甘薯的脱毒培养与快繁
脱毒甘薯种薯及种苗病毒检测与繁育规1
种薯药剂处理50%甲基托布津或50%多菌灵500倍或90%甲基托布津800倍浸种10分钟50%甲基托布津或50%多菌灵500倍或90%甲基托布津800倍浸种10分钟50%甲基托布津或50%多菌灵500倍或90%甲基托布津800倍浸种10分钟4脱毒苗的病毒检测方法与标准4.1脱毒苗的病毒检测方法4.1.1目测法目测法是根据甘薯叶片和薯块上出现的典型症状判断甘薯是否感染病毒。
甘薯病毒病的症状主要包括：（1）叶斑型。
主要有紫色羽状斑、紫斑、紫环斑、黄色斑或者枯斑（2）花叶型。
苗期感病后，初期叶脉呈网状透明，后沿叶脉出现不规则黄绿相间的花叶斑纹（3）卷叶型。
叶片边缘上卷，严重者可形成杯状（4）叶片皱缩型。
病苗叶片较小，皱缩，叶缘不整齐，甚至扭曲畸形（5）叶片黄化型。
包括叶片黄化及网状黄脉。
薯块上的症状主要是产生黑褐色或黄褐色龟裂纹。
病毒病的症状可因病毒种类、甘薯品种以及环境条件等因素的影响而改变，因此根据症状只能作初步判断。
另外，目测法还应注意区分甘薯品种特性以及由于土壤水份对大、营养失调等原因造成的生理病害与病毒病症状的差异。
4.1.2指示植物法常用巴西牵牛(Ipomoea setosa)作指示植物，几乎所有侵染甘薯的病毒都能感染巴西牵牛，因此，将薯苗嫁接在巴西牵牛上，从巴西牵牛的显症情况可判断薯苗是否带毒。
具体嫁接方法如下：以薯苗芽尖作接穗，将芽尖削成楔形，另将具3-4片真叶的巴西牵牛作砧木，在其茎中部切一斜口把楔形接穗插入，用封口膜扎住，置防虫网室内遮阴保湿3-4天，然后在自然光照下观察记载牵牛的显症情况，一般嫁接后25～30天左右开始出现症状,显症初期新生叶出现系统性明脉，以后发展为花叶或皱缩等症状。
4.1.3甘薯病毒的血清学检测常用的血清学检测方法为酶联免疫吸附法（ELISA）或在此基础上改进的斑点酶联免疫吸附法（Dot-Blot ELISA）等。
Dot-Blot ELISA具有快速和能检测大量样品的特点，在大量检测样品时较常应用。
甘薯脱毒快繁及微型薯生产技术研究
的检测一般先采取 目测 法淘汰弱苗 和显症苗 ， 然后
再用血清学方 法或 分子 生物 学方 法 进行 筛选 。经 血清学或分子 生物 学方 法检 测呈 阴性 的样 品再 进
去多余 的水 分 ， 手和接 种工 具严 格消毒 后 ， ４ Ｘ 在 ０ 解剖 镜 下 ， 无 菌 刀 片或 解 剖针 挑 下 ０ １ ０ ２ 用 ． — ．
从 另一侧 轻轻一 挑 将 茎尖 粘 于 刀 片 上 ， 速接 种 迅 于培养基 。为 防污染 ， 每个 培养皿 接种 １ —２个微 茎尖 ， 人培养 室 内进 行培 养 。环 境条 件为 ： 放 温度 ２ ± １ 湿 度 ７ 一 ８ 、 照 强 度 ３ ５ ℃、 Ｏ ０， 光 ９ ６ ０ ｄ前
灯火 焰等原 因易使 茎尖 变干 ， 丧失 活力 。解 剖刀 、
解 剖针 、 子等要 浸于 ７ 的消 毒酒 精 中并用 火 镊 ０
焰 灼烧消 毒 ， 最好 准备 两套 刀片与 解剖 针 ， 替使 交 用， 以防灼烧 过热 伤 及 茎尖 。在切 取 茎 尖 时 可 以
从 一 侧 切 至 仅 与 另 一 侧 有 少 许 连 接 ， 后 用 刀 片 然
・
１ ・ ８
陕
西
农
业
科
学
２ｌ（） Ｏ Ｏ ４
甘 薯脱 毒 快 繁 及微 型薯 生 产 技 术研 究
