微生物学实验设计书
微生物学实验指导书(1-5)
微生物学实验指导书目录实验一实验室环境和人体表面微生物的检查 (2)实验二普通光学显微镜的使用和细菌的简单染色 (5)实验三细菌的革兰氏染色和芽孢染色 (12)实验四放线菌和真菌的制片、染色和形态观察 (16)实验五酵母菌形态观察与死活细胞鉴别及显微镜直接计数法 (20)生命科学学院微生物学教研室编写实验一实验室环境和人体表面微生物的检查微生物以其微小的形体广泛地分布在自然环境的各个角落，包括空气、土壤、水、动植物、人体的体表和某些脏器。
在有人群活动的场所，特别是人口密度相对大的一些地方，如：商场、影剧院、会议室、教室、实验室等都会散落着细菌的营养体、芽孢和霉菌的孢子。
只不过因为它们体积太微小（细菌的大小在1~10μm之间），远远低于人肉眼的分辨极限（人眼的正常分辨能力一般为0.25mm，即250μm），而看不见它们，但它们确实真实存在。
由于空气、器具、器皿、人体体表等处缺乏微生物进行繁衍所需要的足够水分和营养物，它们只是“暂居”于此。
一旦满足它们的营养要求，在适宜的温度条件下，它们将迅速地生长、繁殖，其“子孙后代”将会聚集在一起，形成一个人眼可见的群体——菌落。
不同微生物形成的菌落差异很大，人们可根据菌落的形状、大小、质地、颜色对它们进行表观的判断和认识。
不同环境条件中栖息的微生物有所不同，有些是对人无害的腐生菌，有些是致病菌，有些则是改变条件才可致病的条件致病菌。
本实验是对初学者的入门实验，通过从实验室内空气、实验者的头发、皮肤、手指、钱币等处取样，接种于营养琼脂培养基，37°C培养1~2天，可验证微生物的存在，并观察微生物菌落的形态和数量。
一、实验器材1.培养基肉膏蛋白胨琼脂平板。
2.溶液和试剂无菌水。
3.仪器和其他用品灭菌湿棉签，试管架，酒精灯，记号笔，镊子，废物缸等。
二、目的要求1.通过实验确证在实验室内的空气、器、物和人体体表上存在着微生物。
2.比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型，观察不同类群微生物的菌落形态特征。
医学微生物学实验课程设计
科学思维：通过观察、分 析、归纳和总结，培养科 学的思维方式和研究方法
实验设计能力：学会设计 合理的实验方案，提高实
验效率和准确性
团队合作能力：通过小组 合作，学会与他人沟通、
协作和解决问题
掌握微生物学的基本理论和实 验技能
学会设计和实施实验方案
培养观察、分析和解决问题的 能力
提高团队合作和沟通能力
01
02
03
04
课程内容
实验材料：显微镜、培养皿、 细菌、真菌等微生物样本
实验目的：观察微生物的形 态和结构
实验步骤：制备样本、观察、 记录结果
实验结果：描述微生物的形态 和结构特征，分析其生长环境
和生理特性
实验目的：了解微生物的 生理生化特性
Байду номын сангаас
实验材料：微生物培养基、 微生物菌种、实验仪器等
实验步骤：培养微生物、 观察微生物生长情况、检 测微生物生理生化指标等
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实验操作规范： 遵守实验室规章 制度，正确使用
仪器设备
实验结果准确性： 实验数据准确， 实验结果与预期 相符
实验报告撰写： 实验报告完整， 数据记录清晰，
结论明确
团队合作与沟通： 与团队成员有效 沟通，共同完成 实验任务
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实验操作技能：包括实验仪器的使 用、实验材料的处理等
