暨南大学生化期末考试题
生化期末考试题库及答案

生化期末考试题库及答案一、选择题1. 酶的催化作用主要依赖于:A. 酶的浓度B. 酶的活性中心C. 底物的浓度D. 酶的分子量答案:B2. 以下哪种物质不属于核酸?A. DNAB. RNAC. 胆固醇D. 脂多糖答案:C3. 细胞呼吸过程中,产生能量最多的阶段是:A. 糖酵解B. 丙酮酸氧化C. 三羧酸循环D. 电子传递链答案:D二、填空题4. 蛋白质的四级结构是指由多个多肽链通过_________相互连接形成的结构。
答案:非共价键5. 细胞膜的流动性主要归功于其组成成分中的_________。
答案:磷脂分子三、简答题6. 简述糖酵解过程中产生的ATP与氧气无关的原因。
答案:糖酵解是细胞内葡萄糖分解产生能量的过程,它不依赖于氧气。
在糖酵解的第一阶段,葡萄糖被磷酸化为葡萄糖-6-磷酸,这个过程消耗了两个ATP分子。
在第二阶段,两个3碳的丙酮酸分子被产生,同时产生了4个ATP分子。
因此,糖酵解过程总共产生了2个ATP分子,这个过程是厌氧的,不需要氧气参与。
7. 描述DNA复制的基本过程。
答案:DNA复制是一个半保留的过程,首先需要解旋酶将双链DNA解旋成两条单链。
随后,DNA聚合酶识别模板链并沿着模板链合成新的互补链。
新的链以5'至3'方向合成,而模板链则以3'至5'方向。
复制过程中,原始的两条链作为模板,每条链合成一条新的互补链,最终形成两个相同的DNA分子。
四、计算题8. 如果一个细胞在有氧呼吸过程中消耗了1摩尔葡萄糖,计算该细胞释放的能量(以千卡为单位)。
答案:有氧呼吸过程中,1摩尔葡萄糖可以产生38摩尔ATP。
每摩尔ATP水解释放的能量为7.3千卡。
因此,1摩尔葡萄糖通过有氧呼吸产生的总能量为:38摩尔ATP × 7.3千卡/摩尔ATP = 277.4千卡。
五、论述题9. 论述细胞周期的四个阶段及其在细胞生长和分裂中的作用。
答案:细胞周期包括四个阶段:G1期、S期、G2期和M期。
2021年暨南大学微生物学专业《微生物学》期末试卷B(有答案)

2021年暨南大学微生物学专业《微生物学》期末试卷B(有答案)一、填空题1、在E.coli细胞膜上存在Mot蛋白和Fli蛋白,前者位于______,其功能为______,后者位于______,其功能为______。
2、烈性噬菌体生活史可分五个阶段,即______、______、______、______和______。
3、在豆血红蛋白分子中,其蛋白质部分由______所触发,再由______ 的基因进行编码和合成;而血红素部分则由______所触发,再由______ 基因进行编码和合成。
4、在用曲法对微生物进行固体培养时,根据培养容器和规模的不同,可把它分为______、______、______、______、______和______等形式。
5、蕈菌典型肉质子实体的构造包括______、______、______、______ 和______五个主要部分。
6、在经典遗传学发展至分子遗传学过程中,有四种模式微生物发挥了重大作用,它们是① ______,② ______,③ ______,④ ______。
7、E.coli的代时约为______min,一个细胞经2h繁殖后,可变为______ 个;Saccharomyces cerevisiae的代时约为______min,一个细胞经6h分裂后,可变为______个。
8、一般来说,在土壤中,各种微生物含量按递减顺序排列如下:______、______、______、______、______和______。
9、质粒通常以共价闭合环状的超螺旋双链DNA分子存在于细胞中,但从细胞中分离的质粒大多是3种构型,即______型、______型和______ 型。
10、巨噬细胞在非特异性和特异性免疫中主要有以下四个作用: ______,______,______和______。
二、判断题11、细菌计数板每小格的体积是1/20000mm3。
