将摇瓶成果转移到发酵罐的策略和实践
发酵罐操作规程范文
发酵罐操作规程范文发酵罐是发酵生产中非常重要的设备，其操作规程对于保证生产质量、提高产量具有至关重要的作用。
下面是一份发酵罐操作规程，供参考：一、发酵罐操作前的准备工作1.检查发酵罐设备的机械和电气设备是否正常，确保设备运行无异常。
2.清洁发酵罐内部和外部，确保无残留物质干净。
3.检查发酵罐是否有漏气现象，如果有，及时进行维修。
4.准备好所需的原料、辅料和发酵罐操作所需的其他设备。
二、发酵罐操作规程1.将所需原料按照配方比例加入到发酵罐中。
2.根据发酵工艺要求，将发酵罐内温度、湿度、PH值等参数设定好。
3.启动发酵罐的搅拌设备，确保原料充分混合。
4.启动发酵罐的通风设备，确保发酵罐内空气流通良好。
5.监控发酵罐内温度、湿度、PH值等参数，及时调整。
6.根据发酵工艺要求，定期对发酵罐内的发酵情况进行检查，如有需要进行适当的调整。
7.发酵过程中，要定期清洁发酵罐内部和外部，确保无污物残留。
8.发酵结束后，将发酵罐内的发酵物料转移至下一步工序，清洁发酵罐。
9.对发酵罐进行定期的检修和保养，确保设备运行良好。
10.记录发酵过程的温度、湿度、PH值等参数，并做好数据备份。
三、发酵罐操作注意事项1.注意发酵罐内部压力的变化，确保安全操作。
2.注意发酵罐内的通风情况，确保空气流通。
3.发酵罐操作过程中要及时调整参数，确保发酵工艺正常进行。
4.不得在发酵罐内随意添加物质，防止影响生产质量。
5.禁止在发酵罐操作过程中吸烟、喝酒等行为，确保生产安全。
6.发酵罐操作人员应穿戴好防护装备，确保安全操作。
7.注意发酵罐设备的维护保养，延长设备寿命。
摇瓶和发酵罐培养
1
体积氧传递系数（ 体积氧传递系数（KLa）和溶解氧的差 异
2
CO2浓度的差异 菌丝受机械损伤的差异
3
Company Logo
1
体积氧传递系数（ 体积氧传递系数（KLa）和溶解氧的差异
通气状况：
摇瓶培养：瓶塞对氧传递的阻力、表面通气状况 与周围环境有关 发酵罐培养：鼓泡通气
Company Logo
四、消除差异的方法
消除摇瓶与发酵 罐培养这两种规 模结果的差异， 模结果的差异， 使摇瓶发酵结果 能反映罐上的结 果，是一个很重 要的问题。 要的问题。
Company Logo
从下面四个方面模拟罐上发酵的条件
1 增加摇瓶机的 转速，提高摇 转速， 瓶的Kd值和 瓶的 值和 溶氧水平
Company Logo
搅拌增加菌体受损伤的程度
菌体内核酸类物质的漏出率与搅拌转速、 菌体内核酸类物质的漏出率与搅拌转速、搅拌持续 时间、搅拌叶的叶尖线速度、 时间、搅拌叶的叶尖线速度、培养液单位体积吸收的功 率以及体积氧传递系数(KLa)等成正比关系，也就是说， 等成正比关系， 率以及体积氧传递系数 等成正比关系 也就是说， 这些发酵参数的数量增加，其漏出率也增加， 这些发酵参数的数量增加，其漏出率也增加，菌体受损 伤的程度也增加。 伤的程度也增加。 虽然摇瓶发酵也有低分子核酸类物质漏出， 虽然摇瓶发酵也有低分子核酸类物质漏出，其漏出 量远远低于罐的。 量远远低于罐的。
Company Logo
LOGO
2 减少培养基的 装量，要注意 装量， 水分蒸发所引 起的误差
3 直接向摇瓶中 通入无菌空气 或氧气等措施
4 可在摇瓶中加 入玻璃珠来模 拟发酵罐的机 械搅拌来研究 因搅拌引起的 差异
发酵罐的操作及控制
发酵罐的操作及控制一、实验目的1、学习发酵过程中发酵控制、取样、流加等一般操作过程。
2、了解和学习自动发酵罐的操作过程和注意事项。
二、实验原理（一）发酵控制1、发酵温度的控制一般来说，接种后应适当提高培养温度，以利于孢子的萌发或加快微生物的生长、繁殖，而且此时发酵的温度大多数是上升的。
随着发酵液的温度逐渐上升，发酵液的温度应该控制在微生物的最适生长温度；到主发酵旺盛阶段温度的控制可比最适生长温度低些，即控制在微生物代谢产物合成的最适温度；到发酵的后期，温度出现下降的趋势，直至发酵成熟即可放罐。
工业发酵过程一般无须加热，因为释放的发酵热常常超过微生物的最适生长温度，所以需要冷却阶段较多。
