高三生物二轮复习专题生物技术实践课件

解析： 猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时其它蛋白较少，是提纯血红 蛋白的理想材料。提纯血红蛋白分四步：红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白 溶液、透析，其中洗涤红细胞时，要用生理盐水反复洗涤，既要将红细胞洗涤干净，又要 不破坏红细胞，然后再用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂，释放出血红蛋白。分离提纯血红蛋 白时用凝胶色谱法，是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质，相对分子质量大的蛋白质 移动速度较快；血红蛋白的颜色可用于观察红色区带的移动情况，并据此判断分离效果。 故D不正确。
(2)分解纤维素的微生物的分离 ①实验原理
即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 ②流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌落。
1．消毒和灭菌的区别： 条
件
结果
较
消 为温和的
毒
物理或化
学方法
仅杀死物 体表面或 内部一部 分对人体 有害的微
生物
常用方法
煮沸消毒法 巴氏消毒法
化学药剂 消毒法
解析： 检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压 灭菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板 上，将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48小时，在确定对照组无菌后，选择 菌落数在30～300的平板进行计数。
答案： D
1．(2011·北京海淀期中)通过实验测定土壤中的细菌数量，下列与此操作有关的叙 述中，不正确的是( )
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 B．取10－4、10－5的土壤稀释液0.1 mL，分别涂布于各组平板上 C．将培养皿倒置，37 ℃恒温培养12～24小时 D．选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数
应用范围
一般物品 不耐高温的液体
用酒精擦拭双 手，用氯气消
毒水等
条件
结果
杀死物体
内外所有
灭
强烈的
的微生物
菌 理化因素
，
包括芽孢
和孢子
常用方法 灼烧灭菌
干热灭菌
高压蒸 汽灭菌
应用范围 接种工具 玻璃器皿、金
属工具
培养基及容器 的灭菌
2.微生物的纯化培养常用的两种接种方法的比较
方法
平板划线法
①接种环的灼烧
方 法
稀释涂布平板法
①稀释操作时：每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌；操
作时，试管口和移液管应在离火焰1～2 cm处
②涂布平板时：
注
a．涂布器用70%酒精消毒，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然
意事项 后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃
b．不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒
解析： 果醋制作所需要的适宜温度最高，为30～35 ℃；果醋制作所用的菌种(醋 酸菌)为好氧细菌，只进行有氧呼吸；腐乳制作所用的菌种主要是毛霉；酵母菌、醋酸菌、 毛霉等菌种都具有细胞壁，都既有DNA又有RNA，细胞中都有核糖体。
答案： D
1．果酒、果醋、腐乳、泡菜制作过程中所用菌种及控制条件的比较
答案： (1)①果胶 ②防止空气进入 ③气泡冒出 (2)④灭菌 ⑤醋酸杆 ⑥附着 ⑦流速 (3)⑧D (4)⑨酒精
近几年的高考新课标试卷中，命题特点有：以发酵食品加工为背景考查微生物的分 离、纯化和培养过程以及在食品加工中所起的作用；结合食品制造和洗涤业考查酶的固定 化及实际应用；果酒、果醋和泡菜的制作方法与流程，植物的组织培养、蛋白质的提取和 分离、PCR技术的基本操作和应用，理解生物技术在其他方面的应用。题型大多以非选择 题为主，江苏单科卷，广东理综卷也有选择题。
答案： D
五种生物成分的提取
提 取
物 质
提取 方法
提取原理
步骤
D NA
盐析 法
①DNA在不同浓 度的NaCl溶液中溶解度不 同
②DNA不溶于酒 精，但某些蛋白质则溶于 酒精
①将实验材料溶解在2mol/L的NaCl溶液中，过 滤
②加水稀释至0.14mol/L 的NaCl溶液使DNA析出并过滤，再用2mol/L的 NaCl溶液溶解DNA ③加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为 95%的酒精溶液
Na2SO4)
提 取
物 质
橘 皮
精 油
胡 萝
卜 素
提 取
方 法
提取原理
步骤
压 榨法
①石灰水浸泡、漂 通过机械加压，压榨
洗 ②压榨、过滤、静置 出果皮中的芳香油
③再次过滤
萃
使提取物溶解在有机
①粉碎、干燥 ②
取法 溶剂中，蒸发后得到提取物 萃取、过滤 ③浓缩
4．(2011·江苏卷)下列有关酶的制备和应用的叙述，正确的是( ) A．酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶 B．透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化 C．棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤 D．多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层
