国产发酵罐操作说明(英文)
BIOTECH-10BGZ发酵罐操作规程
日期：2006-12-05日期：2009-12-5日期：
2.6 保温结束后，关蒸汽阀S2、S1、冷凝V1，缓慢开进水阀W1，再将温度控制设定为自动。
2.7 当温度降至100℃以下，缓缓开排气阀V4，是保护罩顶部的压力表指示为零，移去保护罩（带棉手套）。
2.8 将进气过滤器K7口与控制箱左侧空去出口连通，开弹簧夹，对发酵罐进行通气，调整空气流量3~5L/Min。
警告：
1 发酵开始前，进行PH、DO电极的标定，发酵结束要按要求保存电极，保证电极的使用寿命。
2 灭菌过程中要一刻不离人，随时控制灭菌条件,以防压力过大发生危险。
3 关闭总电源前，请将控制器退回主菜单，然后按Ctrl+F6关闭控制程序，然后关电源。
4 设备运行结束，勿忘关闭自来水阀、空气源。
5 玻璃罐体工作压力不大于0.1MPa，进罐空气压力应不大于0.1MPa。
2.4 关进水阀W1，开蒸汽冷凝水阀V1，开蒸汽发生器出口阀、缓缓开蒸汽阀S1，蒸汽进入夹套。升温过程中调整阀V1，节约蒸汽提高效率。
2.5 党培养基90℃以上，开蒸汽冷凝水阀V3，微开蒸汽阀S2，蒸汽进入钟罩内，当钟罩顶排气口V4有蒸汽排出时，2min后关闭v4并关小V3，当罐温接近120℃或保温温度时微开阀v4适量排气，并调整蒸汽阀S1维持罐温。
2.9 关闭V3，消毒结束
当温度到达工艺要求时，调节搅拌转速、空气流量、罐压，标定溶氧电极的斜率及校正PH电极的零点。
3 发酵操作
3.1 接种：调小进气量，旋松接种口，在火焰保护下，打开接种口倒入种子并旋紧接种盖。
3.2 补料操作：硅胶管安装，将经灭菌消毒的补料瓶及输液管放置于搁架上，利用手动转动蠕动泵泵头，同时将硅胶管沿蠕动泵凹槽安装至蠕动泵出口处，夹紧白色夹子，根据需要设定补料速率。
BioFlo-CelliGen 115 中文快速使用手册(Aug 2012)
2第二步：点击pH 第一步：点击Calibration 第三步：输入6.86（或7.0），将电极放入pH6.86（或7.0）的标准缓冲液中，待电极读数稳定后点击“Set Zero”第四步：输入4.0或9.18（或10.0），将电极放入相应的标准缓冲液中，待电极读数稳定后点击“Set Span”2.3 DO 电极的标定(1) 打开DO 电极帽，将电极与缆线相连后连接于主控制台DO 缆线接口进行电极极化，极化时间6小时以上。
(2) 极化完成后，按下图步骤进行标定：(3) 标定零点，如图中第3步，标定有三种方法： 第一种方法：将DO 电极与电极导线断开连接，按图中第三步进行，完成后将电极与缆线重新连接。
第二种方法：需要在标定过程中向培养基中通入氮气，即点击图中“N2 (3) On ”将氮气通入罐内液体中，如果没有“N2(3) On ”选项，可以手动操作通入氮气，随后按图中第三步进行，标定完后点击“N2 (3) Off ”或手动关闭。
第三种方法：将DO 电极置于饱和硫代硫酸钠溶液或饱和亚硫酸钠溶液中，按图中第三步进行。
注意：以上第一、第二种标定方法可在灭菌后标定；第三种方法必须在灭菌前标定0点，灭菌后标定斜率。
(4) 标定斜率，如图中第四步，该标定有两种方式：第一种是将pH 、温度，搅拌转速参数调节至培养所需控制参数值，然 后将通气量调到最大值，待读数稳定后，按图中第四步进行；第二种是将pH 、温度参数调节至培养所需控制参数值，然后将通气量和搅拌转速调到最大值，按图中第四步进行。
注意：DO 斜率标定在灭菌后、接种前进行。
2.4 酸/碱、消泡液和培养基的配制(1) 酸/碱配制根据培养过程要控制的pH 值来确定；一般可选的酸为硫酸、磷酸或通入CO 2来微调pH 值，碱的控制主要为氢氧化钠或NaHCO 3；硫酸，磷酸使用浓度一般最高不超过10%，NaOH 使用浓度一般为1-3 mol/L 。
注意：不要使用盐酸，盐酸会对罐体中金属部件造成腐蚀。
发酵罐操作规程生物化工公司
发酵罐操作规程开机：操作前请认真检查电源是否接上，填好使用说明书。
插上电源，然后依次打开搅拌开关、通气开关和温控开关。
调节：转速调节：打开搅拌开关后，按绿色键“Run”，搅拌开设运转。
调节转速时，按“▲”或“▼”进行调节。
关闭搅拌时，先按红色键“Stop”，待搅拌停止后关闭开关。
通气调节：打开通气开关，将通气阀打开，此时压缩空气通人发酵罐中。
调节气量大小通过反应器上的转子流量计进行调节。
关闭时，先关通气阀，再关闭通气开关。
温度调节：打开温度开关，控温仪显示当时温度。
调节温度时，先轻按“◎”一下，然后按“▲”或“▼”进行调节设定温度，然后再轻按“◎”一下，恢复。
等反应器底部加热，直到设定温度。
灭菌取下温度探头和通气管，关闭通气阀，打开放气阀。
加入培养基，拧紧加料口。
将通气口、出气口和放料口用纱布包扎。
放入灭菌锅中，进行灭菌。
取出，接好温度探头和通气管。
打开通气、搅拌、温度开关，启动搅拌，打开通气阀，待温度降至设定温度进行接种。
清洗取下温度探头和通气管，关闭通气阀，打开放气阀。
将顶部6个螺丝按对称方向拧下。
取出搅拌，清洗发酵罐各部分。
打开通气阀，清洗通气管道。
关闭通气阀，装上搅拌，并将顶部重新用6个螺丝按对称方向固定。
注意事项按“▲”或“▼”时出现的数字并非转速，要等5秒钟后出现的数字才是转速。
温度一般不需要调节。
由于本发酵罐采用底部加热，因此务必不要将料液沿器壁流下。
装发酵罐顶部时，注意加料口与通气口对称放置。
BioFlo-CelliGen 115 中文快速使用手册(Aug 2012)
