乙肝丙肝核酸检测的新平台培训课件
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最新浅谈乙肝病毒检测ppt课件
地区的特点和情况，采取特殊政策和灵
④民族团结是实现民族平等的政治基础
A．①③
B．②④
C．①④
D．②③
37
【分析】题干主要反映了民族区域自治制度的优越 性及民族团结的重要性，②③正确且符合题意，故 选D项。①与题意不符，不选；民族平等是实现民 族团结的政治基础，④说法错误，不选。
答案 D
38
•
认为“民族区域自治就是少数民族
自己管理自己”
7.洗涤
洗涤液充分洗涤5次，洗涤完扣干（每次应保持30-60秒的浸 泡时间）
8.显色
每孔加入A、B底物50 μL，混匀，37℃暗置15分钟
9.终止
每孔加50 μL终止液50 μL，混匀
10.测定
酶标仪单波长450nm或双波长450/630nm测定各空OD值，记 录结果,30分钟内测定完成）
4.结果判定
民族区域自治制度已载入《中华人民共
和国宪法》，成为我国的一项基本政治
制度。坚持民族区域自治制度也是党和
政府坚持依法行事的体现。
31
•
我国民族区域自治制度的优越
性
•
（1）有利于维护国家统一和安全：
民族区域自治是以领土完整、国家统一为
前提和基础的，是国家的集中统一领导与
民族区域自治的有机结合。它增强了中华
自治法所规定的，涉及政治、经济、文化和
社会生活各个方面，但不同于特别行政区的
高度自治权。民族区域自治是以领土完整、
国家统一为前提和基础的。
30
•
④明确实行民族区域自治制度的
原因。首先，实行民族区域自治是适合
我国国情的必然选择，是由我国的历史
特点和现实情况决定的。其次，民族区
乙肝知识培训PPT课件
乙肝知识培训 PPT课件
汇报人：XXX
01
乙肝病毒及传播途径
02
乙肝的症状与诊断
03
乙肝的预防与治疗
04
乙肝对生活的影响
05
乙肝的预防与控制策略
目 录
01
乙肝病毒及传播 途径
乙肝病毒的结构与特性
乙肝病毒结构
乙肝病毒由外壳和内核构成， 外壳上有突起，负责病毒的感
染和复制。
乙肝病毒特性
乙肝病毒具有耐热、耐酸、耐 紫外线等特性，在一定条件下
乙肝患者和易感人群应定期进行乙肝病毒检测，以便早 期发现和治疗。
03 乙肝的隔离与防护
乙肝病毒携带者应采取必要的隔离和防护措施，避免病 毒传播。
谢谢
汇报人：XXX
2
药物治疗
乙肝治疗常用的药物包括干扰素、拉米 夫定、阿德福韦酯等抗病毒药物，以及
抗炎保肝药物和免疫调节药物。
3
注意事项
在治疗乙肝时，应该根据患者的病情和 医生的建议选择合适的治疗方法和药物，
同时注意药物的副作用和不良反应。
04
乙肝对生活的影 响
乙肝对个人生活的影响
就业歧视
乙肝患者可能会在就业时遭受歧视，导致 职业发展受阻。
乙肝症状
乙肝患者可能出现的症状包括疲劳、 食欲不振、黄疸、肝区疼痛等。
02
诊断方法
乙肝的诊断通常通过血液检测来进 行，检测项目包括乙肝病毒标志物 和肝功能。
乙肝的诊断标准与方法
乙肝的症状
乙肝患者可能出现的症状包括疲劳、食欲不振、黄 疸和肝区疼痛等。
诊断方法
诊断乙肝的方法包括肝功能检查、乙肝病毒标志物 检测和肝脏超声等。
社交压力
乙肝患者可能会面临来自家庭和社会的压 力，影响其社交生活。
汇报人：XXX
01
乙肝病毒及传播途径
02
乙肝的症状与诊断
03
乙肝的预防与治疗
04
乙肝对生活的影响
05
乙肝的预防与控制策略
目 录
01
乙肝病毒及传播 途径
乙肝病毒的结构与特性
乙肝病毒结构
乙肝病毒由外壳和内核构成， 外壳上有突起，负责病毒的感
染和复制。
乙肝病毒特性
乙肝病毒具有耐热、耐酸、耐 紫外线等特性，在一定条件下
乙肝患者和易感人群应定期进行乙肝病毒检测，以便早 期发现和治疗。
03 乙肝的隔离与防护
乙肝病毒携带者应采取必要的隔离和防护措施，避免病 毒传播。
谢谢
