全自动生化分析仪的常用检测方法
全自动生化分析仪的常用检测方法
免疫比浊法
• 优点： 方法简便 结果准确 可用于自动化仪器检测
• 缺点：抗体用量大 达平衡时间长
双波长法
消除样品中对测定有干扰的物质的影响； • 在试样中含有两个组分a和b时，若要测定 组分b,组分a有干扰，应设法消除组分a的 吸收干扰。首先选择待测组分b的最大吸 收波长λ 1作为测量波长，然后用作图的方 法选择参比波长λ 2 ，使组分a在这两个波 长处的吸光度相等。
吸光系数
• 三种表现形式：摩尔吸光系数ε 吸光系数a 百分吸光系数E1%1cm
Lambert-Beer（朗伯-比尔）定律
• 郎伯-比尔定律表明：当液层厚度固定时， 溶液的吸光度与溶液的浓度成正比。 即：A/C=const • 故：只要测出某种溶液的吸光度，将它与 已知浓度的标准溶液吸光度进行比较，就 可以算出该溶液的浓度。
标准溶液对比法
C
Cs Ci
吸光系数法
吸光系数法又称绝对法，是直接利用朗伯比尔定律的数学表达式A＝Kbc进行计算的 定量分析方法。在手册中查出待测物质在 % 最大吸收波长max处的吸光系数 或 E11cm , 并在相同条件下测量样品溶液的吸光度A， 则其浓度为：
A c L
或
A影响吸光系数和吸收光谱形状
E1＝E2 E1≠E2 （E2-E1)↑
结论： ● ●
A=E1C·L A与C不成线性关系，偏离Beer定律 A与C偏离线性关系越严重
选择较纯单色光（Δ λ ↓，单色性↑） 选λ max作为测定波长
（一）光学因素
2. 杂散光的影响 杂散光是指从单色器分出的光不在入射 光谱带宽度范围内，与所选波长相距较远。 杂散光来源：仪器本身缺陷；光学元件 污染造成 杂散光可使吸收光谱变形，吸光度变值。
日立7180全自动生化分析仪使常规用
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补充试剂
菜单下，确定试剂信息 观察各项目可测定数（Tests Available）和每种试剂剩余测定数 （Remaining Tests ） 的余量。 结合当日预计测定量追加试剂，试剂位置按屏幕显示放置，注意不能有气泡。 试剂装载完成后，执行以下操作：
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结果的传输
该仪器正常情况下应自动向LIS传输结果数据。 当遇LIS故障导致数据不能自动传输的情况下，执行以下操作
用鼠标选中需 要传输的结果
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注意：当遇LIS故障时可导致7180传输端口自动关闭。LIS故障排除 后应检查7180传输端口是否关闭，如关闭需打开后再进行手工传输 操作。
速率法
速率A (rate-A) 两点速率 (2 point rate)
终点法（显色反应）
定义
用可见光作光源，比较溶液的颜色深浅以测定 所含物质浓度的方法。
终点法
一点终点法
A
Abs.
0
t
终点法
两点终点法
Abs.
R2 S+R1
A1 0
A2
A
t
终点法
胆红素（钒酸盐法）反应曲线
S+R1
R2
关机
仪器左上角STAND BY状态下
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临床生化应用基础
郭玉亮
概要
•分析方法 •校准方法 •校准结果分析 •结果不良分析
分析方法
定义 根据不同的测试项目的反应原理不同，
采用不同的监测方法，求得用于计算的吸 光度值的过程。
分析方法
终点法
一点终点法（1 point） 两点终点法 (2 point end)
临床全自动生化分析仪培训课件
临床全自动生化分析仪
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样品架的优点
①随着样品架移动及样品的被检测，可不 断追加已放置样品杯或采血试管的样品 架；
②通过样品架的 移动能将样品传 送到另一个分析 模块（analysis die-block）甚至 另一台分析仪上 再进行分析。
临床全自动生化分析仪
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（二）试剂室和试剂瓶