创新意识的培养： 通过实验设计、 数据分析和结果 评估，培养学生 的创新思维和解 决问题的能力。
团队协作精神的 培养：通过分组 实验、讨论和合 作，培养学生的 团队协作精神和 沟通能力。
实验技能的培养： 通过实际操作和 观察，培养学生 的实验技能和动 手能力。
微生物学实验教程第二版课程设计
微生物学实验教程第二版课程设计引言微生物学作为一门基础生物学科学，其重要性不言而喻。
近年来，随着科技的飞速发展，人类对于微生物学的认识也在不断提高。
微生物学实验教程就是在此背景下产生的。
本课程设计是微生物学实验教程第二版的课程设计，旨在帮助学生深入了解微生物学实验相关知识，提高他们的实验操作能力，同时也为未来研究和应用微生物学打下坚实的基础。
课程设计目标1.培养学生对微生物学实验基础知识的掌握和理解；2.提高学生实验操作技能和实验数据分析能力；3.强化学生实验安全意识和责任心；4.培养学生的团队协作精神。
课程设计内容课程设计的内容主要包括以下四个方面：实验室基础知识在进入实验室进行微生物学实验之前，学生需要掌握实验室基础知识，包括实验室安全规定、实验室仪器的使用方法和实验室常用试剂的基础知识等。
基本实验技能微生物学实验主要包括无菌技术、凝胶电泳、PCR扩增、酶切、蛋白质电泳等。
针对这些实验，需要学生掌握基本的实验操作技能，如样本采集、处理等，也需要学生掌握这些实验所需要的仪器和试剂的使用方法。
实验数据分析实验结果的分析是实验的重要部分。
学生需要能够利用所学知识对实验数据进行分析和解释，从而得出相应的结论。
在实验过程中，学生还需要理解和掌握实验数据处理技术。
团队协作微生物学实验通常需要团队协作完成。
在学生的实验过程中，需要加强团队协作意识，学习如何与实验室同伴和指导教师合作，互相帮助，共同完成实验。
课程设计方法针对上述课程设计内容，我们设计以下教学方法：讲授课程教师讲授微生物学实验的基础知识和实验操作方法，包括如何收集样本、处理样本、采样等等。
学生应该密切关注课程内容，积极参与讨论。
实际操作通过实验室实际操作，帮助学生掌握实验技能，包括无菌技术、凝胶电泳、PCR扩增、酶切等技能。
学生应该在实验中仔细观察、思考，提高实验操作技能和实验数据分析能力。
分组实验分组实验可以提高学生的团队协作精神。
在小组之间进行协作，提高了学生的团队协作能力，也可以互相学习彼此的实验技能。
(完整版)微生物学实验指导书
03微生物在自然界和人类生活中的作用阐述微生物在生态系统、工业生产、医疗卫生等领域的重要性。
01微生物的定义与分类包括细菌、真菌、病毒等微生物的基本概念和分类方法。
02微生物的生物学特性介绍微生物的形态、结构、生理生化特性等。
微生物学概述01实验室安全制度包括实验室安全守则、危险标识识别、紧急情况下的应对措施等。
02实验操作规范介绍实验前准备、实验过程中的操作规范、实验后清理等注意事项。
03生物安全阐述生物安全的概念、生物安全级别的划分及相应防护措施。
实验室安全与规范介绍显微镜的种类、使用方法和维护保养。
显微镜介绍离心机的类型、使用方法和维护保养。
离心机阐述培养箱和摇床的工作原理、使用方法和注意事项。
培养箱与摇床包括分光光度计、电泳仪、PCR 仪等设备的简要介绍和使用方法。
其他常用设备常用仪器与设备实验报告格式包括标题、作者、摘要、正文、结论、参考文献等部分的撰写要求。
数据处理与图表制作介绍数据处理的方法、图表的制作规范及注意事项。
