猫瘟热病毒抗原cdv-agelisa试剂盒使用说明书.doc
抗原检测试剂盒使用说明
抗原检测试剂盒使用说明
抗原检测试剂盒使用说明
一、适用范围：
本试剂盒专为检测抗原提供的试剂，用于实验室研究、样本检测和抗原检测项目的结构及性能分析。
二、原理：
本试剂盒采用免疫双抗血清方法，即采用抗原抗体免疫反应的原理，检测抗原的浓度，以间接检测抗原浓度的方法分辨抗原的存在与否。
三、主要材料及试剂：
1、主要试剂：免疫双抗血清
2、其他试剂：抗原检测试剂盒，包括抗原抗体、标准抗原、测定液、冰冻试剂和培养基等；
3、试剂设备：试管、温度计、pH计、洗涤器、滴定管、冰箱、凝固仪等。
四、使用方法：
1、抗原检测试剂盒使用前，请先清洗所有试剂设备，然后再按说明书上所示，将各试剂稀释或配制至实验室评定值；
2、抗原检测试剂中的抗原抗体（ antibody ）和抗原将按照相应的比例混合，充分混合后，转移至试管内；
3、在室温下反应30分钟，并将反应液放入凝固仪中冷凝20分钟，以便开始检测；
4、按说明书上所述，根据检测到的抗原的数量，进行抗原检测。
五、注意事项：
1、请勿将未使用的试剂放入试剂室；
2、每次实验完毕，务必及时清洗所有试剂设备；
3、使用时请穿实验衣和手套，并注意避免接触皮肤；
4、试剂使用完毕，请及时将其妥善存放；
5、请勿将废弃物倒入下水口，应妥善处理；
6、请勿将试剂盒接触酸性物质或温度过高的物质；
7、请勿将检测液接触空气，实验过程中应加以封闭。
犬瘟热金标快速检测试纸条(CDV-Ag)
犬瘟热金标快速检测试纸条（CDV-Ag）简介犬瘟热，俗称狗瘟，是由犬瘟热病毒引起的一种烈性传染病。
临床特征为双相热型、消化道、呼吸道炎症，眼、鼻流出脓样分泌物，少数病例可发生非化脓性脑炎。
多发生于3-6个月龄幼犬，青年犬也有感染，潜伏期为3-6天。
病毒单独感染症状轻微，若继发细菌感染症状加重，病死率较高。
检测原理本试纸为免疫层析法对病毒进行双抗体夹心检测。
检测样品为眼部及结膜分泌物，鼻液，唾液。
产品组分1．20份CDV Ag 试纸卡2．20份样品稀释液3．20份消毒棉签4．一份产品说明书保存及有效期限室温保存，不可冷冻。
生产日期起18个月有效。
样品收集及准备1、用生理盐水沾湿的棉签收集狗眼部及结膜分泌物，鼻液，唾液；2、采集样品时注意多部位同时收集新鲜及有效样品，充分在试管中搅拌稀释；；3、静置5分钟，用一次性滴管取上清液；4、样品一般须当即进行检测，否则应冷藏保存，超过24小时的，应该冷冻保存。
检测步骤1、试纸条恢复室温；2、取出试纸，开封后平放在桌面，从滴管中缓慢而准确地逐滴加入3-5滴混合液。
3、加样品液后，红色的液体从靠样品孔的观察窗边缘涌出，朝另一方向流动。
4、5-10分钟后判断结果。
结果判定阳性（+）：当位置C显示出红色线条，而位置T同时显示出红色线条时，判为阳性。
阴性（-）：当位置C显示出红色线条，而位置T不显色时，判为阴性。
无效：当位置C不显示出红色线条，则无论位置T显示出红色线条与否，该试剂盒判为无效。
阳性阴性注意事项1．仅用作体外诊断。
2．注意样品具有潜在传染性，注意防止交叉感染。
3．该试纸及配套试管、棉签均为一次性产品，不可交叉及重复使用。
4．包装袋破损或产品过期请勿使用。
Canine Distemper Virus Rapid Test CardIntroduceCanine distemper is caused by the canine distemper virus (CDV).It is a contagious, incurable, often fatal, multisystemic viral disease that affects the respiratory, gastrointestinal, and central nervous systems. Infected dogs shed the virus through bodily secretions and excretions, especially respiratory secretions. Young puppies between 3 and 6 months old are most susceptible to infection and disease and are more likely to die than infected adults. PrincipleThe test card is based on immunochromatography of double-antibody sandwich. Testing sample is the eye and conjunctival secretions,nasal fluid.Content1 CDV diagnostic Card: 20 pcs2 Dilution Buffer: 20 pcs3 Swab: 20 pcs4 Instruction: 1 insertProcedure1. Recover the dipstick to room temperature. remove as many of the test devices from the foil pouches as needed for testing.ing the disposable sample collection swab take a portion of secretion of eye mucus,nasal fluid.insert the collection swab into specimen tube containing the sample diluent.3.Mix the swab until the sample has been dissolved into the sample diluent.Discard the swab and repeat procedure for each