苯扎溴铵消毒湿巾杀菌效果与毒性实验研究_翟文慧
消毒剂消毒效果的验证报告
消毒剂消毒效果的验证组长：***组员：*** ****** ****** ****** ******编号：201412151135版次：2014 年第 1 版目录1．概述 (3)1.1消毒剂 (3)1.2消毒剂使用说明 (3)2．验证目的 (3)3．验证容 (4)4．验证组织 (4)4.1验证小组 (4)4.2验证委员会 (5)5．验证实施步骤 (5)5.1验证前准备 (5)5.2验证所需文件资料 (5)5.3悬液法定量杀灭试验 (6)5.4对裸手消毒效果试验 (7)5.5消毒剂对佩戴手套后的消毒效果验证 (9)5.6消毒剂对物体表面消毒效果验证 (12)5.7消毒剂消毒效果验证结论 (15)6．验证主要依据 (15)7．验证合格标准 (15)7.1判断标准 (15)7.2现场考察试验合格标准 (15)8. 再验证周期 (16)附录 (16)附录一验证方案会审记录 (16)附录二验证方案修改申请及批准书 (17)附录三漏项和偏差处理记录 (18)附录四悬液法定量杀灭试验记录 (19)附录五消毒剂对佩戴手套后人员手现场试验记录 (22)1．概述1.1 消毒剂消毒剂的作用原理：破坏细胞膜类，阻断细胞食物摄取和废物排泄，钝化关键酶。
以下是几种常用的消毒剂：（1）新洁尔灭(苯扎溴铵)：是一种常用的季铵盐类消毒剂，在浓度较低时即可有抑菌的作用；当浓度较高时，可以杀灭多种细菌繁殖体和部分的病毒，但是不能杀灭细菌芽孢，属于低效消毒剂。
（2）75%乙醇：适用于一般物体表面消毒以及手和皮肤的消毒，它无法杀灭细菌芽孢和病毒。
（3）优洁：属于长效、强效、广谱杀菌剂，是一种新型消毒剂，其有效成分为复合季铵盐和六亚甲基四胺，可有效快速地杀灭细菌繁殖体、芽孢、真菌和部分病毒等，各种微生物对其均无抗药性，抑菌时间较长，可用于一般物体表面消毒，稳定性好，无腐蚀性，无毒无害，并且由于杀菌时不受蛋白质及有机物的干扰，故使用衰减周期长，可循环使用，相对使用成本低。
苯扎溴铵
苯扎溴铵
化学名称：十二烷基二甲基苄基溴化铵
别名：苯扎溴铵；新洁尔灭(90%含量商品名)
性质
本品为黄白色蜡状固体或胶状体。
易溶于水，微溶于乙醇。
具有芳香气，味极苦。
具有典型阳离子表面活性剂的性质，水溶液搅拌时能产生大量泡沫。
性质稳定，耐光，耐热，无挥发性，可长期存放。
用途
本品为最常用的表面活性剂之一，具有洁净、杀菌消毒和灭藻作用，广泛用于杀菌、消毒、防腐、乳化、去垢、增溶等方面，是迄今工业循环水处理常用的非氧化性杀菌灭藻剂、黏泥剥离剂和清洗剂之一。
在用于循环水系统的微生物控制与清洗时，本品与洁而灭具有相似的活性，但在同等试验情况下，本品比洁而灭具有更好的杀菌活性。
例如在
10mg/L有效物的用量下，本品对异养菌的杀灭率为98.9%，而洁而灭对异养菌的杀灭率为98.3%。
此外，本品比洁而灭具有更低的毒性，具有同样的使用注意事项，在通常使用情况下，其使用浓度为50～100mg/L。
本品对杀菌灭藻有高效、毒性小、可溶于水、不受水硬度影响、使用方便、成本低等优点。
【注意事项】(1)禁止与普通肥皂配伍。
(2)不适用于膀胱镜、眼科器械、橡胶及铝制品的消毒。
理化性质：属于阳离子表面活性剂，季铵盐类，水溶液呈碱性，性状稳定
药理作用：能降低水溶液表面张力，改变细菌细胞膜的通透性，使细菌蛋白质变性。
应用：抗菌谱广，对革兰氏阴性、阳性菌都有杀灭作用，对病毒效果差，对霉菌、芽孢无作用。
还可用于杀灭虾蟹固着类纤毛虫。
注意事项：不能再酸性环境使用。
常与戊二醛混合使用。
中药洗剂中非法添加的苯扎溴铵检测方法研究_陈卫平
’ () 苯扎溴铵 对照品溶液 阳性对照品溶液 供试品溶液 高效液相色谱图
>! ? 《 中国药典 （ 二部 ） 》 《 中国医院制剂 参照 !$$" 年版 和第 ! 版 ># ? 》 规范 ， 将苯扎溴铵液浓缩后检测溴离子， 并以 $) $"3 苯扎溴铵
