实验五 酵母菌的形态观察、死活细胞的鉴别及显微镜直接计数法
实验酵母菌形态学观察与显微镜直接计数技术1剖析

四、实验方法
四)插片接种法
融化高氏1号培养基,倾倒平板。冷凝。 将浸泡于酒精中的盖玻片用酒精燃烧法灭菌、
冷却,45度倾角插入培养基。 接种环取放线菌孢子,沿插片接缝处划线接种。 每人练习1片,共用培养基。 每2组共用一平板。每板插片4片 一半同学接种天蓝色放线菌,另一半同学接种
白色放线菌
酵母菌的有性生殖方式,是指邻 近两个”性别”不同的细胞,相 互接触,局部融合,再通过质配, 核配和减数分裂,形成4个单倍 体子核,每一个子核与其附近的 原生质一起,在其表面形成一层 孢子壁后,就形成了一个子囊孢 子,而原有营养细胞就成了子囊
BW
3.酵母菌的形态有何特点?
大多数酵母菌为单细胞,形状因种 而异。基本形态为球形、卵圆形、 圆柱形或香肠形。有些 酵母菌(热 带假丝酵母,Candida tropicalis) 进行一连串的芽殖后,长大的子细 胞与母细胞并不立即分离,其间仅 以狭小的接触面相连,这种藕节状 的细胞串称为“假菌丝” (图)。 (如果细胞相连,且其间的横截面 积与细胞直径一致,这种竹节状的 细胞串称真菌丝。如霉菌菌丝等)。
显微镜计数技术
血球计数板是一 块特制的厚型载 玻片,载玻片上 有4条槽而构成 3个平台。中间 的平台较宽,其 中间又被一短横 槽分隔成两半, 每个半边上面各 有一个计数区 (图5-2)。
显微镜计数技术
计数区的刻度有两种:一种 是计数区分9个大方格(大 方格用三线隔开),而每个 大方格又分成16个中方格; 另一种是一个计数区分成 25个中方格(大方格之间 用双线分开)。但是不管计 数区是哪一种构造,它们都 有一个共同特点,即计数区 都由400个小方格组成。
(3)假丝酵母假菌丝的观察:用水浸片观察假丝 酵母的假菌丝。
酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴定_百替生物

实验七酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴定一、实验目的1.观察酵母菌的形态特征、出芽生殖方式,并掌握酵母菌与细菌形态特征的区别。
2.学习鉴别死活细胞的实验方法。
二、实验原理酵母菌是单细胞的真核微生物,菌体比细菌大而且不运动。
酵母菌的繁殖方式分为无性繁殖和有性繁殖两种,以无性繁殖为主。
芽殖是酵母菌普遍的无性繁殖方式,少数为裂殖;有性繁殖是产生子囊和子囊孢子。
本实验是通过美蓝染液水浸片和水一碘液水浸片来观察酵母的形态和芽殖方式。
美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型无色。
用美蓝对酵母活细胞染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型,而对代谢作用微弱或死细胞,无此还原能力或还原能力极弱,而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。
因此,不仅用此法可观察酵母细胞形态,也可用来鉴别酵母菌的死细胞和活细胞。
三、实验器材1.材料:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)或卡尔酵母(Saccharomyces calsbergensis)培养2天左右的麦芽汁(或豆芽汁)液体培养物。
2.试剂:O.1%吕氏碱性美蓝染色液、革兰氏染色用的碘液。
3.器材:显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、洒精灯等。
四、实验步骤1.美蓝浸片观察(1)在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色液,然后按无菌操作接种环挑去少量酵母菌放在染液中,混合均匀,染液不宜过多。
注:染液不宜过多或过少,否则,在盖上盖玻片时,菌液会溢出或出现大量气泡。
(2)用镊子取一块盖玻片,先将一边与菌液接触,然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上。
注:盖玻片不宜平着放,以免产生气泡。
(3)将制片放置约3min后镜检,先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形态和出芽情况,并根据颜色来区别死活细胞。
(4)染色约0.5h后再次观察,注意死细胞数量是否增加。
2.水-碘浸片观察在载玻片中央滴一滴碘液,然后在其上加3小滴水,取少许酵母菌苔放在水-碘液中混匀,盖上盖玻片后镜检。
酵母菌死活鉴定和显微镜检测

实验二酵母菌的死活鉴定和显微镜计数一、实验目的学习血球计数板使用的原理与方法,学习区别死活酵母的方法。
二、原理测定微生物数量方法很多,通常采用的有显微直接计数和平板计数法。
镜检计数法适用于各种单细胞菌体的纯培养悬浮液,菌体较大的酵母或霉菌孢子可采用血球计数板,一般细菌采用彼得罗夫•霍泽细菌计数板,两种计数板的原理和部件相同,只是细菌计数板较薄,可以使用油镜观察,而血球计数板较厚,不能使用油镜,故细菌不易看清。