转盘式试剂室（reagent chamber）：内 装放置试剂瓶的转盘，一般可放置20种以上具 有一定形状的塑料试剂瓶，大型分析仪可放置 30～45种试剂瓶。
临床全自动生化分析仪
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前分光和后分光方式
光栅分光有前分光和后分光两种方式， 光源首先经过单色器分光，然后透射到比色 溶液的方式为前分光。目前以后分光方式为 多见，其优点是单色器中没有转动部分，双 波长在同一时刻检测，因而提高了检测的精 度和速度。
临床全自动生化分析仪
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后分光方式
光源先透过比色杯中的反应液再照射 到光栅上，经色散后所有固定单色光同时通 过各自的光纤传输到对应的检测器，微处理 器按该分析项目的分析参数，
Байду номын сангаас
临床全自动生化分析仪
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样品前处理系统
能独立工作，由样品投入部、离心分离部、 开栓部、在线分注部、非在线分注部、贴条码部、 盖栓部、样品分注收存部、样品接收部等模块构 成前处理系统，每一模块既是系统的部分，又是 独立的单元，可根据不同需要选择使用，具有灵 活性和扩展性。
也可通过样品输送部分与样品分析系统连接， 组成类似工业领域的生产流水线，从而实现了从 采血到报告的实验室的全自动化。
临床全自动生化分析仪
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（四）取样和加试剂装置
1．取样装置（sampling assembly）： 由取样针、取样臂、取样管路、取样注射器
全自动生化分析仪的使用流程及操作步骤
全自动生化分析仪的使用流程及操作步骤下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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OLYMPUS AU400型全自动生化分析仪计量检测方法
OLYMPUS AU400型全自动生化分析仪计量检测方法探讨李晓丽一、生化分析仪计量现状生化分析仪是医院必不可少的检查仪器，生化项目测定、激素、免疫球蛋白、血药浓度等特殊化合物的测定以及酶免疫、荧光免疫等分析离不开生化分析仪。
随着国民经济的高速发展，科学技术的不断进步，以往的半自动生化分析仪逐渐被全自动生化分析仪所取代，在各级医疗卫生机构中广泛使用。
全自动生化分析仪是将生化分析中的取样、加试剂、去干扰物、混合、保温、比色、结果计算、书写报告和清理等步骤的部分或全部由模仿手工操作的仪器来完成。
全自动生化分析仪的准确性如何，直接影响着医生对病人病情的判断，这就对计量部门检测生化分析仪提出了更高的技术要求。
JJG464-1996《生化分析仪》检定规程相对于全自动生化分析仪的检定来说，有一定的局限性。
二、普通检测方法存在的问题检测全自动生化分析仪普通方法是通过加样针在样品(检测用标准物质)中加入反应试剂(相同的标准物质)，搅拌均匀后，由泵依次吸至比色池中进行比色，经信号处理后，记录或打印出结果。
即采用全自动生化分析仪分析样品时的工作程序来检测标准物质的吸光度，或者采用直接把标准物质放入试剂盒中，用测定试剂空白的方法检测标准物质的吸光度。
根据笔者的经验，这两种方法检测出的吸光度数值比实际值偏低，其原因是这种方法引入了试剂针和样本针在清洗过程后残留的清洗液，这对标准物质起到了稀释的作用。
根据朗伯-比尔定律，物质的浓度降低，吸光度也会随之减小。
三、使用探讨检测方法检定全自动生化分析仪举例由于普通检测方法存在检测出的吸光度数值比实际值偏低的问题，我们在检定时一般将通过加样针在样品中加入反应试剂的过程跳过，直接手动将标准物质添加至比色杯中，我们称之为探讨检测方法。
下面以OLYMPUS AU400型全自动生化分析仪为例，来阐述探讨检测方法的检测流程。