()12、实验室做固体培养基时,常加1.8%的琼脂作凝固剂,做半固体培养基时,琼脂加入量通常是0.5%。
生化工程期末考试题及答案

生化工程期末考试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 生化工程中的“酶”通常指的是:A. 蛋白质B. 核酸C. 脂质D. 糖类2. 下列哪项不是酶催化反应的特点:A. 高效性B. 特异性C. 需要高温D. 可逆性3. 以下哪个不是生化工程中常用的固定化酶技术:A. 吸附法B. 交联法C. 包埋法D. 溶解法4. 生物反应器中,细胞培养的目的是:A. 提高酶活性B. 产生代谢产物C. 增加细胞数量D. 以上都是5. 以下哪个不是生化工程中常用的生物反应器类型:A. 搅拌槽式反应器B. 填充床反应器C. 膜反应器D. 离心机二、填空题(每空1分,共10分)6. 生化工程涉及的学科包括_________、_________和_________。
答案:生物学、化学工程、医学7. 固定化酶技术的优点包括_________、_________和_________。
答案:重复使用、稳定性高、易于分离8. 生物反应器的设计需要考虑的因素包括_________、_________和_________。
答案:温度、pH值、氧气供应9. 酶的催化机制通常涉及到_________和_________的相互作用。
答案:酶活性中心、底物10. 细胞培养技术在医药领域中的应用包括_________和_________。
答案:生产药物、生产疫苗三、简答题(每题10分,共20分)11. 简述固定化酶技术在工业生产中的应用及其优点。
答案:固定化酶技术在工业生产中广泛应用于食品加工、制药、环境治理等领域。
其优点包括:提高酶的稳定性和重复使用性,降低生产成本;易于实现酶与反应物的分离,简化工艺流程;提高反应效率,缩短生产周期。
12. 描述生物反应器在生物制药过程中的作用及其重要性。
答案:生物反应器在生物制药过程中起到至关重要的作用,它为细胞或酶提供了适宜的生长和催化环境,确保了药物生产的高效性和稳定性。
生物反应器的设计和操作直接影响到药物的产量和质量,是实现工业化生产的关键环节。
2022年暨南大学生物科学专业《微生物学》期末试卷B(有答案)

2022年暨南大学生物科学专业《微生物学》期末试卷B(有答案)一、填空题1、E.coli的肽聚糖单体结构与Staphylococcus aureus的基本相同,所不同的是前者① ______,② ______。
2、质型多角体病毒的核酸为______。
3、厌氧乙酰-CoA途径又称______途径,这种非循环式的CO2固定机制主要存在于一些______、______和______等化能自养细菌中。
4、光能自养型和光能异养型微生物的共同点是都能利用______;不同点在于前者能以______作唯一碳源或主要碳源,而后者则以______作主要碳源;前者以______作供氢体,而后者则以______作供氢体。
5、在真核微生物细胞质内存在着沉降系数为______S的核糖体,它是由______S和______S两个小亚基组成,而其线粒体和叶绿体内则存在着______S核糖体,它是由______S和______S两个小亚基组成。
6、人类对微生物的发现和认识,比对动、植物晚得多,其原因是微生物具有______、______、______和______四个特点。
7、在面包、蛋糕中常加入______作为防腐剂。
8、细菌沥滤又称细菌冶金,主要分三阶段:______,______,______;其中后一步是关键,它由化能自养细菌______来完成的。
9、基因突变的自发性和不对应性曾有三个著名实验予以证明,它们是______等人的______,______的______,以及______等的______。
10、抗原与抗体间有八类主要反应,例如______、______、______和______等。