实验结果分析与讨论阐述实验结果的分析方法、讨论实验结果的合理性及可能存在的问题。
实验报告提交与评审说明实验报告的提交方式、评审标准及相关注意事项。
实验报告撰写要求03根据实验需求，选择适当的培养基类型，如营养琼脂、马丁氏琼脂等。
选择合适的培养基按照培养基配方准确称量各成分，加入蒸馏水或去离子水，加热溶解后调整pH 值。
配制培养基将配制好的培养基分装到试管、培养皿等容器中，采用高压蒸汽灭菌法或干热灭菌法进行灭菌处理。
培养基分装与灭菌培养基制备与灭菌微生物接种与培养接种前准备准备好无菌操作台、无菌接种环、酒精灯等接种工具，确保无菌操作环境。
微生物接种采用划线法、倾注法等方法将待测微生物接种到培养基上。
培养条件设置根据微生物的生长需求，设置好培养温度、湿度和光照等条件。
观察前准备准备好显微镜、载玻片、盖玻片等观察工具，确保无菌操作环境。
微生物形态观察通过显微镜观察微生物的形态、大小、排列方式等特征，记录并描述观察结果。
2024年度年微生物学实验教案
微生物培养方法与技术
无菌操作技术
包括灭菌、消毒、无菌操作等 ，是微生物实验的基本技能。
2024/2/2
纯培养技术
通过分离和纯化方法获得单一 菌种的过程，包括平板划线法 、稀释涂布平板法等。
培养基制备技术
根据不同微生物的营养需求制 备不同类型的培养基，如固体 培养基、液体培养基等。
微生物接种技术
2024年微生物学实验教案
2024/2/2
1
目录
2024/2/2
• 实验教学目标与要求 • 微生物学实验基础知识 • 常见微生物实验操作演示 • 学生分组实验操作指导 • 实验中常见问题及解决方案 • 实验考核评价标准与反馈机制
2
01
实验教学目标与要求
2024/2/2
3
知识与技能目标
掌握微生物学实验的基本操作 技能，如无菌操作、显微镜使 用、细菌培养等。
2024/2/2
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抗生素效价测定方法演示
2024/2/2
实验目的 实验原理 操作步骤 注意事项
了解抗生素效价测定的原理和方法，能够准确测定抗生素的效 价。
抗生素效价测定是通过比较标准品和供试品对微生物的抑制作 用来测定抗生素的效价。常用的方法有管碟法和浊度法。
包括制备标准品和供试品溶液、接种微生物、加样、培养、观 察结果等步骤，需掌握加样技巧和观察方法。
细菌污染处理
一旦发现细菌污染，应立即停止实 验，对污染原因进行调查，并采取 相应的处理措施，如重新准备样品 、更换实验器材等。
24
实验器材使用不当导致误差调整策略
01
正确使用实验器材
实验前应熟悉实验器材的使用方法和注意事项，避免因使用不当导致误
差。
微生物学实验设计方案
微生物学实验设计方案实验目的本实验的目的是通过设计一系列实验，加深对微生物学的理论知识的理解，培养学生的实验观察能力、数据分析能力和实验设计能力。
实验背景微生物学是研究微生物的分布、形态、结构、生理代谢、遗传学、进化以及与人类和环境的关系等方面的科学。
在微生物学实验中，主要研究微生物的生长、培养和鉴定等过程。
实验设计实验1：微生物的培养实验目的通过培养微生物，观察微生物的形态和生长情况。
实验步骤1.准备培养基：按照指定的比例配制含有必需营养成分的培养基。
2.消毒处理：将培养基装入试管中，进行高压蒸汽灭菌，杀死其中的细菌和真菌等。
3.接种微生物：使用无菌技术，将待培养的微生物接种到培养基中。
4.培养条件控制：将培养基加热到适宜的温度，并控制合适的氧气和湿度条件。