汇报人：XXX
2
药物治疗
乙肝治疗常用的药物包括干扰素、拉米 夫定、阿德福韦酯等抗病毒药物，以及
抗炎保肝药物和免疫调节药物。
3
注意事项
在治疗乙肝时，应该根据患者的病情和 医生的建议选择合适的治疗方法和药物，
同时注意药物的副作用和不良反应。
04
乙肝对生活的影 响
乙肝对个人生活的影响
就业歧视
乙肝患者可能会在就业时遭受歧视，导致 职业发展受阻。
乙肝症状
乙肝患者可能出现的症状包括疲劳、 食欲不振、黄疸、肝区疼痛等。
02
诊断方法
乙肝的诊断通常通过血液检测来进 行，检测项目包括乙肝病毒标志物 和肝功能。
乙肝的诊断标准与方法
乙肝的症状
乙肝患者可能出现的症状包括疲劳、食欲不振、黄 疸和肝区疼痛等。
诊断方法
诊断乙肝的方法包括肝功能检查、乙肝病毒标志物 检测和肝脏超声等。
社交压力
乙肝患者可能会面临来自家庭和社会的压 力，影响其社交生活。
乙型肝炎和丙型肝炎的诊断与报告PPT课件
• ◆例2、男性，有输血史，体检发现ALT、AST正常， 抗HCV（+），HCV RNA （-）， 诊断？如何报告？
•
----诊断“既往感染丙型肝炎病毒”，无需报卡
20
谢谢！
21
感谢下 载
2．临床表现：全身乏力、食欲减退、恶心和右 季肋部疼痛等，少数伴低热，轻度肝肿大，部分患 者可出现脾肿大，少数患者可出现黄疽。部分患者
15
无明显症状，表现为隐匿性感染。
丙肝的诊断
• (二)慢性丙型肝炎的诊断 1．诊断依据：HCV感染超过6个月，或发病日期
不明、无肝炎史，但肝脏组织病理学检查符合慢性肝 炎，或根据症状、体征、实验室及影像学检查结果综 合分析，亦可诊断。
性检测的特异度在98％以上，只要一次病毒定性检测为阳
性，即可确证HCV感染，但一次检测阴性并不能完全排除
丙肝的诊断
• 流行病学史 • • 抗-HCV和HCV RNA 阳性
丙型肝炎
18
丙肝的报告
• ◆丙型肝炎在临床诊断上只分为急 性或慢性，没有“丙肝携带者”的 诊断，因此，只要是“抗-HCV + HCV RNA阳性”的就需要报卡
性，ALT持续或反复升高，或肝组织学检查有肝炎病变。
•
2．HBeAg阴性慢乙肝：血清HBsAg阳性，HBeAg持续阴性，抗-HBe阳性或阴性，
HBV DNA阳性，ALT持续或反复异常，或肝组织学检查有肝炎病变。
6
• ◆临床诊断 • （三）乙型肝炎肝硬化
乙肝的诊断
•
▼血清HbsAg阳性，或有明确的慢性乙肝病史
19
乙肝和丙肝的报告
• 提问
• ◆患者诊断为“慢乙肝、慢丙肝混合感染”，如何报告？
乙肝病毒核酸检测实验操作流程ppt课件
主要内容hbvdna的检测原理hbvdna操作流程hbvdna检测结果分析临床意义dna提取pcr扩增标本采集检测原理hbv用一对乙型肝炎病毒特性引物primer和一条乙型肝炎病毒特异性荧光探针配以pcr反应液耐热dna聚合酶taq酶四种脱氧核苷酸单体dntps等成分用pcr体外扩增法定量检测乙型肝炎病毒dna原理图信号强度与结合探针的dna分子数成正比操作流程二
乙肝病毒核酸检测 实验操作流程
广西临床检验中心 唐 娟
.
1
主要内容
➢ HBV-DNA的检测原理
➢ HBV-DNA操作流程
标本采集 DNA 提取
PCR 扩增
➢ HBV-DNA检测结果分析
➢ 临床意义
.
2
检测原理
.
3
HBV ：
用一对乙型肝炎病毒特性引物（Primer）和一 条乙型肝炎病毒特异性荧光探针，配以PCR反 应液、耐热DNA聚合酶（Taq酶）、四种脱氧 核苷酸单体（dNTPs）等成分，用PCR体外扩 增法定量检测乙型肝炎病毒DNA
吸取上层血清，转移至 1.5ml灭菌离心管
用一次性无菌注射器抽取 受检者静脉血2毫升，注
血 入含EDTA或枸橼酸钠抗凝 浆 剂的试管
的 采
立即轻轻颠倒玻璃管混合 5～10次，使抗凝剂与静
集 脉血充分混匀
5～10分钟后即可分离出 血浆，转移至1.5ml灭菌 离心管
.