二、判断题11、革兰氏染色法与芽孢染色法和抗酸性染色法一样,是一种鉴别染色法。
()12、所有碳源物质既可以为微生物生长提供碳素来源,也可以提供能源。
()13、反硝化作用是化能自养微生物以硝酸或亚硝酸盐为电子受体进行的无氧呼吸。
()14、与其他微生物相似,同种病毒粒或噬菌体个体间,也存在生长期(即年龄)和形态上的差别。
2022年暨南大学生物科学专业《微生物学》期末试卷A(有答案)

2022年暨南大学生物科学专业《微生物学》期末试卷A(有答案)一、填空题1、不同的放线菌有不同的典型形态,如______属的基内菌丝会断裂成大量的杆菌状体,______属等可在菌丝顶端形成少量孢子,______属具有孢囊并可产生孢囊孢子,而______属则具有孢囊,但产生的是游动孢子等。
2、典型的类病毒是由美国学者______于1971年发现的______,它的成分是一种______分子。
3、发酵工业的生产菌种主要来源:______、______和______。
4、生长因子主要包括______、______和______,它们对微生物所起的作用分别是______、______和______。
5、原核细胞的核区内含有______个染色体,其细胞膜以大量折皱陷入细胞质里面去,称这些管状或囊状的结构为______,其核糖体的大小为 ______;而真核细胞的核含有______个染色体,还含有______,其核糖体的大小为______。
6、我国古代劳动人民在微生物应用方面的主要贡献是发明用______独特工艺加工______原料以生产______。
7、最常见的厌氧菌有① ______,② ______,③ ______,④ ______,⑤ ______,⑥ ______等。
8、汞的微生物转化主要包括3个方面______,______和______。
9、根据感受态建立方式,可以分为______转化和______转化,前者感受态的出现是细胞一定生长阶段的生理特性;后者则是通过人为诱导的方法,使细胞具有摄取DNA的能力,或人为地将DNA导入细胞内。
10、巨噬细胞在非特异性和特异性免疫中主要有以下四个作用: ______,______,______和______。
二、判断题11、G-细菌细胞壁肽聚糖含量少、厚度薄,因此用溶菌酶处理后容易获得原生质体。
()12、对含葡萄糖的培养基进行高压蒸汽灭菌时可在121.3℃加热20min即可。
2022年暨南大学生物技术专业《微生物学》期末试卷B(有答案)

2022年暨南大学生物技术专业《微生物学》期末试卷B(有答案)一、填空题1、缺壁细菌的主要类型有______、______、______和______。
2、噬菌体的成斑率一般均大于______。
3、6分子葡萄糖经HMP途径进行直接氧化和一系列复杂反应后,最终产物为______个______分子,______个______分子和6个CO2。
4、光能有机营养型微生物的能源是______,氢供体是______,基本碳源是______和______,这类微生物的代表如______等。
5、酵母菌细胞膜上的类脂由______、______和______三类成分组成,其中第三类中的______是维生素D2的前体。
6、微生物代谢类型的多样性表现在:① ______,② ______,③ ______,④ ______,⑤______,⑥ ______,⑦ ______。
7、许多因素会影响加压蒸气灭菌的效果,主要有:① ______,② ______,③ ______,④ ______,以及⑤ ______等。
8、无菌动物在生理上有几个特点:______,______,______等。
9、微生物菌种保藏的原理是在______、______、______、______和______等环境条件下,使其处于代谢不活泼状态。
10、特异性免疫具有的特点为______、______和______。
二、判断题11、支原体与L-型细菌极其相似,但后者具有恢复形成细胞壁的能力。
