最新基础医学-缺血预处理大鼠心肌细胞中的Bcl-2蛋白对线粒体通透性转换孔的影响-药学医学精品资料
• 第三、往往我们一个项目当即将竣工，项目上的后期决算 编制全部由一个预算员来完成，实际上竣工决算的最终编 制和资料装订涉及到很多细节方面，而项目经理恰把所有 的希望都由预算员来完成，同时也希望能够编制一个理想 的数字，但实际这个数字能否满足项目的经营成本，这个 数字是否真实有效，能否经得起审计部门的反复审核？施 工班组和材料商的最终结算数据是否与项目结算数据相吻 合，现在项目上在结算时往往施工班组和材料供应商的结 算数据大于项目部与业主的结算审计数据，在预算员编制 过程中对现场了解不够，在编制过程中也会出现漏编漏算 的现象，我们如何去控制这方面的量和价的问题？
• 这个时候我们的项目经理、施工员和质量员同时 可以来协助预算员编制决算，控制施工班组和供 货商的量和价的二次控制，特别是班组的施工质 量和供货商的材料质量多数在结算送审前被业主 或相关方的投诉造成竣工决算送审的影响，同时 施工签证单、增加工程的确认、主要材料单价确 认和合同专用条款等等受到决算编制的影响。为 了更好的提高决算编制的质量，项目部更应重视 审计前的策划。首先要实事求事的编制一份真实 有效的数据，项目部全员参与决算编制，俗话说， 千做不如一算，只有团队的力量才会使决算编制 质量得到有效的提高。
2.将实验动物分为三组：
正常对照组：穿线但不做结扎处理，持续灌流。 缺血再灌组：结扎30min，再灌注20min。 缺血预处理组：连续3次停灌3min+复灌 5min，然后
缺血30min，再灌注20min。
3.Bcl-2蛋白含量的测定
取心尖以上缺血梗死区横切2mm厚心肌，用免 疫组化sp法测定心肌Bcl-2的含量
4.心肌线粒体的制备
取左前壁心肌组织，转移至分离缓冲液A中冲洗、 剪碎、匀浆。用低温高速离定：线粒体悬液用考马斯 亮蓝法进行蛋白含量测定，以1mg/ml的BSA作为标 准品。线粒体悬液的吸光度：根据蛋白定量的结果 用肿胀液将线粒体混悬液稀释为0.25mg/ml。在线 粒体悬液中加200µmol/ml的 CaCl2，测定加入 CaCl2前后A520吸光度的变化，每隔30s进行一次， 连续观察15min。以到达平衡后的吸光度变化ΔS作 为MPTP开放程度的指标。
最新基础医学-缺血预处理 大鼠心肌细胞中的Bcl-2蛋 白对线粒体通透性转换孔的
影响-药学医学精品资料
背
景
缺血预处理（IPC）是迄今保护缺血/ 再灌注（I/R）心肌的最强效方式之一。缺 血/再灌注损伤致心肌细胞死亡有凋亡和坏 死两种形式。IPC心肌保护作用主要表现在 缩小心肌梗死面积。线粒体是细胞关键的 细胞器之一，它在供能、调节渗透压、钙 稳态，PH值以及细胞信号传导中起了重要 作用。
材
料
实验动物：SD大鼠 实验药品：戊巴比妥钠，抗鼠Bcl-2抗体及SP免疫组化
试剂盒,分离缓冲液A
实验仪器：呼吸机，分光光度计，低温高速离心机
方
法
1.建立动物缺血模型
大鼠用戊巴比妥钠麻醉后，用止血钳游离大鼠左侧的胸 大肌，暴露左第2，3，4肋，分别在左第2，3，4肋间隙距离 胸骨左缘约0.5cm处进针穿线，每个肋间隙同一进针点穿两 根长约40cm的0号手术线，再将两根线用力拉向两侧，分开 肋间肌和软组织并结扎肋间动脉，留取结扎线的剩余部分， 将两根结扎线剩余部分用力拉向两侧拉开胸腔，并固定之。 充分暴露心脏及其表面的血管，剪开心包膜，结扎冠状动脉 前降支，结扎之前在预结扎的冠状动脉前降支处放置一根约 0.5cm长直径1.5mm的乳胶管，打一个活结结扎，以备进行反 复多次缺血再灌实验。
• 其二：谈谈二算对比表。在工程项目初期我们就 针对该工程的投标报价结合实际施工内容进行了 详细的分析，把涉及到钱的主体反应在二算对比 表中，通过二算对比找出盈亏点，经营点，为此 我们又做出了一份二算对比分析报告。而这份二 算对比分析报告自始自终贯穿着整个工程，也就 是我们现实工程的一面镜子。放在我们面前的问 题是如何利用好这面镜子，在不同的阶段随时随 地的对工程项目造价进行修正，从各个角度对其 进行动态观测，分析其变化对项目经济效果产生 的影响。
