硫酸软骨素双酶法生产新工艺
硫酸软骨素的提取和纯化的研究进展
硫酸软骨素的提取和纯化的研究进展栾允光赤峰学院化学系，赤峰024000摘要介绍了硫酸软骨素的来源、结构、性质及其生理功能，对硫酸软骨素的提取方法——中性盐法、碱提取法、酶提取法、超声波法、乙酸抽提法和纯化方法一一溶剂法、季铵盐化合物沉淀法、超滤膜法、色谱法电泳法的具体工艺路线及其优缺点进行了综述。
关键词：硫酸软骨素；提取；纯化硫酸软骨素（Chondroitin sulfate）是一种酸性粘多糖，广泛存在于哺乳动物的软骨、喉骨、鼻骨和气管中。
硫酸软骨素是由葡萄糖醛酸和氨基己糖交替连结而成的双糖聚合物，它通常与蛋白质结合成糖蛋白的形式存在，当其水解时发生消去反应，连接硫酸软骨素与蛋白质中丝氨酸羟基的苷键断裂，可以得到游离态的硫酸软骨素。
硫酸软骨素为白色或微黄色粉末,具有吸湿性，易溶于水而成粘度较大的溶液，难溶于甲醇、乙醇、乙醚、丙醇、丙酮和冰醋酸等有机溶剂，并且遇热不稳定，乙酰基易发生水解脱落,在酸性条件下更易水解成不同聚合度的低聚糖。
硫酸软骨素具有降血脂、抗凝血、抗炎症及抗肿瘤等生理活性，临床上可用于预防动脉粥状硬化、提高机体免疫力、治疗风湿病和肾炎及由链霉素引起的听觉障碍。
硫酸软骨素与铜等金属离子结合可用于治疗皮肤病，与硝酸铋或氢氧化铝反应得到的络合物可用于治疗消化性溃疡，与苯甲酸酯、利多卡因或布比卡因作用生成的衍生物可用作麻醉剂。
作为食品添加剂，硫酸软骨素可用于食品的乳化、保湿和祛除异味。
在化妆品中添加硫酸软骨素，可调节皮肤的细胞代谢，促进营养的吸收，保持皮肤的水分和改善发质。
[1,2,3]1 硫酸软骨素的提取1.1 中性盐法先用10%氯化钙提取，氯仿-戊醇（1：4）除去蛋白质，2倍量乙醇沉淀，最后以Lloyd 试剂精制。
而以透析法除杂质、氯化六氨合钴纯化，或一磷钨酸纯化，均可使工艺简化。
以30%氯化钾或30%氯化钾加1% 碳酸钾提取，高岭土吸附除去杂蛋白，可提高产品收率。
该方法提取的产品较白，各项指标符合国家标准，也不会造成环境污染，但是产率较低，造成原材料的大量浪费，对经济效益有一定的影响。
硫酸软骨素制作工艺流程
硫酸软骨素制作工艺流程英文回答：The production process of chondroitin sulfate involves several key steps.Step 1: Raw Material Preparation.The first step in the process is the preparation of raw materials. This includes sourcing and selecting high-quality bovine trachea or shark cartilage, which are the primary sources of chondroitin sulfate. The raw materials are inspected and cleaned to remove any impurities.Step 2: Extraction.Once the raw materials are prepared, the next step is the extraction of chondroitin sulfate. This is typically done using a combination of enzymatic and chemical methods to break down