sample. Adding 4 drops containing the sample diluent into the sample-well on the card.4. Read results after 10 minutes.ResultsPositive:The test zone and control zone have a pink/purple band visible.This indicates that the presence of canine distemper virus antigens.Negative:Only the control zone has a pink/purple band visible.The sample do not contains canine distemper virus antigens.Void:No color reaction on C line.Positive NegativePrecautions− Handle all biological materials as though capable of transmitting CDV.− Do not eat, drink, smoke or prepare foods, or apply cosmetics within the designated work area.− Do not use components past expiration date.− Optimal results will be obtained by strict adherence to this protocol. Careful washing and pipetting throughout this procedure are necessary to maintain precision and accuracy.− Do not use components past expiration date.− Only for veterinary use.The entire risk as to the performance of these products is assumed by the purchaser. We shall not be liable for indirect,special or consequential damages of any kind resulting from use of the products。
elisa试剂盒实验说明书
PRRSV N蛋白抗体检测间接ELISA方法的建立1 材料：1.1 蛋白、血清、酶标二抗原核表达PRRSV N蛋白；标准阳性血清和阴性血清，待检血清；自制HRP标记兔抗猪IgG；1.2 主要试剂和溶液包被液（50 mmol/L pH9.6的碳酸盐缓冲液）Na2CO3 1.59 gNaHCO3 2.93 g准确称取后，溶于950 mL的蒸馏水中，调pH值为9.6，定容到1 L；PBS-T洗涤液1000 mL 10 mmol/L pH7.4的PBS中加入0.5 mL Tween-20；封闭液和血清稀释液含10%小牛血清的PBS-T缓冲液，10%马血清的PBS-T缓冲液，含5%BSA的PBS-T缓冲液，含10%BSA的PBS-T缓冲液，含5%脱脂奶的PBS-T缓冲液；底物溶液100 mmol/L的柠檬酸溶液（21 g柠檬酸C6H6O7•H2O溶于去离子水，定容至1 L）24.3 mL，200 mmol/L Na2HPO4•12H2O（71.6 g Na2HPO4•12H2O溶于去离子水，定容至1 L）25.7 mL混匀，加入50 mg的四甲基联苯胺（TMB），临用前加入50 μL的30% H2O2；终止液（2 mol/L H2SO4）每200 mL终止液，由蒸馏水177.8 mL和浓硫酸22.2 mL 混和而成。
1.3 主要仪器设备电热恒温培养箱；4℃冰箱；酶标仪。
2 步骤：2.1抗原包被浓度和二抗稀释度的确定将原核表达的N蛋白分别作2.0 μg/mL，1.0 μg/mL，0.5 μg/mL，0.25 μg/mL，0.1μg/mL，0.05 μg/mL连续稀释6个稀释度，每个稀释度重复两孔，100 μL/孔，4℃包被酶标反应板过夜。
将自制HRP标记的兔抗猪二抗分别做1:50、1:100、1:200和1:400一系列倍比稀释，南京金益柏生物技术有限公司Tel:025-********Fax*************每个稀释度重复两孔，100 μL/孔，组成方阵确定重组蛋白的最佳包被浓度和二抗稀释度。
试剂盒使用说明书
大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
1使用目的：本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织（如鸡、牛肉和猪肉），药物、血清和尿样中大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）残留的定量检测。
2实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法，在微孔板包被有大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）偶联抗原，加入大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）标准品或样品，游离大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）与微孔条上预包被的大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）偶联抗原互相竞争抗大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）含量成反比，通过标准曲线计算样品中大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）的含量。