溶液作对照， 结果供试品溶液呈极弱阳性反应， 对照品溶液呈明显 《 中国药典 （ 二部 ） 》 的正反应。 参照 !$$" 年版 ， 用紫外光谱扫描法 鉴别 ， 并 用苯 扎 溴 铵溶 液 作对 照 ， 在 !"$ = !8$ 16 波 长 范 围 内扫 描， 结果因样品中含复杂的中药成分， 吸收本底较高， 样品溶液在 而对照品溶液在这两处有 !C! 16 和 !C4 16 波长处无最大吸收峰， 最大吸收峰。 可见， 采用化学分析法与紫外光谱扫描法的干扰多， 结 果不明显。 经过摸索， 采用高效液相色谱法， 在 !($ 16 波长处检测， 以苯扎溴铵溶液作对照。 结果样品溶液色谱图中， 苯扎溴铵保留时 间相应位置上未见色谱峰。 参考文献：
- 收稿日期： 修回日期： #((0 * ($ * ## ； #((" * && * #( .
中国药业 !"#$% &"%’(%)*+,#)%-.ຫໍສະໝຸດ ・!"・%
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!) (5 ( 溴鉴别 （( ! ($$ ） 取 "3 苯扎溴铵溶液 加稀硝酸溶液 ( 67， 生成 " 67， 水浴蒸至近干， 加水 !" 67 溶解， 用 白色沉淀。 取金归洗液 "$ 67， 取滤液 ($ 67， 加稀硝酸溶液 ( 67， 生成白 $) 8 !6 微孔滤膜过滤， 色沉淀， 管壁变模糊， 管底有少许沉淀， 倾 9 $$$ : ; 6.1 离心 #$ 6.1， 出上清液后加乙醇， 管壁即清， 但管底沉淀难溶解。 取上清液， 加硝 酸银试液 ( 67， 生成白色沉淀； 取沉淀分为 ! 份， 一份加氨试液后 沉淀微溶， 另一份加稀硝酸试液后沉淀几乎不溶。 !) (5 ! 季铵盐鉴别 （( !($$ ） 取 "3 苯扎溴铵溶液 加氯试液 ( 67、 氯仿 ! 67 " 67， 振摇， 静 置分层 ， 氯 仿层 显淡黄 色。 取 金归 洗液 "$ 67 ， 水浴 蒸发 至 (" 67， 滤过， 取滤液 # 份， 一份加 ( 67 水作为空白对照液， 一份 加 "3 苯扎溴铵溶液 ( 67 和氯试液 ( 67 作为加样对照液， 一份加 静置分层， 加样对照液的氯 氯试液 ( 67。 # 份各加氯仿 ! 67 振摇， 仿层显淡黄棕色， 另两管氯仿层同显黄色。 !$ ! !) !) ( 仪器分析法 紫外光谱扫描法 置 ($$ 67 量瓶中， 加水稀释至刻度， 摇 取金归洗液 $) ! 67， 匀， 作为供试品溶液； 另取 "3 苯扎溴铵溶液约 ( - ， 置 ($$ 67 量瓶 中， 摇匀， 制成每 ( 67 溶液中含 $) " 6- 的溶液， 作为对照品溶液。 用紫外 < 可见分光光度法在 !"$ = !8$ 16 波长范围内扫描。 !) !) ! 高效液相色谱法 > ( ? （!"$ 66 B 9) C 66D 色谱条件： 色谱柱为 %-./012 @A& < ’(8 柱 ； 流动相为 $) $! 6E/ ; 7 庚烷磺酸钠溶液 + 含 $) (3 三乙胺， 用 " !6） 磷酸调 FG 至 #) 9" H $) ( , < 乙腈 + #" I C" , ； 流速为 () $ 67 ; 6.1； 柱温 检测波长 !($ 16； 进样量 !$ !7。 #$ J ； 水浴蒸干， 加水溶解并稀释至 测定方法： 取金归洗液 "$ 67， 用 $) 8 !6 微孔滤膜过滤 D 再用 $) 9" !6 微孔滤膜 !" 67 量瓶中， 过滤， 作为供试品溶液。 另 精 密 量 取 "3 苯 扎 溴 铵 溶 液 ! 67 ， 置
苯扎溴铵消毒液杀菌试验观察
苯扎溴铵消毒液杀菌试验观察王艳萍【摘要】[目的]探讨苯扎溴铵消毒液对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、绿脓杆菌的杀菌效果.[方法]采用工作液直接接种法进行试验观察.[结果]苯扎溴铵对大肠埃希菌、绿脓杆菌基本无杀菌作用,对金黄色葡萄球菌有良好的杀菌效果,且应选择浓度≥0.10％的苯扎溴铵作用10 min以上具有完全杀菌效力.[结论]苯扎溴铵浓度≥0.10％时,适用于对金黄色葡萄球菌消毒.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2014(000)020【总页数】2页(P6530-6531)【关键词】苯扎溴铵;杀菌作用;金黄色葡萄球菌【作者】王艳萍【作者单位】江阴职业技术学院化学纺织工程系,江苏江阴214405【正文语种】中文【中图分类】S188苯扎溴铵为最常用的表面活性剂之一，具有洁净、杀菌、消毒的作用。