• 今天就第二个目标为了盈利我们应该做些什么？ 大家都知道一个项目合同条款的好坏，直接关系 到项目的盈利，所以合同的重要性方面，金螳螂 公司在这方面动足了脑筋，推行合同压缩版，目 的是摆脱繁琐的通用条款，经过梳理提炼出针对 在建项目的重要条款包括有很多我们所说的“霸 王条款”，由于合同贯穿于整个项目工程过程中， 只有全面了解合同，谨记合同中的关键条款、 “霸王条款”，在合同中只要和钱有关的条款都 要深入研究，如何利用有利条款，规避不利条款 的风险，也就是说要做到知己知彼，我想在座的 项目经理在这方面的经验比我更丰富。
线粒体通透性转换孔（MPTP）是位于线粒体 内外膜间由多个蛋白质组成的复合孔道，又称线 粒体大通道，是线粒体内外信息交流的中心枢纽， 功能的发挥依赖于其开放状态。根据细胞环境的 不同，MPTP可有3种开放状态，一种是完全关闭 状态，一种是可逆性的低水平开放状态，另一种 是不可逆的高水平开放状态。MPTP高水平开放 的直接效应是导致线粒体质子－电化学梯度耗散、 离子稳态打破、线粒体肿胀和ATP水解，这些效 应最终激发细胞死亡。细胞色素C等凋亡效应因 子从线粒体释放是MPTP调控细胞凋亡的关键。
预期实验结果
Bcl-2蛋白含量：
正常对照组＞ 缺血预处理组＞ 缺血再灌组
MPTP开放程度：
正常对照组＜ 缺血预处理组＜ 缺血再灌组
说明Bcl-2蛋白对MPTP的开放有抑制作用
Thank you !
工程项目审计
徐秋生
工程管理---过程控制---决算编制--审计通病
• 我们做工程最直接地来说就是两个目标： 第一是做一个满足人们视觉效果的作品； 第二就是为了盈利。那么为了同时能达到 这两个目标指标，项目经理、施工员及管 理班组人员肩上都担负了重大的责任，尤 其是项目经理的全面管理。
• 第四、A、送审前:1、竣工资料不全；2、竣工图编制及确 认；3、竣工验收报告不及时；4、施工签证单等手续不全； 5、主要材料单价没有确认；6、施工缺陷整改；7、过程 中的索赔和合同约束；8、甲供材料确认单；9、现场使用 的水电费确认等；
Bcl-2和Bax在缺血预处理保护海马神经元缺血再灌损伤中的作用
Bcl-2和Bax在缺血预处理保护海马神经元缺血再灌损伤中的作用刘亚君;崔鹤;谢东萍;缪冰;刘克敬;陈连璧【期刊名称】《山东大学学报：医学版》【年(卷),期】2006(44)3【摘要】目的:探讨凋亡相关基因bcl-2和bax在缺血预处理(ischemic preconditioning,IPC)保护大鼠海马神经元缺血再灌损伤中的作用。
方法:随机将动物分为IPC加缺血再灌组(IPC组)、单纯缺血再灌组(IR组)和对照组。
观察海马CA1区神经元的组织形态学变化;TUNEL染色检测海马CA1区神经元凋亡;免疫组化测定海马CA1区神经元Bcl-2和Bax的表达。
结果:IPC组海马CA1区神经元存活数显著多于IR组,凋亡细胞数显著低于IR组,Bcl-2呈强表达,Bax表达不明显。
结论:IPC诱导Bcl-2表达上调和Bax蛋白表达下调,可抑制凋亡的发生,对海马CA1区神经元缺血再灌损伤起保护作用。
【总页数】4页(P227-230)【关键词】基因,bcl-2;基因,bax;缺血预处理;海马神经元;脑缺血再灌损伤;大鼠,Wistar【作者】刘亚君;崔鹤;谢东萍;缪冰;刘克敬;陈连璧【作者单位】山东大学医学院生理学研究所;山东医学高等专科学校生理学教研室【正文语种】中文【中图分类】Q463;R743【相关文献】1.缺血预处理经抑制P53表达减轻缺血再灌后大鼠海马神经元损伤 [J], 刘慧敏;崔鹤;刘亚君;许复郁;王志宏;陈连璧2.生地预处理在减轻全脑缺血再灌注大鼠海马神经元损伤中的作用 [J], 韩振翔;魏江磊;祁丽丽;李妙龄3.大鼠全脑缺血再灌后海马CA1区Bax蛋白和bcl-2表达及EGb761的保护作用[J], 吕建国;孙燕玲;王秋桂4.氟桂利嗪和N-乙酰半胱氨酸促进PD移植神经元存活的实验研究/Bcl-2、Bax蛋白在NRs抗体预处理后缺氧缺糖海马脑片CA1区的表达变化/短暂性前脑缺血后大鼠海马NMDA受体亚单位NR1 mRNA的表达变化及其与细胞凋亡的关系 [J],5.ghrelin在缺血预处理抗大鼠海马神经元缺血再灌注损伤中的作用 [J], 刘亚君;陈筱南;陈连璧因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
牛磺酸对大鼠缺血心肌Bcl-2和Bax蛋白表达的影响