2第二步：点击pH 第一步：点击Calibration 第三步：输入6.86（或7.0），将电极放入pH6.86（或7.0）的标准缓冲液中，待电极读数稳定后点击“Set Zero”第四步：输入4.0或9.18（或10.0），将电极放入相应的标准缓冲液中，待电极读数稳定后点击“Set Span”2.3 DO 电极的标定(1) 打开DO 电极帽，将电极与缆线相连后连接于主控制台DO 缆线接口进行电极极化，极化时间6小时以上。
(2) 极化完成后，按下图步骤进行标定：(3) 标定零点，如图中第3步，标定有三种方法： 第一种方法：将DO 电极与电极导线断开连接，按图中第三步进行，完成后将电极与缆线重新连接。
第二种方法：需要在标定过程中向培养基中通入氮气，即点击图中“N2 (3) On ”将氮气通入罐内液体中，如果没有“N2(3) On ”选项，可以手动操作通入氮气，随后按图中第三步进行，标定完后点击“N2 (3) Off ”或手动关闭。
第三种方法：将DO 电极置于饱和硫代硫酸钠溶液或饱和亚硫酸钠溶液中，按图中第三步进行。
注意：以上第一、第二种标定方法可在灭菌后标定；第三种方法必须在灭菌前标定0点，灭菌后标定斜率。
(4) 标定斜率，如图中第四步，该标定有两种方式：第一种是将pH 、温度，搅拌转速参数调节至培养所需控制参数值，然 后将通气量调到最大值，待读数稳定后，按图中第四步进行；第二种是将pH 、温度参数调节至培养所需控制参数值，然后将通气量和搅拌转速调到最大值，按图中第四步进行。
注意：DO 斜率标定在灭菌后、接种前进行。
2.4 酸/碱、消泡液和培养基的配制(1) 酸/碱配制根据培养过程要控制的pH 值来确定；一般可选的酸为硫酸、磷酸或通入CO 2来微调pH 值，碱的控制主要为氢氧化钠或NaHCO 3；硫酸，磷酸使用浓度一般最高不超过10%，NaOH 使用浓度一般为1-3 mol/L 。
注意：不要使用盐酸，盐酸会对罐体中金属部件造成腐蚀。
发酵罐操作流程
发酵罐操作流程一、准备工作。
在进行发酵罐操作之前，需要做好充分的准备工作。
首先，检查发酵罐的清洁情况，确保没有杂物或残留物。
其次，准备好所需的原料和发酵剂，确保质量和数量充足。
最后，检查发酵罐的操作设备是否完好，确保安全可靠。
二、操作步骤。
1. 开启发酵罐。
将发酵罐的进气阀关闭，然后打开罐内的排气阀，释放罐内的压力。
接着，打开发酵罐的罐盖，将原料和发酵剂倒入罐内。
2. 调节温度。
根据发酵原料的要求，调节发酵罐的温度。
一般情况下，发酵罐的温度控制在25-30摄氏度之间，可以根据具体原料的要求进行调整。
3. 控制湿度。
保持发酵罐内的湿度适宜，通常情况下，湿度控制在80%-85%之间。
可以通过喷水或者调节通风口来控制罐内的湿度。
4. 搅拌发酵。
启动发酵罐内的搅拌设备，确保原料和发酵剂充分混合均匀。
搅拌的时间和速度根据具体原料的要求进行调整。
5. 监控发酵过程。
在发酵过程中，需要不断监控发酵罐内的温度、湿度和搅拌情况。
及时调整发酵罐的操作参数，确保发酵过程顺利进行。
6. 完成发酵。
根据具体原料的发酵时间，等待发酵过程完成。
一般情况下，发酵时间在12-24小时之间，可以根据具体原料的要求进行调整。
7. 排放气体。
在发酵过程完成后，关闭发酵罐内的搅拌设备，打开罐内的排气阀，释放罐内的压力。
等待罐内的气体排放完毕后，关闭排气阀。
8. 清洁消毒。
完成发酵后，需要对发酵罐进行清洁消毒。
将发酵罐内的残留物清理干净，然后进行消毒处理，确保下次使用时卫生安全。
三、注意事项。
1. 操作发酵罐时，需要严格按照操作流程进行，确保操作安全可靠。
2. 发酵罐的清洁和消毒工作需要做到位，确保发酵过程的卫生安全。
3. 在发酵过程中，需要及时监控发酵罐内的参数，确保发酵过程顺利进行。
4. 操作人员需要具备相关的操作技能和安全意识，确保发酵过程安全顺利进行。
四、结束语。
以上就是发酵罐操作流程的详细介绍，希望能对大家有所帮助。
在操作发酵罐时，一定要严格按照操作流程进行，确保发酵过程顺利进行，同时注意安全和卫生。
FUS-50L(A)发酵罐使用
FUS-50L（A）发酵罐使用接种/移种火焰圈保护接种⏹准备工作：操作人数以3人最佳，非操作人员离开房间，操作人员带好口罩，隔热手套；关闭门窗、空调风扇；3人分别负责持接种钳、传递种瓶和接种。
⏹注意：严禁带橡胶或者塑料薄膜手套，一旦发生烧伤会更严重。
⏹用湿抹布盖住搅拌电机以及周围管道，以防止电机和硅胶管被烧坏。
⏹向火圈棉花上滴加无水酒精至饱和并置于接种口。
⏹关小进气流量，全开尾气阀门。
⏹预先拧松接种口盖子。
⏹持接种钳者用接种钳钳住接种口盖子，点燃火圈，用接种钳拧下接种口盖子，并置于接种口远离接种者方向，盖子内测朝向火焰。
⏹传递种子瓶者将捆扎棉线解下，如是棉塞，将棉塞外部包裹纱布取下，递给接种者。
⏹接种者在火焰旁边取下种瓶纱布或棉塞，火烧种瓶瓶口一圈后缓慢将种子液倒入罐中。
然后递给传递种瓶者，同时，传递种瓶者将下一瓶种子递给接种者。
⏹所有接种完成后持接种钳者拧上罐盖，用湿抹布熄灭火圈，恢复罐压和通气。
⏹注意：预先估计接种时间，保证火焰时间足够长，如果种瓶数量较多，预先合瓶。
⏹注意：接种速度不宜过快，否则可能会导致种子液溢出，导致无菌失效。
⏹注意：接种后和种瓶上部温度很高，禁止手持种瓶上部。
⏹注意：严禁向燃烧的火圈上添加酒精。
⏹注意：火圈掉落地面后立即用湿抹布覆盖。
移种管道移种准备工作：⏹记录此时所有发酵罐重量。
⏹取下种子罐、发酵罐的取样口末端，连接移种管道。