不同浓度稀释液可用于外科手术前洗手、皮肤消毒和霉菌感染、黏膜消毒、创口感染的洗涤消毒[1]，具有高效、毒性小、可溶于水、不受水硬度影响、使用方便、成本低等优点。
实验室对消毒剂杀菌效力的测定方法通常参照美国政府农业化学师友会(AOAC)制定的消毒剂效力测定方法。
标准验证消毒剂效力的方法有载体试验法、表面试验法、工作液直接接种法3种[2]。
该研究将采用工作液直接接种法进行苯扎溴铵的效力验证。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 试验用菌种。
有金黄色葡萄球菌(CMCC 26003)、大肠埃希菌(ATCC 25922)、绿脓杆菌(ATCC 15442)3种。
1.1.2 培养基和稀释剂。
有营养琼脂培养基、营养肉汤培养基、0.9%无菌氯化钠、pH 7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液。
营养肉汤培养基按干粉培养基说明书配制、分装，于121 ℃高压蒸汽灭菌后备用[3]。
取氯化钠9.0 g，加纯化水溶解至1 000 ml，过滤，分装至试管中，于121 ℃，20 min高压蒸汽灭菌后备用，制得浓度0.9%无菌氯化钠。
取磷酸二氢钾3.56 g、磷酸氢二钠7.23 g、氯化钠4.3 g、蛋白胨1 g，加纯化水1 000 ml[4]，然后加热溶解，过滤，分装至试管中，于121 ℃，20 min高压蒸汽灭菌后备用[5]，制得pH 7.0氯化钠-蛋白胨缓冲剂。
苯扎溴铵的说明书
苯扎溴铵的说明书背景及概述[1][2]苯扎溴铵，别名新洁尔灭、溴苄烷铵，为一种季铵盐阳离子表面活性广谱杀菌剂，具有杀菌作用强而快，毒性低，对皮肤和组织无刺激性，渗透力强，对金属、橡胶制品无腐蚀作用等特点。
苯扎溴铵能有效地杀灭多种非芽孢型致病性革兰阳性菌、阴性菌和某些真菌，它有较强的浸润渗透性，有助于消灭刚进入组织的细菌；无腐蚀性和刺激性，对组织无损害，不影响组织愈合，不增加瘢痕形成，无全身性毒副作用。
本组在常规清创的同时，加用苯扎溴铵加强局部清创处理，临床取得了较好效果。
苯扎溴铵的作用较慢，在应用时应让其在伤口内停留数分钟，以充分发挥其杀菌、浸润、渗透作用；另外，苯扎溴铵是一种季铵盐阳离子表面活性剂，使用时应避免与肥皂、人工合成洗涤剂等物质直接接触，以免降低药效。
规格[3]溶液剂：0.1%～0.2%；酊剂：0.1%；贮备液：5%，10%，50%～60%。
应用[3-4]①表浅伤口、黏膜消毒：用0.01%～0.05%溶液剂。
②术前洗手：用0.05%～0.1%溶液剂浸泡5分钟。
③膀胱和尿道灌洗：用小于0.005%浓度的溶液剂。
④术前皮肤(包括会阴部)消毒：用酊剂局部涂布。
⑤物品表面消毒：用0.1%～0.5%溶液剂浸泡或擦拭30分钟。
具体如下：1）治疗老年真菌性阴道炎：取 0. 1% 苯扎溴铵溶液适量，坐浴和阴道内冲洗各 15 分钟，1 次 /日，连续用药 20～30 天即可治愈。
随访 1～2 年，均未见复发。
2）治疗女阴尖锐湿疣：患者取膀胱截石位，暴露病变部位，取无菌纱布块浸透5% 苯扎溴铵液后塞入阴道，使其与病变处密切接触，其他部位也可用纱布湿敷，12～24 小时后将纱布取出，用1：5 000高锰酸钾溶液熏洗外阴，1 次 / 日，同时外用及口服抗生素 3～7 天以防感染及外阴粘连。
若病变如呈团块或大乳头形者，可先切除，再用上法治疗。
对于有合并症者，宜对症处理。
苯扎溴铵对阴道内壁、宫颈及小阴唇等部位尖锐湿疣效果较好，对其他部位因苯扎溴铵纱布难放置，与病变处接触不良者，效果较差。
0.2%苯扎溴铵溶液消毒效果验证
[3] 吴烈钧. 气相色谱检测方法[M]. 北京：化学工业出版社，2001： 191-192.
食品与药品 Food and Drug 2010年第 12卷第11期
431
东医疗器械）；YX-400B不锈钢双层立式蒸汽压力消 毒器（上海三申）。 1. 2 用具