牛磺酸对大鼠缺血心肌Bcl-2和Bax蛋白表达的影响万福生;王青松;龚文华;罗达亚;赵小曼;李华【期刊名称】《南昌大学学报（医学版）》【年(卷),期】2002(042)005【摘要】目的:探讨大鼠心肌缺血损伤与凋亡相关基因bcl-2和bax表达的关系及牛磺酸的影响.方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支建立心肌缺血模型.检测心肌线粒体中超氧化物歧化酶(SOD)、Ca2+-ATPase活性及MDA(丙二醛)含量,用免疫组化法检测Bcl-2和Bax蛋白在心肌中的表达量.结果;结扎冠脉左前降支可致心肌线粒体MDA含量升高,SOD和Ca2+-ATPase活性下降;缺血心肌Bax蛋白表达呈显著升高;牛磺酸能明显减少缺血心肌线粒体MDA的生成,降低心肌Bax蛋白的表达,增加Bc1-2蛋白的表达.结论:结扎大鼠冠状动脉左前降支导致的心肌缺血损伤与Bc1-2和Bax蛋白的表达有关.【总页数】3页(P1-3)【作者】万福生;王青松;龚文华;罗达亚;赵小曼;李华【作者单位】江西医学院生化与分子生物学教研室,江西,南昌,330006;江西医学院生化与分子生物学教研室,江西,南昌,330006;江西医学院生化与分子生物学教研室,江西,南昌,330006;江西医学院生化与分子生物学教研室,江西,南昌,330006;江西医学院生化与分子生物学教研室,江西,南昌,330006;江西医学院生化与分子生物学教研室,江西,南昌,330006【正文语种】中文【中图分类】R-332;Q593+.3【相关文献】1.阈下电刺激对大鼠缺血心肌细胞凋亡及bcl-2、bax表达的影响 [J], 杨峰;沈祥春;何艳;张蓓;沈正;刘兴德2.抑郁对心肌梗死大鼠缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的影响[J], 尤鑫;刘兴德3.环境因素对大鼠缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响 [J], 熊小栓;魏芳;吴立荣;刘兴德4.川芎嗪对大鼠缺血心肌Bcl-2及Bax蛋白表达的影响 [J], 黎玉;万福生;万义福5.温心胶囊对大鼠实验性缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Fas蛋白表达的影响 [J], 张腾;曹洪欣;盛小禹;卢大儒;沈自尹因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
缺血预处理对猪冬眠心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响
缺血预处理对猪冬眠心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响林利;夏勇;陈清枝【期刊名称】《徐州医学院学报》【年(卷),期】2005(025)005【摘要】目的探讨缺血预处理对冬眠心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响.方法18只小型中国家猪随机分为3组:对照组(CON组)、冬眠心肌组(HM组)、缺血预处理组(IP组).采用末端标记技术(TUNEL)测定细胞凋亡,免疫组化方法检测Bcl-2、Bax蛋白表达,透射电子显微镜观察心肌细胞超微结构.结果HM组中Bcl-2蛋白表达较CON组显著增加,在IP组,Bcl-2蛋白表达较HM组进一步升高;在HM组Bax蛋白表达高于CON组,Bax蛋白表达在HM组、IP组无统计学差别.TUNEL显示,CON组极少心肌细胞凋亡,HM组细胞凋亡较CON组增多,IP组细胞凋亡较HM组减少.结论缺血预处理可能通过增加Bcl-2蛋白表达来减少冬眠心肌细胞凋亡的发生.【总页数】4页(P404-407)【作者】林利;夏勇;陈清枝【作者单位】徐州医学院附属医院心内科,江苏,徐州,221002;徐州医学院附属医院心内科,江苏,徐州,221002;徐州医学院附属医院心内科,江苏,徐州,221002【正文语种】中文【中图分类】R54【相关文献】1.去甲肾上腺素和缺血预处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡、Bcl-2、Bax蛋白表达的影响 [J], 程芳洲;唐国华;李庚山;余细球;李远重;贺新华;鲍翠玉;周云2.