⏹注意：移种准备需要约40min，注意在移种前完成所有准备操作移种管道消毒：⏹依次从种子罐的最远端到种子罐打开蒸汽进罐底阀、取样阀，打开种子罐的移种管道排凝阀门，消毒30min。
⏹记录此时最远端发酵罐的罐重。
消毒结束：⏹关闭移种管道排凝阀门，依次从种子罐到最远端发酵罐关闭蒸汽进罐底阀，罐底最后一个发酵罐罐底进蒸汽阀门后立即打开此罐罐底阀，维持移种管道压力。
待移种管道冷却。
移种:⏹升高种子罐罐压至0.1MPa，维持发酵罐罐压0.05Mpa，从最远端发酵罐开始移种。
发酵罐操作规程正式样本
文件编号：TP-AR-L8865There Are Certain Management Mechanisms And Methods In The Management Of Organizations, And The Provisions Are Binding On The Personnel Within The Jurisdiction, Which Should Be Observed By Each Party.（示范文本）编制：_______________审核：_______________单位：_______________发酵罐操作规程正式样本发酵罐操作规程正式样本使用注意：该操作规程资料可用在组织/机构/单位管理上，形成一定的管理机制和管理原则、管理方法以及管理机构设置的规范，条款对管辖范围内人员具有约束力需各自遵守。
材料内容可根据实际情况作相应修改，请在使用时认真阅读。
1、进罐前准备工作：清洗发酵罐；电极标定；装好pH电极、溶氧电极；放出蒸汽发生器中的污水；贮水箱中加满水；培养基配制好后倒入发酵罐，调至适当体积及pH；打开搅拌；检查罐上各种盖帽，旋紧。
2 灭菌操作：2.1打开蒸汽发生器，机器自动进水，水位达到要求后开始加热。
2.2 打开蒸汽发生器后面的球阀。
2.3 夹层进汽预热。
打开夹层进汽阀门，打开夹层排汽阀门，夹层开始进汽预热。
打开排气阀，排出冷空气。
待温度上升至95-98℃时关闭夹层蒸汽，停止搅拌。
2.4 取样阀进汽。
打开罐底侧面蒸汽阀，打开罐底放料阀（此阀顺时针开，逆时针关，与普通阀门正好相反），蒸汽进入发酵罐。
微开取样阀。
2.5空气管进汽。
关好空气进气阀，打开蒸汽进汽阀，蒸汽进入过滤器。
先从尾阀排出少量冷凝水，关小尾阀，打开过滤器下面的进汽阀，蒸汽从空气管进入发酵罐。
2.6灭菌。
控制排气阀大小，控制空气口、出料口进汽量，将温度控制在灭菌所需温度，维持一定时间。
GUJS-5_7、10、15、20、25、30发酵罐操作说明(触摸屏)
GUJS 发酵系统由发酵罐、空气处理系统、蒸汽净化系统、电气控制系统、恒温系统及管道、阀门等组成。
其工艺流程图如图一。
㈡ 空气过滤器及空气管路的消毒⒈ 关闭空气阀F 11(图三);打开F 2，慢慢打开蒸汽阀阀门F 1,当冷凝水排尽后微开F 2，打开F 12,排尽冷凝水后F 12调为微开。
注意:此时蒸汽压力应在0.12～0.14MPa 之间;压力过低将造成灭菌不彻底,压力过高则空气过滤器滤芯有可能被损坏而失去过滤能力。
⒉ 微开F 13、F 15,打开F 14蒸汽通过空气过滤器及以后的空气管道进入发酵罐内。
⒊ 开启空气压缩机,调节空气减压阀,使其出口压力在0.2～0.25MPa 之间。
⒋ 消毒时间一般为30分钟。
到时间后依次关闭F 13、F 15、F 12、F 2、F 1。
⒌ 打开F 11、F 2、F 12;排去冷凝水后,再将F 12、F 2、F 13、F 15、转为微开;稍开F 13、F 15，吹空气过滤器。
⒍ 吹干空气过滤器一般需20分钟左右。
然后关闭F 12、F 2、F 13、F 15,保持空气管道及空气过滤器中是正压。
空气减压阀分水过滤器绝对过滤器发酵罐蒸汽源蒸汽过滤器摇床菌种发酵液自来水电磁阀压缩空气加热器图 一 工艺流程图㈢空消1.打开排水阀F33,蒸汽阀F5，排尽夹套中的水后即关闭F5。
2.打开F4、F22,排尽蒸汽管中冷凝水后将F22转为微开;稍开F21,微开F14使蒸汽徐徐进入发酵罐;对发酵罐进行空消。
3.注意在升温过程中需将“加热”、“冷却”、“pH调节”、“消泡”、“流加”开关置于“关”的位置或将控制器置与“停机”状态。
否则当温度设定值设定在培养温度时,会自动通冷却水,影响升温速度,同时也浪费蒸汽。
4.在灭菌过程中,应时刻注意罐压,并控制在0.11～0.12MPa之内,请勿超压。
罐压的控制通过调节阀门F4和F14来实现。
5.空消时间一般为30～50分钟。
到时间后,关闭F4、F14。
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Operating instruction for BIOXING bioreactorThe components for the bioreactor1-variable area flowmeter:used for regulate the flow rate of air2-the bioreactor: the place for cultivating strains and fermentation3-the base:for supporting the bioreactor and alkali bottle4-feeding pipe and alkali(acid) pipe: for added medium and alkali or acid5-condenser: used for cooling the out air6-air outlet: for air exhausting7-rotator: install the electrical machine for driving the rotator8-inoculate: adding strain, medium, glucose and other needed for fermentation9-use for installing pH electrode10-used for installing oxygen electrode11-used for installing temperature electrode12-used for installing the pipes for water used for keeping the temperature at a set point13-sampling: used for taking samples from bioreactor14-nuts: for fix the lid and make sure the bioreactor is gas tightness 15-air inlet: for pumping aseptic air to bioreactor16-parameters sleet17-user loading in(or out)18-electrical machine: for driving the rotator19-temperature electrode20-bioreactor switchThe reactor(contain at least 1.5L water in it) must be sterilized at 121℃for 30min before used for fermentation, after this, the reactor will be able to use for fermentation.Instructions for bioreactor use1.Turn on the power and login the systemUser name: SYS Password: 3332.After loading successfully, some necessary steps must be done before thefermentation, this may conclude the followings.A.Electrode calibration: the electrodes used for fermentation are pH and oxygenelectrode in our lab and the calibration for them is similar.pH: use the standard buffer(7.0,green and 4.0,pink) to calibrate the electrode: pH 7.0 is first and then 4.0Oxygen: use the saturated sodium sulfite calibrate the zero point and before inoculate the 100% point must be calibrateB.Feeding pump calibration: as the process of fermentation is continued, extrafresh and aseptic fermentation medium may be added under a constant rate, so the feeding pump must be calibration as you calculated.3.Bioreactor wrapping and fermentation mediumThe fermentation medium is added to bioreactor and sterilized at 121℃for 15min.Before this, following things must be done.A.Bioreactor assembling: after all the things above are done, first we must assemblethe bioreactor, there may have some points need to be considered. First the seal ring under the lid must be added correctly and four nuts must be screwed. Another one is the direction of the condenser, it must be placed different side compared with the scale in the glass.B.Bioreactor wrapping: in order to ensure the aseptic environment for fermentation,the wrapping is necessary: first, the pipes for taking samples, air output and medium feeding must be wrapped by silver paper or gauze (eight layer); and