自身的一部分， 仅由氨基酸构建而成，该部位含有一 段三个氨基酸组成的特殊序列：丝氨 酸－酪氨酸－甘氨酸（有时丝氨酸会 被相似的苏氨酸取代）。当蛋白质链 折叠时，这段短片段就被深埋在蛋白 质内部，然后，发生一系列化学反应： 甘氨酸与丝氨酸之间形成化学键，生 成一个新的闭合环，随后这个环会自 动脱水。最终，经过大约一个小时的 反应，周围环境中的的氧气攻击酪氨 酸的一个化学键，形成一个新的双键 并合成荧光发色团。 蛋白质链形成一个圆柱形罐头（蓝 色），子链的一部分直接从中间穿过 （绿色），发色团刚好在罐头盒的中 间，它被保护起来以免受周围环境的 影响。这种保护对于发射荧光是必需 的。
③最新的PRIME技术
Tuesday, March 29, 2011
GFP
1，GFP的发现 发现 GFP是从一种生活在北太平洋寒冷水域的 水母体内发现的。这种水母体内含有一种 生物发光蛋白质——aequorin，它本身发 蓝光。GFP能把这种光转变成绿色，也就 是当水母容光焕发的时候我们实际看到的 颜色。受到Ca2+或紫外线激活时, 水母中 的发光蛋白Aequorin 被激活, 产生蓝光, GFP 能够吸收蓝光( 395nm 处有最大光 吸收) , 发射绿色( 或黄绿色) 荧光