5.观察与记录：定期观察微生物的生长情况，并记录观察结果。
实验2：微生物的鉴定实验目的通过鉴定微生物，了解微生物的种类和特性。
实验步骤1.选取待鉴定微生物：从培养基中挑选出待鉴定的微生物。
2.形态观察：观察微生物的形态特征，包括菌落形状、颜色、边缘等。
3.细胞形态观察：采用显微镜观察微生物的细胞形态特征，如形状和大小。
4.生理生化特性测试：进行一系列实验，包括酸碱度、甲烷生成等，以确定微生物的生理生化特性。
5.鉴定结果分析：根据观察结果和实验数据，对微生物进行鉴定。
实验3：抗菌药物敏感性测试实验目的通过测试微生物对不同抗菌药物的敏感性，了解微生物的药物抗性情况。
实验步骤1.准备培养基：按照指定的比例配制含有不同抗菌药物的培养基。
2.制备试验菌液：选取微生物，并进行培养，制备试验菌液。
3.分配培养基：将试验菌液均匀涂抹在含有抗菌药物的培养基上。
4.培养条件控制：将分配好的培养基加热到适宜的温度，并控制合适的氧气和湿度条件。
5.观察与记录：观察每个培养基上微生物的生长情况，并记录生长结果。
6.结果分析：根据观察结果和记录数据，分析微生物对不同抗菌药物的敏感性。
《微生物学及实验》实验指导书
《微生物学及实验》实验指导书杨翔华主编辽宁石油化工大学环境与生物工程学院第一部分 实验目的《微生物学及实验》实验课是我院环境科学专业学生必修的一门重要的基础实验课，是学生进入我院实验室的第一门实验课。
《微生物学及实验》实验的目的是使学生掌握微生物学的基本实验方法和技术，正确的使用实验的仪器设备，在学生头脑中建立无菌概念和掌握无菌操作技能是最重要的内容，是学生进行后续课实验和研究的基础。
在目前的实验室条件和有限学时的情况下，得到微生物实验技术的基本操作和技能训练，培养学生动手操作能力和创新能力。
通过微生物学实验课教学，加深理解和巩固课堂所学的知识，熟悉微生物学实验的基本操作技术，了解微生物实验的基础知识。
通过微生物学实验培养学生观察、思考、分析问题、解决问题的能力，养成实事求是、严肃认真的科学态度、创新精神、创新思维和创新能力。
本实验指导书主要内容包括：微生物个体和菌落形态观察、染色方法、培养基制备和灭菌、无菌操作、微生物检测和分离、生理生化反应、影响微生物生长的因素和污染物微生物降解实验，水中微生物分布调查等内容。
同时也注意和环境微生物学的联系与区别。
整个实验课中贯穿了显微镜使用—灭菌方法—无菌操作—微生物菌种分离筛选鉴定、选育—微生物代谢作用这一主线。
微生物学需掌握的基本操作在实验中得到训练，同时加深了学生对所学微生物学基本概念的理解。
实验设计贴近生活，可以大大提高同学们学习微生物学的兴趣。
实验内容与目录如下：序 号实验名称 学时 实验类型 实验一光学显微镜的使用及活性污泥中生物相的观察 3 基础验证实验 实验二微生物的染色及观察 3 实验三培养基的制备和灭菌 3 实验四纯种微生物的分离、转种和培养 3 实验五有机污染物质的生物降解实验* 4 综合性实验 实验六 双歧杆菌口服液的发酵制备* 4 *注：实验六为选做实验。
第二部分微生物学实验室规则微生物学实验的对象大多为环境微生物，其中某些微生物对人体具有危害性，因此要求进入实验室后必须严格遵守以下实验室规则：1.进入实验室应先穿白大衣，离开实验室时要脱下白大衣，反折放回原处，不必要的物品不得带入实验室，必须带入的书籍和文具等应放在指定的非操作区，以免受到污染。
微生物实验设计
微生物实验设计一、实验目的本实验旨在探究微生物的生长条件以及对于不同环境因素的适应能力，通过设计不同的实验条件来观察微生物的生长情况，并进一步了解微生物的特性。