1.准备工作(1)启动系统，系统将进行初始化(Initialization)及预热(Warm-Up)操作，并转到待机(Stand by)状态。
全自动生化分析仪技术参数
全自动生化分析仪技术参数1．技术规格：1.1 仪器类型：全自动分立式，急诊优先检测；分析参数和试剂全开放★1.2 分析速度：比色恒速≥400T/H1.3 同时分析项目：78个比色项目1.4样本位：≥90个样本位1.5样本管规格：标准杯、微量杯、原始采血管，规格（Φ12-13）mm×（25~100）mm1.6加样技术：液面探测、随量跟踪、立体防撞、堵针检测、空吸检测1.7 分析方法：终点法、两点法、速率法1.8试剂位：≥80个1.9 试剂针：液面探测、随量跟踪、立体防撞、气泡检测1.10试剂针携带率：自动清洗，携带率小于或等于0.1%1.11 反应杯：≥90个1.12反应杯清洗：自动8阶清洗，清洗水预加温2．校准与质控：校准方法包括1点线性法、2点线性法、多点线性法。
可自动描绘校准K值趋势图进行校准追踪。
可进行失控样本测试结果报警并记录失控原因3．软件主要功能：自动校准、自动条码扫描、项目组合测试、试剂信息管理、血清指数、反映全过程监测、脏杯记忆回避、防交叉污染程序、病人信息记忆及联想输入、自动报告审核、数据多参数查询、报表统计与打印、参考范围分级、报警信息分级、用户操作权限分级管理、自动休眠与唤醒、实时在线帮助4．报告打印：中文报告，8种格式可选。
报告单支持用户自定义模式，质控与状态信息等5. 基本配置要求5.1 主机1台5.2 操作电脑1台，19寸以上液晶显示屏，5.3打印机1台5.4 样本、试剂条码扫描仪选配5.5纯水系统一套5.6UPS电源一块5.7外置打印机一台B超技术参数1.设备用途说明腹部、妇科、产科、浅表组织与小器官、颅脑、术中、介入性超声2.主要规格及系统概述：2.1 高档黑白便携式超声波诊断仪包括：2.1.1 高分辨率LCD显示器2.1.2 全数字化二维灰阶成像单元2.1.3 全数字化波束形成器*2.1.4组织二次谐波成像（应用于凸阵、高频线阵探头）2.1.5 二维图像优化技术* 2.1.6 可配置可变角度解剖M型（超声仪器主机内置）*2.1.7多角度扩展探头技术2.2 测量和分析：(B 型、M 型)2.2.1 一般测量（包括腹部、泌尿和小器官等软件包）2.2.2 妇科、产科测量（包括胎儿生长曲线和多胎计算等软件包）2.2.3 血管测量与分析2.3 图像存储与(电影)回放重现单元2.4 输出信号：复合视频2.5 图像管理与记录装置：2.5.1 超声图像存档与病案管理系统，一体化病案管理单元包括病人资料、报告、图像等的存储、检索和修改等2.5.2静态图像以PC 通用格式直接存储，无需特殊软件即能在普通PC 机上直接观看图像2.5.3 USB 接口3. 系统概述3.1 系统通用功能：3.1.1 监视器：＞10″LCD显示器3.1.2 全激活电子探头接口：2 个3.2 探头规格*3.2.1 频率：超宽频变频探头,工作频率明确显示,二维显示频率可选择≥4 种*3.2.2 腹部用凸阵探头,最高频率≥6MHZ,最低频率≤2.5MHZ（请附图）*3.2.3 可配置高频线阵探头中心频率≥13MHz3.2.4 探头配置：电子凸阵（腹部）探头1 个3.2.5 穿刺导向：探头可配穿刺导向装置，具有穿刺测量功能3.3 二维灰阶显像主要参数：3.3.1变频探头工作频率范围：电子凸阵：超声频率2.5 — 6.0MHz电子线阵：超声频率5.0 — 13MHz电子微凸（含腔内）：超声频率3.0 — 9MHz3.3.2 灰阶≥2563.3.3 扫描速率：电子凸阵探头，全视野，18 cm 深，帧频≥15帧/秒，可显示帧频3.3.4 发射声束聚焦：发射≥4 段3.3.5 体位标记≥50个*3.6.6 数字声束形成器：数字式全程动态聚焦，数字式可变孔径及动态变迹，A/D≥12 bit（需提供原厂date sheet 证明)*3.3.7 回放重现：灰阶图像电影回放≥1000 帧，回放时间≥30秒3.3.8 增益调节：B/M 可独立调节，TGC 分段≥6*3.4 超声功率输出调节：B/M 输出功率可调,可调级数≥50级自动分析心电图机技术参数输入电路心电输入：12导联同步采集，10电极导联选择：自动或手动输入方式：浮地输入输入保护：标配导联线内附除颤保护电路采样率：8000 