7
注意事项
血清血清
尽量吸取血清的上层液，有纤维蛋白的标本应离心去除 脂类浑浊标本拒收 （离心4000rpm，5min）
.
10
注意事项
3.浓缩离心后若出现有“絮状悬浮物”，去上清时应一 并把“絮状悬浮物”吸除，不影响实验结果。如不 吸取絮状悬浮物会导致实验结果偏低。
乙肝病毒核酸检测 实验操作流程
广西临床检验中心 唐 娟
.
1
主要内容
➢ HBV-DNA的检测原理
➢ HBV-DNA操作流程
标本采集 DNA 提取
PCR 扩增
➢ HBV-DNA检测结果分析
➢ 临床意义
.
2
检测原理
.
3
HBV ：
用一对乙型肝炎病毒特性引物（Primer）和一 条乙型肝炎病毒特异性荧光探针，配以PCR反 应液、耐热DNA聚合酶（Taq酶）、四种脱氧 核苷酸单体（dNTPs）等成分，用PCR体外扩 增法定量检测乙型肝炎病毒DNA
吸取上层血清，转移至 1.5ml灭菌离心管
用一次性无菌注射器抽取 受检者静脉血2毫升，注
血 入含EDTA或枸橼酸钠抗凝 浆 剂的试管
的 采
立即轻轻颠倒玻璃管混合 5～10次，使抗凝剂与静
集 脉血充分混匀
5～10分钟后即可分离出 血浆，转移至1.5ml灭菌 离心管
.
7
注意事项
血清血清
尽量吸取血清的上层液，有纤维蛋白的标本应离心去除 脂类浑浊标本拒收 （离心4000rpm，5min）
.
10
注意事项
3.浓缩离心后若出现有“絮状悬浮物”，去上清时应一 并把“絮状悬浮物”吸除，不影响实验结果。如不 吸取絮状悬浮物会导致实验结果偏低。
乙肝、丙肝、梅毒的报告PPT课件
• 急性确诊丙肝（HCV RNA阳性+急性临床表现） • 慢性确诊丙肝（HCV RNA阳性+慢性临床表现）
特殊情况：母婴抗-HCV的被动传输问题
22
丙型肝炎病毒实验室检测结果的临床意义
抗-HCV HCV RNA
临床意义
阳性 阳性 阴性
阴性
阳性 阴性 阳性
阴性
HCV现症感染 提示既往感染，或治疗后HCV清除 急性HCV感染早期， 或各种原因导致的免疫功能低下 的HCV感染者 未感染HCV
18
• 乙型肝炎 • 丙型肝炎 • 梅毒
内容
19
丙肝
• 主要问题： 1、诊断分类不明确 2、网络报告要求不清楚
20
丙肝的诊断标准
• 诊断标准： WS213-2008， WS213-2018 （2018年8月1日开始执行）
21
病例分类
• 临床诊断丙肝（基本条件：抗-HCV阳性+（流行
病学史/临床表现/肝功））
HBc-IgM1:1000以上或者5、或者6）
13
慢性乙肝确诊的诊断
• 主要依靠： 慢性疑似基础上+血清
HBeAg阳性（或者HBV DNA ）
14
乙肝两对半（大三阳、小三阳）问题
HBsAg（1） 、抗-HBs（2）、 HBeAg（3） 、抗-Hbe（4）、抗 -HBc（5）
大三阳：1、3、5 （HBsAg 、HBeAg 、抗-HBc） 小三阳：1、4、5（HBsAg、抗-Hbe、抗-HBc）
乙肝 丙肝 梅毒的诊断与报告
1
• 乙型肝炎 • 丙型肝炎• 梅毒
内容
3
乙肝—目前主要问题
• 诊断 – 《乙型病毒性肝炎诊断标准》 (ws299-2008)未得 到有效执行 – 急性乙肝、慢性乙肝分类诊断混乱，未分类比重大 – 各级医疗机构诊断能力参差不齐 – 抗-HBc-IgM检测比例低，实验室能力有待提高
特殊情况：母婴抗-HCV的被动传输问题
22
丙型肝炎病毒实验室检测结果的临床意义
抗-HCV HCV RNA
临床意义
阳性 阳性 阴性
阴性
阳性 阴性 阳性
阴性
HCV现症感染 提示既往感染，或治疗后HCV清除 急性HCV感染早期， 或各种原因导致的免疫功能低下 的HCV感染者 未感染HCV
18
• 乙型肝炎 • 丙型肝炎 • 梅毒
内容
19
丙肝
• 主要问题： 1、诊断分类不明确 2、网络报告要求不清楚
20
丙肝的诊断标准
• 诊断标准： WS213-2008， WS213-2018 （2018年8月1日开始执行）
21
病例分类
