实验五白细胞分类计数ppt课件

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淋巴细胞（Ly）：胞体呈圆形，直径介于6～15µm之间，在成人血涂片中 以小淋巴细胞为多见，直径6～9µm，核大呈深紫色致密而浓染，胞浆量 极少；大淋巴细胞胞浆量较多，呈清澈的淡蓝色，可见少量嗜苯胺蓝颗粒， 胞核圆或椭圆，常偏向细胞一侧，染色较深。
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单核细胞（Mo）：在瑞氏染色涂片上为12～20µm，胞体圆形、椭圆形或不 规则形；核形多种多样，最重要的特点是染色质较细致疏松，呈丝网状或条 缕状，着色较淡胞浆较多，淡兰色，含大量细小尘土样颗粒。
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血涂片制作
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羽 状 尾 部
良好血涂片外观 －羽（子弹头）状尾部
－周边有空白 －无划痕
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不 良 血 涂 片
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2．瑞氏染色操作
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3．白细胞分类：
低倍镜下所见
先用低倍镜选择厚薄适宜，染色良好，细胞分布均
匀的体尾交界处，滴加香柏油一滴，油镜下分类计
数。分类时要有秩序的连续进行，避免主观选择视
计数。
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RBC异常
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中性粒细胞
血小板
嗜酸性粒细胞
嗜碱性粒细胞（右）
淋巴细胞
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单核细胞
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实验报告（注意学号） 1原理 2方法
3各类细胞百分比报告
4讨论
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野。通常分类计数100个白细胞，计算并报告各种
白细胞所占比例。
结果记录方 式：
Ne 正 一 Ly 正 Mo 正 Eo 正 Ba 正
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体尾交界处
理理想想区区域域
细胞重叠
细胞太稀
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各类成熟白细胞的形态学：
中性粒细胞（Ne）：在瑞氏染色血涂片上呈圆形，直径10～13µm，胞浆染粉 红色，核形一叶（杆状核）至五叶不等，以三叶者多见，染成深紫红色，胞 浆中有许多细小均匀紫红色颗粒。
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[参考值]
正常成人外周血白细胞分类参考值：
Ne
50%～70%
Ly
20%～40%
Mo 3%～8%
Eo
0.5%～5%
Ba
0%～1%
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[注意事项]
1.血涂片制备要厚薄适宜、均匀、头体尾分明，无溶血、无空洞。 2.很多因素影响涂片时血膜的厚度。血滴大、血粘度高、推片角度大、
速度快则血膜厚，反之则血膜薄。 3.按一定顺序，有秩序地连续进行，避免选择视野。 4.分类计数时应同时报告RBC和WBC的形态是否有异常。退化细胞不
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染色原理：
• 血红蛋白、嗜酸性颗粒均为碱性物质，故与酸性染料伊红结合而染成红 色，呈嗜酸性。
• 细胞核的核蛋白为酸性物质，故与碱性染料美兰结合，染成深蓝色或深 紫红色，呈嗜碱性。
• 中性颗粒与美兰和伊红同时结合而染为淡紫红色，呈Байду номын сангаас中性。
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[器材]
• 光学显微镜
• 推片，载玻片
[试剂]
• Wright染液
实验二
白细胞分类计数 （differention count of leukocyte）
谢海啸
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一、白细胞分类计数
白细胞分类计数是将血液制备成涂片，瑞氏染色后显微镜下根据白 细胞的形态特征进行分类计数。通常分类100个白细胞，计算得出 各种白细胞所占百分比。
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瑞氏染色原理：
• 瑞氏染料溶于甲醇，离解为带正电的碱性美兰（M+）和带负电的酸性伊红 （E-）离子。细胞的染色既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。各种 细胞成分的化学性质不同，对染料的亲和力也不一样，故可呈不同的着色特 点。
将血涂片放染色架上。 ❖ 2）加染液：在涂片上滴加瑞氏染液数滴，以染液覆盖整个血膜为度，
稍静置1min。 ❖ 3）加缓冲液：滴加缓冲液等量或多些，与上述染液充分混匀。 ❖ 4）染色：染色10min. ❖ 5）冲洗：不要先倒掉染液，平持血涂片用流水缓缓冲洗干净。 ❖ 6）干燥：直立血涂片，使其自然干燥。
Wright
1.0g
甲醇
600ml
• 磷酸盐缓冲液（PH6.4～6.8）
• 香柏油
[标本来源]
• EDTA-K2抗凝全血
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[操作]
1.制备血涂片 ❖ 1)推片：血膜厚薄适中，边缘整齐，外观呈舌形，头、体、尾
分明。 ❖ 2）干燥 ❖ 3）标记
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2．染色 ❖ 1）准备：血膜干透后，用蜡笔在两端划线，以防止染色时染液外溢。
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嗜酸性粒细胞（Eo）：较中性粒细胞稍大，胞核多为两叶，呈眼镜、八 字形，核染色质粗糙染深紫红色，胞浆内充满粗大均匀的嗜酸性颗粒， 瑞氏染色时呈桔红色，有折光性。
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嗜碱性粒细胞（Ba）：胞浆中含有大小不等的嗜碱性颗粒，瑞氏染色时呈兰 黑色。于光学显微镜下常见胞浆中有小空泡，乃因嗜碱性颗粒易溶于水或因 功能活动而脱颗粒所致；核呈淡紫红色常看不清，呈杆状或分叶状。