3试剂盒组成3.1预包被的大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。
3.2大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0ug/ml, 0.1ug/ml,0.3ug/ml,0.9ug/ml,2.7ug/ml,8.1ug/ml3.3抗大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）抗体酶结合物：1瓶（6ml）。
3.4显色液A：1瓶（6ml）。
3.5显色液B：1瓶（6ml）。
3.6终止液：1瓶（6ml），2M硫酸。
3.7样本稀释液：1瓶（10×,6ml），用于样品稀释用。
3.8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。
3.9说明书一份。
4需要而未提供的材料4.1设备4.1.1波长450nm酶标仪。
CG,甘胆酸,CG,ELISA试剂盒说明书
CG,甘胆酸,CG,ELISA试剂盒说明书1）用弃的试剂盒及样本都应按污染物妥善处理。
试剂盒内终止液有腐蚀性，须小心使用。
2）孵育时，推荐使用水浴箱。
如无水浴箱，可取密封湿盒放入37℃温箱内使用。
3）瓶盖每次使用后要盖紧，各瓶盖之间不可混用。
不同批号CG,甘胆酸,CG,ELISA试剂盒说明书是以免疫学反应为基础，将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。
由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。
CG,甘胆酸,CG,ELISA试剂盒说明书种属：人、大小鼠、豚鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊；标本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水等等；公司主营业务：试剂盒：免疫组化试剂盒、ELISA试剂盒、分子生物学试剂盒。
细胞：原装进口细胞、国产肿瘤细胞、国产正常细胞。
耗材：细胞培养耗材、普通实验耗材。
生化试剂：原装进口生化试剂、进口分装生化试剂、国产生化试剂。
抗体：免疫组化、免疫荧光、流式细胞检测、免疫细胞化学。
服务：荧光定量PCR、测序、多肽合成、引物合成。
甘胆酸从冷藏环境中取出（2-8℃），然后放置室温平衡后可以使用。
1. 试剂盒提供6管标准品，每管已标定浓度，并且冻干。
实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动助其溶解，使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。
2. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
犬猫快速检测试纸的注意事项及说明书
现有试纸板包括犬猫两种
犬：CPV犬细小病毒,CCV犬冠状病毒,CDV犬瘟热病毒,C.Brucella Ab布鲁氏杆菌，SNAP CPL 犬胰腺炎
猫：FPV猫瘟，FIV Ab猫艾滋，FeLV Ag猫白血病，SNAP FPL猫胰腺炎
通用板：TOXO.Ag弓形虫
试纸的一些注意事项：
1、不同批号的试纸不能混用
2、采料不宜过多，棉签头½-⅔最好
3、妥善处理用过的试纸板，避免交叉传染
4、严格按照说明书执行
5、在规定时间内判读结果（记录时间）
6、专人操作（一人负责到底）
7、加样不宜过快（一滴滴加入观察液体行进速度）（加样保持滴管垂直于试纸板）
8、加样不宜过粘稠，吸取稀释液的上清液
9、试纸有可能产生误差，诊断需结合临床化验诊断
10、遵从医嘱
11、对于加液后液面不前进问题，可用吸管或细针在加样窗口
SNAP® cPL™犬胰腺炎快速检测试剂使用简单：
得检测结果颜色模糊，需进行重复检测。
无颜色出现——如果参考斑点无颜色，需进行重复检测。
犬瘟热病毒(CDV)核酸检测试剂盒(RT-PCR-荧光探针法)产品技术要求标准2023版
犬瘟热病毒（CDV）核酸检测试剂盒（RT-PCR-荧光探针法）本标准规定了犬瘟热病毒（CDV）核酸检测试剂盒（RT-PCR-荧光探针法）的产品构成、要求、试验方法、检验规则、标志、使用说明、包装、运输与贮存。
本标准适用于犬瘟热病毒（CDV）核酸检测试剂盒（RT-PCR-荧光探针法）。
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 191 包装储运图示标志GB/T 27532-2011 犬瘟热诊断技术SN/T 2428-2010 犬瘟热诊断方法DB22/T 2782-2017 犬瘟热病毒检测荧光定量RT-PCR方法中文名称：犬瘟热病毒（CDV）核酸检测试剂盒（RT-PCR-荧光探针法）。
8测试/盒。
产品成分应符合表1要求。
4.1.1 试剂盒各组分齐全，无破损，标签和说明书字迹清晰，内容完整。
4.1.2 试剂无明显浑浊或沉淀。
检测企业阳性参考品P1~P3 ，结果应均为阳性。
检测企业阴性参考品N ，结果应为阴性。
检测企业最低检出限参考品L ，重复10次，结果应均为阳性。
检测企业精密度参考品R1/R2各重复10次，结果应均为阳性，且FAM通道Ct值的变异系数（CV ，%）应不高于5.0%。
检测企业线性参考品（S1~S5）结果均为阳性，线性相关系数| r | >0.980。
经人员目测检测，结果应符合4. 1的要求。
取3份企业阳性参考品（P1~P3），按照犬瘟热病毒（CDV）核酸检测试剂盒（RT-PCR-荧光探针法）说明书进行检测，结果应符合4.2的要求。
取企业阴性参考品N ，按照犬瘟热病毒（CDV）核酸检测试剂盒（RT-PCR-荧光探针法）说明书进行检测，结果均为阴性，应符合4.3的要求。