• 临床诊断丙肝（基本条件：抗-HCV阳性+（流行
病学史/临床表现/肝功））
HBc-IgM1:1000以上或者5、或者6）
13
慢性乙肝确诊的诊断
• 主要依靠： 慢性疑似基础上+血清
HBeAg阳性（或者HBV DNA ）
14
乙肝两对半（大三阳、小三阳）问题
HBsAg（1） 、抗-HBs（2）、 HBeAg（3） 、抗-Hbe（4）、抗 -HBc（5）
大三阳：1、3、5 （HBsAg 、HBeAg 、抗-HBc） 小三阳：1、4、5（HBsAg、抗-Hbe、抗-HBc）
乙肝 丙肝 梅毒的诊断与报告
1
• 乙型肝炎 • 丙型肝炎• 梅毒
内容
3
乙肝—目前主要问题
• 诊断 – 《乙型病毒性肝炎诊断标准》 (ws299-2008)未得 到有效执行 – 急性乙肝、慢性乙肝分类诊断混乱，未分类比重大 – 各级医疗机构诊断能力参差不齐 – 抗-HBc-IgM检测比例低，实验室能力有待提高
乙肝丙肝等传染病诊断报告管理要求教学课件ppt
丙型肝炎
是由丙型肝炎病毒引起的疾病，主要传播途径是血液传播、母婴传播和性接触传播。
传染病诊断报告
是指按照法定程序和标准，对确诊或疑似传染病病例的信息进行报告、汇总、分析、利用和反馈的过程。
本课件重点内容的回顾
全球疫情现状
疫情对全球经济的影响
疫情对健康的影响
对当前疫情形势的展望
对防控工作的建议与思考
课件内容仅供学习参考，不作为指导标准和规范
02
乙肝丙肝等传染病概述
乙肝全称乙型病毒性肝炎，是由乙型肝炎病毒引起的疾病。这种病毒存在于乙肝患者的血液和体液中，可经过各种途径传播给他人。
乙肝
丙肝全称丙型病毒性肝炎，是由丙型肝炎病毒引起的疾病。这种病毒存在于丙肝患者的血液和体液中，可经过各种途径传播给他人。
丙肝
乙肝丙肝等传染病的定义
乙肝
乙肝患者通常会出现乏力、食欲减退、厌油腻、肝区疼痛等症状。长期反复发作还会引起贫血、消瘦、消化不良、食欲减退等症状。乙肝病毒携带者可能没有任何症状，但也能传染给他人。
丙肝
丙肝患者通常会出现疲劳、食欲减退、恶心、腹胀等症状。长期反复发作还会引起贫血、消瘦、消化不良、食欲减退等症状。丙肝病毒携带者可能没有任何症状，但也能传染给他人。
诊断报告需由专业医生审核，确认其真实性、准确性和完整性。
专业医生审核
医院管理部门需对已审核的诊断报告进行再次审核，确保其合规性和合法性。
医院管理部门审核
患者应对诊断报告进行确认，如有问题及时提出异议并进行修改。
患者确认
诊断报告的审核流程
存档要求
医院应将乙肝丙肝等传染病诊断报告进行存档，确保其可追溯性和可查询性。
加强防控宣传和教育
加强对公众的宣传和教育，提高人们对传染病防控的认识和意识。
《丙型肝炎病毒实验室检测技术规范》(2023年修订版)ppt课件
引用文献1的作者、年份、标题、期刊名称、卷号 、期号、页码。
参考文献2
引用文献2的作者、年份、标题、期刊名称、卷号 、期号、页码。
参考文献3
引用文献3的作者、年份、标题、期刊名称、卷号 、期号、页码。
THANKS
感谢观看
实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）
总结词
实时荧光定量聚合酶链反应是一种快速、高灵敏度的检测丙型肝炎病毒核酸的方法。
详细描述
qRT-PCR技术利用荧光探针标记特异性引物，通过实时监测荧光信号的强度，对病毒核酸进行定量检测。该方法 可快速准确地检测出HCV RNA的拷贝数，具有高灵敏度、高特异性和重复性好等优点。
目的
规范丙型肝炎病毒（HCV）实验室检测技术，提高检测质量 和效率。
背景
HCV是一种导致肝炎、肝硬化和肝癌等疾病的重要病原体， 早期诊断和治疗对疾病控制具有重要意义。
范围和应用
范围
本规范适用于各级医疗机构、疾病预防控制机构和科研院所等开展HCV实验室 检测工作。
应用
本规范规定了HCV实验室检测技术的基本要求、检测方法、结果报告和质量控 制等方面的要求。
步骤
