病毒感染的微生物学检查方法
简述病毒微生物学诊断的方法和流程
简述病毒微生物学诊断的方法和流程下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
文档下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用，谢谢！本店铺为大家提供各种类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，想了解不同资料格式和写法，敬请关注！Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you! In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!病毒微生物学诊断的方法和流程随着病毒性疾病的不断爆发和传播，病毒微生物学诊断成为了保障公共卫生的关键一环。
病毒感染的检查方法与防治原则
效抑制 HIV gp120与 T 细胞 CD4 分子结合；新霉素 B 是一种氨基糖苷类抗生素，可作
3. 蛋白酶抑制剂：沙奎那韦、茚地那韦、利托那韦、替拉瑞韦、波普
瑞韦、西咪匹韦 4. 整合酶抑制剂：拉替拉韦、艾维雷韦
5. 神经氨酸酶抑制剂：奥司他韦、扎那米韦
医学微生物学（第9版）
二、干扰素和干扰素诱生剂
1. 干扰素（IFN）
具有广谱抗病毒作用，毒性小，使用同种IFN无抗原性，主要用于 HBV、HCV 人类疱疹病毒和乳头瘤病毒等感染的治疗。
用病毒复制中的调控因子，阻断 RNA 与蛋白质的结合，从而干扰病毒 RNA 的复制。
医学微生物学（第9版）
五、治疗性疫苗
是一种以治疗疾病为目的的新型疫苗，主要有 DNA 疫苗和抗原抗体复合物
第二节
病毒感染的特异性预防 prevention of viral infection
医学微生物学（第9版）
一、人工主动免疫常用生物制品
1. 灭活疫苗（inactivaed vaccine） 通过理化方法将具有毒力的病毒灭活后制成灭活疫苗，这种疫苗失去了感染
性但仍保留原病毒的抗原性，常用的有肾综合征出血热疫苗、狂犬病疫苗、甲型
炎病毒VP1结构蛋白、HBsAg及狂犬病病毒刺突糖蛋白等。
4. 基因工程疫苗（genetically engineering vaccine） 采用DNA重组技术，提取编码病毒保护性抗原基因，将其插入载体，并导入细
菌、酵母菌或哺乳动物细胞中表达、纯化后制成的疫苗。例如目前已广泛使用的重
病毒的检测方法
病毒的检测方法病毒是一种微生物，它可以侵入宿主细胞并利用宿主细胞的生物合成系统复制自己。
病毒的检测是非常重要的，它可以帮助人们及时发现病毒的存在，采取相应的措施来控制和治疗病毒感染。
目前，病毒的检测方法有很多种，包括免疫学方法、分子生物学方法、细胞学方法等。
下面将详细介绍几种常见的病毒检测方法。
首先，免疫学方法是一种常用的病毒检测方法。
这种方法利用人体免疫系统产生的抗体来检测病毒的存在。
常见的免疫学方法包括ELISA法、免疫荧光法和免疫印迹法。
这些方法可以通过检测血清、唾液、尿液等样本来确定病毒感染的情况。
免疫学方法具有操作简单、结果快速的特点，因此被广泛应用于临床诊断和流行病学调查中。
其次，分子生物学方法也是一种常用的病毒检测方法。
这种方法利用PCR、实时荧光定量PCR、核酸杂交等技术来检测病毒的核酸。
分子生物学方法具有高灵敏度和高特异性的特点，可以检测到病毒的极低浓度，因此被广泛应用于病毒性疾病的诊断和研究中。
另外，细胞学方法也是一种常用的病毒检测方法。
这种方法利用细胞培养和显微镜技术来检测病毒的存在。
通过观察细胞的形态和结构变化，可以判断细胞是否受到病毒感染。
细胞学方法具有直接观察病毒感染的优势，可以帮助人们更直观地了解病毒的生物学特性。
总的来说，病毒的检测方法有很多种，每种方法都有其特点和适用范围。
在实际应用中，可以根据具体情况选择合适的检测方法来进行病毒检测。
同时，随着科学技术的不断发展，病毒的检测方法也在不断更新和完善，相信在不久的将来，会有更多更准确、更快速的病毒检测方法出现，为人们的健康保驾护航。
第十五章 病毒感染的检查方法与防治原则