Hz/8Ch模数转换精度≤2.5 μV输入阻抗：≥50MΩ耐极化电压：≥±500mV共模抑制比：≥110dB频率响应：0.05Hz-150Hz（+0.4/-3 dB）标准灵敏度：10mm/mV, 误差≤±2%时间常数：≥3.2秒滤波器：低通滤波、肌电滤波、交流滤波、基线抑制滤波低通滤波75Hz, 100Hz, 150Hz 三档肌电滤波25Hz/35Hz 二档交流滤波50Hz或60Hz基线抑制强/弱二档增益/灵敏度选择：5，10，20mm/mV，手动或自动不正常状态检测：电极脱落报警，高频噪声过高报警电极脱落：液晶显示器显示脱落部位显示和记录显示方式：≥4.8"液晶显示显示分辨率：320x240显示导联数：同屏12导联，≥2.8s显示内容：程序型号、版本、日期和时间、走纸速度、灵敏度、导联名称、滤波器、患者信息（ID号码、年龄、性别）、计时标记、电极松脱、噪音等。
生化分析仪的常用检测方法
生化分析仪的常用检测方法
生化分析仪以机械化的设备模仿代替以前的手工操作，它的应用提高了工作效率，减少了主观误差，具有灵敏、准确、快速、标准化等特点，成为医院检验科必备的检测设备。
按照生化分析仪的结构原理，生化分析仪可以分为管道连续流动式、分立式、离心式和干片式等几种，目前临床最常用的是分立式生化分析仪，其常用检测方法包括终点法、固定时间法和连续监测法。
终点法：
被测物质在反应过程中完全被转变为产物，即达到反应终点，根据终点吸光度的大小求出被测物浓度，称为终点法。
终点法参数设置简单，反应时间一般较长，精密度较好
固定时间法：
指在时间-吸光度曲线上选择两个测光点，此两点既非反应初始吸光度亦非终点吸光度，这两点的吸光度差值用于结果计算，称为固定时间法。
该分析方法有助于解决某些反应的非特异性问题。
连续监测法：
又称速率法，是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时，连续选取时间-吸光度曲线中线性期的吸光度值，并以此线性期的单位吸光度变化值（ΔA/min）计算结果。
连续监测法的优点即是可以确定线性期并计算ΔA/min，根据此值再准确地计算酶活性，因而使自动生化分析仪在酶活性测定方面显著地优于手工法。
通常情况下，全自动的生化分析仪是几种检测方法并存，如海力孚的HF240-300全自动生化分析仪检测方法就包括终点法、动力学法、免疫比浊发、固定时间发、双试剂法等，仪器检测范围宽泛，是基层医院首选的医疗设备。
生化分析仪常用分析方法—课件
（二）固定时间法（fixed-time assay)
①概述 ②计算公式 ③临床应用
①概述
1）固定时间法（fixed-time assay):指在时间-吸光度曲线上选择两个 测光点，此两点既非反应初始吸光度，亦非终点吸光度，即样品和 试剂混合后读取延滞期后的吸光度A1和反应一定时间的吸光度A2， 这两点的吸光度差值用于计算结果。如图
样品处理系统
样品架和样品盘 试剂架和试剂盘 加液器：包括定量吸量器和加样针
搅拌器：由电机和搅拌棒组成
检测系统
光路系统：前分光光路、后分光光路 分光装置：滤光片和单色器
比色杯：反应杯 信号检测器：光电信号转换 恒温装置：保持恒温，25℃、30℃、37℃
清洗装置：吸液针、吐液针、擦拭刷经化学 反应后随着被测物的消耗吸光度下降。
②分类
分类
一点终点法 两点终点法
一点终点法（one point end assay)
1）定义：在反应达到平衡时选择一个测光点的吸光度计算待测物 浓度，主要用于单试剂的测定。如图
2）计算公式
Cu=Au×Cs/As=Au×K
2）快速反应干扰物：在样本中含有明显干扰待测物反应的物质时， 固定时间法能有效去除这些干扰，提高特异性。某些干扰物比待测 物更快与试剂发生反应。
3）慢反应干扰物：一些干扰物在待测物反应完全后才开始发生反 应。
②计算公式
C=（A2-A1）×K K为校准系数 K=Cs/As
③临床应用
主要应用于样本中有物 质明显干扰待测物反应 的情况，如苦味酸法测 定肌酐、溴甲酚氯法测 定血清白蛋白等
（三）自动生化分析仪检测项目
常包括肝功能、血糖、血脂、 肾功能、心肌酶谱、骨代谢、 尿蛋白等，例如AST、ALT、 GGT、LDH、TBA、TG、TC、 ALP、GLU、UREA、UA、LDL、 HDL、CK、TP等