颗粒增强免疫荧光法通常包括包被、洗涤、加样、温育、洗涤、荧光染 色和读数等步骤。
03
应用
颗粒增强免疫荧光法在临床诊断、食品安全、动物检疫等领域广泛应用
。
04
丙型肝炎病毒抗体检 测技术
酶联免疫法
原理
酶联免疫法是一种间接酶免疫测 定技术，通过将抗体与酶结合， 使抗体与抗原的反应产物能够以 颜色反应进行定量或定性的检测
应用
适用于对低浓度抗原或抗体检测的灵敏度和特异性要求较高的场景，如临床诊断和研究。
05
参考文献2
引用文献2的作者、年份、标题、期刊名称、卷号 、期号、页码。
参考文献3
引用文献3的作者、年份、标题、期刊名称、卷号 、期号、页码。
THANKS
感谢观看
实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）
总结词
实时荧光定量聚合酶链反应是一种快速、高灵敏度的检测丙型肝炎病毒核酸的方法。
详细描述
qRT-PCR技术利用荧光探针标记特异性引物，通过实时监测荧光信号的强度，对病毒核酸进行定量检测。该方法 可快速准确地检测出HCV RNA的拷贝数，具有高灵敏度、高特异性和重复性好等优点。
目的
规范丙型肝炎病毒（HCV）实验室检测技术，提高检测质量 和效率。
背景
HCV是一种导致肝炎、肝硬化和肝癌等疾病的重要病原体， 早期诊断和治疗对疾病控制具有重要意义。
范围和应用
范围
本规范适用于各级医疗机构、疾病预防控制机构和科研院所等开展HCV实验室 检测工作。
应用
本规范规定了HCV实验室检测技术的基本要求、检测方法、结果报告和质量控 制等方面的要求。
步骤
颗粒增强免疫荧光法通常包括包被、洗涤、加样、温育、洗涤、荧光染 色和读数等步骤。
03
应用
颗粒增强免疫荧光法在临床诊断、食品安全、动物检疫等领域广泛应用
。
04
丙型肝炎病毒抗体检 测技术
酶联免疫法
原理
酶联免疫法是一种间接酶免疫测 定技术，通过将抗体与酶结合， 使抗体与抗原的反应产物能够以 颜色反应进行定量或定性的检测
应用
适用于对低浓度抗原或抗体检测的灵敏度和特异性要求较高的场景，如临床诊断和研究。
05
2024版核酸检测医学知识培训课件
人员培训与考核
对实验人员进行定期培训和考核， 提高其专业技能和素质。
问题处理及应急措施
01
02
03
04
问题识别与处理
对实验过程中出现的问题进行 及时识别和处理，避免影响实
验结果。
应急预案制定
针对可能出现的突发事件制定 应急预案，确保实验安全进行。
应急物资准备
准备必要的应急物资和设备， 以应对突发事件的发生。
Chapter
样本类型选择及采集方法
呼吸道样本
包括鼻咽拭子、口咽拭子、鼻咽抽取物、深咳痰液等，首选鼻咽拭子。
采集方法
用采样拭子在鼻咽部或口咽部轻轻旋转擦拭，然后放入含有保存液的采样管中，折 断采样拭子头部，旋紧管盖。
样本保存条件及时限要求
保存条件
样本应保存在2-8℃的环境中，避免 反复冻融。
时限要求
防止泄漏
应确保样本包装严密，防 止在运输过程中发生泄漏 或污染。
接收和处理流程
接收流程
在接收样本时，应核对样本信息、检查样本包装是 否完好、确认样本是否在规定的保存期限内。
处理流程
接收到样本后，应按照实验室规定进行登记、编号、 分装等操作，然后按照相应的检测方法进行核酸检 测。在处理过程中应注意防止交叉污染和生物安全 风险。
等。
定量结果的误读
正确理解病毒载量的意义，避免 将其简单等同于病情严重程度。
忽视质量控制
重视实验过程中的质量控制，确 保结果的准确性和可靠性。
临床意义探讨
辅助诊断
01
核酸检测结果可作为疾病诊断的重要依据之一，结合患者临床
表现和其他检查结果进行综合判断。
疗效评估
02
通过连续监测患者体内病毒载量的变化，评估治疗效果和病情
对实验人员进行定期培训和考核， 提高其专业技能和素质。
问题处理及应急措施
01
02
03
04
问题识别与处理
对实验过程中出现的问题进行 及时识别和处理，避免影响实
验结果。
应急预案制定
针对可能出现的突发事件制定 应急预案，确保实验安全进行。