the cartilage and extract the chondroitinsulfate.Step 3: Purification.After extraction, the chondroitin sulfate undergoes a purification process to remove any remaining impurities and contaminants. This is often done through filtration and precipitation techniques to isolate the chondroitin sulfate from the extraction solution.Step 4: Drying.Once purified, the chondroitin sulfate is dried to remove any remaining moisture. This is typically done using a combination of air drying and vacuum drying to ensure the final product has the proper moisture content.Step 5: Testing and Quality Control.Throughout the production process, the chondroitin sulfate is tested for purity, potency, and quality. This ensures that the final product meets the necessaryspecifications and standards for use in dietary supplements or pharmaceuticals.Step 6: Packaging.The final step in the process is the packaging of the chondroitin sulfate. This is typically done in a controlled environment to prevent contamination and ensure the product remains stable during storage and transportation.中文回答：硫酸软骨素的制作工艺包括几个关键步骤。
硫酸软骨素生产工艺
硫酸软骨素生产工艺硫酸软骨素生产工艺动物软骨中均含有酸软骨素，大家畜的鼻中隔及喉头骨中含量较多，据报道，猪鼻中隔含有41%左右。
药物硫酸软骨素是从软骨中提取的硫梳软骨素A 和硫酸软骨素C等各种硫酸软骨素的混合物。
有的商品称康得灵。
本品用于因链、霉素所引起的听觉障碍症的预防和冶疗，如偏头痛、神经痛、风湿痛、肝炎等症。
性状：硫酸软骨素是一种白色粉末，吸水性强，易溶于水而成粘稠液体，不溶于乙醇、丙酮和乙醚等有机溶剂中，其盐类对热较稳定上。
制法：硫酸软骨的制剂和片剂，它的生产工艺主要有稀碱和浓碱和浓碱提取两种，下面各介绍两种。
一、稀碱提取工艺之一工艺流程：猪喉（鼻）软骨，浸出氢氧化钠过滤，浸出液，酶水解盐酸、胰酶53～54℃，水解液，吸附活性白土、活性炭，沉淀氯化钠、乙醇，PH值6.3～7，沉淀物，干燥无水乙醇60～65℃，干品，制剂氯化钠P值5.5，注射液。
