人体寄生虫学部分解析

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人体寄生虫学部分

第1部分医学蠕虫

(Medical helminthes)

第1单元线虫

(nematode)

实验一、似蚓蛔线虫(Ascaris lumbricoides)

(蛔虫roundworm)

一、目的要求

1.掌握蛔虫卵(受精卵、未受精卵及感染期蛔虫卵)的形态特征。

2.掌握常用的虫卵检查方法――粪便生理盐水直接涂片法。

3.熟悉蛔虫成虫的形态特点,并能区分雌虫和雄虫。

4.观察病理标本,以深入了解蛔虫对人体的致病作用。

二、实验内容

(一)标本观察(自学)

1.受精蛔虫卵(玻片标本)

从大小、形态、颜色、卵壳结构和内含物等五个方面仔细观察。虫卵呈宽椭圆形,大小为45~75μm×35~50μm,卵壳厚,表面有一层凸凹不平的蛋白质膜,新鲜粪便排出的虫卵常被宿主胆汁染成棕黄色,内含有一个大而圆、未分裂的受精卵细胞,与卵壳之间形成半月形间隙,如粪便放置过久或者患者便秘,那么虫卵内的半月形间隙可消失。图1-1。

2.未受精蛔虫卵(玻片标本)

虫卵呈长椭圆形或不规则形,大小为88~94μm×39~44μm,卵壳和蛋白质膜均较受精蛔虫卵薄,呈淡黄色,内含有许多大小不等的屈光颗粒。图1-1。

3.感染期虫卵(玻片标本)

受精蛔虫卵在外界适宜条件下,经过一段时间卵壳内的卵细胞可发育成一条卷曲的幼虫。

4.脱蛋白膜受精卵(玻片标本)

蛔虫卵排出体外后,由于摩擦等外力等因素作用,有时蛋白质膜会完全或部分脱落,此时虫卵颜色变浅或无色透明,可见清晰的卵壳,仍较厚,常易与无色透明的钩虫卵相混淆,观察时应注意显微镜光线不要太强。

5. 蛔虫头端结构标本(玻片标本)

将蛔虫成虫切片后,卡红染色后呈粉红色。低倍镜下观察,在虫体顶端口孔周围可见有3个“品”字形排列的唇瓣,背侧的一个较大,唇瓣的内缘有细齿。

图1-2 成虫

图1-1 蛔虫卵

(二)示教

1.雌雄成虫(大体标本)

肉眼观察,新鲜虫体呈淡红色,死后或经福尔马林固定保存后呈灰白色。

成虫为线状、长圆柱状,中间稍膨大,两端逐渐变细,体表有横纹和两条侧线,形似蚯蚓,雌虫大小为20~35um,尾部尖直,雄虫大小为15~31cm,后端向腹部卷曲,有时可见2根交合刺。图1-2。

2.雌雄成虫内部结构解剖标本(大体标本)

观察体内生殖与消化器官。肉眼观察可见,虫体体腔内除一条直的消化管外,其余均为生殖器官,细长如线,迂回盘曲,并且雌性生殖系统为双管型,由卵巢、输卵管、子宫、阴道和阴门等组成。近端为子宫,两侧子宫会合为阴道,远端为卵巢游离在原体腔内。因此,蛔虫的产卵量非常大,繁殖能力相当强。雄性生殖器官为单管型:由睾丸、储精囊、输精管、射精管和交合刺等组成,游离端为睾丸。3.蛔虫横切面染色标本(玻片标本)

观察下列结构:体壁:表皮为角皮层,其下为皮下层和纵肌层,皮下层伸入原体腔内并增厚,背腹及两侧分别形成四条纵索。肠管:肠壁由单层柱状上皮细胞组成。原体腔:即体壁和消化道之间的腔隙,腔内充满液体,内部器官,如生殖、消化器官浸浴其中。

4.蛔虫性机械性肠梗阻(病理标本)

可见较多蛔虫扭结成团,完全或部分阻塞肠道。

5. 胆道蛔虫症(病理标本)

肝门胆管内嵌塞有1条蛔虫。

6. 蛔虫性肠穿孔(病理标本)

可见蛔虫穿透患者肠壁。

7. 蛔虫钻入阑尾(病理标本)

可见蛔虫钻入阑尾。

(三)操作

1.粪便直接涂片法查虫卵(操作)

1)材料:生理盐水,载玻片,盖玻片,棉签棍或牙签,

2)方法:滴一滴生理盐水于洁净的载玻片,用棉签棍或牙签挑取绿豆大小的

粪便块,在生理盐水中涂抹均匀;涂片的厚度以透过涂片约可辨认书上的字迹为宜,加盖玻片。一般在低倍镜下查到蛔虫卵,换用高倍镜观察。应注意虫卵与粪便中异物的鉴别。虫卵都具有一定形状和大小;卵壳表面光滑整齐,具固有色泽;卵内含卵细胞。

3)注意:

①粪便量要适中。粪便过多,则涂片太厚不利于观察;粪便太少,则涂片薄影

响检出率。制好的涂片以透过水膜能隐约看到课本的字体为适宜。

②粪便中含有各种植物细胞,酵母菌、花粉、植物纤维和未完全消化的食物残

渣等,容易与虫卵混淆,必须注意鉴别。

③制好的涂片不能干燥,否则不易辨认虫卵。

2. 浓聚法

A 清水沉淀法(示教)

1)原理:原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集于水底,有助于提高检出率。

2)材料:小烧杯,铜筛(或塑料纱网),大试管

3)方法:取粪便约5~10克置小烧杯内,加水少许,用玻璃棒搅成糊状,并加水稀释。倒入铜筛(或塑料纱网)内过滤,滤去粪渣,并把滤液倾入大试管内,加水至将满。静置10~15分钟。倾去上层液4/5,留粪渣,加水,静置5~10分钟,如此换水数次,直到上清液澄清为止,最后倾去上层液体,吸取沉渣镜下检查。

B离心沉淀法:(示教)

将上述滤去粗渣的粪液离心(1500~2000rpm/min)1~2分钟,倒去上液,注入清水,再离心沉淀,如此反复沉淀3~4次,直至上液澄清为止,最后倒去上液,取沉渣镜检。

3. 厚涂片透明法(改良加藤法)(示教):

1)材料:定量板及刮棒;100目尼龙或金属筛网片(大小约4×4cm);亲水玻璃纸条(约5.2×2.6cm),浸泡于甘油孔雀绿液(3%孔雀绿1ml,甘油 50m1,水49ml)

中过夜后用;压板(厚玻璃或有机玻璃制品,大小为5×3cm,可连续使用);载玻片及显微镜。

2)操作步骤

①滤取粪便:将筛网覆盖在送检标本上,自筛网上用刮棒刮取挤溢到网面上的粪

便。

②模板取样:将定量板放在载玻片上,使小边突紧贴玻片的一边,用一手的两指

压住定量板的一端,将刮棒上取得的粪便填满模孔,刮去多余部分,

然后自一端掀起定量板,再松开压住的两指把板取去,玻片上即留

下二个长条形粪样。

③盖纸压片:在粪条上覆盖含孔雀绿甘油液的玻璃纸条,展平后用压板加压,粪

样即在玻璃纸与载玻片间铺开成长椭圆形,小心取下压板(一指固定

压板外的玻璃纸的一端,另一手平拖移去压板,以免玻璃纸与压板同

时揭起)。

④透明读片:约1~2小时粪膜透明后即可读片。钩虫卵不宜透明过久。

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