应急物资准备
准备必要的应急物资和设备， 以应对突发事件的发生。
Chapter
样本类型选择及采集方法
呼吸道样本
包括鼻咽拭子、口咽拭子、鼻咽抽取物、深咳痰液等，首选鼻咽拭子。
采集方法
用采样拭子在鼻咽部或口咽部轻轻旋转擦拭，然后放入含有保存液的采样管中，折 断采样拭子头部，旋紧管盖。
样本保存条件及时限要求
保存条件
样本应保存在2-8℃的环境中，避免 反复冻融。
时限要求
防止泄漏
应确保样本包装严密，防 止在运输过程中发生泄漏 或污染。
接收和处理流程
接收流程
在接收样本时，应核对样本信息、检查样本包装是 否完好、确认样本是否在规定的保存期限内。
处理流程
接收到样本后，应按照实验室规定进行登记、编号、 分装等操作，然后按照相应的检测方法进行核酸检 测。在处理过程中应注意防止交叉污染和生物安全 风险。
等。
定量结果的误读
正确理解病毒载量的意义，避免 将其简单等同于病情严重程度。
忽视质量控制
重视实验过程中的质量控制，确 保结果的准确性和可靠性。
临床意义探讨
辅助诊断
01
核酸检测结果可作为疾病诊断的重要依据之一，结合患者临床
表现和其他检查结果进行综合判断。
疗效评估
02
通过连续监测患者体内病毒载量的变化，评估治疗效果和病情
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药时机）
乙肝丙肝核酸检测的新平台
8
慢性HCV治疗方案
V RNA下降>2log
HCV病毒检测阴性
治疗到24周 HCV RNA检测
HCV病毒检测 阴性
继续治疗至24周
HCV病毒检测 阳性
停药
继续治疗至48周
乙肝丙肝核酸检测的新平台
HCV RNA下降<2log 考虑停药
10
国产试剂现状
Sciences. Foster City, CA
4. Pegasys (P乙eg肝in丙ter肝fer核on酸alf检a-2测a)的[p新ac平kag台e insert]. Hoffmann-La Roche Inc. Nutley, N1J8 5.
TYZEKA™ (Telbivudine) [Package Insert]. Novartis Pharmaceuticals Corp. E Hanover, NJ 6. Marcellin P et al. Hep DART
INTRON® A (Interferon alfa-2b) [package insert]. Schering-Plough Corp. Kenilworth, NJ 2. EPIVIR-HBV® (Lamivudine)
[package insert] GlaxoSmithKline, Research Triangle park, NC 3. HEPSERA™ (Adefovir dipivoxil) [package insert] Gilead
乙肝丙肝核酸检测的新平 台
目前乙肝和丙肝临床治疗过程中遇到的主要问题
• 治疗终点无法准确判定
• 有些病人经一段时间治疗后DNA/RNA检测结果忽阴忽阳，但 临床症状依然明显
• 不能及时预测耐药（病毒学突破）
• 核苷（酸）类似物治疗后病毒DNA/RNA快速下降至检测限以 下，不久却发现病毒出现反跳
• 疗效的准确监测？？？
• 目前使用的国产试剂能解决的问题，不能解决的问题： • HCV试剂盒说明：500～5×107 IU/mL • 较可信的测试范围：104～5×107 IU/mL
注：1 IU/mL= 1 copy/mL
乙肝丙肝核酸检测的新平台
11
内容
• HBV核酸检测的现状与需要 • HCV核酸检测的现状与需要
• 罗氏的CAP/CTM能带来什么益处
供了指导 • 对用药耐药性的监测（拉米夫定－YMDD，…） • 肝移植HBV复发风险的降低（术前，术后） • ……
乙肝丙肝核酸检测的新平台
4
HBV DNA监测的临床应用
HBV治疗路线图