二、实验材料与方法1. 实验材料：- 不同种类的微生物培养基- 培养皿- 培养液（如葡萄糖液、肉汤等）- 恒温箱/恒温培养箱- 捞网、移液管等实验用具- 显微镜2. 实验步骤：a) 准备工作：- 对实验室以及实验器材进行消毒处理，确保实验环境的无菌状态。
- 准备不同种类的微生物培养基，并按照要求配制出培养液。
b) 实验设计：- 将培养基均匀倒入培养皿中，分成若干组。
- 在不同培养皿中分别加入不同的环境因素，如不同温度、不同酸碱度等。
- 在每个培养皿中接种相同数量的微生物，并标注清楚。
c) 实验观察：- 将培养皿置于恒温箱/恒温培养箱中，设置相应的温度和时间。
- 定期观察每个培养皿中的微生物生长情况，可使用显微镜进行观察。
- 记录不同实验条件下微生物的生长情况，包括菌落大小、颜色、密度等。
三、预期结果与讨论通过本实验设计，可以预期得到以下结果与讨论：1. 不同微生物对于温度的适应能力不同，某些微生物可能对较高温度更适宜生长，而另一些微生物则偏好较低的温度。
2. pH值的变化可能对微生物的生长产生显著影响，某些微生物可能更适应酸性环境，而另一些则适应碱性环境。
3. 不同培养基成分的变化可能导致微生物生长的差异，通过对比观察可以发现一些微生物的特殊营养需求。
4. 预期观察到微生物在适宜的条件下会迅速生长繁殖，而在不适宜的条件下可能出现生长受限的情况。
四、实验意义通过这个实验设计，我们能够更加深入地了解微生物的特性以及其对环境的适应能力，为微生物的研究与应用提供理论基础。
另外，通过观察和记录微生物在不同环境因素下的生长状况，也能够为环境监测提供一定的参考依据。
此外，本实验还能够引导学生进行科学探究，培养他们的实验设计与分析能力。
五、实验注意事项1. 所有实验操作需在无菌条件下进行，以防止外界细菌的污染。
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微生物学设计性实验
环境中放线菌的提取分离，鉴定以及生物活性的研究
摘要：放线菌是重要的抗生素产生菌，具有抑菌性，本实验以土壤中的放线菌为实验对象，经过对土壤中的放线菌的分离纯化从而获得纯种的放线菌，进而对它的抑菌性进行研究，得出的结论为土壤中的放线菌具有抑菌性。
关键词：放线菌分离纯化抑菌性
1.前言
因其菌落呈放射状而得名。
大多有基内菌丝和气生菌丝，少数无气生菌丝，多数产生分生孢子，有些形成孢囊和孢囊孢子。
依靠孢子繁殖。
表面上和属于真核生物的真菌类似，从前被分类为“放线菌目”(Actinomycetes)。
但因为放线菌没有核膜，且细胞壁由肽聚糖组成，和其它细菌一样。
目前通过分子生物学方法，放线菌的地位被肯定为广义细菌的一个大分支。
放线菌用革兰氏染色可染成紫色（阳性），和另一类革兰氏阳性菌——厚壁菌门相比，放线菌的GC含量较高。
2.1实验目的
学习和掌握土壤中放线菌的分离和纯化技术
观察放线菌菌体的基本形态
鉴定以及探究其生物活性
3. 实验原理
放线菌是原核生物，是重要的抗生素产生菌，在土壤中的数量仅次于细菌，尤其在有机质丰富、透气性好的中性到微碱性土壤中的数量较多，土壤颗粒的分散程度对于分离放线菌也有影响。
分离放线菌时，一般在制备的土壤稀释液时添加百分之十的酚或在分离培养基中加相应的抗生素以抑制细菌和霉菌。
（如加链霉素25-50μ/ml以抑制细菌;添加制霉菌素50μ/ml或多菌灵30μ/ ml以抑制霉菌）。
胆酸钠处理土壤悬液后土壤分散效果较好，且优于纯蒸馏水。