曹秀敏 ，张 明 。 李延 龙 ，王利亚 ，乔保建 （ 平顶 山 市农 业科 学院 农业 生物技 术 实验 室 ， 河南 平顶 山
摘
４７ ０） ６ ０ １
要 ： 对甘 薯 长期 大 田种 植 ， 毒 侵 染 ， 性 退 化 ， 性 降 低 ， 针 病 种 抗 产量 和 品 质 下 降 的 特 点 ． 出 对甘 薯 进 行 脱 提
甘薯脱毒和组培快繁技术研究初探
甘薯(Ipomoea batatas Lam.)又称山芋、番薯、红薯、地瓜,为旋花科甘薯属一年生或多年生蔓性草本植物,耐旱,耐贫瘠,产量高,富含多种营养物质,具有良好的保健功能。
我国的甘薯种植面积及产量均居世界首位,主要用作粮食、饲料及工业原料,在国家粮食安全与能源安全方面占有重要地位。
病毒病是甘薯的主要病害之一[1-2],一旦感染病毒,会导致产量品质降低,种性退化,严重者可导致减产[3]。
为提高甘薯脱毒率,满足脱毒苗产业化生产的需求,笔者对甘薯茎尖培养、高温和药剂3种脱毒方法进行了研究;对繁殖速度慢的甘薯品种进行了增殖培养基的筛选试验,以提高繁殖速率,短期内获得大量的脱毒组培苗。
1材料与方法1.1试验材料试验甘薯品种为烟薯25、京6、济薯26、普薯32,由北京市农业技术推广站及北京市密云区和合元种植专业合作社提供。
本试验于2018-2020年进行。
1.2试验材料准备准备大号塑料钵,底部铺设报纸,以防浇水时基质随水从排水孔中流出;栽培基质选用蛭石和草炭,比例2∶1;基质提前用500倍百菌清溶液喷湿,将薯块平铺或直插入基质中,注意直插时分清上下部,浇水后放于适宜温度下催芽。
催芽温度条件29~32℃。
待苗出芽后降低温度,控制在25~28℃。
从携带有SPLCV病毒的烟薯25盆栽苗上剪插条,插条长约10cm,去除叶片,插条上部平切,下部斜切;将插条放于500倍百菌清溶液中浸泡10s,再用浓度为100~500mg/kg萘乙酸溶液处理,以利快速生根;扦插基质为蛭石和草炭,扦插容器选用塑料钵,从底部到上部依次为报纸、草炭、蛭石,同样用500倍百菌清溶液处理;将处理好的插条扦插于基质中,喷水后放置于25~28℃的环境条件下培养。
待生根并长出新芽后即可进行药剂脱毒试验。
1.3茎尖剥离技术1.3.1材料准备当甘薯块茎长出新芽后,切下顶部约2cm的芽段,剪去已展开的叶片放入烧杯中,倒入洗涤灵进行洗涤,用流水冲洗30min左右,置于超净工作台上。
彩紫1号甘薯茎尖脱毒与组培快繁技术研究
种植 试 验还 显示 ．彩 紫 １ 号甘 薯 的脱毒 苗能 明显 提 高 甘薯 的产 量 。脱毒 试管 苗 比正常 薯块 未脱 毒苗 增 产 ２ ％，比带毒 苗增 产 ６ ． ，充分 表 明 了脱毒 苗 ５ ２２ ％
的复壮 与增 产作 用 。
参 考 文 献
６ Ｂ 是影 响 甘薯 茎 尖 成 苗 的重 要 因 子 。 出苗 率 随 一Ａ
纬鼓
２１ 不 同培 养基 对 茎尖成 苗 率的 影响 ．
２１第 期 ０年 ３ １
肥 ２ ０ ｇ 过 磷 酸 钙 ６ ０ ｇ 四 周 留保 护 行 。 脱 ０ｋ、 ０ｋ ，
试 验结 果 表 明 （ １ ：ＭＳ培 养基 中添 加不 同 表 ）
毒 苗 种 植 行 株 距 为 ３ｃ ２ ｃ ０ｍ￣ ０ｍ，每 小 区 ２ Ｏ株 苗 ，
目前 全 国年 种植 面积 为 ６ ０多 万 ｈ ２ ０ ｍ ．年 产鲜 薯 １