Keeffe E. Clin Gastro Hepatolo乙g肝y 丙20肝07核;5酸:8检9测0-的89新7平. 台
病毒或细胞
37°C孵育
乙肝丙肝核酸检测的新平室台温
80°C孵育 15
CAP机械臂介绍
• 取SPU枪头 • 样本管/反应管管盖抓手 • 样本初始体积感应器 • 取试剂钢针
样本管/反应管结
乙肝丙肝核酸检测的新平台
16
构
HBV-DNA定量测试用于药品FDA注册试验
通用名
商品名
Interferon alfa-2b
TYZEKA™ VIREAD (HIV)
FDA 批准日期
1991 1998 2002 2005
2005 2006 Phase 3
关键的 HBV-DNA测试
N/A 杂交研究解决方案 1 Amplicor Monitor 2 Cobas Amplicor 3
Cobas Amplicor 4 Cobas Amplicor 5 Cobas TaqMan 6
• 治疗后12或24周病毒DNA/RNA下降幅度直接决定预后
问题的根源在哪里？
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2
内容
• HBV核酸检测的现状与需要
• HCV核酸检测的现状与需要 • 罗氏的CAP/CTM能带来什么益处 • 总结
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3
HBV DNA监测在抗病毒治疗中的临床应用
• HBV DNA是监测抗病毒治疗响应和时间的关键标志物 • HBV 治疗的路线图理念，为HBV DNA监测用于临床实践提
• 总结
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12
COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan 系统
全世界第一台用于体外诊断的全自动荧光定量分子诊断系统 真正实现 “样品进，结果出” 全球安装超过 2,000台，国内安装超过 40台
COBAS AmpliPrep / COBAS TaqMan48®系统
α-2b 干扰素
Lamivudine
拉米夫定
Adefovir dipivoxil
阿德福韦酯
Entecavir
恩替卡韦
Peginterferon alfa-2a
聚乙二醇干扰素α-2a
Telbivudine
替比夫定
Tenofovir
替诺福韦
INTRON® A EPIVIR-HBV® HEPSERA™ BARACLUDE™ PEGASYS®
COBAS AmpliPrep / COBAS TaqMan 96®系统 （无连接系统）
COBAS AmpliPrep / COBAS TaqMan 96®系统（带 连接系统）
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13
COBAS AmpliPrep仪器简介
• 全自动系统，自动进行核酸提取纯化和 PCR反应体系配制
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6
内容
• HBV核酸检测的现状与需要
• HCV核酸检测的现状与需要
• 罗氏的CAP/CTM能带来什么益处 • 总结
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7
HCV DNA监测在抗病毒治疗中的临床应用
• HCV病毒感染是可治愈的疾病 • HCV RNA检测可以有效指导临床用药 • 治疗的终点是核酸检测为阴性（核酸检测可以直接指导停
5
侯金林等，慢性乙型肝炎抗病毒治疗方案优化，中国肝脏病杂志
国产试剂现状
• 目前使用的国产试剂能解决的问题，不能解决的问题： • HBV试剂盒说明：500～5×107 IU/mL • 较可信的测试范围：104～5×107 IU/mL • 对部分发生HBV病毒突变的病人无法准确检测
