实验室常用的N测定方法

黄瓜植株氮磷钾测定

5.吸取待测液20ml，加两滴2，4-2硝基酚，加6N NaOH至溶液呈淡黄色，加10ml显色剂（钼酸铵—偏钒酸铵），定容至50ml，用比色法测定（450nm）。

6. 吸取待测液5ml，加水定容至25ml，用火焰光度计测定（满度40ug/ml）

总氮量的测定――微量凯氏定氮法

1.仪器设备：微量凯氏定氮仪、凯氏烧瓶（50ml）、容量瓶（50ml）、锥形瓶（50ml）、滴定管（5ml）、吸量管（5ml和2ml）、量筒、消化架和蒸馏装置

2. 试剂：

1）H2SO4（三级、无氮、比重1.84）。

2）10N.NaOH溶液：称取工业用固体NaOH 420g，溶于1L水中，加橡皮塞。

3）甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：0.5g溴甲酚绿和0.1g甲基红溶于100 ml乙醇

4）2%H3BO3指示剂溶液：20.0g H3BO3（三级）溶于1L水中，每升H3BO3溶液加入甲基红-溴甲酚绿混合指示剂5ml并用稀酸或稀碱调至微紫色，pH为4.8，宜鲜配鲜用。

5）混合催化剂：

K2SO4（三级）：CuSO4（三级）=3：1混合研磨，通过80号筛混匀，贮于具塞瓶中，消煮时每毫升H2SO4加0.37g混合催化剂。

6）0.01 N H2SO4标准溶液(0.556ml浓硫酸加水至2L，量取一定要准确。)

3 .步骤：

1）消煮：称取磨碎植株样品0.2500g，加入30~50 ml消煮管中，加入1.85 g混合催化剂，再加入浓H2SO4 8ml加热1.5小时(200度)，溶液至淡蓝色后继续消煮0.5~1.0小时(300度)，瓶内回流达瓶颈1/3为好。

2）蒸馏：消煮液转入半微量定氮蒸馏器，用30ml分3~4次洗消煮管，蒸馏15分钟，体积达50ml，即可停止蒸馏。

3）滴定：由蓝绿至蓝紫突变为紫红为滴定终点。

4. 结果计算：

全N%=（V-V0）×N×0.14×100÷W

N%=(V-V0)×10-3×N×14×10÷W×100

式中：

N—H2SO4标准溶液的当量浓度；

V—土样测定的消耗的H2SO4标准溶液体积（ml）；

V0——空白测定消耗的H2SO4标准溶液体积（ml）；

0.014—N的毫当量（g）；

W—烘干土样重（g）；

两次平行测定结果允许绝对相差为0.005%。

硫酸标准液的配制及标定

1、取无水碳酸钠（Na2CO3 ）2克左右，180—200℃下烘4-6小时。

2、准确称取1克Na2CO3溶于少量水，定容至一升。

3、准确吸取2.8ml浓硫酸，溶于100ml水中即为1N，稀释100倍即为0.01N。（例：取10ml

定容至1升）。

4、取配好的碳酸钠标准液1ml，加入甲基红-溴甲酚绿指示剂1滴（绿色），以所配0.01N

硫酸滴定至终点（红色），计算体积。

做三次平行标定以求准确。

5、公式：硫酸当量浓度N=n/（V*0.052994）

n：单位：克，1ml标准液含Na2CO3的克数。

V：单位：ml，滴定用去硫酸体积。

附：① H2SO4：比重1.84；重量百分比（%）96%；M=18；N=36；配1升1N溶液需量取28ml。

②无水碳酸钠，分析纯（二级），克当量数为52.994。

3—5.1.3 植物全磷的测定(钒钼黄吸光光度法)

方法原理植物样品经浓H2SO4消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。待测液中的正磷酸与偏钒酸和钼酸能生成黄色的三元杂多酸，其吸光度与磷浓度成正比，可在波长400～490nm处用吸光光度法测定磷。磷浓度较高时选用较长的波长，较低时选用较短的波长。①此法的优点是操作简便，可在室温下显色，黄色稳定②。在HNO3，HCl,HClO4和H2SO4等介质中都适用，对酸度和显色剂浓度的要求也不十分严格③，干扰物小④。在可见光范围内灵敏度较低，适测范围广(约为1—20mg/L，P)故广泛应用于含磷较高而且变幅较大的植物和肥料样品中磷的测定。

