常用培养基和抗生素的配制方法
常用溶液的配置
试剂配制(1)液体LB培养基(-) 1000ml蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g去离子水溶解并定容至1000ml高压灭菌，4℃保存。
(2)氨苄青霉素溶液(100mg/ml) 10ml氨苄青霉素1g去离子水溶解并定容至10ml过滤除菌，-20℃分装保存。
(3)卡那霉素溶液(100mg/ml) 10ml卡那霉素1g去离子水溶解并定容至10ml过滤除菌，-20℃分装保存。
(4)固体LB培养基(-) 1000ml蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g琼脂糖粉15g去离子水溶解并定容至1000ml高压灭菌后铺平板(6cm培养皿)，冷却后4℃保存。
(5)含抗生素LB固体培养基1000ml固体LB培养基溶液1000ml高压灭菌，当培养基降温至50℃左右，加入终浓度为100Rg/ml的氨苄青霉素或100Rg/ml卡那霉素，并铺平板(6cm培养皿)，冷却后，4℃保存。
(6)0.1M CaCl2溶液一制备感受态1000ml氯化钙11.099g去离子水溶解，定容至1000ml高压灭菌后4℃保存。
(7)0.1M MgCl2溶液一制备感受态1000ml氯化镁9.521g去离子水溶解，定容至1000ml高压灭菌后4℃保存。
(8)0.1M CaCl2-15%甘油溶液---制备感受态1000ml氯化钙9.521g50%甘油300ml去离子水溶解，定容至1000ml高压灭菌后4℃保存。
(9)50％甘油溶液100ml甘油50ml去离子水50ml(10)0.5M EDTA 溶液(PH=8.0) 500mlEDTA 93.05g去离子水溶解，NaOH调PH至8.0,定容至500ml。
(11)10%SDS 溶液100mlSDS 10g去离子水溶解，定容至100ml。
(12)5M乙酸钾溶液100ml5M乙酸钾49.07g去离子水溶解，定容至100ml，室温保存。
(13)1MTris-HCl 溶液(pH=8.0) 100mlTris 碱12.1g去离子水溶解，定容至100ml，浓盐酸调pH值至8.0，室温保存。
常用培养基配方汇总
常用培养基配方汇总1. 营养琼脂培养基 (Nutrient Agar)- 夏洛特奥康纳 (Charlote A. O'Connor) 配方:-蛋白胨:5克-麦芽提取物:3克-胰蛋白酶胨:1.5克-硫酸镁:0.2克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
2. 肉蔗糖琼脂培养基 (Tryptic Soy Agar, TSA)- 条件反射琼脂 (孟德尔和赛尼·特鲁斯 ('Sneath and Tres') 配方):-牛肉蛋白胨:17克-大豆酪蛋白胨:3克-肉汤提取物:5克-葡萄糖:2.5克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
3. MAC琼脂培养基 (MacConkey Agar)- 麦康奈 (MacConkey) 配方:-紫胆杆菌胨:17克-葡萄糖:1.5克-硫酸盐:1.5克-中性红:0.03克-石蕊:0.3克-氯化钠:5克-地膜:10克-pH值调整到7.1-7.5-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
4. LB琼脂培养基 (Luria-Bertani Agar)- 古斯塔夫·诺维斯 ('Gustaf Novis') 配方:-研磨大豆饼粉:10克-酵母提取物:5克-部分脱脂酪蛋白:5克-氯化钠:1克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
5. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (Potato Dextrose Agar, PDA)- 林登麦卡蒂 ('Lindenmuth and McCarty') 配方:-马铃薯提取物:4克-葡萄糖:20克-地膜:15克-pH值调整到5.6-5.8-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
这些是一些常用的培养基配方，适用于细菌和真菌的培养。
细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法
细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法、常用培养基1、LB 培养基将下列组分溶解在0.9L 水中：蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用INNaOH （〜1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。
注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
2 、SOB 培养基将下列组分溶解在0.9L水中：蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1mol/L 氯化钾2.5ml用水补足体积到1L。
分成100ml的小份，高压灭菌。
培养基冷却到室温后，再在每100ml 的小份中加1ml 灭过菌的1mol/L 氯化镁。
3、SOC培养基成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中加1ml 灭过菌的1mol/L 氯化镁外，再加2ml 灭菌的1mol/L 葡萄糖（18g 葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100ml，用0.22um的滤膜过滤除菌）。
4 、TB 培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨12g酵母提取物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。