单磷酰脂A和缺血预处理对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡 Bcl-2 Bax蛋白表达的影响 [J], 程芳洲;马业新;黄俊;唐国华3.异丙酚或缺血预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤期细胞凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响 [J], 余淑珍;荆建敏;郭永清;张玮玮4.缺血预处理影响兔肝缺血再灌注时细胞凋亡及调控基因Bcl-2/Bax表达的研究[J], 苏松;夏先明;贺凯;李波;冯春红;张孟愈5.远程缺血预处理对大鼠体外循环后肺泡上皮细胞凋亡与相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响 [J], 涂杰;梁东科;刘国锋;梁蓓薇;韦秋英;刘菊梅;张炳东因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
线粒体通透性转换孔与心脏病
线粒体通透性转换孔与心脏病徐婧【摘要】线粒体是细胞能量加工器,对维持细胞的正常能量代谢和存活有重要作用.线粒体功能紊乱可引起心肌细胞的凋亡和坏死.线粒体通透性转换孔(mitoclion-drial permeability transition pore,mPTP)大量开放是导致线粒体功能紊乱的关键,它与多种心脏病的发生、发展密切相关.该文对mPTP的构成、调控、功能及与心脏病关系的进展作一综述.【期刊名称】《国际心血管病杂志》【年(卷),期】2010(037)004【总页数】4页(P193-196)【关键词】线粒体;线粒体通透性转换孔;心脏病【作者】徐婧【作者单位】200120,上海,心律失常教育部重点实验室(同济大学)【正文语种】中文线粒体是心肌细胞内最重要的细胞器之一,是三羧酸循环、电子传递和氧化磷酸化反应的主要场所。
心肌细胞内线粒体的体积占40%～60%,在生理情况下,它是细胞的能量加工器,维持细胞的正常能量代谢和存活。
线粒体功能紊乱会导致心肌细胞的凋亡和坏死。
线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,mPTP)的大量开放是导致线粒体功能紊乱的关键,与多种心脏病的发生、发展密切相关[1]。
本文对mPTP的构成、调控、功能及与心脏病关系的进展作一综述。
1 mPTP的构成迄今为止,mPTP的确切构成仍是未解之谜。
一般认为,mPTP位于线粒体内、外膜上由多个蛋白组成的非选择性、高导电性复合通道,允许任何相对分子质量＜1500的分子通过,钙离子可诱导其开放,螯合钙离子又可快速使其关闭。
mPTP主要由基质的亲环蛋白D(cyclophilinD,CyP-D),内膜的腺苷酸转移酶(adenine nucleotide translocator,ANT)以及内膜的线粒体磷酸转载体(phosphate carrier,PiC)这三个基本亚基组成[2]。
大鼠脑缺血预处理后线粒体通透性转换及细胞色素C水平的变化及意义的开题报告
大鼠脑缺血预处理后线粒体通透性转换及细胞色素C 水平的变化及意义的开题报告
一、研究背景和意义
缺血性脑卒中是发生在脑血管以及其他血管系统的血流供给不足引
起的一种疾病，其常见的症状为突发的神经功能异常、运动及感觉障碍等。
目前，缺血性脑卒中已经成为了全球主要的疾病负担，所以相关研
究非常重要，而线粒体通透性转换（mitochondrial permeability transition，MPT）和细胞色素C（cytochrome c，Cyt C）是目前研究中
较为热点的内容，对其进行研究可以更加深入地了解缺血性脑卒中的发
生机制，提高预防和治疗的效果。
二、研究目的
本研究旨在探究大鼠脑缺血预处理后，MPT及Cyt C水平的变化情况，为缺血性脑卒中的发生机制提供实验性依据。
三、研究内容和方法
本研究将30只健康SD大鼠随机分成3组，分别为对照组、模型组
和预处理组。
模型组和预处理组将进行脑缺血模型制备，而预处理组将
在模型制备前进行预处理。
预处理和模型制备完毕后，将进行大鼠脑细
胞的分离和培养，并进行MPT和Cyt C的检测。
四、研究预期结果
预期结果是脑缺血预处理可以降低MPT的发生，并减少Cyt C释放，从而有助于降低缺血性脑卒中的发生率。
五、研究意义和价值