操作过程：浸出：将2%氢氧化钠250千克置浸泡罐内，加入洁白干燥软骨40千克，在室温下每隔半小时缓缓搅拌1次，待浸出液比重达波美5.0（20℃）度时出料。
用纱布过滤。
骨渣再用适量蒸镏水浸泡20分钟，过滤。
二次过滤液合并，使滤液总体积为200升。
酶解：将上述滤液置消化罐中，搅拌下缓缓加入1：1盐酸并调PH 值8.8～9.0，用循环水浴加热。
罐内温度达50℃时加入相当于1：25倍胰酶1300克（宜使用高倍的胰酶）继续升温，控制消化温度为53～54℃，不得超过50℃循环水浴温度55～57℃保持，水解7小时。
在水解过程中，由于氨基酸的增加，PH值会有下降，需用10%的氢氧化钠随时调整PH值至8.8～9.0，在水解过程后期，取反应液少许，用滤纸自然过滤到比色管中，10毫升滤液滴加10%三氯醋酸1～2滴。
若仅微显浑浊，说明消化情况良好，否则可酌情增加适量胰酶。
吸附：使内温53～54℃保持，用1：2盐酸调节PH值至10%氢氧化风俗溶液调PH值至6.0，并加入与滤液体积等同的1%氯化钠溶液。
软骨素工艺流程
硫酸软骨素生产工艺图
硫酸软骨素生产工艺说明
1、原料清洗：将动物软骨原料去除结缔组织及油脂，粉碎成软骨碎料。
2、消化（碱解）：软骨碎料加水，再加入氢氧化钠和氯化钠，使溶液中氢氧化钠
浓度为2~3%和氯化钠浓度为 1.5~2.5%，控制温度为50~60O C,连续搅拌保温6~8小时，静置取上清液。
3、酶解：上清液用盐酸调节PH为6~8，加入重量为动物软骨重量4%的胰酶在
50~60O C下酶解6~10小时，用盐酸调节PH值到5.5~6.5，得酶解液。
4、过滤：所得酶解液进行抽滤，得澄清酶解液。
5、醇沉：将酶解液用95%乙醇沉淀，沉淀物用65%乙醇洗涤，再用无水乙醇脱水，
得硫酸软骨素粗品。
6、真空干燥：真空度0.07~0.095Mpa，干燥温度65~80O C。
7、粉碎：100目粉碎过筛。
硫酸软骨素提取工艺及药理学作用的研究进展
福建水产,2007年6月第2期NO.2 J O URNAL O F FUJ I AN F I SHER I ES Jun.26.2007硫酸软骨素提取工艺及药理学作用的研究进展陈守平1,许永安2(1.、福建农林大学食品学院,福建福州350002;2、福建省水产研究所,福建厦门361012)摘要:硫酸软骨素是从动物软骨中提取的粘性多糖,在医药、化妆品和食品工业上有广泛的用途,市场前景广阔。
本文主要阐述了硫酸软骨素提取方法及其药理学作用的研究进展,为该领域的生产和研究工作者提供参考。
关键词:硫酸软骨素;提取工艺;药理学作用 硫酸软骨素(Chondr oitin sulfate,简称CS)是一种天然酸性粘多糖,属生物高分子化合物。
CS有A、C和D的3种异构体,均是由D2葡萄糖醛酸和N2乙酰2D2氨基半乳糖硫酸酯为单位组成[3],只是硫酸基位置不同。
CS广泛存在于人和一些动物如猪、牛、羊和鱼等软骨组织中,且通过共价键与核心蛋白相结合[1-3]。
CS为白色、无臭、略带咸味的固体粉末[4],吸水性强,易溶于水而成粘度大的溶液[5],难溶于乙醇、丙酮等有机溶剂[6,7],其盐类对热较稳定。
CS具有促进冠状动脉循环、降血脂、抗凝血、抗肿瘤和心血管硬化等活性[8～10],主要是治疗风湿和类风湿疾病的药物,对冠心病、动脉粥样硬化、心肌梗塞等心血管疾病的防治有一定疗效。
1 硫酸软骨素的提取工艺硫酸软骨素的提取方法有碱法、碱盐法、酶解、超声波法和乙酸抽提法等;其分离纯化有乙醇沉淀法、盐液沉淀法、季铵盐络合法和离子交换色谱法等。
目前国内普遍采用稀碱和浓碱的提取法,国外报道用稀碱稀盐综合提取法,而这些制备工艺一般都要经过酶解和活性碳或白陶土等处理。