冷却到60 C , 再加100ml灭菌的170mmol/LKH2PO4/0.72mol/LK2HPO4 的溶液（2.31g 的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml。
高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌）。
5、2X Y培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨16g酵母提取物10g氯化钠4ml如果需要用INNaOH (〜1ml )调整pH 至7.0，再补足水至1L 。
注：琼脂平板需添加琼脂粉 12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉 7g/L 。
6、YPD 培 养基将下列组分溶解在 0.9L 水中： 蛋白胨 20g 酵母提取物 10g 葡萄糖 20g用水补足体积为 1L 后，高压灭菌。
建议在高压灭菌之前，对色氨酸营养缺陷型每升培养基 添加1.6g 色氨酸，因为 YPD 培养基是色氨酸限制型培养基。
常用培养基配制
常用培养基参考文献1.Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks,L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.常用储存液参考文献1.Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks,L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.常用缓冲液10X 磷酸盐缓冲液(储存液) (PBS) /升终1 X浓度NaCl 80.0 g 137 mMKCl 2.0 g 2.7 mMNa2HPO414.4 g 100 mMKH2PO42.7 g 2 mMH2O 至800 mlHCl 至pH 7.4H2O 至1升20X SSC /升终1 X浓度NaCl 175.3 g 150 mMNa3citrate x H2O 88.2 g 15 mMH2O 至800 ml 1M HCl调节pH值至7.0Tricine 179.2 g 0.1 MSDS 10.0 g 0.1% (w/v) O 至1升H2稀释溶液的pH至8.350X TAE (Tris-醋酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱242.0 g 40 mM冰醋酸57.1 ml 20 mM0.5 M EDTA (pH 8.0) 100 ml 2% mMO 至1升H2稀释溶液的pH大约为~8.510X TBE (Tris-硼酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱108.0 g 90 mM硼酸55.0 g 90 mM0.5 M EDTA (pH 8.0) 40 ml 2% mMHO 至1升210X TPE (Tris-磷酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱108.0 g 90 mM磷酸(85%) 15.5 ml 23 mM0.5 M EDTA (pH 8.0) 40 ml 2% mMO 至1升H2TE (Tris-EDTA) 缓冲液pH 7.4, 7.6或8.0 /升终1 X浓度参考文献1.Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks,L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.常用缩写下面红色字体为赠送的个人总结模板，不需要的朋友下载后可以编辑删除xx年电气工程师个人年终总结模板根据防止人身事故和电气误操作事故专项整治工作要求，我班针对现阶段安全生产工作的特点和重点，为进一步加强落实安全工作，特制定了防止人身事故和防电气误操作事故的(两防)实施细则。
常用培养基配制
限制-修饰
rRNA
核糖体核糖核酸
RT
逆转录
RT-PCR
逆转录聚合酶链式反应
SAM
S-腺苷蛋氨酸
SAP
虾碱性磷酸酶
SDA
链置换扩增
/升
终1 X浓度
Na2HPO4x7H2O
64 g
47.8 mM
KH2PO4
15 g
22 mM
NaCl
2.5 g
8.6 mM
NH4
5 g
18.7 mM
添加剂
/升
终1 X浓度
抗生素(如果需要)
氨苄青霉素
50 µg/ml
氯霉素
20 µg/ml
卡那霉素
30 µg/ml
四环素
12 µg/ml
半乳糖苷(如果需要)
2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.
0.1% (w/v)
H2O
至1升
稀释溶液的pH至8.3
5X Tris-三(羟甲基)甲基甘氨酸-SDS电泳缓冲液
/升
终1 X浓度
培养基配方及配置
培养基配方及配置
一般来说，培养基的配方包含基础培养基、添加剂和调节剂。
基础培养基是指提供生物体基本生长必需的基本成分，包括能源物质、有机和无机原料、氮源、矿质元素和缓冲物质等。
常用的基础培养基有
LB培养基、MS培养基等。
添加剂是指用于满足特定实验需求的成分，如抗生素、抗菌剂、激素、维生素等。
添加剂的种类和浓度根据实验目的的不同而有所差异。
调节剂是指用于调节培养基pH值、渗透压、表面张力等物理化学性
质的成分，如缓冲液、pH调节剂等。
以下是一个常用的细菌培养基LB的配方及配置：
1.基础培养基成分：
- 水：900ml
-蛋白胨：10g
-酵母提取物：5g
-NaCl：5g
2.添加剂：（可根据实验需求进行必要的添加）
- 抗生素（如氨苄青霉素）：100μg/ml
- 抗菌剂（如氯霉素）：25μg/ml
3.配制方法：
-将蛋白胨、酵母提取物和NaCl加入水中，并搅拌混合均匀。