()12、以(NH4)2SO4为氮源培养微生物时,会导致培养基pH升高。
()13、肽聚糖合成过程中的一个重要中间产物称作“Park”核苷酸,就是UDP-N-乙酰胞壁酸四肽。
()14、P2噬菌体通常以前噬菌体的形式整合在宿主细胞中,而不会导致细胞死亡,故二者都属于温和噬菌体。
@9、疯牛病的病原体为一种朊病毒。
()15、从低等真菌、酵母菌到高等真菌,它们细胞壁中的多糖成分都是以几丁质为主。
暨南大学生物化学试卷整理

暨南大学生物化学试卷整理暨南大学生物化学试卷整理一、选择题:(每题1分,共15分)1.下列哪种物质含有高能磷酸键…………………………………()A.ADPB.GTPC.GMPD.CDP2.SDS凝胶电泳测定蛋白质的分子量是根据各种蛋白质…………()A.在一定的PH条件下所带的电荷不同B.分子量的大小不同C.分子的极性不同D.溶解度不同3.脂肪酸的从头合成的酰基载体是…………………………………()A.ACPB.CoAC.TPPD.生物素4.组氨酸是经过下列哪种的作用生成组胺的……………………()A.还原作用B.转氨基作用C.羟化作用D.脱羟基作用5.下列关于密码子的哪个是错的……………………………………()A.每个密码子由三个碱基构成B.每个密码子代表一个氨基酸C.每个氨基酸只有一种密码子D.有的密码子不代表任何氨基酸6.有关核糖体的叙述哪个是错的……………………………………()A.是由大小两个亚基组成的B.翻译过程一条肽链上只能有一个核糖体C.核糖体的亚基分为大小亚基D.核糖体翻译需要能量7.下列哪个是抑癌基因……………………………………………()A.ras基因B.sis基因C.P53基因D.src基因8.反密码子GAT的tRNA可以识别以下密码子…………………()A.UCCB.CUTC.CUAD.UUU9.三羧酸循环的限速酶是……………………………………………()A.丙酮酸脱氢酶B.顺乌头酸酶C.异柠檬酸脱氢酶D.琥珀酸脱氢酶10.蛋白质在紫外光中吸收的最高波长为…………………………()A.260nmB.280nmC.300nmD.320nm11.具有生物活性的维生素D是……………………………………()A.25—羟D3B.D3C.7—脱氢胆固醇D.1,25—二氢基D3 12.解偶联剂能…………………………………………………………()A.加快电子传递B.抑制电子传递C.促进H+通过线粒体的内膜D.降低完整线粒体的摄氧率13.细胞之间的连接方式有……………………………………………()A.紧密连接B.通讯连接C.胞间连丝D.粘联连接14.对同功酶的叙述下列正确的是………………………………………()A.分子结构相同B.催化相同化学反应C.催化能力相同D.是同一种酶15.蔗糖的合成需要……………………………………………………()A.UDPGB.ADPGC.CDPGD.GDPG二、填空题:(每空1分,共32分)1、生物膜主要是由()和()组成。
暨南大学生物化学复习题

1.蛋白质的一级结构及空间结构概念及稳定力量2.Pr二级结构基本形式有哪几种?3.蛋白质亲水胶体的稳定因素有哪些?4.蛋白质的变性与降解是否为同一事件?简述理由。
5.分子筛、离子交换树脂分离纯化蛋白质的原理6.核酸的双螺旋结构的结构特征7.简述酶抑制剂分类及作用机制区别?8.以图示作出糖有氧氧化、糖酵解、糖异生、磷酸戊糖途径的综合图,并标明关键步骤、产能、脱氢、产CO2部位。
9.血糖来源与去路10 以图示写出糖原合成与分解途径,标明关键步骤。
11.甘油三酯的分解代谢途径(以TG为起始――乙酰CoA),步骤、关键酶;12.血浆脂蛋白分类及分类依据、各血浆脂蛋白组成特点(密度、TG、PL、Pr),各种血浆脂蛋白在脂类物质运输中的作用13.一位同学早餐喝了两杯牛奶;另一位同学则吃了一块面包喝了一杯牛奶,请问哪位同学早餐更具营养价值?为何?14.氨的来源、转运与去路;α-酮酸的去路15.肝昏迷氨中毒学说16.一碳单位及来源、生理功用17.心肌损伤患者哪种转氨酶和肌酸激酶升高?18.Tyr与那些神经递质生成有关?白化症,黑尿酸症,巴金森氏与其有何关联?19.巨幼红细胞贫血与一碳单位和甲硫氨酸循环关联?20.以生化途径显示下列物质在体内如何进行生物氧化产能的具体步骤。