血球计数板的构造血球计数板是一块特制厚玻片。
玻片上由四道槽构成三个平台,中间的平台分成两半,其上各刻一个相同而有一定面积的小方格网。
方格的刻度有两种规格。
一种是25×16,称为希里格式血球计数板,分为25大格,每大格又分为16小格;另一种是16×25,称为麦氏血球计数板,分16大格,每大格分为25小格。
总数都是400小格(如图所示)。
每个大方格边长为1mm,则每一大方格的面积为1mm2,每个小方格的面积为1/400mm2,盖上盖玻片后,盖玻片与计数室底部之间的高度为0.1mm,所以每个计数室(大方格)的体积为0.1mm3,每个小方格的体积为1/4000mm3,使用血球计数板直接计数时,先要测定每个小方格(或中方格)中微生物的数量,再换算成每毫升(或每克样品)中微生物细菌的数量。
三、实验材料1、菌种:酵母菌2、仪器:显微镜、血球计数板3、材料:盖玻片、吸水纸、滴管4、染料:美蓝染液四、实验步骤和内容1、视待测菌液浓度,加无菌水做适当稀释,以每小格菌数5-10个为宜,准确计算稀释倍数。
2、取清洁干燥的血球计数板,加盖玻片盖住网格和两边的槽。
3、将待测菌液充分摇匀后,用无菌吸管吸少许,由盖玻片边缘或槽内加入计数板来回推压盖玻片,使其紧贴在计数板上,计数室内不能有气泡。
静置5-10分钟。
4、在低倍镜下找到小方格网后更换高倍镜观察计数,上下调动细螺旋,以便看到小室内不同深度的菌体。
实验五、酵母的活菌观察及活细胞计数

实验五、酵母的活菌观察及活细胞计数一、实验目的1、认识酿酒酵母的形态特征。
2、了解微生物细胞活体染色的原理,能辨别酿酒酵母的死活。
3、学校血细胞计数法的原理和方法。
二、实验原理1、血细胞计数板计数的原理:将经过适当稀释的微生物细胞或孢子悬液,加至血细胞计数板的技数室中,在显微镜下逐格计数。
由于计数室的容积是固定的(0.1mm3),故可将在显微镜下计得的菌体细胞数(或孢子数)换算成单位体积试样中的含菌量。
此法计得的数值为样品中的死菌数和活菌数的总和,故称其为总菌计数法。
2、血细胞计数板:是一块特制的精密载玻片,在载玻片上有四条长槽,将玻片中央区域分隔成3个平台,中间平台比两边的平台低0.1mm,此平台中间又有一条短槽将其分隔成2个短平台,在2个平台上各有一个相同的方格网。
它被划分为9个大格,其中央大格即为计数室。
该计数室又被精密地划分为400个小格,但计数室还有25个中格(为16小格/每中格)或16个中格(为25小格/每中格)两种,每中格的四周均有双线界限标志,以便在显微镜下区分。
因此两种中格类型计数室的总体积是一样的。
即计数室大方格的边长为1mm,故面积为1mm2,j计数室与盖玻片间的深度为0.1mm,所以计数室的体积为0.1mm3。
计数时,先计得若干中格(一般为5个)中格内的含菌数,再求得每中格菌数的平均值,然后乘上中格数(16或25),就可得出1大方格(0.1mm3)计数室中的总菌数,若再乘上104(换算成每mL的含菌量)及菌液的稀释倍数,即可算出每mL原菌液中的总菌数值。
算术计算法:菌数(个/mL)=(x1+x2+x3+x4+x5)/5 ×25(或16)×104×稀释倍数3、活体染色法:活体染色法就是用对微生物无毒性的染料(如美兰、刚果红、中性红等染料)配成一定的浓度,,再与一定量的菌液混合,经一段时间后死菌和活菌会呈现不同的颜色,这样便可以在显微镜下区分活菌数和死菌数。
实验7_酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别

二、基本原理——美蓝染色液 基本原理——美蓝染色液
美蓝为无毒性染料,其氧化型为蓝色, 美蓝为无毒性染料,其氧化型为蓝色,而还原型为无 用它对酵母菌染色时, 色。用它对酵母菌染色时,由于活细胞的新陈代谢作 使细胞内具有较强的还原能力, 用,使细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝从蓝色 的氧化型变为无色的还原型,所以酵母的活细胞无色; 的氧化型变为无色的还原型,所以酵母的活细胞无色; 对于死细胞或代谢缓慢的老细胞, 对于死细胞或代谢缓慢的老细胞,则因它们无此还原 能力或还原能力极弱,而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。 能力或还原能力极弱,而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。 因此,用美蓝水浸片不仅可观察酵母的形态, 因此,用美蓝水浸片不仅可观察酵母的形态,还可以 区分死、活细胞。 区分死、活细胞。
四、操作步骤——美兰染色 操作步骤——美兰染色
在载玻片中央加一滴0.05%吕氏碱性美蓝染色液, 在载玻片中央加一滴0.05%吕氏碱性美蓝染色液,用接种环 0.05%吕氏碱性美蓝染色液 染液不宜过多或过少) 挑取少量酵母菌苔,混合均匀; 挑取少量酵母菌苔,混合均匀;(注:染液不宜过多或过少) 用镊子取一块盖玻片,先将一边与菌液接触, 用镊子取一块盖玻片,先将一边与菌液接触,然后慢慢将盖 玻片放下使其盖在菌液上; 盖玻片不宜平着放下) 玻片放下使其盖在菌液上;(注:盖玻片不宜平着放下)