选 取健 康 无病 斑 的薯 块 ．洗净 后 用 ３ ｍｇ ｇ赤 ０ ／ ｋ
霉 素 （ Ａ ）浸 种 ３ ｒ ｎ Ｇ ０ ｉ ，埋 于 消 毒 过 的 泥 炭 中 ， ａ 放 人 ２ ｃ 培 养 箱 黑 暗 培 养 催 芽 ： 露 芽 后 升 温 至 ５Ｉ ＝ ３ ｃ 培 养 ７ ：剪 取 生 长 旺 盛 的茎 尖 ５ ｍ。切 去 叶 ０Ｉ ＝ ｄ ｅ
．
品种 及其 特性 演 变 ．以求 总结 出主 栽 品种特 性演 变
年 ）和 宁 ８ （ ０ ０年 ） １ ２１ 。其 中 ２ ０ ０ ０年 以前 推 广 的
２４ 脱毒 苗 的大 田种 植效 果 ．
试 管 苗 可 比正 常薯 块 未 脱 毒 苗 增 产 ２ ％ ． 比带 毒 ５ 苗 增产 ６ ．％，增 产效 果 十分显 著 。 ２２
甘薯茎尖脱毒和试管快繁研究
温光条 件培养 ， 般 均借 助 空调 和 日光 灯 等进 行 一 温 光调控， 殖 成本较 高。 繁
本研究探讨 了采 用高 温 预 处 理 植 株 的 ２ ５ ～
１ ２ １ 培 养 基 处 理 ．． 设 ７个 处 理 固 体 培 养 基 ： ＭＳ不 加 激 素 ； ① ② １２ Ｓ 加 激 素 ； １ ２ Ｓ＋ ＩＡ０ ０ ｇ Ｌ； ／Ｍ 不 ◎ ／Ｍ Ａ ２ｒ ／ ④ ａ Ｉ２ ／ ＭＳ＋ Ｉ Ａ０ ０ ／ ； ｌ ２ Ｓ＋ Ｉ ０ ０ Ａ ． ５ ｍｇ Ｌ ⑤ ／ Ｍ ＡＡ １ ｍ ／ ⑥ １２ Ｓ＋ Ｉ ０ １ ／ ⑦ １ ２ Ｓ＋ ｇ Ｌ； ／ Ｍ ＡＡ ． ５ ｍｇ Ｌ； ／Ｍ Ｉ ０２ ＡＡ ．０ｍｇ Ｌ 每 处 理 接 种 ９瓶 ， ２ ～２ ／。 在 ５ ８℃ ．
２ 结 果 与 分 析
２ １ 茎 尖 预 处 理 脱 毒 效 果 ，
温 （ ４ ）２ ３ ±１ Ｉ 预处 理 的生 长势 强 的试 管 植株 ２ ～５ ｍｍ茎 尖 。两处理 各 培养 ３ ０瓶 ， 瓶 接 种 １个 茎 每
尖。
实验 结果表 明， Ｂ处 理 茎 尖 培 养 污染 率 为 ０ ； 成苗率 为 ８ ． ％， 于 Ａ 处 理 （ １ 。 说 明采用 ６７ 优 表 ） 高温 预培 养植株 ２ ～５ｍｍ 茎尖作 为 外植 体 。 组 其 织培养 成苗率 高 ， 脱毒效 果 良好 。
大量研究 和实 践 表 明 ， 薯脱 毒 后 能显 著 提 甘
高 产 量 。 目前 ， 国 甘 薯 脱 毒 技 术 已 趋 成 熟 ， 本 我 基
建立 相应 的脱 毒 苗生产 、 育体 系， 在部 分省 市 繁 并 大 面积推广 应 用【 ｏ 剥取 ０ ２～０ ５ｍｍ 茎 尖 分 １ ］ ． ．
甘薯的脱毒培养与快繁
➢一般培养10 d茎尖膨大并转绿，培养20 d 左右茎尖形成2-3 mm的小芽点，并在基部 逐渐形成绿色愈伤组织。 ➢愈伤组织形成后，应将培养物转入无植物 生长物质的MS培养基上，以便小芽生长和 生根。
5. 茎尖苗的初级快繁 ➢当薯苗长至3-6 cm时，将小植株切断进行 短枝扦插，除顶芽一般带1-2 片展开叶外， 其余的切段均是带一节一叶的短枝 ➢切段直插于三角瓶内无植物生长物质的 MS培养基中 ➢2-3 d内，切段基部产生不定根，30 d左右 长成具6-8 片展开叶的试管苗
6. 严防病虫害：定期喷洒农药，防治蚜虫 及地下害虫。
思考题：
１、甘薯脱毒的过程？ ２、甘薯脱毒苗如何进行快繁？