取企业最低检出限参考品L ，按照犬瘟热病毒（CDV）核酸检测试剂盒（RT-PCR-荧光探针法）说明书进行检测，重复10次，结果应符合4.4的要求。
抗原试剂盒的用法
抗原试剂盒的用法1抗原试剂盒的定义抗原试剂盒又称ELISA试剂盒，是利用酶联免疫吸附反应（ELISA）检测，可用于检测特定抗原物质（如抗体、蛋白、抗原、细胞因子或其它外源能够与抗体结合的物质）在样品中的相互作用。
2各种抗原试剂盒抗原试剂盒可以分为常规ELISA试剂盒、全自动ELISA试剂盒、多因子ELISA试剂盒和金属ELISA试剂盒几种。
常规ELISA试剂盒是反应回路最简单的试剂盒，通常包含一种抗体或抗原、几种杂交液、一种酯化底物，用于检测特定抗原或抗体，能简便、快捷地进行单一或相互间因子检测，具有较多的应用。
全自动ELISA试剂盒是在常规ELISA试剂盒上完善后出现的，添加了稳定和吸附等因素，并采用微量无毒技术，该试剂盒的特点是环境友好、方便快捷。
多因子ELISA试剂盒是在全自动ELISA试剂盒的基础上添加多个组分，具有检测多种抗原物质的能力。
金属ELISA试剂盒是在金属氧化物的显色底物和稳定抗体反应的基础上发展起来的，可用于检测有机金属污染物。
3抗原试剂盒的用法（1）准备检测样品：首先将抽取后的样品稀释至稳定液，经过多次混匀，将水溶液中的Tween20去除。
（2）添加抗原：将抗原溶液加入模拟ELISA反应盒，添加抗原可通过改变抗原浓度来优化检测效率。
（3）添加抗体：将抗体溶液加入模拟ELISA反应盒，添加抗体可以提高检测的灵敏度。
（4）添加抗体复合物：将抗体复合物溶液加入模拟ELISA反应盒，抗体复合物是由抗原与抗体结合的复合物。
（5）调整混合液：将模拟ELISA反应盒中的混合液调节至pH值6.5-7.5范围内，以保证ELISA反应过程顺利进行。
（6）激发ELISA反应：把前述模拟ELISA反应混合液加入反应盒，使用适宜的温度、时间激发ELISA反应，在该过程中，抗体与抗原复合物会形成交联反应。
（7）处理ELISA反应：将ELISA反应处理后的混合液中的抗体复合物回收，然后采用恒定温度、时间处理ELISA反应，完成ELISA反应最后一步。
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猫瘟热病毒抗原(CDV-Ag)ELISA试剂盒使用说明书南京森贝伽现货供应，质量保证，价格优惠，试剂盒首选森贝伽。
本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定猫血清，血浆及相关液体样本中猫瘟热病毒抗原(CDV-Ag)水平。
实验原理：
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）测定标本中猫瘟热病毒抗原(CDV-Ag)。
用纯化的猫瘟热病毒(CDV)抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中猫瘟热病毒抗原(CDV-Ag)相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的瘟热病毒(CDV)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中猫瘟热病毒抗原(CDV-Ag)的存在与否。
试剂盒组成：
样本处理及要求：
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上
清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心
20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程
中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/
分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备
用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上
进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤：
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1
孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。
然后在待测样品孔先
加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15分钟
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
结果判定：
试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定：样品OD值< 临界值（CUT OFF）者为猫瘟热病毒抗原(CDV-Ag)阴性
阳性判定：样品OD值≥临界值（CUT OFF）者为猫瘟热病毒抗原(CDV-Ag)阳性
注意事项
1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。
2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5．底物请避光保存。
6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm
7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
终止液为2M的硫酸，使用时必须
注意安全。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月。