二、基本原理——酵母菌形态 基本原理——酵母菌形态
酵母菌为单细胞真核微生物, 菌体比细菌大。 酵母菌为单细胞真核微生物 , 菌体比细菌大 。 无 性繁殖主要是出芽生殖 出芽生殖, 性繁殖主要是 出芽生殖 , 仅裂殖酵母属是以分裂 方式繁殖; 有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。 方式繁殖 ; 有性繁殖是通过接合产生子囊孢子 。 本实验通过用美蓝染色浸片 美蓝染色浸片来观察生活的酵母形 本实验通过用 美蓝染色浸片 来观察生活的酵母形 态和出芽生殖方式。 态和出芽生殖方式。
实验五___放线菌、霉菌及真菌的形态观察

a.形态观察:酵母是不运动的单细胞真核生物, 形态观察:酵母是不运动的单细胞真核生物, 形态观察 通常比常见细胞大几倍甚至十几倍。 通常比常见细胞大几倍甚至十几倍。 大多数 酵母菌以出芽方式进行无性繁殖, 酵母菌以出芽方式进行无性繁殖,有的分裂繁 有性繁殖是通过结合产生子囊孢子。 殖;有性繁殖是通过结合产生子囊孢子。 b.死活鉴定:美蓝是一种无毒的染料,它的氧 b.死活鉴定:美蓝是一种无毒的染料, 死活鉴定 化型呈蓝色,还原型呈无色。 化型呈蓝色,还原型呈无色。用美蓝对酵母的 活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用, 活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用, 细胞内具有较强的还原能力, 细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色 的氧化型变为无色的还原型。因此, 的氧化型变为无色的还原型。因此,具有还原 能力的酵母活细胞是无色的, 能力的酵母活细胞是无色的,而死细胞或代谢 作用微弱的衰老细胞则成蓝色或淡蓝色。 作用微弱的衰老细胞则成蓝色或淡蓝色。
实验五
放线菌、 放线菌、霉菌及酵母菌的 形态观察
一.实验目的
学习并掌握观察放线菌、 学习并掌握观察放线菌、霉菌及酵母菌 形态的基本方法; 形态的基本方法; 初步了解放线菌、霉菌及酵母菌的形态 初步了解放线菌、 特征。 特征。
微生物实验思考题参考答案及知识要点

微生物实验思考题参考答案及知识要点一.酵母菌形态观察及死活细胞鉴别1.吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同对酵母菌死细胞数量有何影响?是分析其原因。
美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型无色。
用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变成为无色的还原型。
因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色,借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。
美蓝浓度高了,代谢不太活跃的活细胞也会被染色,从而使观察到的死细胞较多,活细胞较少;反之,则代谢微弱的细胞也能还原美蓝,不被染色,从而使观察到的死细胞较少,活细胞较多。
二. 细菌的简单染色和革兰氏染色1. 革兰氏染色中那一步是关键?为什么?你是如何操作的?革兰氏染色的关键步骤是:乙醇脱色(是脱色时间)。
如果脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌;如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。
脱色时间的长短还受涂片的厚薄,脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响,难以严格规定(脱色是应当控制速度,脱色时间一般为20—30s)。
2. 固定的目的之一是杀死菌体,这与自然死亡的菌体有何不同?自然死亡的菌体本身已经部分自溶,结构已经改变。
固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。
3. 不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌?能。
在酒精脱色后,不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌(G+),被酒精脱色为革兰氏阴性菌。
最后一步用番红染液复染,是为了让结果更清楚。
4. 涂片为什么要固定,固定适应注意什么问题?a 杀死细菌并使菌体黏附与玻片上;b 增加其对染料的亲和力。
固定时应注意:手持玻片,菌膜朝上,在微火过3次(手指触摸玻片反面,不烫手为宜),固定时应尽可能维持细胞原有形态,防止细胞膨胀或收缩。
三. 霉菌、放线菌的形态观察1. 镜检时,如何区分基内菌丝与气生菌丝?一般气生菌丝颜色较深,直生或分枝丝状,比基内菌丝粗;而基内菌丝色浅、发亮,可看到横隔膜,继而断裂成球状或杆状小体。
实验四:酵母菌形态观察及计数