- 将培养基溶液倒入容量瓶中，加水至1000ml，并混合均匀。
-调节pH值至7.0-7.2（一般使用缓冲液进行调节）。
-用自制滤纸过滤器滤过，将溶液分装至培养皿或试管中。
-如需添加抗生素或抗菌剂，将相应的药物加入培养基中，并充分溶解。
-培养基装瓶后可以高温高压灭菌，或使用滤器过滤进行无菌处理。
以上是一个简单的LB培养基的配方和配置流程，不同实验需要可能
会有所调整和变化。
在设计培养基配方时，需要结合具体实验目的和生物
体的特性来确定合适的成分和浓度，并注意配制和保管过程中的无菌操作，以确保培养基的质量和有效性。
培养基配方及配置
培养基配方及配置培养基是一种提供养分和条件给细胞、组织或微生物生长和繁殖的人工环境。
不同种类的细胞或微生物，需要不同的培养基来满足其生长和繁殖的需求。
下面将介绍细胞和微生物培养基的配方及配置方法。
1.培养基配方：不同细胞或微生物的培养基配方各有不同，下面是常用的细胞培养基的配方示例：-DMEM培养基配方：Dulbecco’s Modified Eagle Medium（DMEM）是一种广泛应用于动物细胞培养的基础培养基。
其主要成分包括：- 无铁媒介物（Iron Medium）：DMEM中通常包含高浓度的铁盐，例如铁氯化物。
- 糖类（Glucose）：DMEM中通常包含葡萄糖，用于提供能量供细胞代谢。
- 氨基酸（Amino acids）：DMEM中包含多种氨基酸，用于蛋白质的合成。
- 维生素（Vitamins）：DMEM中通常添加B族维生素和其他必需维生素。
- 盐类（Salts）：DMEM中含有多种无机盐，例如氯化钠、磷酸盐等。
- 缓冲液（Buffer）：DMEM中的缓冲液用于维持培养基的pH值。
- 补充物（Supplements）：DMEM中可添加血清、激素和生长因子等提供细胞生长所需的物质。
-LB培养基配方：大肠杆菌（Escherichia coli）的最常用培养基是Luria-Bertani （LB）培养基。
其主要成分包括：- 蛋白质源（Protein source）：LB培养基中通常添加琼脂和酵母提取物作为蛋白质源。
- 碳源（Carbon source）：LB培养基中添加葡萄糖等碳源供菌落生长所需。
- 盐类（Salts）：LB培养基中含有多种无机盐，例如氯化钠、磷酸盐等。
- 缓冲液（Buffer）：LB培养基的缓冲液用于维持培养基的pH值。
- 抗生素（Antibiotics）：LB培养基中添加抗生素，用于选择性培养目标菌株。
- 补充物（Supplements）：在LB培养基中还可以添加亲水胶体、氧化还原剂等。
微生物学实验常用培养基的
牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）121℃灭菌20min。
2、高氏（Gause）1号培养基（培养放线菌用）配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）121℃灭菌20min。
4、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌用）培养基的配制：马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：(1)、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(4)、将滤液稀释到5—6波美度，pH约6.4，加入2%琼脂即成。
121℃灭菌30min。
7、无氮培养基（自生固氮菌、钾细菌）113℃灭菌30min。
8、半固体肉膏蛋白胨培养基121℃灭菌20min。
9、合成培养基加12 mL0.04%的溴钾酚紫（pH5.2—6.8，颜色由黄变紫，作指示剂）。
121℃灭菌20min。
10、豆芽汁蔗糖（或葡萄糖）培养基培养基的配制：称新鲜豆芽100g，放入烧杯中，加入水1000mL，煮沸约30min，用纱布过滤。
用水补足原量，再加入蔗糖（或葡萄糖）50g，煮沸熔化。
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常用培养基和抗生素的配制方法
1.LB培养基：
材料：10g蛋白胨、5g酵母提取物、10g氯化钠、水至1000mL。
方法：将蛋白胨、酵母提取物和氯化钠加入水中，调整pH值至7.0，用自动出厂级水蒸馏水冲洗到1000mL。
2.M9盐基培养基：
材料：64gNa2HPO4•7H2O、15gKH2PO4、2.5gNaCl、5gNH4Cl、水至
1000mL。
方法：将Na2HPO4•7H2O、KH2PO4、NaCl和NH4Cl加入水中，调整pH
值至7.0，用自动出厂级水蒸馏水冲洗到1000mL。
3.TSB培养基：
材料：17g磷酸二氢钾、20g蛋白胨、5g氯化钠、水至1000mL。
方法：将磷酸二氢钾、蛋白胨和氯化钠加入水中，调整pH值至7.3，用自动出厂级水蒸馏水冲洗到1000mL。
4.青霉素琼脂培养基：
材料：5g酵母提取物、1g酪蛋白、10gD-葡萄糖、2gK2HPO4、
2gKH2PO4、20g琼脂、水至1000mL。
方法：将酵母提取物、酪蛋白、D-葡萄糖、K2HPO4和KH2PO4加入水中，调整pH值至7.0，加入琼脂，用自动出厂级水蒸馏水冲洗到1000mL。
抗生素的配制方法：
1.青霉素盐酸盐溶液：
材料：10g青霉素盐酸盐、水至100mL。
方法：将青霉素盐酸盐加入水中，搅拌至溶解。
2.氨苄青霉素钠盐溶液：
材料：10g氨苄青霉素钠盐、水至100mL。
方法：将氨苄青霉素钠盐加入水中，搅拌至溶解。
3.克拉霉素溶液：
材料：10g克拉霉素、水至100mL。
方法：将克拉霉素加入水中，搅拌至溶解。
4.挠敏霉素溶液：
材料：10g挠敏霉素、水至100mL。
方法：将挠敏霉素加入水中，搅拌至溶解。
5.氯霉素溶液：
材料：10g氯霉素、水至100mL。
方法：将氯霉素加入水中，搅拌至溶解。
以上是常用培养基和抗生素的基本配制方法，具体使用时还需要根据实验的需求和文献资料进行相应的优化和调整。
在配制过程中，需要注意配制环境的无菌操作、避免污染和准确称量材料的重量等。