(提示:代谢物的中间产物如为三羧酸循环中间代谢物需经丙酮酸才能以乙酰CoA形式再进入三羧酸循环彻底氧化分解)谷氨酸甘油色氨酸21.在大运动量或消耗型活动中,应补充足量的B族维生素,有何道理?生化课堂讨论题1.蛋白质的一级结构的概念,稳定力量举例说明蛋白质一级结构与功能的关系(核糖核酸酶变性与复性)2.蛋白质的空间结构的概念(二、三、四级结构),稳定力量举例说明空间结构与功能的关系(Hb与O2)3.真核生物DNA双螺旋结构、mRNA、tRNA结构特点及功能。
4.酶促反应动力学的影响因素有哪些?(1)酶反应动力学曲线为何类型曲线?代表意义是什么?(2)Km,Vm含义,及意义(3)最适温度,最适pH??(4)抑制剂分类(5)可逆性抑制剂对酶促反应速度的影响,对Km、Vm影响?5.生糖AA(Asp、Glu、Ala)如何生成G?6. 生糖AA(Asp、Glu、Ala)如何生成CO2,水产生能量?7.蛋白质消化吸收腐败及AA分解代谢总途径(图示)8.关键酶的调节方式?9.整体水平代谢调节中三大营养物的代谢状况:(短期饥饿、长期饥饿。
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1. 拉式构象图内容答:拉氏构象图:Ramachandran根据蛋白质中非共价键合原子间的最小接触距离,确定了哪些成对二面角(Φ、Ψ)所规定的两个相邻肽单位的构象是允许的,哪些是不允许的,并且以Φ为横坐标,以Ψ为纵坐标,在坐标图上标出,该坐标图称拉氏构象图(TheRamachandran Diagram)。
图上的一个位点对应于一对二面角(Φ、Ψ),代表一个Cα的两个相邻肽单位的构象。
该图简化了蛋白质构象的研究,有利于正确判断蛋白质结构模型的正误。
同时也发现了肽链的折叠具有相当大的局限性,二面角(Φ、Ψ)取值范围有限,只有取值所对应的构象才是立体化学所允许的。
⑴实线封闭区域一般允许区,非键合原子间的距离大于一般允许距离,区域内任何二面角确定的构象都是允许的,两者无斥力,构想能量最低,所以构象是稳定的。
⑵虚线封闭区域是最大允许区,非键合原子间的距离介于最小允许距离和一般允许距离之间,立体化学允许,但构象不够稳定。
⑶虚线外区域是不允许区,该区域内任何二面角确定的肽链构象,都是不允许的,此构象中非键合原子间距离小于最小允许距离,斥力大,构象极不稳定。
Gly的Φ、Ψ角允许范围很大。
构象的范围是很有限的,对非Gly氨基酸残基一般允许区占全平面的7.7%,最大允许区占全平面22.5%。
2. 蛋白质翻译后修饰的作用。
答:蛋白质翻译后修饰在生命体中具有十分重要的作用。
它使蛋白质的结构更为复杂, 功能更为完善, 调节更为精细, 作用更为专一。
表现如下:(1)磷酸化、糖基化和硫酸化还有许多其它的修饰对蛋白的功能是极为重要的,因为它们能决定蛋白的活性、稳定性、定位和循环,进一步影响细胞的生长分化、细胞周期、细胞凋亡和癌症发生等生物学过程;(3)与某些疾病相关:如多种硫酸酯酶缺乏症,属于一种罕见的溶酶体储存紊乱疾病,造成硫酸酯酶的翻译后修饰出现异常,致使酶活性减少或缺乏,造成各种硫酸酯酶的硫酸酯底物堆积在细胞的溶酶体和其他细胞器中,损害细胞的正常功能,出现一系列复杂的临床表型。
3. 二硫键在肽链折叠、蛋白质结构和功能方面的作用答:二硫键等基团间的相互作用为蛋白质产生维持高级结构和功能提供基础。
半胱氨酸残基中的巯基是所有蛋白质氨基酸残基中最活泼基团,在体内多种反应中扮演着至关重要角色。
巯基与二硫键之间可借助氧化还原反应相互转化。
当条件合适时,二硫键可按照原来的配对进行组合,这样形成的蛋白质可与天然蛋白质一样,既有正确的空间构象,又具有原来蛋白质的生物活性。
这一过程被成为蛋白质氧化重折叠。