（三）脱毒试管苗的大规模移栽技术及管理方法
1. 培育壮苗：降低培养温度、增强光照，株高 3-5 cm为宜。
2. 适当炼苗 ：移苗前，打开瓶塞，在室温和自 然光照下锻炼2-3 d。
3. 精心移栽 ：倒入清水，振摇松动培养 基，洗去根部培养基，移至灭菌的蛭石或 沙土中。苗生根、长出新叶后再移植于土 壤中。
途的生长健壮的甘薯品种植株作为母株； 取枝条，剪去叶片后切成数段，每段
带1腋芽，含顶芽的2-3 节。
脱毒的甘薯种苗
2. 材料消毒： ➢流水冲洗数分钟，用滤纸吸干表面水分后 于70%的酒精浸泡10 s，再用0.1%多菌灵 浸泡8 min，再用0.1%升汞消毒10 min，无 菌水冲洗5 次。 ➢或用10%次氯酸钠溶液消毒15 min，无菌 水冲洗3 次。
3. 茎尖剥离 ➢把消毒好的芽放在解剖镜下，无菌剥去 顶 芽 和 腋 芽 上 较 大 的 幼 叶 ， 切 取 0.3-0.5 mm含1-2 源自叶原基的茎尖组织，接种在培 养基上。
4. 茎尖培养：
我国甘薯脱毒种薯种苗繁育存在的问题及建议
我国甘薯脱毒种薯种苗繁育存在的问题及建议作者：张振臣来源：《植物保护》2020年第06期摘要病毒病是甘薯的重要病害，种植脱毒健康种苗是防治病毒病、提高甘薯产量最有效的方法。
近年来，我国甘薯病毒及其传播介体的发生呈现出新的特点，传统的脱毒种薯种苗繁育体系不能满足当前甘薯生产的需要。
本文综述了当前我国甘薯病毒的种类及危害现状，分析了我国甘薯脱毒种薯种苗繁育中存在的问题，对规范和完善我国甘薯脱毒种薯种苗繁育体系提出了建议。
关键词甘薯病毒病; 脱毒种苗; 繁育体系; 问题和建议中图分类号： S 435.311文献标识码： ADOI： 10.16688/j.zwbh.2019397Abstract Viral diseases are important diseases threatening sweet potato production in China. The most effective measure for controlling viral diseases and improving the yield of sweet potato is planting virus-free sweet potato seeds （cuttings or storage roots）. In recent years， the occurrence of sweet potato viruses and their transmission vectors has exhibited new features in China. Traditional virus-free seed breeding system cannot meet the needs of the current sweet potato production. The species and harm status of sweet potato viruses in China were reviewed， and the problems in the breeding of virus-free sweet potato seeds in China were analyzed. The suggestions for standardizing and