本研究可以从细胞层面研究大鼠脑缺血预处理后MPT和Cyt C的变化，有助于深入研究缺血性脑卒中的病理生理机制，为预防和治疗缺血性脑卒中提供实验性依据。
芹菜素对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及相关蛋白Bcl2、Bax、Caspase3表达的影响
芹菜素对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及相关蛋白Bcl2、Bax、Caspase3表达的影响一、概述随着心血管疾病研究的深入，心肌缺血再灌注损伤已成为该领域的研究热点。
心肌缺血再灌注损伤涉及复杂的病理生理过程，其中细胞凋亡及相关蛋白的表达在这一过程中扮演重要角色。
近年来，天然药物在心血管疾病治疗中的应用逐渐受到关注，其中芹菜素因其抗氧化、抗炎等生物活性而受到研究者的青睐。
本研究旨在探讨芹菜素对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及相关蛋白BclBax、Caspase3表达的影响，以期为心肌缺血再灌注损伤的治疗提供新的思路和方法。
在本研究中，我们采用结扎左冠状动脉前降支的方法建立大鼠心肌缺血再灌注模型，通过给予不同剂量的芹菜素，观察其对心肌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。
同时，结合心肌组织病理学检查，全面评估芹菜素对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。
本研究的开展不仅有助于深入了解芹菜素在心肌缺血再灌注损伤中的作用机制，还可为开发新型心血管疾病治疗药物提供理论依据。
同时，本研究结果也可为临床用药提供参考，促进芹菜素在心血管疾病治疗中的合理应用。
本研究具有重要的理论和实践意义，有望为心血管疾病的防治提供新的视角和方法。
1. 心肌缺血再灌注损伤概述心肌缺血再灌注损伤是一种复杂的病理过程，它发生在心肌缺血后，当血液供应重新恢复时。
在这一过程中，尽管心肌得到了恢复血液供应的机会，但其组织损伤往往会进一步加重。
这是由于在缺血期间，心肌细胞经历了超微结构、能量代谢、心功能和电生理等多方面的损伤性变化。
当血液再灌注时，这些变化可能会变得更加明显，有时甚至会导致严重的心律失常，甚至猝死[1]。
心肌缺血再灌注损伤的机制涉及多个方面，包括氧自由基的产生、细胞内钙离子超载、炎症反应等。
心肌细胞凋亡在这一过程中扮演了重要角色。
细胞凋亡是一种程序性细胞死亡过程，它在心肌缺血再灌注损伤中起到关键作用。
多种凋亡相关蛋白参与了这一过程，如BclBax和Caspase3等。
大鼠在体缺血后处理对肺细胞凋亡及肺Bax和Bcl-2表达的影响
大鼠在体缺血后处理对肺细胞凋亡及肺Bax和Bcl-2表达的影响发表时间：2018-03-19T11:31:22.197Z 来源：《医药前沿》2018年3月第9期作者：陈莹[导读] 缺血/再灌注损伤可损害肺组织结构，增加细胞凋亡，而IPO可能通过调节Bax与Bcl-2的表达来降低细胞凋亡指数。
（贵阳市第一人民医院病理科贵州贵阳 550001）【摘要】目的：通过实验在动物整体水平上初步探讨:缺血后处理(ischemic postconditioning,IPO)在肺缺血/再灌注损伤（ischemia/reperfusion,I/R）中的保护作用。
方法：成年SD大鼠60只，随机分为3组，每组20只，设立假手术组（Sham组）、缺血/再灌注组（I/R组）、缺血后处理组（IPO组）。
观察各组肺组织的病理学改变，肺湿/干重之比，TUNEL法检测细胞凋亡指数，免疫组化法测定肺组织中Bcl-2与Bax的表达。
结果：与I/R组相比，IPO组病理学改变减轻、肺湿/干重之比与肺细胞凋亡指数明显降低、Bax表达显著减少、而Bcl-2表达明显增高。
结论：缺血/再灌注损伤可损害肺组织结构，增加细胞凋亡，而IPO可能通过调节Bax与Bcl-2的表达来降低细胞凋亡指数，从而减轻肺损伤。
【关键词】肺；缺血后处理；细胞凋亡；Bax；Bcl-2【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）09-0115-02 缺血后处理是指组织或器官发生缺血后，在长时间再灌注之前进行数次短暂缺血/再灌注循环，从而减轻再灌注损伤的一种保护作用。