第十五章 病毒感染的检查 方法与防治原则
吉林医药学院 鞠晓红
重点难点
重点 • 病毒培养标本采集与处理原则 • 病毒分离培养方法 • 病毒在培养细胞中的增殖指标 • 病毒感染特异性预防方法 难点 • 病毒鉴定技术 • 病毒感染的诊断方法
第一节 病毒感染的检查方法来自录一、标本的采集与处理 二、病毒的分离培养与鉴定 三、病毒感染的诊断
二、病毒感染的治疗
1.抗病毒化学制剂 • 核苷类药物：碘苷、阿昔洛韦、阿糖腺苷等 • 非核苷类反转录酶抑制剂 • 蛋白酶抑制剂 • 其他：金刚烷胺、磷甲酸钠等 2.干扰素及诱生剂 3.其他 • 中草药、新抗生素、治疗性疫苗、治疗性抗体等
一、标本的采集与处理
原则基本与细菌相似，但应注意： 1.污染标本用“双抗”或两性霉素B处理 2.低温保存，尽快送检 3.血清学诊断采集双份血清（早期和恢复期）
二、病毒的分离培养与鉴定
（一）病毒的分离培养
1.动物接种 2.鸡胚培养 3.细胞培养
1.动物接种 • 目前较少应用 • 常用动物：小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、鸡等 • 接种途径：皮内、皮下、肌肉、腹腔、静脉等 • 应用：无敏感细胞培养的病毒
（2）病毒在培养细胞中生长的表现 • 细胞代谢改变：pH值改变 • 细胞病变效应（CPE）：细胞聚集、融合、坏死、脱 落溶解或形成包涵体等 • 红细胞吸附：与加入的脊椎动物红细胞结合 • 干扰作用：抑制其后加入病毒的增殖，阻抑后者特有 的CPE
（二）病毒的鉴定
• 形态学鉴定：电子显微镜 • 血清学鉴定：用已知抗体鉴定病毒种、型和亚型。常
2.鸡胚培养 一般选用9～14d孵化鸡胚 • 卵黄囊接种：乙脑病毒 • 羊膜腔接种：流感病毒初次分离 • 尿囊腔接种：流感病毒传代培养 • 绒毛尿囊膜接种：疱疹病毒 • 脑内接种：狂犬病病毒
病毒感染的微生物学检查方法
临床微生物学检验
临床微生物学检验引言临床微生物学检验是一种通过检测和分析患者体内微生物的存在和活动水平来帮助诊断和治疗感染性疾病的方法。
微生物学检验可以确定感染的原因和类型，并确定适当的抗生素治疗方案。
本文将介绍临床微生物学检验的概念、常见的检验方法和其在临床实践中的应用。
临床微生物学检验的概念临床微生物学检验是通过收集患者样本（如血液、尿液、血液培养物等）并对其中的微生物进行培养、分离和鉴定来确定感染病原体的方法。
它涉及一系列实验室操作和技术，包括细菌培养、抗生素敏感性测试、鉴定和分子生物学方法等。
这些方法可以帮助确认感染病原体的存在、确定其感染类型（细菌、真菌、病毒等）以及选择适宜的治疗药物。
临床微生物学检验的常见方法细菌培养细菌培养是一种常见的微生物学检验方法，它涉及将患者样本置于培养基中以促进微生物的生长。
不同类型的培养基可以支持不同类型的微生物生长，如常见的血液琼脂培养基可用于细菌培养。
细菌培养的时间可以从几小时到几天不等，具体取决于患者样本中微生物的增殖速度和种类。
抗生素敏感性测试抗生素敏感性测试是一种用于确定感染病原体对不同抗生素的敏感性和抵抗性的方法。
常见的抗生素敏感性测试方法包括纸片扩散法和微量稀释法。
这些测试可以帮助医生选择最适合的抗生素治疗方案，以避免抗生素的滥用和抵抗性的产生。
分子生物学方法分子生物学方法在临床微生物学检验中也扮演着重要的角色。
这些方法可以通过检测微生物的核酸（如DNA或RNA）来快速鉴定微生物的存在和类型。
其中常用的方法包括PCR （聚合酶链反应）和实时荧光定量PCR。
分子生物学方法具有高度的特异性和敏感性，可以快速准确地检测微生物。
临床微生物学检验的应用临床微生物学检验在临床实践中具有广泛的应用。
它可以帮助确定感染的病原体，指导治疗方案的制定和调整，并监测治疗的疗效。
以下是临床微生物学检验在不同感染疾病中的应用示例：细菌感染在细菌感染的诊断和治疗中，临床微生物学检验可以帮助确定感染的菌种、菌株的数量和敏感性，从而选择适当的抗生素治疗方案。
病原微生物检测方法 汇总
病原微生物检测方法汇总病原微生物检测方法是现代医学领域中的重要技术，它可以帮助医生准确诊断和治疗各种与微生物感染相关的疾病。