improving the breeding system of virus-free sweet potato seeds in China were offered.Key words sweet potato viral disease; virus-free sweet potato seed; breeding system; problem and suggestion甘薯是我国重要的粮食作物，其独特的高产性和广适性曾为解决我国城乡居民的温饱问题作出了重要贡献。
红薯脱毒育苗技术步骤
红薯脱毒育苗技术步骤红薯脱毒育苗是红薯种植的重要环节，通过脱毒育苗可以有效提高红薯的品质和产量。
下面将详细介绍红薯脱毒育苗的技术步骤，供您参考。
一、选材选择良种红薯作为育苗的基础材料，要选择无病无虫的健康红薯块作为种薯，保证材料的品质。
二、消毒1.将红薯块清洗干净，并用清水浸泡3-4小时，然后捞出沥干备用。
2.使用稀释的50%过氧化氢或者0.3%的次氯酸钠水溶液对红薯块进行消毒处理，消毒时间约为20-30分钟。
3.将消毒后的红薯块取出，清水冲洗干净，晾干备用。
三、萌发1.将消毒后的红薯块摆放在通风良好的阴凉处，等待红薯块萌发，一般为3-5天。
2.注意控制湿度和温度，避免过高或太低的温度对红薯萌发产生不良影响。
四、育苗基质准备1.选用适宜的培育基质，一般以腐熟的泥炭、河沙、腐殖土和蛭石粉混合而成，比例为3:3:3:1。
2.将育苗基质装入育苗盘或育苗盆中，压实并进行灭菌处理，保证基质的卫生。
五、播种1.将红薯块切成适当大小的块茎，每块茎留有1-2个芽，然后把块茎均匀地摆放在育苗盘或育苗盆中。
2.盖上适量的育苗基质，保持适当的湿润度，利于红薯的发芽和生长。
六、管理1.控制湿度：保持育苗基质的适当湿度，避免过干或过湿的情况发生。
2.温度管理：控制适宜的温度，保持在20-25摄氏度，有利于红薯幼苗的健康生长。
3.光照管理：提供充足的光照，对幼苗进行适当的日照，促进幼苗的正常生长。
七、病虫害防治1.定期巡查：定期检查育苗情况，及时发现病害虫害情况，采取相应的措施进行防治。
2.病虫害防治：采用生物防治或者低毒性农药喷雾进行防治，保证幼苗的健康生长。
八、移栽当红薯幼苗长到一定高度时，可以进行移栽，将红薯幼苗移植到田间地块中进行生长。
红薯脱毒育苗技术步骤，需要严格控制每个环节的质量，确保红薯幼苗的健康生长。
同时在育苗的过程中，要注重科学管理，合理施肥，及时防治病虫害，以保证红薯的良好生长和高产。
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➢甘薯又叫红薯、地瓜等，为旋花科一年 生植物。我国近年来甘薯种植面积达到 666.7万公顷，占世界的80%以上。但采 用营养繁殖导致甘薯病毒蔓延，致使产 量、质量降低。病毒病成为我国甘薯生 产的最大障碍之一。
➢如：甘薯花椰菜花叶病毒（SPCLV），甘薯羽 状 斑 驳 病 毒 （ SPFMV ） ， 甘 薯 潜 隐 病 毒 （SPLV），甘薯脉花叶病毒（SPVMV），甘薯 轻 斑 驳 病 毒 （ SPMMV ） ， 甘 薯 黄 矮 病 毒 （SPYDV），烟草花叶病毒（TMV），烟草条 纹病毒（TSV），黄瓜花叶病毒（CMV）等。
一个繁殖周期，可使用1/2或1/4MS（大量元 素）培养基进行增殖，尽可能用自然光照， 可用食用白糖代替蔗糖，可用经检验合格 的自来水代替蒸馏水或无离子水。