111 碱法碱法提取硫酸软骨素的原理是基于硫酸软骨素与蛋白质结合的O-糖苷键可在强碱作用下发生β-消去反应,使糖-肽键断裂,硫酸软骨素从蛋白多糖中释放出来[11],但在强碱作用下硫酸软骨素易发生降解。
硫酸软骨素提取工艺工艺流程及注意事项
硫酸软骨素提取工艺工艺流程及注意事项哎呀呀，硫酸软骨素的提取工艺可太重要啦！要想得到高质量的硫酸软骨素，这工艺流程可得一丝不苟呀！
先说这工艺流程吧，那得像精心编排的舞蹈一样精准有序呀！不能有丝毫的马虎。
比如说，原材料的选取就得精挑细选，这就好比为一场盛宴准备最上乘的食材！然后是一系列的化学处理步骤，每个环节都要恰到好处，就像给精密的仪器校准一样。
再讲讲这注意事项，可千万不能掉以轻心呀！你想想，要是在提取过程中温度控制不好，那不是前功尽弃啦？这就跟开车速度不稳容易出事故一样。
还有呀，试剂的添加量也得严格把控，多一点少一点都不行，不然怎么能得到理想的产品呢？
哇塞，整个提取过程都要保持高度的专注和严谨，难道能随便对待这么重要的工作吗？就像对待珍贵的艺术品一样，每一个细节都要精心雕琢呀。
硫酸软骨素的提取可不是闹着玩的，这可不是小孩子过家家呀！一定要牢记工艺流程和注意事项，别等出了问题才追悔莫及。
要好好对待这个重要的提取工作呀！。
硫酸软骨素不同生产工艺的考察
浸提液
盐酸, pH 2. 8～ 3. 2 30 m in, 过滤
滤液
胰酶 (骨重量的 4% ) , 6 h pH 8. 5～ 9. 0, 50～ 54℃
酶解液
活性炭, 盐酸, pH 6. 5 80～ 90℃, 过滤
滤液
乙醇达 60% 4h
沉淀干60燥℃1
3. 2 稀碱提取工艺 ( )
软 骨 碎 片 2% 氢氧化钠 (骨重量 6 倍) 浸 提 液 盐酸, pH 2. 5～ 3. 0
27. 02 0. 016 3. 35
30. 16 0. 019 2. 98
4. 2 影响产品收率的主要因素是浸提是否完全、除 杂过程和沉淀过程的损失量。资料报道[1]2% 氢氧化 钠溶液便可从软骨中较完全地提取 1。 从现在的方 法和数据看, pH 13, 即约 0. 4% 的碱溶液辅以氯化钠 溶液也可较完全地提取 1。 但浓碱提取时, 时间较 短, 易使产品色泽加深, 温度高时尤甚; 即便用稀碱 溶液提取, 温度也不宜超过 40℃。 不同浓度的碱液 提取法可影响 1 的分子链降解。碱液浓度愈大、温度 愈高、提取时间愈长, 则分子降解程度愈大。 粘多糖 类药物其生物活性与分子量有关[7]。 如果希望药物 成分在特定的范围内保持分子完整, 则应避免用浓 碱提取, 并避免高温。1 分子量为 2×103～ 5×103 时 用于治疗动脉粥样硬化和风湿类症状效果较好。 4. 3 表 1 中不同工艺制得 1 的含量 (1 含量 % = 2. 82×氨基己糖含量[2]) 和氮含量都符合原料药的 要求。 一般说来, 1 含量愈高, 其氮含量在一定范围 内就愈低; 产品氮含量超过规定值愈多, 表明蛋白质 或其肽链杂质愈多。 提取后的处理过程主要是为了 除去蛋白质。比较几种工艺的产品质量可看出, 浸提 溶液中的离子强度对提取处理过程中限制蛋白质浸 出以及蛋白质沉淀影响较大, 离子强度较大时有利 于提高产品质量。
硫酸软骨素提取工艺工艺流程及注意事项
硫酸软骨素提取工艺工艺流程及注意事项嘿呀！今天咱们来聊聊硫酸软骨素提取工艺的工艺流程及注意事项哇！
首先呢，咱来说说这工艺流程。
1. 原材料的准备呀！这可太重要啦！得选用优质的软骨组织，比如猪、牛、鸡的软骨等等。