QU Jian-quan, QU Jing, SONG Xiao-hong, LI Mei-yan (Shandong Freda Biopharm Co., Ltd., J inan 250101, China) Abst r act: Obj ect ive To validate the disinfectant effi cacy of 0.2% bromogeramine solution. M ethods The quantitative suspension test was carried out to validate the disinfectant efficacy of 0.2% bromogeramine solution for Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Candida albicans, respectively. Result s The three tests showed the sterilization rates of 0.2% bromogeramine solution for Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Candida albicans were all greater than 99.9%. Conclusion The 0.2% bromogeramine solution can be used for the disinfection of bacteria and fungi. Key Words: bromogeramine; disinfection; sterilization rate
苯扎溴铵溶液的稳定性观察
苯扎溴铵溶液的稳定性观察【摘要】目的：评价在常温和0 ℃下存放的苯扎溴铵(新洁尔灭)的杀茵效果。
方法：采用厂家3个批号的苯扎溴铵，分别于常温和0 ℃下存放24 h。
稀释成1∶50浓度后，将3种标准菌株置于其中，分别在作用5，10，15，30，60，120 min 后取出药液，倾入培养基，置35 ℃培养箱培养48 h，观察菌株的存活情况。
结果：经两种温度、不同时间的菌株培养结果观察，苯扎溴铵的杀菌效果一致，均能快速杀灭3种标准菌株。
结论：苯扎溴铵消毒液保存在0 ℃下，不影响其杀菌效力，只要在保质期内，结冰的消毒液仍可使用，其性能稳定。
【关键词】苯扎溴铵；结晶；稳定性苯扎溴铵(新洁尔灭)溶液制剂浓度为5％，在临床上经稀释后用于消毒，在制剂中用于防腐。
由于我国幅员辽阔，各地气候差异较大，尤其冬天气温降低，导致苯扎溴铵溶液瓶中常有白色沉淀物析出。
虽然药厂在药品使用说明书中已做解释，如有沉淀，要求在临用前用温热水使其溶解，方可使用。
但许多用户仍打电话询问，对其杀菌效力表示怀疑。
为确保苯扎溴铵溶液用于制剂时的质量合格和用于消毒杀菌时的有效性，笔者将有和无白色沉淀物的瓶装苯扎溴铵溶液进行了杀菌效力考察[2]，报道如下。
1 试验材料培养基：麦康凯培养基（批号为0510262）、甘露醇培养基（批号为050819）、营养肉汤培养基（批号为040510）、十六烷甲基溴化铵培养基（批号为060112），0.1％蛋白胨水溶液（批号为060302），均来源于中国药品生物制品检定所。
菌种：枯草芽胞杆菌[CMCC(B)63501]、金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、铜绿假单胞菌[CMCC(B)10104]，均来源于中国药品生物制品检定所。
样品：苯扎溴铵溶液，规格为500ml/瓶。
浓度为5％(批号为20060901，20060902，20060903)，均由重庆市渝生制药厂提供。
2 方法和结果2.1 菌液制备：分别取枯草芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物少许，接种至营养肉汤培养基中，经35 ℃培养16～18 h，取1 ml加0.9％无菌氯化钠溶液9 ml，备用。
新洁尔灭溶液治疗新生儿脓疱疹的效果观察
新洁尔灭溶液治疗新生儿脓疱疹的效果观察【摘要】目的探讨苯扎溴铵溶液（新洁尔灭溶液）对新生儿脓疱疹的治疗效果。
方法 40例新生儿脓疱疹患儿，分为治疗组和对照组，各20例。
治疗组患儿给予新洁尔灭溶液擦拭治疗，对照组患儿给予酒精擦拭治疗。
比较两组患儿对治疗方法的接受率及治疗效果。