(2)倾斜缓慢放置盖玻片;
(3)放置3min后镜检;
(4)染色半小时后再次进行观察,注意死
活细胞数量是否增加;
(5) 用0.05%吕氏碱性美蓝染液重复上述操 作。
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细菌形态观察
3.血球计数实验操作
(1)镜检计数室:去污,清洗,吹干; (2)加样品:盖上盖玻片,菌悬液于边缘滴一小滴,
渗入,使充满菌液; (3)显微镜计数:加样后静止5min,每个小格内5
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3.直接计数法
细菌形态观察
直接计数法是利用血球计数板在显微镜下直接 计数的一种简便、快速、直观的方法。
显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养 悬浮液,如有杂菌或杂质,常不易分辨。菌 体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数 板,一般细菌则采用彼得罗夫·霍泽 (Petrof Hausser)细菌计数板。两种计数 板的原理和部件相同,只是细菌计数板较薄, 可以使用油镜观察。而血球计数板较厚,不 能使用油镜,计数板下部的细菌不易看清。
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4.血球计数板的构造
细菌形态观察
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细菌形态观察
血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻 片上有4条槽而构成3个平台。中间的平台 较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每 个半边上面各有一个计数区(图21-1), 计数区的刻度有两种:一种是计数区分为 16个大方格(大方格用三线隔开),而每 个大方格又分成25个小方格;另一种是一 个计数区分成25个大方格(大方格之间用 双线分开),而每个大方格又分成16个小 方格。但是不管计数区是哪一种构造,它们 都有一个共同特点,即计数区都由400个小 方格组成。
细菌形态观察
一.1.配制培养基、灭菌、接种培养
二. 每台配制100ml马丁氏液体培养基(不加琼脂),分 装到8支试管中,121℃,30min灭菌,灭菌后每一小 组分得2支试管,液体接种酵母菌,30℃恒温摇床培 养
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五、实验报告
1、绘图说明你所观察的酵母菌的形态特征 填表: 2、填表:
各中格中菌数 1 2 3 4 5 二次平均值 菌数/mlAຫໍສະໝຸດ B 5二、实验原理
酵母菌是不运动的单细胞真核微生物, 酵母菌是不运动的单细胞真核微生物,其大小通常比常见 细菌大几倍甚至十几倍。大多酵母菌以出芽方式进行无性繁殖, 细菌大几倍甚至十几倍。大多酵母菌以出芽方式进行无性繁殖, 有的分裂繁殖,有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。 有的分裂繁殖,有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验是通 过美蓝染液水浸片来观察酵母菌的形态和出芽生殖方式。 过美蓝染液水浸片来观察酵母菌的形态和出芽生殖方式。
菌种: 1、菌种:酿酒酵母 仪器或其他用品:血细胞计数板,显微镜, 2、仪器或其他用品:血细胞计数板,显微镜,盖玻 片,载玻片等 0.1%美蓝染色液等 3、0.1%美蓝染色液等
四、实验内容: 实验内容:
1、美蓝浸片观察 在载玻片中央加一滴0.1%的美蓝染色液, 在载玻片中央加一滴0.1%的美蓝染色液,然后用 0.1%的美蓝染色液 接种环取少量酵母菌于染液中,混合均匀; 接种环取少量酵母菌于染液中,混合均匀; 用镊子取一块盖玻片,先将一边与菌液接触, 用镊子取一块盖玻片,先将一边与菌液接触,然 后慢慢将盖玻片放下,使其盖在菌液上。 后慢慢将盖玻片放下,使其盖在菌液上。将玻片放置 约三分钟后,用显微镜观察酵母的形态和出芽情况, 约三分钟后,用显微镜观察酵母的形态和出芽情况, 并判断细胞的死活。 并判断细胞的死活。