注：1 IU/mL= 1 copy/mL
• 基于MGP磁珠分离技术，确保高质量的核 酸提取纯化
• 最多72个样品可以同时上机，运行中可连 续装载上架，提高工作效率 • 包括耗材、样品、试剂均可以连续上 样
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COBAS AmpliPrep仪器
MGP 磁珠分离技术
1.裂解、稳定和去蛋白
2.核酸捕获
3.冲洗
4.洗脱
DNA 或者 RNA
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8
慢性HCV治疗方案
V RNA下降>2log
HCV病毒检测阴性
治疗到24周 HCV RNA检测
HCV病毒检测 阴性
继续治疗至24周
HCV病毒检测 阳性
停药
继续治疗至48周
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HCV RNA下降<2log 考虑停药
10
国产试剂现状
Sciences. Foster City, CA
4. Pegasys (P乙eg肝in丙ter肝fer核on酸alf检a-2测a)的[p新ac平kag台e insert]. Hoffmann-La Roche Inc. Nutley, N1J8 5.
TYZEKA™ (Telbivudine) [Package Insert]. Novartis Pharmaceuticals Corp. E Hanover, NJ 6. Marcellin P et al. Hep DART
INTRON® A (Interferon alfa-2b) [package insert]. Schering-Plough Corp. Kenilworth, NJ 2. EPIVIR-HBV® (Lamivudine)
[package insert] GlaxoSmithKline, Research Triangle park, NC 3. HEPSERA™ (Adefovir dipivoxil) [package insert] Gilead
乙肝丙肝核酸检测的新平 台
目前乙肝和丙肝临床治疗过程中遇到的主要问题
• 治疗终点无法准确判定
• 有些病人经一段时间治疗后DNA/RNA检测结果忽阴忽阳，但 临床症状依然明显
• 不能及时预测耐药（病毒学突破）
• 核苷（酸）类似物治疗后病毒DNA/RNA快速下降至检测限以 下，不久却发现病毒出现反跳
• 疗效的准确监测？？？
• 目前使用的国产试剂能解决的问题，不能解决的问题： • HCV试剂盒说明：500～5×107 IU/mL • 较可信的测试范围：104～5×107 IU/mL
注：1 IU/mL= 1 copy/mL
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内容
• HBV核酸检测的现状与需要 • HCV核酸检测的现状与需要
• 罗氏的CAP/CTM能带来什么益处
供了指导 • 对用药耐药性的监测（拉米夫定－YMDD，…） • 肝移植HBV复发风险的降低（术前，术后） • ……
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4
HBV DNA监测的临床应用
HBV治疗路线图
Keeffe E. Clin Gastro Hepatolo乙g肝y 丙20肝07核;5酸:8检9测0-的89新7平. 台
病毒或细胞
37°C孵育
乙肝丙肝核酸检测的新平室台温
80°C孵育 15
CAP机械臂介绍
• 取SPU枪头 • 样本管/反应管管盖抓手 • 样本初始体积感应器 • 取试剂钢针
样本管/反应管结
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构
HBV-DNA定量测试用于药品FDA注册试验
通用名
商品名
Interferon alfa-2b
TYZEKA™ VIREAD (HIV)
FDA 批准日期
1991 1998 2002 2005
2005 2006 Phase 3
关键的 HBV-DNA测试
N/A 杂交研究解决方案 1 Amplicor Monitor 2 Cobas Amplicor 3
Cobas Amplicor 4 Cobas Amplicor 5 Cobas TaqMan 6
• 治疗后12或24周病毒DNA/RNA下降幅度直接决定预后
问题的根源在哪里？
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内容
• HBV核酸检测的现状与需要
• HCV核酸检测的现状与需要 • 罗氏的CAP/CTM能带来什么益处 • 总结
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HBV DNA监测在抗病毒治疗中的临床应用
• HBV DNA是监测抗病毒治疗响应和时间的关键标志物 • HBV 治疗的路线图理念，为HBV DNA监测用于临床实践提
• 总结
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COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan 系统
全世界第一台用于体外诊断的全自动荧光定量分子诊断系统 真正实现 “样品进，结果出” 全球安装超过 2,000台，国内安装超过 40台
COBAS AmpliPrep / COBAS TaqMan48®系统
α-2b 干扰素
Lamivudine
拉米夫定
Adefovir dipivoxil
阿德福韦酯
Entecavir
恩替卡韦
Peginterferon alfa-2a
聚乙二醇干扰素α-2a
Telbivudine
替比夫定
Tenofovir
替诺福韦
INTRON® A EPIVIR-HBV® HEPSERA™ BARACLUDE™ PEGASYS®
COBAS AmpliPrep / COBAS TaqMan 96®系统 （无连接系统）
COBAS AmpliPrep / COBAS TaqMan 96®系统（带 连接系统）
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COBAS AmpliPrep仪器简介
• 全自动系统，自动进行核酸提取纯化和 PCR反应体系配制
乙肝丙肝核酸检测的新平台
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内容
• HBV核酸检测的现状与需要
• HCV核酸检测的现状与需要
• 罗氏的CAP/CTM能带来什么益处 • 总结
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HCV DNA监测在抗病毒治疗中的临床应用
• HCV病毒感染是可治愈的疾病 • HCV RNA检测可以有效指导临床用药 • 治疗的终点是核酸检测为阴性（核酸检测可以直接指导停
5
侯金林等，慢性乙型肝炎抗病毒治疗方案优化，中国肝脏病杂志
国产试剂现状
• 目前使用的国产试剂能解决的问题，不能解决的问题： • HBV试剂盒说明：500～5×107 IU/mL • 较可信的测试范围：104～5×107 IU/mL • 对部分发生HBV病毒突变的病人无法准确检测
注：1 IU/mL= 1 copy/mL
• 基于MGP磁珠分离技术，确保高质量的核 酸提取纯化
• 最多72个样品可以同时上机，运行中可连 续装载上架，提高工作效率 • 包括耗材、样品、试剂均可以连续上 样
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14
COBAS AmpliPrep仪器
MGP 磁珠分离技术
1.裂解、稳定和去蛋白
2.核酸捕获
3.冲洗
4.洗脱
DNA 或者 RNA