通常是利用发酵罐的热交换装置进行降温（如采用夹套或蛇形管进行调温），冬季发酵时空气还需进行加热处理，以便维持发酵的正常温度。
2、发酵pH值控制首先应根据不同微生物的特性，不仅要控制原始培养基的pH值，而且在整个发酵过程中，必须随时检测pH值的变化情况，根据发酵过程中的pH值变化规律，选用适当的方法对pH值进行调节和控制。
3、提高溶解氧的措施控制溶解氧的工艺手段主要是从供氧和需氧两方面来考虑。
影响溶解氧效果的主要因素有：（1）通气流量（通风量）；（2）搅拌速度；（3）气体组分中的氧分压；（4）罐压；（5）温度；（6）培养基的物理性质等。
而影响需氧的则是菌体的生理特性，诸如不同菌龄的呼吸强度差别，基质加入时菌丝耗氧的增加等。
4、二氧化碳浓度控制CO2在发酵液中的浓度变化受到许多因素的影响，如细胞的呼吸强度、发酵液的流变学特性、通气搅拌程度；罐压大小、设备规模等。
对CO2浓度的控制主要看其对发酵的影响，如果对发酵有促进作用，应该提高其浓度；反之应设法降低其浓度。
5、泡沫的控制泡沫产生的原因：通气和搅拌、培养基成分、培养基的灭菌方法、培养液的温度、酸碱度、浓度等对发酵过程的泡沫形成也有一定的影响泡沫的消除和防止：了解发酵过程中泡沫的消长规律，方可有效的控制泡沫。
茯苓的摇瓶补料发酵和发酵罐补料液体发酵
茯苓的摇瓶补料发酵和发酵罐补料液体发酵【摘要】本文在茯苓摇瓶液体发酵条件研究的基础上，进一步探讨了茯苓的摇瓶补料培养液体发酵和发酵罐补料液体发酵的发酵工艺。
新发酵工艺缩短了茯苓液体发酵的时间，并提高了茯苓菌体产量。
【关键词】茯苓；液体发酵；发酵条件；补料；发酵罐Erlenmeyer Flask Additional Medium Liquid Fermentation and Additional Medium Liquid Fermentation in Fermentor of Poria CocosAbstract:Under the studies on conditions of liquid fermentation of Poria cocos，the techniques of Erlenmeyer flask additional medium liquid fermentation and additional medium liquid fermentation in fermentor were studied in this paper.The time of Poria cocos liquid fermentation was decreased，the dry weight of mycelium was increased also through new technique of fermentation.Key words:Poria cocos;liquid fermentation;fermentation conditions;additional medium;fermentor茯苓来源于多孔菌科真菌茯苓［Poria cocos (Schw.) wolf］的菌核，属药食两用的大宗药材，具有利水渗湿、健脾安神的功效。
传统的茯苓栽培法存在生产周期长、产量不高及松材消耗量大等缺点，且不利于对我国自然资源和生物多样性的保护。
摇瓶与发酵(发酵人论坛)
装量少也不行，因为放罐后要检测，体积总得要满足各项检测用量。在这里我给一个提示：按照一般经验，发酵液和摇瓶的体积比例为10%-20%。我们首先强调了空气的分配，其实还要考虑其他物质的混合，比如：摇床震动的作用也会使细胞分泌出来的成份快速分布于整个发酵体系中，如果不摇瓶发酵过程，需要补料，自然摇动，也会使这些物质得到分散，均匀作用于每个细胞。
摇瓶虽然简单，但是要想得到有价值的结论，基本原则不能抛弃，细节也要掌握，毕竟细节决定成败。
一、摇瓶装量
摇瓶的装量是多少，没有理论上的规定，所以大家的装量一定也不一样，对装量的观点也互不相同。那么多少合适呢？我不知道有没有下限，但是肯定会有一个上限，总不能装满吧！因为装量越多，在一定转动的情况下，溶氧会越少，相对蒸发量就越低，出现异常的概率就会变大，而且单位发酵液分配的动力也应该会降低。