肺缺血后处理的研究起步较晚，其保护机制还未确定。
因此本实验通过建立肺缺血/再灌注损伤模型，探讨缺血后处理在肺I/R损伤中的保护作用及其可能机制。
1.材料和方法1.1 实验分组成年SD大鼠60只，雌雄不拘，并随机分为3组，每组20只。
10%水合氯醛腹腔麻醉，气管插管，接动物呼吸机。
缺血预处理大鼠心肌细胞中的Bcl-2蛋白对线粒体通透性转
预期实验结果
Bcl-2蛋白含量：
正常对照组＞ 缺血预处理组＞ 缺血再灌组
MPTP开放程度：
正常对照组＜ 缺血预处理组＜ 缺血再灌组
说明Bcl-2蛋白对MPTP的开放有抑制作用
Thank you !
由于两者都是通过引起细胞色素C等物 质浓度的改变来发挥作用，但是这两者之间 是否存在直接联系尚不清楚。本实验旨在于 研究Bcl-2蛋白是否会对MPTP的开放情况产 生影响。
实 验 设 计
将实验动物分为三组： 正常对照组
缺血再灌组
缺血预处理组 比较三者的Bcl-2蛋白的含量和MPTP的开放程度
材
2.将实验动物分为三组：
正常对照组：穿线但不做结扎处理，持续灌流。
缺血再灌组：结扎30min，再灌注20min。
缺血预处理组：连续3次停灌3min+复灌 5min，然后 缺血30min，再灌注20min。
3.Bcl-2蛋白含量的测定
取心尖以上缺血梗死区横切2mm厚心肌，用免 疫组化sp法测定心肌Bcl-2的含量
线粒体通透性转换孔（MPTP）是位于线粒体 内外膜间由多个蛋白质组成的复合孔道，又称线 粒体大通道，是线粒体内外信息交流的中心枢纽， 功能的发挥依赖于其开放状态。根据细胞环境的 不同，MPTP可有3种开放状态，一种是完全关闭 状态，一种是可逆性的低水平开放状态，另一种 是不可逆的高水平开放状态。MPTP高水平开放 的直接效应是导致线粒体质子－电化学梯度耗散、 离子稳态打破、线粒体肿胀和ATP水解，这些效 应最终激发细胞死亡。细胞色素C等凋亡效应因 子从线粒体释放是MPTP调控细胞凋亡的关键。
曲美他嗪对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠的治疗效果及对Bcl_2、Caspase_3蛋白表达的影响
曲美他嗪对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠的治疗效果及对Bcl_2、Caspase_3蛋白表达的影响朱雪梅【摘要】Objective To investigate the effect of trimetazidine on the expression of B cell lymphoma leukemia_2(Bcl_2)and cys-teinyl aspartate_specificproteinase_3(Caspase_3)in rats with acute myocardial ischemia_reperfusion injury.Methods 48 healthy adult male SD rats were randomly divided into sham operation group,model group,low dose group and high dose group,with 12 rats in each group.The rats of the model group,low dose group and high dose group were prepared for the acute myocardial ischemia reper-fusion injury.The low dose group was given10mg/kg trimetazidine and the high dose group was given 20mg/kg trimetazidine.The creatine kinase(CK)and lactate dehydrogenase(LDH)were detected by automatic biochemical analyzer,the myocardial tissue was observed by HE staining,the apoptosis of cardiomyocytes was detected by DNA