精
c．酒精灯与培养皿距离要合适，移液管管头不要接触任何物体
方法 目的 培养
平板划线法
稀释涂布平板法
获得单细胞菌落：在培养基上形成的由单个菌种繁殖而来 的子细胞群体
平板冷凝后倒置培养，使培养基表面的水分更好地挥发， 防止皿盖上水珠落入培养基造成污染
2．(2011·江苏单科)下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是( ) A．腐乳制作所需要的适宜温度最高 B．果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵 C．使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌 D．使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA
培养基的配制及微生物的分离 1．培养基的配制：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板 2．微生物的纯化培养 包括培养基的制备和纯化微生物两个阶段，纯化微生物时常用的接种方法是平板划 线法和稀释涂布平板法。
3．微生物的分离和计数 (1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 ①筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。 ②测定微生物数量的常用方法：统计菌落数目和显微镜直接计数。 ③过程：土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察。
(3)若甲罐中的杨梅酒全部流经乙罐制成杨梅醋，则乙罐中CO2的产生量是⑧ ________。
A．甲罐的两倍
B．与甲罐的相等
C．甲罐的一半
D．几乎为零
(4)在杨梅酒和杨梅醋发酵的整个过程中，某物质浓度随时间变化的示意图如下，该
物质是⑨________。
解析： (1)纤维素酶和果胶酶具有专一性，能分解细胞壁中的纤维素和果胶，破坏 细胞壁，以提高出汁率；酒精发酵罐顶上弯管中加水是为了防止空气进入；发酵一段时间 后，发酵罐内液面不再有气泡产生，说明发酵基本完毕。
a．第一次划线前：杀死残留微生物，避免污染菌种和培养基
b．每次划线前：杀死残留菌种，保证每次划线菌种来自上次划线 注
末端 意
c．划线结束后：杀死残留菌种，避免污染环境和感染操作者 事
②灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死ห้องสมุดไป่ตู้项
菌种
③划线时最后一区域不要与第一区域相连
④划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破
制作内容
比较项目
菌种
控 制
条 件
O2的有 无
最适温 度
果酒
果醋
酵母菌
无氧 18～25 ℃
醋酸 菌
有氧
30～ 35 ℃
腐乳
泡 菜
毛霉
无氧 15～18 ℃
乳 酸菌
无 氧
常 温
2.果酒、果醋、腐乳和泡菜制作过程比较及亚硝酸盐含量的检测
果酒和 果醋制作
腐乳 的制作
制作泡菜并检测亚硝酸盐含量
制 作原理
果酒： 无氧呼吸
果醋： 有氧呼吸
多种 微生物
发酵
泡菜制作：乳酸菌无氧呼吸。亚硝酸 盐检测：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对 氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N—1—萘 基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料
制作泡菜并检测亚 果酒和果醋制作 腐乳的制作
硝酸盐含量
实
让豆腐上长
验
出毛霉→加
流
盐腌制→加
程
卤汤装瓶→
图
密封腌制
果酒和果醋制作
1．微生物培养基的配制、消毒灭菌、计数分离等技术，尤其是培养与分离 2．果酒、果醋、腐乳、泡菜制作过程及原理 3．植物有效成分提取的基本原理、装置、方法，以及提取有效成分的最佳条件的探索
4．传统发酵食品制作的原理、过程、设计、条件控制 5．DNA、蛋白质技术中相关成分的提取、分离的原理、方法与装置 6．固定化酶和固定化细胞的原理和方法，酶活力的测定方法，影响酶活性的因素 研究及酶在生产生活中的应用
提取 物质
血红 蛋白
玫瑰 精油
提取 方法
提取原理
步骤
凝胶色
根据相对分子质量的大
谱法 小
①样品处理 ②
根据各种分子带电性质 粗分离 ③纯化 ④纯 电泳法 的差异及分子本身的大小、形 度鉴定
状的不同
①水蒸气蒸馏
水蒸气
利用水蒸气将挥发性较 ②分离油层(加NaCl)
蒸馏法 强的植物芳香油携带出来
③除水过滤(加无水
(1)在制备杨梅酒过程中，为了提高杨梅的出汁率，在压榨前可加入一定浓度的纤维 素酶和①________酶。甲罐顶上弯管中加水的主要目的是②____________。发酵一定时间 后，观察到发酵罐内液面不再有③________，说明发酵基本完毕。
(2)在制备杨梅醋过程中，乙罐内先填充经④________处理的木材刨花，然后加入含 ⑤________菌的培养液，使该菌⑥________在刨花上，再让甲罐中发酵完毕的杨梅酒流入 乙罐进行杨梅醋发酵，杨梅醋的pH可通过控制杨梅酒的⑦________来调节。
答案： A
固定化酶和固定化细胞的比较