当然，只有带着工作热情和感情去工作，这些小细节才会去做，才能想得到。之前有个同学做培养基优化初筛时，每个考察会安排3个重复，我挺佩服他的，因为我们只做一次，不做重复，只在中心点做5个重复。但是他在最后检测的时候，却让我们大跌眼镜。他将另外两个瓶中的发酵液直接倒入另外一瓶中，然后检测他认为的平均效价。这其中的问题希望大家能看得出：
本次内容作为网站知识汇总的第一期：摇瓶试验与发酵。
第一节：摇瓶与发酵
之所以选择摇瓶作为第一节，主要原因是我对“她”有深厚的感情，本科时进行植物细胞培养时使用的是摇瓶，研究生课题设计多数时间也在使用摇瓶，进入企业研发部和车间，也长期离不开摇瓶培养，包括种子培养，培养基优化，和过程验证。摇瓶虽然简单，但它的确是我们一个非常好用的工具，不仅研究过程要应用，生产过程也离不开，它的用途多种多样。不仅用于种子制备，种子的测试，原料的测试，培养基的优化，发酵过程的优化，还能够伴随整个发酵过程。
液体菌种制作的关键技术
确定发酵结束，开始利用的时间要根据生产计划和菌龄来确定，菌种成熟的主要指标是，菌丝体形态成为多而小的菌丝球，发酵结束取样时PH值不致过低。放置10分钟，发酵液与菌丝球不分层，菌丝球呈悬浮状，密度较大，发酵液变清即可开始应用。
3.4衰亡期。达到稳定生长期的菌群，由于营养物质的短缺，群体中的细胞死亡率逐渐上升，以致死亡菌数超过新生菌数，群体中的活菌数下降，出现了“负生长”曲线下跌。此期特点：菌体细胞形状和大小出现异常，甚至畸形，菌体发生自溶。
4.不同发酵阶段的培养条件
4.1缩短缓滞期的措施和培养条件。以指数生长期的种龄接种；适当加大接种量，可达20%以上。采用较为丰富的培养基。最适的培养条件：大多数食用菌的培养温度为24~27℃，低罐压0.015~0.025Mpa，较少通气量。
6.检查污染
6.1检查方法。采用先闻后看再取样的方法检查污染情况。培养二天后可以闻尾气味道。正常是无异味。细菌污染有酸味，异味，霉菌污染有酒味。菌丝球增加较快为正常。不增加有可能污染了杂菌。可在接种后第4天取样，在火焰保护下，通过取样阀门，将样液取到无菌瓶内。再在超净工作台上，将样液接入空试管培养基上。于32度条件下培养24h，观查有无细菌等感染。
2.3不同的菌种适宜的PH值范围不同。通常调控PH有以下几种方法；①配制合适的培养基，调节培养初始PH至合适的范围，并使其有很好的缓冲能力。②培养过程中加入非营养基质的酸碱调节剂如Caco2，或氨水或生理酸性物质。③将PH控制与代谢调节结合起来，通过补料来控制PH。
2.4培养基粘度越大，菌球越小，刺毛越短。但粘度不能过大。在培养过程中接种量越大，菌球越小，接种量大时通常可以分散的生长，而接种量小时，则有利于菌丝球形成。搅拌速度快、通气量大时菌球小，搅拌速度慢通气少时菌球直径大。
从摇瓶到发酵罐地发酵放大问题
boss说这是行业内的一个未解之谜。越有鼓包，菌的性能越好。
你们大肠杆菌高密度怎么做到200的？我们做死只能在120-130之间，我们是要表达目标蛋白的，T7启动子，Lac诱导。
诱导点延后到OD达到45以后，用氨水做氮源，甘油做碳源，DO达不到30%以上时补纯氧
回复
高密度培养技术，也就是高密度发酵技术，提高菌体的发酵密度，最终提高产物的比生产率（单位体积单位时间内产物的产量）不仅可以减少培养体积，强化下游分离提取，还可以缩短生产周期，减少设备投资从而降低生产成本，能极大的提高产品在市场上的竞争力．而高密度发酵工艺与优化控制技术在基因工程(Genetic Engineering)类药物上的应用前景广阔，国内外技术空白较多。
我现在做的也和楼主的问题有些相似，就是发酵罐接种后4h左右溶氧回升，后会沉寂几小时后又开始生长，我的表达产物表达得不好，很头疼，看完上面的交流后我觉得我可以试试调整培养基试一试。
据体是几个小时呀？如果是8个小时以上，很有可能是污染和种子退化的问题。培养基的话，目前发现安琪的酵母粉和蛋白胨都不适合做大肠肝菌发酵。