结果治疗组患儿对治疗方法的接受率为65%，高于对照组的20%，差异具有统计学意义（P<0.05）。
治疗组患儿治疗总有效率为90%，高于对照组的60%，差异具有统计学意义（P<0.05）。
结论采用0.02%的新洁尔灭溶液治疗新生儿脓疱疹，毒性低、刺激小，新生儿表现较为安静，治疗较为快速。
【关键词】新洁尔灭；新生儿；脓疱疹；护理治疗DOI：10.14163/ki.11-5547/r.2017.17.078新生儿脓疱疹又常称为新生儿天疱疮，在新生儿中常见，是一种急性化脓性皮肤病，常在出生后1～2 d出现，皮疹大小不等，呈边缘不清的多形红斑，极易并发新生儿脓疱疮，若处理不及时，甚至可引发败血症或脑膜炎等[1，2]。
近来通过观察在本院就诊的患儿，发现使用新洁尔灭并配合温水洗浴对该病症有较好的治疗效果。
现报告如下。
1 资料与方法1. 1 一般资料选用北京航天总医院儿科2007年10月～ 2010年10月足月分娩1～10 d的新生儿脓疱疹患儿40例，其中阴道分娩32例，剖宫产8例，患儿体重3000～4000 g， Apgar评分≥8分，所选患儿母亲孕期无妊娠并发症，患儿面部、四肢、胸背部均散在大小不等的脓疱疹。
将40例患儿分为治疗组和对照组，每组20例。
1. 2 方法1. 2. 1 治疗方法治疗组患儿采用新洁尔灭溶液擦拭，新洁而灭溶液2 ml，加入洁净水100 ml，水温28～30℃，混匀后成0.02%的新洁尔灭溶液，由护士专人给患儿进行擦拭患处，持续约5 min完成，2次/d。
对照组新生儿沐浴完毕后用75%的酒精擦拭脓疱疹，两组治疗3 d后，疗效观察。
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公共卫生苯扎溴铵消毒湿巾杀菌效果与毒性实验研究翟文慧,王万海,张聪恪,刘吉起河南省疾病预防控制中心 郑州市 450016摘要 目的 了解苯扎溴铵消毒湿巾的杀菌效果和毒性。
方法 按卫生部 消毒技术规范 (2002年版)有关要求,对苯扎溴铵消毒湿巾有效成分含量、杀菌效果及毒性进行检测评价。
结果 经检测,该消毒湿巾苯扎溴铵含量为3 60g/L,经37 90d存放后,苯扎溴铵含量为3 49g/L,下降率为3 05%,有效期可定为两年;该样品p H值为5 90;微生物污染检验均符合要求;消毒湿巾样片对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌作用2m in,平均杀灭率为别为99 12%、99 32%、98 53%,作用5m i n、10m i n、20m i n,平均杀灭率均为100%;消毒湿巾样片对实验动物一次完整皮肤刺激试验属无刺激性;消毒湿巾样片对实验动物未见皮肤变态反应。
结论 该苯扎溴铵消毒湿巾杀灭微生物效果良好,各项毒性试验都符合要求,安全无毒。
关键词 苯扎溴铵;湿巾;杀菌效果;毒性中图分类号:R187 文献标识码:B 文章编号:1672 3422(2008)23 0042 03Experim ent al St udy on Germ ici dal Efficacy and Toxicity of Benzalkoniu m Bro m id D isinfectionW et TissueZ HAI W enhui,WANG W anhai,Z HANG Congke,et alH enan P rovincial Center for D isease Control and P revention,Zhengzhou450016,ChinaABSTRACT Objective To explore the ger m ic i d al e fficacy and tox icity of benza l k onium br o m i d d isi n fection w et tissue.M et hods Exa m i n ation and eva l u ation w ere conducted on the content of ef fective co m ponen,t ger m ic i d a l e fficacy,and tox icity acco r d i n g to Technical Standard