哎呀呀，可不能随便找些质量不过关的软骨哟！
2. 然后就是预处理啦！把软骨清洗干净，去除杂质和多余的组织，这一步可得仔细着点呢！要是没弄好，后面可就麻烦啦！
3. 接下来是酶解过程哟！加入适量的酶，让软骨中的成分分解出来，这可需要控制好酶的种类、用量还有反应条件呀！
4. 再就是分离和提纯啦！通过各种方法，像离心、过滤啥的，把咱们想要的硫酸软骨素从混合物中分离出来，哇，这可是个精细活！
5. 最后就是干燥和包装啦！把提纯好的硫酸软骨素进行干燥处理，然后包装好，就大功告成啦！
再说说这注意事项。
哎呀呀！这注意事项可不少呢！
1. 安全第一呀！处理化学试剂的时候，一定要戴好防护用具，小心别让自己受伤啦！
2. 控制反应条件可关键啦！温度、酸碱度啥的，都得严格把控，不然结果可就不理想喽！
3. 选择高质量的酶和试剂呢，这能保证提取的效果和效率，可不
能为了省钱而随便选哟！
4. 操作过程要规范哇！每一步都得按照标准流程来，不能偷懒，也不能马虎！
5. 设备的清洁和维护也不能忘呀！不然会影响提取的质量和纯度呢！
哇塞！总之，硫酸软骨素的提取工艺可不是一件简单的事儿，工艺流程得精心设计，注意事项得牢记心中！这样才能得到高质量的硫酸软骨素呀！。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
表 ｌ 因素水平 表
表 ３ 方 差 分 析 结 果 表
２ ２ ３ 正 交试 验 及 结 果 ．．
精 密 吸取 供 试 品溶 液 ０ ５ｍ ， ． Ｌ 置具 塞 试 管 中 ， ２ １２ 下方 按 ．． 项 法 进 行 显 色 ， ５０ｎ 波长 处 测 定 吸 光 度 Ａ， 算 总皂 苷 的 含 量 。 于 ３ ｍ 计
白多糖 中释 放 出来 。 碱 提过 程 中会 使 提取 液 颜 色加 深 ， 期 除蛋 白 但 后
ｌ ， ｌ ● ， ， ＇ ． － ， ’ … ｌ ｌ ， Ｉ． Ｉ ’ ＇ ’ ｍ ｌ … ， ｍ ， ’ ｌ ｍ ｌ … ， ｍ ， ， ’ ’ ’ ｍ
耗， 简化 了操作 ， 得 新工 艺更 稳 定 。 使 现报 道 如下 。 １ 仪器 与 试 药
物 的 合成 和创 新 药 物 研 究 提 供 借 鉴 。
作 者 简 介 ： 湘 鄂 （ ９ ９一） 女 ， 北 枝 江 人 ， 读 博 士研 究 鲁 １７ ， 湖 在
生 ， 要 从 事 中 药及 其 制 剂 的工 艺和 质 量标 准 的研 究 ， 电 子信 箱 ） 主 （
ｌｅ ７ｌ ｘ ０ ０＠ ｓｎ ． Ｏｌ。 ｉａ Ｃ Ｉ ｌ
７ ２光 度 滴 定 仪 （ 士 万 通 公 司 ）Ｔ ０ 瑞 ；ｕ一１ ０ 型 紫外 分 光 光 度 ９１
’ ＇ ， ＇ ｌ １． １＇ ＇ ， ． １ ｌ ， ’ ’ ， ＇ ｌ ｌ ｌ ’ ， ， ’ ， ＇ ， ＇ ＇ ｍ ， ＇ ｌ ’ ’ ’ ， ． ． １
， ， ， ， ， － ， ＇ ＇ ， ， ｍ
２ ２ ４ 方 羞 分 析 结果 ． ．
理 。 者采 用 双 酶 法新 工 艺 ， 引 入新 型 复 合蛋 白酶 ， 笔 通过 去掉 碱 提 、 氧
化 步 骤 ， 著 缩短 了生 产周 期 ， 保证 产 品质 量 基 础 上降 低 了物 料 消 显 在
蛋 白多糖 的形式 存 在 …。 现行 硫 酸 软骨 素 生 产工 艺 大部 分 是 先碱 解 ， 然后 用 胰 脏 （ 酶 ） 碱 性 蛋 白 酶进 行 酶 解 ， 终 使 硫 酸 软 骨 素从 蛋 胰 和 最
