分子生物学名词解释
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三、名词解释
基因工程:在体外应用人工方法进行基因重组,然后把重组的基因导入宿主细胞,进行复制、转录及翻译的过程。
PCR技术:针对插入重组体中的目的基因,设计一对引物,进行菌落PCR,如能扩增出条带,则为阳性克隆。
限制性核酸内切酶:识别DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶。
基因工程载体:供插入目的基因并将其导入宿主细胞内表达或(和)复制的运载工具。
重组DNA技术:重组DNA技术简单概括为:“分、切、接、转、筛”
1.分:分离目的基因
2.切:对目的基因和载体适当切割
3.接:目的基因与载体连接
4.转:重组DNA转入受体菌
5.筛:筛选出含有重组体的受菌体
互补DNA:以mRNA为模板,利用反转录酶合成的与mRNA互补的DNA。
四、问答题
1、简述基因工程的基本程序。
基本程序
目的基因的获得(DNA片段)(分、切)
↓
DNA片段与载体基因的连接(体外重组)(接)
↓
连接产物(重组体)导入宿主细胞(转)
↓
重组体的扩增、筛选与鉴定(筛)
↓
目的基因在宿主细胞中的表达
↓
表达产物的分离纯化
2、简述基因工程技术在医学上的应用。
(一)疾病基因的发现与克隆
(二)生物制药
(三)基因诊断
(四)基因治疗
(五)遗传病的预防
三、名词解释
1、受体:(receptor)细胞膜或细胞内的一些天然分子,能够识别和结合有生物活性的化学信号物质(配体,liganal),从而启动一系列信号转导,最后产生相应的生物学效应。
2、G蛋白:是一种鸟苷三磷酸(GTP)结合蛋白,一般是指与细胞表面受体偶联的异三聚体G蛋白。
3、MAPK:MAPK 通路是多种促增殖信号在细胞内信号转导的共同
通路。MAPK 的上游激酶MAPKK 或MEK 是一个DSPK,它能使MAPK 分子中的Thr 185 和Tyr 187 磷酸化而使该酶激活。
4、第二信使:细胞内的化学信号----第二信使
5、PTK:酪氨酸蛋白激酶(protein tyrosine kinase, PTK )是一类能催化蛋白质酪氨酸残基(tyr或Y)磷酸化的蛋白激酶,共同特征是所极端具有典型的PTK结构域,该酶可催化自身或底物磷酸化。它有两种类型:(1)直接装配在受体的胞内区,因此兼有受体和酶两种作用,被称为酪氨酸蛋白激酶受体或受体酪氨酸蛋白激酶(receptor tyrosine kinase, RTK)。细胞生长因子受体。(2)PTK 在胞内,它们通过与受体胞内区结合,帮助受体转导信号,因此称作非受体酪氨酸蛋白激酶(nonreceptor tyrosine kinase) 。
6、RTK:直接装配在受体的胞内区,因此兼有受体和酶两种作用,被称为酪氨酸蛋白激酶受体或受体酪氨酸蛋白激酶(receptor tyrosine kinase, RTK)。细胞生长因子受体
7、跨膜信号转导:
8、钙调素:CaM 是胞内最广泛的Ca2+的靶分子,或者说,Ca2+主要通过CaM 传递其信息。
CaM 是由148 个氨基酸组成,分子量为16.67kD,含有4 个结构域,每个结构域可结合1 个Ca2+ 。结合是通过酸性氨基酸残基中的羧基,以离子键方式结合,这样,1 分子的CaM 可以结合4 个Ca2+ 。
9、CaMKs
10、催化型受体:催化型受体(catalytic receptors)具有跨膜结构
的酶蛋白
11、Ras蛋白
12、核受体:核受体超家族的分类
•类固醇激素受体:糖皮质激素受体(GR)、盐皮质激素受体(MR)、雄激素受体(AR)、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)
•非类固醇激素受体:甲状腺激素受体(TR)、全反式维甲酸受体(RAR)、9-顺式维甲酸受体(RXR)、1,25(OH)2D3 受体(VDR)、脂肪酸和前列腺素受体(PPAR)。
•孤儿受体:缺少生理性配体(可能是持续性活化的转录因子)四、问答题:简述生长因子受体-MAPK信号转导通路。
一、MAPK信号通路概述
1. MAPK信号通路的组成及特点
•ERK1/2, JNK/SAPK, p38, ERK5/BMK1
•MAPK家族激酶的最大激活都需要催化区中Thr/Tyr磷酸化, 分别被上游的双重特异性PSTK激活。
•激活机制:通过磷酸化三级酶促级联反应(MAPKKK---MAPKK---MAPK),酶与脚手架蛋白结合形成多酶复合物,使酶促反应按顺序进行
2、MAPK家族信号通路的激活信号
•促分裂信号:包括生长因子,细胞因子等
•多种应激原:
物理因素:渗透压、紫外线、热休克
化学因素:活性氧、重金属、抗癌剂
生物因素:细菌、病毒
促炎性因子:TNF
2、简述Gs-PKA信号转导通路
3、简述cAMP-PKA信号通路
GDP-αs(i)γβ
αs(i) -GTP
↓
AC
↓
ATP —→ cAMP↑(↓) → cAMP-PKA信号通路
三、名词解释
1、GSH:谷胱甘肽是由谷、半胱和甘氨酸组成的三肽。第一个肽键与一般不同,由谷氨酸γ羧基与半胱氨酸的氨基组成,分子中的半胱氨酸的巯基是该化合物的主要功能基团。
2、蛋白质变性:蛋白质在某些理化因素的作用下,空间结构发生改变,导致生物学功能丧失,理化性质发生改变,称为蛋白质的变性。
3、α-螺旋:每个残基的N-H与前面隔三个残基的C=O形成氢键,这是α-螺旋稳定存在的因素,氢键方向与螺旋中心轴方向平行,这样