就天然构象的恢复而言,二硫键不仅能稳定天然构象,且还能引导进一步氧化与折叠的发生。
(1)二硫键能够帮助肽链折叠二硫键的形成对于稳定蛋白质的空间结构和保持其活性功能具有极其重要的影响,是蛋白质折叠过程中的重要步骤,它的错误配对是影响蛋白质多肽链正确折叠的重要原因,而且其形成的动力学和热力学性质影响着蛋白质折叠的速率和途径。
相对而言,二硫键更倾向于在氨基酸序列的前半段出现,这在蛋白质翻译过程中对于保证蛋白质新生肽链顺利延伸合成和减少发生错误折叠是有积极意义的。
(2)二硫键能够维持蛋白质结构二硫键作为共价化合键,存在于多数蛋白质中。
二硫键的形成能够使蛋白质肽链的空间结构更为紧密,从而发挥维持和稳定蛋白质三维结构的功能。
二硫键可以具有不同的空间构型,因此形成二硫键的2个半胱氨酸残基所在肽段的相对构象,也可因为二硫键构型不同而发生改变。
大多数真核细胞膜表面蛋白和分泌蛋白经常通过二硫键来稳定其构象。
(3)二硫键的形成和变化能够影响蛋白质的功能半胱氨酸残基中的巯基是所有蛋白质氨基酸残基中最活泼的基团,在体内参抗氧化、亚硝基化和巯基-二硫键交换等多种重要生理反应,从而发挥并调节蛋白质的功能,如:可以调节细胞内环境分子间的接触,从而影响蛋白质的分泌情况;二硫键能够作为许多蛋白功能的切换器,一些分泌的可溶性蛋白和细胞表面受体蛋白通过一个或多个二硫键的切割来实现其功能的控制;另外,蛋白巯基还可以作为细胞内环境分子间相互作用的媒介,其媒介作用通过直接地形成分子间二硫键或间接地改变折叠途径和后续的聚集反应来实现。
例举如下:A、巯基的抗氧化作用——在谷胱甘肽(GSH)中,半胱氨酸残基形成的疏基能够维持细胞的正常代谢与保护细胞膜的完整性,并能结合亲电子基、重金属离子与氧自由基等有害物质,具有抗脂质过氧化作用,可直接使氧自由基还原或促进超氧化物歧化酶合成。
另外,由于巯基具有抗氧化作用,现已证实GSH水平下降是诱导细胞发生凋亡的重要因素。
B、巯基的亚硝基化反应:蛋白质巯基亚硝基化修饰——主要是指巯基与气体信号分子一氧化氮(NO)反应。
蛋白质巯基被NO或其衍生物修饰可发挥NO的生物活性,且使NO更稳定。
蛋白质的巯基亚硝基化修饰影响其在细胞内的活性和功能,如核转录因子(NF-κB) 的一个亚基巯基亚硝基化能够影响其与DNA结合;蛋白质巯基亚硝基化修饰能够活化钙离子通道,天门冬氨酸受体(NMDAR)蛋白质巯基亚硝基化影响相关信号通路;蛋白质巯基亚硝基化调控Caspase酶活性,用Fas处理细胞,Caspase-3发生去亚硝基化后活化,诱导细胞凋亡。
C、巯基-二硫键交换反应对细胞信号分子影响——人热休克转录因子1(heat shocktranscription factor 1,HSF1)中半胱氨酸残基的氧化还原反应能够影响其被热激活状态并DNA结合。
4. 为什么会出现转角?转角为什么一般都出现在蛋白质表面?答:β-转角是种简单的非重复性结构。
在β-转角中第一个残基的C=O与第四个残基的N-H氢键键合形成一个紧密的环,使β-转角成为比较稳定的结构,多处在蛋白质分子的表面,在这里改变多肽链方向的阻力比较小。
β-转角的特定构象在一定程度上取决与他的组成氨基酸,某些氨基酸如脯氨酸和甘氨酸经常存在其中:甘氨酸(Gly):R=H,即侧链没有空间位组,因此临近氨基酸残基形成的二面角自由度较大、不稳定。
一般不出现在规则二级结构中,但常出现在β-转角中,能很好地调整其他残基的空间阻碍,因此是立体化学上最合适的氨基酸,并常出现在两股肽段贴近的位置;脯氨酸(Pro):N原子位于刚性封闭的吡咯环,并使Φ角固定为-60°;该N原子连接的H原子已用于肽键的形成,且吡咯环又阻止其C=O接近附近肽平面的NH,故难以形成α-螺旋或β-折叠所需要的氢键。
因此在一定程度上迫使β-转角形成,促使多台自身回折且这些回折有助于反平行β折叠片的形成。
β-转角及其附近氨基酸残基有较大的亲水性,常出现亲水性较强的D(Asp)、N(Asn)、Q (Gln)、S(Ser)等氨基酸残基,故大多位于蛋白质分子表面,参与蛋白质与水分子、其他蛋白或分子之间的相互作用。