本文将介绍一些常见的病原微生物检测方法，以帮助读者更好地了解和理解这一领域的技术进展。
一、细菌检测方法1. 细菌培养：这是一种传统的细菌检测方法，通过将样本在富含营养物的培养基上培养，可以使细菌生长繁殖并形成可见的菌落。
然后，通过菌落的形状、颜色和生长速度等特征来鉴定细菌种类。
2. PCR技术：PCR技术是一种通过扩增DNA片段来检测细菌的方法。
它利用特定引物将目标DNA扩增成大量的复制品，然后通过凝胶电泳等方法进行检测和鉴定。
二、病毒检测方法1. 细胞培养：病毒检测的一种方法是通过细胞培养来检测病毒的存在。
将样本接种到特定的细胞培养物中，如果存在病毒，它将感染并破坏细胞，形成明显的细胞病变。
2. 免疫学检测：利用抗体与病毒抗原的特异性结合来检测病毒。
例如，ELISA和免疫荧光等技术可以检测病毒抗原或抗体的存在。
三、真菌检测方法1. 镜检法：通过显微镜观察样本中的真菌形态特征，如菌丝、孢子等来进行鉴定。
这是一种简单而常用的真菌检测方法。
2. PCR技术：PCR技术也可以应用于真菌检测。
通过扩增真菌特定基因序列的方法，可以检测和鉴定真菌的存在。
四、寄生虫检测方法1. 寄生虫镜检：通过显微镜观察样本中的寄生虫形态特征来进行鉴定。
不同的寄生虫具有不同的形态特征，可以通过镜检来确定寄生虫的种类。
2. 分子生物学方法：例如PCR技术和基因测序等方法可以用于寄生虫的检测和鉴定。
通过扩增寄生虫特定基因序列或进行基因测序，可以准确地确定寄生虫的种类。
病原微生物检测方法包括细菌、病毒、真菌和寄生虫等不同类型的检测方法。
这些方法在临床医学中起着重要的作用，可以帮助医生准确诊断和治疗与微生物感染相关的疾病。
通过不断的技术创新和方法改进，相信病原微生物检测方法将在未来发展中发挥更大的作用。
细菌与病毒的病原学检查法
凝集试验、对流免疫电泳、酶免疫技术、免疫荧光技 术
核酸检测：
1.核酸杂交技术:Southern印迹杂交、Northern印迹 杂交、原位杂交
2.PCR技术 3.基因芯片 4.16rRNA基因序列分析：编码rRNA，保守区、可变 区
三、抗体的检测（血清学诊断）
凝集试验：直接、间接、协同、冷凝集 沉淀试验：环状、絮状、双向、对流电泳 补体结合试验： 酶联免疫吸附试验（ELISA）：
取双份血清，抗体效价比早期高4倍以上有意
义。
第二节 病毒感染的微生物学检查法
一、形态学检查
1.电子显微镜检查
直接镜检法：107颗粒/ml，电镜观察病毒
颗粒的形态和结构
免疫电镜法（IEM）：
标本+特异性抗体 病毒颗粒聚集 电镜 观察
轮状病毒的粪便、HAV、HBV的血清、疱疹 病毒的疱疹液，可早期诊断。
三、病毒在培养细胞中增殖的鉴定指标
细胞的变化：CPE 红细胞吸附（HAd）： 红细胞凝集： 病毒干扰作用：风疹病毒，埃可病毒,Vero细
胞。
中和试验（NT）：是病毒在活体内或细胞培
养中被特异性抗体中和而失去感染性的一种试验
空斑形成试验：蚀斑形成单位（PFU），感染
性病毒的滴度用PFU/ml表示。
四、病毒成分的检测
血凝抑制试验
病毒+红细胞 血凝现象
病毒+抗体+红细胞 血凝现象消失
用于流感病毒、副流感病毒的诊断、流行 病学调查及鉴定病毒的型和亚型。
ELISA法：HSV、CMV、EB病毒等
蛋白印迹技术：用已知病毒蛋白检测未
知病毒
病毒抗原的检测：HIV和HBV抗原
病毒核酸的检测
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
标本采集与送检 病毒的分离鉴定 电镜技术 血清学试验 分子生物学技术
一、标本采集与送检
（一）供分离病毒、检出核酸及抗原的标本
原则： 1.尽早采取：发病初期 2.部位适宜：由感染部位采取 3.冷藏速送：装有冰块或干冰的容器内
（二）检测特异性抗体 的标本
采集双份血清，4-20℃保存
病毒材料采集与检验结果的关系
采取标本的时期 检查病毒及其成分 测定抗体
潜伏期及前驱期 刚发病或急性期
较难查见 最多查见
未增多
未增多或增 多不明显
恢复期及康复期
很难查见
明显增多 （常超过4倍）
二、常规分离与鉴定
病毒分离是诊断病毒感染的金标准，一旦阳性，即 可确诊。
