高效液相方法验证

Method Development 方法开发 – Useful Informatቤተ መጻሕፍቲ ባይዱon 有用的信息
Chemical structure and MW 化学结构和分子量 Solvent solubility 溶剂中的溶解度 pKa and pH solubility 酸性解离常数和PH溶解度 UV spectrum 紫外光谱 Process impurities 工艺杂质 Possible degradation impurities 可能的降解杂质 Literature References 参考文献 MSDS – Material safety data sheets 安全数据表
Method Development – HPLC Mobile Phase: Buffer 流动相：缓冲液
封尾
Method Development 方法开发
– HPLC Mobile Phase 流动相
Strong solvent component: 强溶剂组份 Methanol 甲醇 Acetonitrile 乙腈 Tetrahydrofuran 四氢呋喃 Weak solvent component: 弱溶剂组份 Water 水 Buffer 缓冲液 Diluted acid (0.1% H3PO4)
Method Development – Method Classification 方法开发－分析方法分类 Assay Method 含量方法 Impurity Profile 杂质情况 - Related Substances 有关物质 Chiral Purity 手性纯度 Content Uniformity 含量均一性 Dissolution Cleaning Validation 清洁验证 Identity – Fingerprint 鉴别－指纹 法
Method Development 方法开发 – HPLC Column色谱柱：考考你 ???
Particle Size 粒径Length长度 Expected N 要求 3.5 µm 5 cm 4200 3.5 µm 10 cm ??? 5 µm 25 cm 12000 10 µm 25 cm ??? Particle Size粒径 Length长度 Resolution分离度 3.5 µm 5 cm 1.5 3.5 µm 10 cm ???
Method Development 方法开发 – HPLC Column 色谱柱
Reversed phase: C18(USP L1), C8(L7) 反相：C18(USP L1), C8(L7) Normal phase: Silica, CN, and NH2 Silica, CN, and NH2 Ion-Exchange: Dionex column 离子交换： Dionex column Ion pair Chromatography: C18/C8/CN 离子对色谱法： C18/C8/CN Size Exclusion Chromatography 排阻色谱法 Chiral separation 手性分离
Method Development 方法开发
– HPLC Column (cont.)色谱柱
Guard Column 预柱 Column Wash 柱子冲洗 Column Temperature (35 ˚C - 60 ˚C) 柱温 （ 35 ˚C - 60 ˚C ） Column Storage 柱子的储存
Analytical Method Development and Validation
分析方法的建立和验证 28 March 2008
Outline总纲
HPLC Method Development
高效液相方法建立 HPLC Trouble-shooting Guide HPLC问题解答 Method Optimization 方法优化 Method Validation 方法验证 System Suitability Requirements 系统适应性要求 GMP “Mind-set” GMP理念
Method Development – HPLC Column (cont.) 色谱柱
Column Dimension: 柱子的尺寸 4.6 mm x 25 cm 4.6 mm x 15 cm 4.6 mm x 10 cm
Particle Diameter: 粒径 10 µm, 5 µm, 3.5 µm, 1.8 µm Pore size, Surface area, End capping 孔径，表面积，封尾
Method Development 方法开发 – HPLC column selection summary 色谱柱选择：总结
C18 Column: first choice C18柱：首选 Short length: 10 cm or 15 cm 短柱： 10 cm or 15 cm Small diameter: 3.5 µ m or 5 µ m 小的粒径： 3.5 µ m or 5 µ m End-capped
Method Development 方法开发 – Resource Planning & Gathering 资源计划收集
Solvents and reagents 溶剂和试剂 Placebo materials 安慰剂 Individual formulation components 各个处方成分 Related substance standards 有关物质标准品 API Reference Standards 活性成分标准品 Accelerated stress sample 强降解样品