总之吧，摇瓶肯定是基础，只有在摇瓶的基础上进行系统的发酵罐的研究才能真正适合生产。再者，你就是由小罐到大罐的工艺操作还是不尽相同。
仅供参考，大家多交流！
微生物发酵的放大实验，要注意反应罐的培养温度，培养基浓度，PH值，搅拌转速，还要不断的反应罐增加补料。
温度好控制
pH上罐子是可以调节的，在摇床上你只能定时取样检测
一切条件都满足啊，但微量元素我就不敢确定啦，不晓得你们的微量元素是不是20uM/L。
你用的无机盐的培养基呀，加1%的蛋白胨，0.5%的酵母粉，三氯化铁0.2mM，其它微量元素不加都可以的
实验四 红霉素的摇瓶发酵
实验四红霉素的摇瓶发酵一、目的要求1. 掌握微生物发酵的基本流程和技术。
2. 掌握红霉素发酵过程。
3. 学习计算红霉素的浓度及分析影响发酵结果的因素。
二、基本原理1. 红霉素结构式：柠檬酸分子式：C37H67NO13，分子量：733.932. 红霉素为大环内酯类抗生素，抗菌谱与青霉素近似，对革兰阳性菌，如葡萄球菌、化脓性链球菌、绿色链球菌、肺炎链球菌、粪链球菌、溶血性链球菌、梭状芽孢杆菌等有较强的抑制作用。
对革兰阴性菌，如淋球菌、螺旋杆菌、百日咳杆菌、布氏杆菌、军团菌、脑膜炎双球菌以及流感嗜血杆菌、拟杆菌、部分痢疾杆菌及大肠杆菌等也有一定的抑制作用。
作用机制主要是与核糖核蛋白体的50S亚单位相结合，抑制肽酰基转移酶，影响核糖核蛋白体的移位过程，妨碍肽链增长，抑制细菌蛋白质的合成，系抑菌剂。
红霉素的生物效价测定原理：红霉素的生物测定是用杯碟法，利用抗菌素在琼脂培养基内的扩散渗透作用，将已知效价的标准溶液与未知效价的样品溶液，在同样的条件下，在涂布有高度敏感型的试验菌株培养基上，进行对照培养。
培养一定时间后，在抗菌素到达的适应浓度范围内，产生透明圈，比较两者抑菌圈的大小，利用图表法对算出未知抗菌素的效价。
敏感菌：葡萄球菌等革兰氏阳性菌株。
三、实验材料1．菌种红霉素链霉菌，金黄色葡萄球菌2．实验器材1 mol/L NaOH；1 mol/L HCl50 mL无菌生理盐水、10mL 、5mL吸管、接种环；酒精灯，滤纸，漏斗，250 mL三角瓶，200ml量筒，广范pH试纸，玻璃棒，滴管，天平，分光光度计等。
3.种子培养基：可溶性淀粉3.5%，硫酸铵0.75%，氯化钠0.5%，磷酸氢二钾0.08%，蛋白胨0.5%，糊精2%，葡萄糖3%，酵母粉2%，碳酸钙0.8%，硫酸镁0.05%，pH 7.5；4. 发酵培养基：可溶性淀粉3%，硫酸铵0.5%，糊精1.5%，葡萄糖2%，玉米浆0.1%，碳酸钙0.9%，豆油0.3 ml/75ml，pH 7.5。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
将摇瓶成果转移到发酵罐的策略和实践
摇瓶是实验室中最常用的设备之一，它通常用于发酵，处理采样，液体冷冻，细胞培养等操作。
使用摇瓶可以有效地完成上述操作，但有些细节操作需要小心谨慎，以防止意外事故发生。
一般来说，摇瓶中的成果可以复杂地转移到发酵罐中。
在实际应用中，有许多不同的转移策略，以防止污染和损坏发酵罐内的物质。
本文将重点介绍如何将摇瓶成果转移到发酵罐的策略和实践。
首先，在转移摇瓶成果到发酵罐之前，应该对摇瓶和发酵罐进行清洗，以确保它们不会受到污染。
在清洗时，应使用专门的清洗剂，并以正确的清洗步骤和正确的清洗时间进行清洗。
外，应确保发酵罐外表干燥，以避免样品与外部污染物混合。
其次，在将摇瓶成果转移到发酵罐中时，一定要注意转移的速度和量。
若过快，液体可能会受到空气中的污染，从而影响发酵的结果；若过多，发酵罐的容量可能不够，从而使样品受到污染。
此外，还需要注意转移液体的温度，以避免损坏发酵罐中的物质。
最后，在将摇瓶成果转移到发酵罐之后，应及时安装好发酵罐的盖子，以防止外部空气流入发酵罐，从而影响发酵罐内的物质。
此外，应着重关注发酵过程，及时调整发酵条件，以确保实验结果准确。
总之，将摇瓶成果转移到发酵罐是一项复杂的技术操作，在此过程中，需要注意清洗发酵罐，控制转移的速度和量，监控发酵过程以及注意发酵罐的封盖，以确保发酵成品的质量。
只有完成这些要求，才能帮助实验室获得可靠的成果。