in situ end labeling(TUNEL),and the expression of Bcl_2 and Caspase_3 protein in myocardium was detected by immunohistochemistry.Results There were no obvious changes in my-ocardial tissue in the sham operated group;in the model group,the myocardial fibers were disordered and the cells were severely ede-matous;the myocardial cell swelling in the low dose group and the high dose group was alleviated.The CK,LDH and Apoptosis in-dex(AI)values in model group,low dose group and high dose group were significantlyhigher than those in sham operation group(P<0.05);the CK,LDH and AI values in the high dose group were(720.02 ± 80.21)U/L,(1642.04 ±137.72)U/L and(7.89 ± 1.04)respectively,which were significantly lower than those in the low dose group and the model group(P<0.05);the expression levels of Caspase_2 protein gray value in model group,low dose group and high dose group were significantly higher than that in the sham operation group,while the expression levels of Bcl_2 protein gray value were lower than that in sham operation group(P<0. 05);the expression of Caspase_2 protein gray value in high dose group was(120.03 ± 24.15),significantly lower than that in the low dose group and model group(P<0.05),while the expression of Bcl_2 gray value was(155.16 ± 10.10),significantly higher than that in the low dose group and model group.Conclusions High dose of trimetazidine can inhibit cardiomyocyte apoptosis in rats with acute myocardial ischemia reperfusion injury,which is related to theup_regulation of Bcl_2 protein expression and down_regula-tion of Caspase_2 protein expression.%目的探讨曲美他嗪对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠的治疗效果及对B细胞淋巴瘤/白血病_2基因(Bcl_2)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶_3(Caspase_3)表达的影响.