试剂

(1)钒钼酸铵溶液25.0g钼酸铵［(NH4)6Mo7O24·4H2O分析纯］溶于400ml 水中，另将1 25g偏钒酸铵(NH4VO3，分析纯)溶于300ml沸水中，冷却后加入250ml浓HNO3(分析纯)。将钼酸铵溶液缓缓注入钒酸铵溶液中，不断搅匀，最后加水稀释到1L，贮入棕色瓶中。

(2)6mol/LNaOH溶液24gNaOH溶于水，稀释至100ml；

(3)0.2%二硝基酚指示剂0.2g2，6—二硝基酚或2，4—二硝基酚溶于100ml 水中； (4)磷标准液［C(P)＝50mg/L］0.2195g干燥的KH2PO4(分析纯)溶于水，加入5ml浓HNO3，于1L容量瓶中定容。

(4)P标准液称取0.2195gKH2PO4(105°烘干)，加水400ml左右，再加浓硫酸5ml，定容1L。

操作步骤：吸取定容、过滤或澄清后的消煮液10.00ml(V2含磷0.05～0.75mg)放入50ml容量瓶中，加2滴二硝基酚指示剂，滴加6mol/LNaOH中和至刚呈黄色，加入10.00ml钒钼酸铵试剂，用水定容(V3)。15分钟后用1cm光径的比色杯在波长440mm处进行测定，以空白溶液(空白试验消煮液按上述步骤显色)调节仪器零点。

标准曲线或直线回归方程准确吸取50mg/LP标准液0，1，2.5，5，7.5，10，15ml分别放入50ml容量瓶中，按上述步骤显色，即得0，1.0，2.5，5.0，7.5，10，15mg/LP的标准系列溶液，与待测液一起测定，读取吸光度，然后绘制标准曲线或求直线回归方程。

结果计算

全P，%＝Ｃ(P)×(v1/m)×(v3/v2)×10－4

式中C(P)—从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷浓度，mg/L；

v3—显色液体积，ml；

v2—吸取测定的消煮液体积，ml；

v1—消煮液定容体积，ml；

m—称样量，g；

10－4—将mg/L浓度单位换算为百分含量的换算因数。

注释

①显色液中(CP)＝１～５mg/L时，测定波长用420nm；5—20mg/L，用490nm。待测液中Fe３＋浓度高的选用450nm，以消除Fe３＋干扰。校准曲线也应用同样波长测定绘制。

②一般室温下，温度对显色影响不大，但室温太低(如＜15℃＝时，需显色30分钟，稳定时间可达24小时；

③如试液为HCl，HClO4介质，显色剂应用HCl配制；试液为H2SO4介质，显色剂也用H2SO4配制。显色液酸的适宜浓度范围为0.2～1.6mol/L，最好是0.5～1.0mol/L，酸度高显色慢且不完全，甚至不显色，低于0.2mol/L，易产生沉淀物，干扰测定。钼酸盐在显色液中的终浓度适宜范围为1.6×10－３ ～10－２mol/L，钡酸盐为8×10－５ ～2.2×10－３mol/L。

④此法干扰离子少，干扰离子是Fe３＋ ，当显色液中Fe３＋ 浓度超过0.1%时，它的黄色有干扰。可用扣除空白法消除。

3—5.1.4 植物全钾的测定(火焰光度法)

方法原理植物样品经消煮或浸提，并经稀释后，待测液中的K可用火焰光度法测定。

试剂

(1)K标准溶液(C(K)＝100mg/L)0.1907gKCl(分析纯，在105～110℃干燥2h)，溶于水，于1L容量瓶中定容，存于塑料瓶中。

)放入50ml容量瓶中，用水操作步骤吸取定容后的消煮液5.00—10.00ml(v

２

定容(v3)。直接在火焰光度计上测定，读取检流计读数。

标准曲线或直线回归方程准确吸取100mg/LＫ标准溶液0，0.5，1.0，2.5，5.0，10，20ml，分别放入50ml容量瓶中，加入定容后的空白消煮液5或10ml(使标准溶液中的离子成分和待测液相近)，加水定容。即得0，1，2，5，10，20，40mg/LK的标准系列溶液。以浓度最高的标准溶液定火焰光度计检流计的满度(一般只定到90)，然后从稀到浓依次进行测定，记录检流计读数，以检流计读数为纵坐标绘制标准曲线或求直线回归方程。

结果计算

全K，%＝Ｃ(Ｋ)×(v3/m)×(v1/v2)×10-4

式中

C(K)—从标准曲线或回归方程求得的测读液中K的浓度，mg/L；

v1——消煮液定容体积，ml；

v2——消煮液的吸取体积，ml；

v3——测读数定容体积，ml；

m——称样量，g；

10-4——将mg/L浓度单位换算为百分含量的换算因数。