利用血细胞计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生 物计数方法。该计数板是一块特制的载玻片, 物计数方法。该计数板是一块特制的载玻片,其上由四条槽构 成三个平台,中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半, 成三个平台,中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半,每一边 的平台上各刻有一个方格网,每个方格网共分为几个大方格, 的平台上各刻有一个方格网,每个方格网共分为几个大方格, 中间的大方格即为计数室。血细胞计数板构造如图1 中间的大方格即为计数室。血细胞计数板构造如图1,计数室的 刻度一般有两种规格,一种是一个大方格分成25个中方格,而 刻度一般有两种规格,一种是一个大方格分成25个中方格, 25个中方格 每个中方格又分成16个小方格,另一种是一个大方格分成16 16个小方格 16个 每个中方格又分成16个小方格,另一种是一个大方格分成16个 中方格,而每个中方格又分成25个小方格, 25个小方格 中方格,而每个中方格又分成25个小方格,但无论是哪一种规 格的计数板,每一个大方格中的小方格400 400个 格的计数板,每一个大方格中的小方格400个,每一个大方格 边长为1毫米,则每一个大方格的面积为1mm 盖上盖玻片后, 边长为1毫米,则每一个大方格的面积为1mm2,盖上盖玻片后, 盖玻片与载玻片之间的高度为0.1毫米, 0.1毫米 盖玻片与载玻片之间的高度为0.1毫米,所以计数室的容积为 万分之一毫升)。 0.1mm3(万分之一毫升)。
酵母菌的形态观察、 酵母菌的形态观察、死活细胞鉴别 及显微镜直接计数法
一、实验目的
1、观察酵母菌的形态及出芽生殖方式,学习区分酵母菌死活 观察酵母菌的形态及出芽生殖方式, 细胞的实验方法。 细胞的实验方法。 2、明确血细胞计数板的原理,掌握使用血细胞计数板进行微 明确血细胞计数板的原理, 生物计数的方法。 生物计数的方法。
1ml菌液中的总菌数 菌液中的总菌数=A/5×25×104×B=50000AB 菌液中的总菌数 × ×
同理,如果是16个中方格的计数板, 同理,如果是16个中方格的计数板,则 16个中方格的计数板
1ml菌液中的总菌数 菌液中的总菌数=A/4×16×104×B=50000AB 菌液中的总菌数 × ×
三、实验器材: 实验器材:
美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈兰色,还原型无色, 美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈兰色,还原型无色, 是一种无毒性的染料 用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用, 用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用, 细胞内具有较强的还原能力, 细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由兰色的氧化型变为无色 的还原型。因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的, 的还原型。因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的,而死细 胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈兰色或淡兰色, 胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈兰色或淡兰色,借此即可对酵 母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。 母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。 显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别 显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别 的具有特定面积和容积的载玻片上(又称计菌器),于显微镜下 的具有特定面积和容积的载玻片上(又称计菌器),于显微镜下 ), 直接计数的一种简便、快速、直观的方法。 直接计数的一种简便、快速、直观的方法。目前国内常用的计菌 器有:血细胞计数板、Peteroff-Hauser计菌器以及Hawksley计 器有:血细胞计数板、Peteroff-Hauser计菌器以及Hawksley计 计菌器以及Hawksley 菌器等,它们都可用于酵母、细菌、霉菌孢子等悬液的计数。 菌器等,它们都可用于酵母、细菌、霉菌孢子等悬液的计数。
计数时,通常数五个中方格的总菌数, 计数时,通常数五个中方格的总菌数,然后求得每个中方 格的平均值,再乘上25或16,就得出一个大方格中的总菌数, 格的平均值,再乘上25或16,就得出一个大方格中的总菌数, 25 然后再换算成毫升菌液中的总菌数。 然后再换算成毫升菌液中的总菌数。 设五个中方格中总菌数A 菌液稀释倍数B 如果是25个中 设五个中方格中总菌数A,菌液稀释倍数B,如果是25个中 25 方格的计数板, 方格的计数板,则
2、显微镜计数 ①、菌悬液的制备 ②、镜检计数室 ③、加样品 将血细胞计数板盖上盖玻片,再用滴管将刚混匀 将血细胞计数板盖上盖玻片, 的菌悬液由盖玻片边缘滴一小滴, 的菌悬液由盖玻片边缘滴一小滴,让菌液沿缝隙靠毛 细渗透作用自动进入计数室。 细渗透作用自动进入计数室。 ④、显微镜计数 ⑤、清洗血细胞计数板