这可能是因为胆酸钠对土壤腐殖质具有较强的结合能力从而有利于破坏土壤团聚结构。
重铬酸钾对土壤真菌、细菌的抑制作用较明显，然而对放线菌并无抑制作用。
而且其价格低廉。
其可作为理想的放线菌分离抑制剂。
实验证明酵母膏、SDS（十二烷基硫酸钠）也有抑菌的作用。
要想获得放线菌的纯培养，还需提供有利于该微生物生长繁殖的最适培养基及培养条件。
4 材料与方法
4.1 菌源：
选定采土地点后，铲去表土层2—3cm，取3—10cm深层土壤10g，装入已灭过菌的纸袋中，封好袋口，并记录取样地点、环境及日期。
土壤采集后应及时分离，凡不能及时分离的样品，应保存在低温、干燥条件下，尽量减少其中菌相的变化。
4 .2 试剂与仪器
培养基：
1、高氏一号培养基： K2HPO4﹒3H2O 0.5g，可溶性淀粉 20g，KNO3 1g, MgSO4﹒7H2O 0.5g， FeSO4﹒7H2O 0.01g，NaCl 0.5g， H2O 1000ml。
2、 LB培养基（液体）：蛋白胨10g，酵母粉5g，NaCl 10g，H2O 1000ml，pH 7.0 5、 LB培养基（固体）：蛋白胨10g，酵母粉5g，NaCl 10g，琼脂 16g，H2O 1000ml，pH 7.0
无菌培养皿，无菌镊子，无菌滴管，显微镜，涂布棒，载玻片，盖玻片，无菌移液管，称量纸，药勺，酒精灯，
10％的酚溶液或（抑制细菌生长），盛有90ml的无菌水并带有玻璃珠的三角瓶，盛有4.5ml无菌水的试管，无菌移液管，接种环，0.1％的美蓝染液
3 试验方法
注意：所取的土样不可过湿，防止样品中杂菌过多；至土壤稀释液时要振荡充分，是土样与水充分混合，将菌分散。
3.1 分离
（1）制备土壤稀释液称取土样1g，加入到一个盛有99ml并装有玻璃珠的无菌水中，并加入10滴10％的酚溶液（抑制细菌生长），有时也可不加酚。
震荡后静置5min，即成10-2土壤稀释液。
（2）倾注法分离将土壤稀释液分别稀释为10-3、10-4、10-5三个稀释度，然后用无菌移液管依次分别吸取1ml10-3、10-4、10-5土壤稀释液于相应编号的无菌培养皿内，用高氏1号培养基倒平板，每
个稀释度做2-3个平行皿。
（3）培养冷凝后，将平板倒置于28℃恒温
4.观察鉴定
（1）菌落形态及菌苔特征的观察
观察放线菌菌落表面形状，大小，颜色，边缘，以及有无色素分泌到培养基内等；并用接种环挑取菌落，注意菌丝在培养基上着生的紧密情况。
（2）个体形态的观察
（3）生物活性的鉴定
抑菌实验
菌种的活化：把放线菌接种到种子培养基，37℃培养2天，同时把金黄色葡萄球菌和大肠杆菌分别接到LB液体培养基置于37℃培养发酵：将活化的放线菌接种到发酵培养基上，37℃培养3天
试验步骤：将发酵液离心，得上清。
同时，将配置好的LB固体培养基倒入平皿，将大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别涂布于细菌培养基中，恒温培养一段时间，将滤纸用打孔器打成5mm直径的圆纸片，将圆纸片浸入发酵液中10min左右，用镊子取出备用。
把4片圆纸片平整的放在培养基的四个区域，在38摄氏度下培养18~20h，观察，测量抑菌圈的大小。
5.实验结果
6.注意事项.
（1）土壤采集后应及时分离，凡不能及时分离的样品，应保存在低温、干燥条件下，尽量减少其中菌相的变化。
（2）调节PH 时要小心操作，尽量避免回调而带入过多的无机离子。
（3）配置培养基时应注意各药勺不要混用：称完药品后应及时盖
紧瓶盖。