➢防虫（35-45 目）条件下于无菌基质中栽培、 繁殖：将经炼苗后的脱毒试管苗移至蛭石、 河沙等基质中，待成活后，连根拔出栽入已 消毒的土壤中。缓苗后薯苗迅速生长，之后 约10 d左右剪秧扦插，以苗繁苗。
4. 控制湿、温、光等条件：基质维持良好 通气条件，空气应保持湿润，移栽初期用 塑料膜覆盖，温度控制在25-30 ℃为宜， 并注意遮荫。
5. 适时定植：及时移植于防虫网内已消 毒的土壤中，适当密植，剪秧扦插，以苗繁 苗；北方，冬、春可建立防虫温室，并辅以 取暖升温措施，保证全年育苗（原原种薯 苗）。
（三）脱毒试管苗的大规模移栽技术及管理方法
1. 培育壮苗：降低培养温度、增强光照，株高 3-5 cm为宜。
2. 适当炼苗 ：移苗前，打开瓶塞，在室温和自 然光照下锻炼2-3 d。
3. 精心移栽 ：倒入清水，振摇松动培养 基，洗去根部培养基，移至灭菌的蛭石或 沙土中。苗生根、长出新叶后再移植于土 壤中。
➢一般培养10 d茎尖膨大并转绿，培养20 d 左右茎尖形成2-3 mm的小芽点，并在基部 逐渐形成绿色愈伤组织。 ➢愈伤组织形成后，应将培养物转入无植物 生长物质的MS培养基上，以便小芽生长和 生根。
5. 茎尖苗的初级快繁 ➢当薯苗长至3-6 cm时，将小植株切断进行 短枝扦插，除顶芽一般带1-2 片展开叶外， 其余的切段均是带一节一叶的短枝 ➢切段直插于三角瓶内无植物生长物质的 MS培养基中 ➢2-3 d内，切段基部产生不定根，30 d左右 长成具6-8 片展开叶的试管苗
脱毒的甘薯种苗
2. 材料消毒： ➢流水冲洗数分钟，用滤纸吸干表面水分后 于70%的酒精浸泡10 s，再用0.1%多菌灵 浸泡8 min，再用0.1%升汞消毒10 min，无 菌水冲洗5 次。 ➢或用10%次氯酸钠溶液消毒15 min，无菌 水冲洗3 次。
3. 茎尖剥离 ➢把消毒好的芽放在解剖镜下，无菌剥去 顶 芽 和 腋 芽 上 较 大 的 幼 叶 ， 切 取 0.3-0.5 mm含1-2 个叶原基的茎尖组织，接种在培 养基上。
6. 脱毒鉴定：
➢将同一株号的试管苗分成3部分，一部分 保存、一部分用于病毒鉴定、一部分移入 防虫网室内的无菌基质中培养。
➢病毒病症状学诊断法、指示植物检定法、 电子显微镜检定法、血清学检测法等。
脱毒的甘薯试管苗
（二）甘薯的快繁
1、脱毒苗的快繁： ➢试管切段快繁：试管繁殖脱毒苗一般30-40 d为
2、原原种的繁育 ：在防虫温室或网室得无病毒 土壤上种脱毒苗，让其结薯，即为原原种薯 。 3、原种的繁育 ：以原原种为种植材料在防虫网 室的无病毒土壤中栽种，结薯即为原种。 4、种薯的繁育 ：种薯可分为不同的等级，一级 种薯的生产要求：在隔离地块上栽培原种，地 块四周500 m以内的范围内不栽甘薯，种薯每种 一年降一级。 一般2-3年就应更换新的脱毒种苗、 种薯。
6. 严防病虫害：定期喷洒农药，防治蚜虫 及地下害虫。
思考题：
１、甘薯脱毒的过程？ ２、甘MS+0.1-0.2 mg/L IAA+0.1-0.2 mg/L 6-BA+3% 蔗糖，补加0.05 mg/L GA3 （促茎尖生长和成 苗），pH5.8-6.0，每支试管1/3的培养基，接种1 个茎尖。 ➢培养条件：温度25-28 ℃，光照14 h/d ，15002000 lx。