then two air filter must be added at the entrance of pipe for air input (notice the direction, the inlet is faced outside) and then wrapped by silver paper.C.Fermentation medium preparation: weighing all the chemical reagents anddissolved by tap water. In this step, the water added for regents dissolving is notthe same as the final volume(1.5L),the water volume is calculated by the equation as followed:The volume of water=1.5-V1-V2V1:the volume of glucose or other carbon source(the carbon source is sterilized at 121℃for 15min separately)V2: the volume of strain for fermentationD.The electrode must be inset in the appropriate place(all the electrode used forcontrol the conditions of fermentation and must be calibration before used)4.operation of bioreactor after fermentation1)In order to keep the aseptic environment, a positive pressure must be added inthe bioreactor, so the first step after sterilized is pouring the aseptic air(or carbon dioxide) into bioreactor immediately, and then starting stir at 150rpm2)Insert the temperature electrode into the bioreactor and install the condensatewater pipes, then open the inlet and outlet valve and convert the temperate controller from manual operation to automatic. At the same time, install the pH and oxygen electrode, the alkali or acid bottle and the feeding bottle.3)After the temperature decreased to the fermentation temperature, convert thepH controller from manual operation to automatic and regulate the pH to set point.4)For the oxygen electrode, calibrate the 100% point when the pH stabilizes atthe set point, this operation is only suitable for aerobic fermentation, when under anaerobic condition, the oxygen electrode isn’t calibrated but it is necessary for air impermeability of the bioreactor.5)After all steps above are OK, the strain and carbon source will be inoculated.In this step, the necessary regent added to bioreactor is different from strain to strain, and the regents contain VB1, biotin and antibiotics.6)Along the whole fermentation, we need to take samples from bioreactor foranalysis some parameters, such as OD and residual glucose. When take the sample, the pipe for air out must be locked.7)When the fermentation comes to an end, sodium hydroxide must be added tobroth for killing all the strain and then poured the waste broth to sewer and the bioreactor must be cleaned.。