For D isi n fection (2002) .Results The benza l k oniu m bro m i d conten t in disi n fection w et tissue w as3.60g/L,after stored at37 f o r90days,the content o f the benza l k onium bro m i d w as3.49g/L and decreased by3.05%,its expiration da te is2years,p H is5.90.The m icrob i o log ical conta m ination tests are in line w ith require m ents.The results sho w ed t h at the d isi n fection w et tissue sa m p le w ith a2m i n contact ti m e k illed99.12%of Staphy lococcus aureus,99.32%o fE sc herich i a coli and98.53%o fC and i d a a l b icans respectively.w it h a5m i n,10m i n and20m i n contact ti m e,the average k illing rate w as100%.In ani m a l tests,the der m a l irritation test w ith the d isinfection w et tissue sa m ple w as no t irr itati o n,and theskin sensitisation test w ith the d isinfection w et tissue sa mp le had not sensiti n g effec.t Conc l u sionB enza l k onium bro m id d isi n fection w et tissue has good ger m ic i d al efficacy and safety,The tox icity testsm eet the requ ire m ents.KEY WORDS Benzal k on i u m bro m id;W et tissue;Ger m ic i d al efficacy;Tox ic ity苯扎溴铵为阳离子表面活性剂类广谱杀菌剂[1],能改变细胞浆膜通透性,使菌体胞浆物质外渗,阻碍其代谢而起杀灭作用。
广泛应用于皮肤、黏膜的消毒[2]。
本试验以其为主要成分制成消毒液,以3.5g/L左右的浓度浸湿灭菌无纺布,制成3.0c m 3.0c m的试验用消毒湿巾,用塑膜密封包装。
为了解该产品的有关性能,了解此类产品反复使用的安全性,我们对苯扎溴铵消毒湿巾的稳定性、杀菌效果、毒性等指标作了试验观察及研究。
1 材料与方法1 1 材料 苯扎溴铵消毒液(3.5g/L左右);苯扎溴铵消毒湿巾:用苯扎溴铵消毒液浸湿灭菌无纺布制成,主要成分为苯扎溴铵。
42医药论坛杂志 2008年12月 第29卷 第23期1.1.2 试验用菌种 大肠杆菌(8099)、金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、白色念珠菌(ATCC10231)由军事医学科学院提供。
1.1.3 试验动物 日本大耳白兔,由中牧股份郑州生物药厂实验动物中心提供;白色豚鼠,由华中科技大学同济医学院实验动物部提供。
1.1.4 试剂 邻苯二甲酸氢钾标准缓冲溶液;混合磷酸盐缓冲溶液;0.02004m ol/L的四苯硼钠标准溶液;中和剂:10g/L甘氨酸+5g/L硫代硫酸钠+5g/L卵磷脂+20m l/L吐温80。
1 2 方法1 2 1 pH值测定 直接取苯扎溴铵消毒液,用p H S-3C型精密pH计测定样品p H值。
1 2 2 含量的测定 取苯扎溴铵消毒液25.0m,l 加蒸馏水50m l与氢氧化钠1m,l再加溴酚蓝指示液0.4m l与氯仿10m l。