方法选取健康成年雄性SD大鼠48只,随机分为假手术组、模型组、低剂量组和高剂量组,每组12只,其中模型组、低剂量组和高剂量组大鼠制备急性心肌缺血再灌注损伤,低剂量组给予10mg/kg曲美他嗪灌胃,高剂量组给予20mg/kg曲美他嗪灌胃,采用全自动生化分析仪检测肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH),采用HE染色观察心肌组织,采用DNA原位末端标记(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,免疫组化法检测心肌组织Bcl_2和Caspase_3蛋白表达.结果假手术组心肌组织未见明显改变,模型组心肌纤维排列紊乱,细胞严重水肿,低剂量组和高剂量组心肌细胞肿胀减轻;模型组、低剂量组和高剂量组CK、LDH和凋亡指数(AI)值明显高于假手术组(P<0.05);高剂量组CK、LDH和AI值分别为(720.02 ± 80.21)U/L、(1642.04 ± 137.72)U/L和(7.89 ± 1.04),明显低于低剂量组和模型组(P<0.05);模型组、低剂量组和高剂量组Caspase_2蛋白表达灰度值明显高于假手术组,而Bcl_2蛋白表达灰度值明显低于假手术组(P<0.05);高剂量组Caspase_2蛋白表达灰度值为(120.03 ± 24.15),明显低于低剂量组和模型组(P<0.05),而Bcl_2蛋白表达灰度值为(155.16 ± 10.10),明显高于低剂量组和模型组.结论高剂量曲美他嗪能抑制急性心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡,与其上调Bcl_2蛋白表达,下调Caspase_2蛋白表达有关.【期刊名称】《心脑血管病防治》【年(卷),期】2018(018)001【总页数】5页(P4-6,9,封3)【关键词】曲美他嗪;急性心肌缺血再灌注损伤;B细胞淋巴瘤/白血病_2基因;天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶_3【作者】朱雪梅【作者单位】100029 北京市中西医结合医院【正文语种】中文【中图分类】R542.2+2心肌缺血再灌注损伤的发生机制比较复杂，已有的研究认为与自由基损伤、钙离子超载、心肌纤维代谢障碍、血管内皮细胞损伤、中性粒细胞和细胞凋亡等诸多因素有关[1]。
丙泊酚预处理减轻大鼠心肌缺血／再灌注损伤与其抑制线粒体通透性转换的关系
Ｌ Ｄ Ａ前 ２ ｎ经股静脉分别注射注射 ２ ｍ ｌ Ｌ 二甲基亚砜和丙泊酚 １ｍ ｋ ～ ・ ｎ Ａ Ｃ ０ｍｉ ０Ｉ ｏ ・ ｘ ｇ・ ｇ ｍｉ 共 ２ ｎ ０ｍｉ。结果
再灌注 １０ ２
ｍｉ ，Ｐ组凋亡指数 （４ ３ ２ ３ ） 明显低 于 Ｉ （３ ３ ３ ４ ） （ ｎ后 Ｐ ２ ．５± ．５ ％ Ｒ组 ３ ．８± ．７ ％ Ｐ＜０ ０ ） Ｄ Ｏ组心肌 细胞凋亡 指数与 Ｉ ．５ ； ＭＳ Ｒ组无 明 显差异 （ Ｐ＞００ ） ．５ 。电镜下 Ｉ Ｒ组线粒体微观结构损伤严重 ， 膜电位较 Ｓａ ｈｍ组显著降低 （ ．５±０ ０ ． １ ．４ Ｐ＜ ． ５ 。 ０２ ．６ｕ ０ ９ ±０２ ， ０ ０ ） ｓ Ｐ Ｐ组线粒体形态学改变 明显减轻 ， 电位（ ．７± ．３ 显著高于 Ｉ 膜 ０６ ０ １） Ｒ组 （ ０ ０ ） ＭＳ Ｐ＜ ．５ 。Ｄ Ｏ组则 没有线粒体保护作用 。结论 丙泊酚预处理可减轻大 鼠心肌缺血／ 再灌注损伤 ， 其机 制与抑制线粒体通透性转换有关 。
ｏ ａ ｓ ｉ ｅ ａ ｅ ｏ ｉ ｈ ｂ ｔｏ ｆｍ ｉｏ ｈ ｎ ｒ ａ ｐ ｒ ｅ ｂ ｌ ｙ ｔ ａ ｓｔ ｎ ｎ ｒ ｔ ｓ ｒ ｌ ｔ ｄ ｔ ｎ ｉ ｉｉ ｎ ｏ ｔ ｃ ｏ ｄ ｉ ｅ ｍ ａ ｉ ｔ ｒ ｎ ｉ ｏ ｉ ｉ
Ｓ ＨＡＮＧ Ｘｉｎ —ｕ Ｌ ｉｇ ｙ ａ Ｚ ｏ ｇ ｙ ｅ ． ＩＪｎ ．ｕ ｎ ． ＥＮＧ Ｙｉ— ｉｇ ｎｒ ｎ ｕ （ ． ｅａｔｅｔｆＡ ａｓ ｅｉ ｌ ｙ Ｐ ｋｕＤｓ ｉ ｅ ｒ ｌ ｏ ｉｌＮ ｎ ｎ ２ １０ ， ｈｎ ； １Ｄ ｐ ｒ ｎ ｏ ｎ ｅ ｈｓ ｏ ｇ ， ｕｏ ｉｒ ｔ ｆ ｒ ｓ ｔ ， ａｆ ｇ １ ８０ Ｃ ｉａ ｍ ｔ ａｏ ｔｃ Ｒ ｅ ａ Ｈ ｐ ａ ｉ ２ Ｘ ｚｏ ｄｃｌ ｏｅｅＪ ｎｓ ｓｔｔ ｏ Ａ ｅ ｈｓ ｌ ｙＸ ｚｏ ２ １０ ，ｈｎ ） ． ｕｈｕＭｅｉ ｌｇ ，ｉ ｇｕＩ ｔｕ ｎｓ ｅｉ ｏ ，ｕｈ ｕ ２０ ２ Ｃ ｉａ ａＣｌ ａ ｎ ｉ ｅｆ ｔ ｏｇ