常是蛋白质磷酸化或N-糖基化位点,其序列具有保守性,与参与蛋白质生物学功能密切相关。
5. 肽链设计Design a sequence of polypeptide containing up to 25 amino acids which is likely to form a hairpin α-helical structure two antiparallel(反向平行)α-helices,with a β-turn in the center of the sequence. Show you proposed sequence using the one-letter code of amino acids, and explain the special features of your design .(设计一个多肽序列:包含25个氨基酸的发卡α-螺旋结构、两个反平行的α-螺旋和位于序列中间的β-转角结构。
用氨基酸代码的形式写出你的序列,解释你设计的具体思路。
)【肽链的设计合成】基本合成步骤:1 、去保护: Fmoc 保护的柱子和单体必须用一种碱性溶剂( piperidine )去除氨基的保护基团。
(如图 1 )2 、激活和交联:下一个氨基酸的羧基被一种激活剂所激活溶解,激活的单体与游离的氨基在交联剂的作用下交联,形成肽键。
3 、循环:这两步反应反复循环直到整条肽链合成完毕。
4 、洗脱和脱保护:根据肽链所含的残基不同,用不同的脱树脂溶剂从柱上洗脱下来,其保护基团被一种脱保护剂( TFA )洗脱和脱保护。
简介多肽是复杂的大分子 , 因此每条序列在物理和化学特性上都是独特的,有些多肽合成很困难 , 另有些多肽虽然合成相对容易 , 但纯化困难;最常见的问题是许多肽不溶于水溶液 , 因此在纯化中 , 这些疏水肽必须溶于非水溶剂中或特殊的缓冲液 , 而这些溶剂或缓冲液很可能不适合应用于生物实验系统 , 因此研究人员不能使用该多肽达到自己的目的 , 因此下面是对于研究人员设计多肽的一些建议。
如何降低肽链合成的难度?1. 减少序列长度由于肽的长度增加会导致粗产物纯度降低 , 小于 15 个残基的肽比较容易得到较高纯度的初产物,当肽链长度增加到 20 个残基以上时 , 正确产物的量就是一个主要考虑的问题。
在许多实验中 , 降低残基数低于 20 往往能得到更好的实验结果。
2. 减少疏水性残基数疏水性残基占明显优势的肽,尤其在距 C 端 7-12 个残基的区域,常常引起合成困难。
这通常被认为是由于合成中形成 b 折叠片,这样会产生不完全配对。
用 1 个或几个极性残基置换或加入 Gly 或 Pro 以打开肽结构可能会有帮助。
3. 减少“困难”残基有多个 Cys 、 Met 、 Arg 、 Try 残基通常难于合成。
Ser 通常可作为 Cys 的非氧化替换。
如何增强肽链的可溶性?•改变 N 端或 C 端对于酸性肽 ( 即 pH 值为 7 时带负电荷 ), 我们推荐乙酰化 (N 端乙酰化 , C 端保持自由羧基 ), 以增加负电荷。
而对于碱性肽 ( 即 pH 值为 7 时带正电荷 ), 我们推荐氨基化 (N 端自由氨基 , C 端氨基化 ), 以增加正电荷。
•缩短或加长序列某些序列含有大量疏水氨基酸 , 如 Trp 、 Phe 、 Val 、 Ile 、 Leu 、 Met 、 Tyr 和 Ala 等 , 当这些疏水残基大于 50% 通常难于溶解。
为了增加肽的极性 , 加长序列可能会有帮助。
另外一种选择是通过减少疏水残基的方法降低肽链的长度以增加极性。
肽链极性越高 , 就越有可能溶于水。
•加入可溶性残基对于某些肽链而言 , 加上一些极性氨基酸能改善可溶性。
我们推荐给酸性肽的 N 端或 C 端加上 Glu-Glu 。
给碱性肽的 N 端或 C 端加上 Lys-Lys 。
如果不能加入带电荷基团 , 可以将Ser-Gly-Ser 加到 N 端或 C 端。