用四苯硼钠标准滴定液滴定。
计算含量。
1 2 3 稳定性的测定 苯扎溴铵消毒湿巾经37 存放90d后,用1.2.2的方法测定含量,计算下降率。
1 2 4 微生物污染检验 取苯扎溴铵消毒湿巾0.5g加人4.5m l中和剂,按 消毒技术规范 (2002年版)测定细菌菌落总数、大肠菌群、真菌菌落总数、致病菌(金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、溶血性链球菌)。
1 2 5 菌液制备 取大肠杆菌(8099)、金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、白色念珠菌(ATCC10231)等菌株的第5-6代的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物(18h~24h),用5m l0.03m o l/L磷酸盐缓冲液(PBS)洗下菌苔,使菌悬液均匀后用上述PBS稀释至所需浓度。
1 2 6 中和剂选择试验[3] 试验用苯扎溴铵消毒湿巾样片(2.0c m 3.0c m),用金黄色葡萄球菌和白色念珠菌菌悬液进行试验。
试验分为6组:1消毒剂+菌悬液;2(消毒剂+菌悬液)+中和剂;3菌悬液+中和剂;4(消毒剂+中和剂)+菌悬液;5稀释液+菌悬液;6稀释液+中和剂+培养基作为阴性对照。
结果判定,当第1组无菌生长或有少数菌生长,第2组菌数较第1组为多,但较第3、4、5组为少,第3、4、5组间菌数误差率 15%,第6组无菌生长,表明所选中和剂及其浓度适宜。
1.2.7 载体浸泡定量杀菌试验[3] 在试验温度20 1 条件下,取苯扎溴铵消毒湿巾样片和对照样片(不含抗菌成分,其他同试验样片,且经灭菌处理)各4片,分成4组置于4个无菌平皿内,取菌液分别在每个被试样片和对照样片上滴染100 ,l计时2、5、10、20m i n,用无菌镊将样片投入含5.0m l中和剂的试管中,充分混匀,分别吸取0 5m l置于两个平皿,用40 ~45 的营养琼脂倾注,37 1 培养48h作活菌菌落计数。
试验重复3次,计算杀菌率。
评价标准:杀菌率 90%,产品具有杀菌作用。
1.2.8 一次完整皮肤刺激试验 取体重2~3kg 的雄性日本大耳白兔3只,试验前将动物背部脊柱两侧左、右各约3c m 3c m的毛去掉,采用自身对照法,将苯扎溴铵消毒湿巾样片覆于一侧所暴露的皮肤上,另一侧作对照,4h后用温蒸馏水去除残留受试物。
分别于去除受试物后的1h、24h、48h观察皮肤刺激反应。
1.2.9 皮肤变态反应试验 取200~300g的白色豚鼠32只,雌雄各半,试验前将豚鼠背部左右两侧3c m 3c m范围内去毛,将苯扎溴铵消毒湿巾样片贴在左侧去毛区,持续6h。
第7d和第14d以同样方法重复一次。
末次诱导后14d,将苯扎溴铵消毒湿巾样片贴在右侧去毛区,持续6h后洗去受试物。
24h和48h后观察皮肤反应。
2 结果2 1 p H值测定 苯扎溴铵消毒湿巾p H值为5 90。
2 2 含量及稳定性的测定 苯扎溴铵消毒湿巾中苯扎溴铵含量为3.60g/L。
经37 存放90d后含量为3.49g/L。
下降率为3.05%,贮存有效期可定为二年。
2 3 微生物污染试验 苯扎溴铵消毒湿巾的细菌菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、溶血性链球菌、真菌菌落总数均符合 消毒技术规范 (2002年版)的规定。
2 4 中和剂试验 可用10g/L甘氨酸+5g/L硫代硫酸钠+5g/L卵磷脂+20m l/L吐温80的磷酸盐缓冲溶液中和该苯扎溴铵消毒湿巾中的苯扎溴铵,且中和剂及中和产物对金黄色葡萄球菌及白色念珠菌及培养基无影响。
见表1。
表1 中和剂选择试验结果组别3次试验平均回收菌量(cf u/m l)金黄色葡萄球菌白色念珠菌1消毒剂+菌悬液002(消毒剂+菌悬液)+中和剂1573273菌悬液+中和剂2.30 1042.40 1044(消毒剂+中和剂)+菌悬液2.19 1042.24 1045稀释剂+菌悬液2.40 1042.46 1046稀释液+中和剂+培养基00注:金黄色葡萄球菌中和剂选择试验第3、4、5组误差率为3 19%;白色念珠菌中和剂选择试验第3、4、5组误差率为5 66。