不适用于快速诊断，操作复杂，实验成本高，阳性 检出率低等
（1）间接ELISA
（2）夹心ELISA
五、分子生物学技术
1. 聚合酶链反应 （PCR）
3′ 5′
3′ 5′
3′ 5′
5′
3′ 3′
3′ 5′ 3′ 5′
5′
模板DNA双链
3′
5′
变性
3′
5′
5′
退火
3′
5′
3′
形成新的双链 5′ DNA
3′
2. 核酸杂交技术
核酸探针（probe）是指能与特定核酸序列 发生特异性互补的已知核酸片段，可检测 待检样品中特定的基因顺序。
1. 形态学鉴定
观察CPE。常见的细胞形态学变化为细胞变圆、坏死、 溶解、脱落或形成合胞体。有些病毒能形成包涵体。
正常细胞
病变细胞
2. 血吸附和血凝作用 多见于以出芽方式释放的病毒。
感染细胞具有吸附红细胞的能力 感染细胞的培养液中有许多游离病毒存在，具有凝集红细胞
的作用
（1）血吸附作用
吸附试验可通过特异抗血清抑制来达到鉴定 具有吸附特性的病毒
有时不得不分离病毒，例如发现了一种新的病毒病， 必须分离病毒进行研究，或者分离株的鉴定对流行 病学有很大作用（如流感病毒），或者需要培育疫 苗，或者希望获得天然弱毒株等。
（一）病毒分离
标本采集
杀灭杂菌
（青链霉素）
接种
三大方法
易感动物 出现病状 鸡胚 病变或死亡 细胞培养 细胞病变
鉴定病毒种型
（二）病毒鉴定
口蹄疫病毒的电镜负染
负染法的优缺点毒结构 缺点：敏感性低，要求病毒量在107以上；所有样品应处
于悬浮状态
3.免疫电镜技术(Immune electron microscopy，IEM)
免疫电镜技术是将抗原抗体反应的特异性与电 子显微镜的高分辨力相结合，在亚细胞和超微 结构水平上对抗原物质进行定位分析的一种高 度精确、灵敏的方法。
（1）免疫凝集电镜技术
抗原与抗体凝集反应后，可使标本中病毒颗粒聚 集成团，再经负染直接在电镜下观察，提高了敏 感性，确定病毒的血清学性质。
（2）免疫电镜定位技术
特异性抗体用电子致密物质，如铁蛋白、过氧化物酶等标 记后，使之与组织超薄切片中的抗原结合，在电镜下观察 到标记物所在位置，即为抗原抗体反应的部位。
透射电子显微镜
1. 正染法：超薄切片法
取材
戊二醛 固定
四氧化锇
清洗与 脱水
切片
染色
铀染 铅染
浸透 包埋 聚合
鸡痘病毒（超薄切片）
超薄切片法的优缺点：
优点：可观察病毒形态和形态发生过程 缺点：操作复杂，费时，但标本可长时间保存
2.负染技术
负染是指通过重金属盐在样品四周的堆积而 加强样品外周的电子密度，使样品显示负的 反差，衬托出样品的形态和大小。
virus
2.补体结合反应
Ag
补体
Ab
红细胞
溶血素
溶血 （-）
Ag
补体
红细胞
不溶血 （+）
Ab
溶血素
3.免疫扩散
4.酶联免疫吸附试验 （ELISA）
将已知的抗体或抗原结合在某种固相裁体上，并 保持其免疫活性。测定时，将待检标本和酶标抗 原或抗体按不同步骤与固相载体表面吸附的抗体 或抗原发生反应。然后加入酶的作用底物催化显 色，进行定性或定量测定。
正常细胞
红细胞吸附
（2）血凝作用
血凝试验
血凝抑制试验
（3）病毒成分的直接检测
用免疫学或分子生物学技术直接检查感染 细胞或其上清液中病毒抗原（或核酸）。
三、 电子显微镜检查
病毒的很多特征如大小、形态、结构等必须借 助电子显微镜进行检查。对于目前尚难培养而形态 又非常典型的病毒，可直接从感染组织或分泌液， 或者接种病料的鸡胚和细胞培养收获的材料作电子 显微镜检查，直接观察病毒粒子。
酶标记染色
四、 血清学试验
是一种常用的诊断病毒病的方法。可采用 ELISA、琼脂扩散、中和试验、标记抗体技术 等免疫血清学方法检查病畜的抗体消长情况和 发病组织中的病毒抗原。
1.中和反应
观察特异性抗体能否保护易感的试验动物死亡，能否 抑制病毒的细胞病变效应。凡能与病毒结合，使其失 去感染力的抗体又称中和抗体。
六、 感染组织的组织学检查
病毒在光学显微镜下无法看到，但是在某些 病毒感染细胞内出现包涵体，或者细胞形态发生 变化，则对诊断有重要意义。如Negri氏包涵体 是狂犬病犬脑细胞的特征。病理组织或渗出液作 成涂片检查包涵体时，常用苏木紫-伊红染色法。
狂犬病毒包涵体（Negri body）