全自动生化分析仪测量方法
全自动生化分析仪测量方法全自动生化分析仪测量方法全自动生化分析仪目前在测量血液常规项目时，是以比色法为主，主要原理是运用光谱技术中不同原子吸光不同而测量的，那么对于ISE模块的功能实现，主要有两种方法，一是比色法，二是间接法。
比色法因其测量精度，准确度等与所要求的相差太大，此法在医学的早期实验室检查中使用，已经是属于淘汰的用法。
间接法，其方法原理与目前市场上存在的其它仪器所用直接法相似，但ACA的脆弱性所致，为防仪器内部被堵塞，对样品的要求极为严格，需经常规分离再经稀释后方可测量，而一般的生化ISE模块对样品的稀释倍数又大都在30倍左右，在如此大的稀释倍数下，对管路确是有益，但从数据统计处理角度来看，这样的测量，将会把误差同比例放大，那么这样测到的结果，准确度和精确度不能达到要求。
另外，ACA所采用的间接法与目前其它仪器所采用的直接法的差异，在此引用一本检验行业的权威之作《临床生化检验》一书对此的描述：间接电位法：样品与标准液要用指定离子强度与pH的稀释液作定量稀释，再行测定，此时样品和标准液的pH和离子强度趋向一致，所测离子活度等于离子浓度，间接法所测结果与火焰法相似。
在高脂血症或高蛋白血症的血清样品中，由于单位体积血清中水量明显减少，若用定量样品作稀释后，再用间接法测定，会得到假性低血钠（或钾），但直接法能真实地反映血清中离子的活度，据报告：直接法比间接法约高2~4%。
通过对ACA的了解，也发现ACA对使用者的解放度不够，想人类自从走上电子电器时代，辅助电子产品的宗旨之一就是解放人的时间，而ACA仪器，因庞大而复杂的系统，在检测操作前有预热、校正、模块检测、纯水检测、系统试剂检测等诸多繁杂工作要准备，此为常态流程，但若仪器再出故障，工作量势必会大幅增加。
尽管为全自动工作仪器，但却不利于检验科室工作的顺利进行，以大型三甲医院为例，每天的病患标本多则上百，若仅在ACA 上花费如些之多的时间，工作的开展将使效率大大降低。
生化仪测定的方法
生化仪测定的方法1.终点法（endessay）完全被转化成产物，不再进行反应达到终点，取反应终点的吸光度来计算被测物质的浓度。
生化检验中除酶和BUN、CRE外几乎都用终点法来进行检测。
1）.一点终点法：取反应达终点时的一个点的吸光度来计算结果。
2）.二点终点法：取反应尚未开始时读取一个点的吸光度，待反应达终点时再取第二点的吸光度。
用第二点吸光度减去第一点吸光度的差值来计算结果。
主要用于扣除试剂和样品空白。
保证结果的准确性。
一般双试剂用。
2.固定时间法（两点法）：是取尚在反应中的两点间的差值来计算结果。
此两点既不是反应起始点也不是终点。
主要用于检测一些非特异性的项目，如肌酐。
3.连续监测法（动力学法、速率法）：是在测定酶的活性或酶代谢产物时，连续取反应曲线中呈线性变化吸光度值（△;A/min）来计算结果。
因在反应线性时间内各点间的吸光度差值为零故又称谓零级反应。
生化仪测定相关内容1.样品：血清、尿液、脑脊液等。
2.试剂：单试剂、双试剂3.双波长：由主波长和副波长构成的两个波长。
可以消除在检测过程中的干扰。
4.校准品（标准）：比对未知样品的浓度5.质控品：用于生化仪在日常工作中对仪器、试剂等方面状态的监控。
全自动生化分析仪测试项目1.肝功类GPT/ALT(谷丙转氨酶) ALP(碱性磷酸酶) Alb(白蛋白)GOT/AST(谷草转氨酶) T-Bil(总胆红素) CHE (胆碱脂酶)TTT (麝香草酚浊度) D-Bil(直接胆红素) FB(纤维蛋白原)NH3 (血氨) TP(总蛋白)2.肾功离子BUN(尿素氮) K(血清钾) Na(血清钠)Cr(肌酐) Fe(血清铁) Ca(血清钙)UA(尿酸) Mg(血清镁) Cl(血清氯)CO2-Cp(二氧化碳结合力) Zn(血清锌) P(血清磷)血糖血脂T-CHO(总胆固醇) HDL-C(高密度脂蛋白胆固醇)TG(甘油三脂) LDL-C(低密度脂蛋白胆固醇)GLU(血糖)心肌酶谱CK(肌酸激酶)LDH(乳酸脱氢酶)GOT(谷草转氨酶)3.其他a-Amy a淀粉酶Hb血红蛋白免疫球蛋白、毒物、类风湿因子等用光学比浊法的都可以用在全自动生化上进行检测。