总皂 苷 含 量较 高 ， 操 作 简 单 ， 用 提 取 时 问短 ， 节 能 、 术 经济 而且 所 从 技
和资源综合利用的角度来看 ， 应用超声提取具有一定的优势。
３ 讨 论
超声 提取法是 在提取过程 中进行超 声波强化 处理 ， 最大 的优
点 是 提 取 时 间 短 、 度 低 、 取 率 高 。 交 试 验 优 选 确 定 的 超 声 提 温 提 正
结 果见 表 ２ 。
表 ２ 正 交 试 验 结 果表
注 ： ２ ２） １＝ ９ Ｆ【 ， ０ ５ １ Ｆ（ ， ０ ０ ９， ２ ２） ＝ ９，Ｆ（ ２） ＝９。 ｏ ２， ｏＩ
Ｂ无 显著性差异 （ ０ １ ， Ｐ＞ ． ）故最佳 提取工艺 以 Ｂｃ 组合为佳 ， 。 即
１ 量 ４ ％ 的 乙 醇 提 取 ４ ａｎ ６倍 ０ ０ｒ 。 ｉ ２ ３ 结 果对 比 ．
本 研 究 结 果 表 明 ， 梅 根 中总 皂 苷 的含 量 高 ， 示 尚有 大 量 的 岗 预 研 究 工 作 有 待 进 行 ， 为 寻 找 高 效 、 毒 化 合 物 进 而 研 究 新 药 奠定 可 低
基础 ， 同时 也 可 为 有 机 合 成 化 学 家 开 展 分子 多 样 性 的 苷 类 天 然产
将 水 浴 提 取 法 和 超 声 提 取 法 两种 方法 按 优 化 条 件进 行 比较试 验， 分别 对 岗 梅根 总 皂 苷进 行 了提 取 和 含量 测 定 。 结果 水 浴提 取 法 总 皂苷 含 量 为 １３ ５ ， 声 提 取法 为 １ ７６ 。 见 ， 声 提取 所 得 的 ． ５％ 超 ．０％ 可 超
取 最 佳 工 艺 水 平 是 科 学 、 行 的 ， 利 于 实 际 生 产 降 低 能 源 、 约 可 有 节
时 间 ， 确 定 岗 梅 根 中总 皂 苷 的最 佳 提 取 方 法 为 超 声 提 取 ， 工 艺 故 其 以 Ａ ＢＣ 组 合 为 佳 ， １ 倍 量 ４ ％ 的 乙醇 提 取 ４ ａ ｎ 即 ６ ０ ０ｒ 。 ｉ
２１ ０ ０年第 ｌ ９卷第 ２ ２期
硫 酸 软 骨 素 双 酶 法 生产 新 工 艺
刘宪锋 ， 王 贞， 李稳强
４ ２０ ） ６ ０ ０ （ 华懋双 汇 实业 ＜ 团） 限公 司生 物化 学制 药厂 ， 南 漯河 集 有 河
制 技 剂术
摘要 ： 目的 介 绍 硫 酸 软 骨 素 双酶 法 生产 新 工 艺 。 法 引入 新 型 复 合 蛋 白酶 ， 用 双酶 法新 工 艺 生产 硫 酸 软 骨 素 。 果 与 现行 硫 酸 软 骨 素 方 采 结 生产 工 艺相 比 ， 有 效 缩 短 生 产 周期 、 低 生 产 成本 、 高产 品 质 量 。 论 双酶 法 生产 新 工 艺值 得 生 产 企 业 重视 和 推 广 。 能 降 提 结 关键词 ： 酸软骨素 ； 酶法 ； 工艺 硫 双 新 中 图分 类 号 ： ４ ０ ６ Ｒ ７ ． Ｔ ６． ：９７６ 文 献标 识 码 ： Ａ 文章 编 号 ：０ ６ ９ １２ １ ）２— ０ ５— ２ １０ —４ ３ （０ ０ ２ ０ ５ ０ 困 难 ， 重 影 响 产 品 色 泽 和 质 量 ， 要 在 后 道 工 序 进 行 氧化 脱 色 处 严 需
硫 酸 软骨 素 （ｈｎｒｉｎｓｌ ｔ， Ｈ ） 一类 动物 性 黏多 糖 ， 动 ｃｏｄｏｔ ｆ ｅＣ Ｓ是 ｉ ｕａ 由
物喉 骨 、 鼻软 骨 、 管或 骨 腱 、 带 等 含 硫 酸软 骨素 的软 骨 组 织 制取 气 韧
而成 。 软骨 中 ， 酸 软 骨 素 与 蛋 白 质 （ 胶原 蛋 白 ） 合在 一 起 ， 在 硫 如 结 以