Agilent色谱柱选择与保养
安捷伦系列气相色谱质谱维护方法

安捷伦系列气相色谱质谱维护方法安捷伦(Agilent)系列气相色谱(GC)和质谱(MS)仪器在现代分析实验室中应用广泛,因为其稳定性和可靠性。
为了保证这些仪器的正常运行和准确的分析结果,有效的维护非常重要。
以下是一些安捷伦系列GC和MS仪器的维护方法。
1.定期检查和清洁仪器:定期检查仪器的所有部件,确保其没有松动或损坏。
清洁仪器的外部和内部,特别是注射器、化学泵、进样口、样品盘等与样品接触的部分。
2.检查和更换柱子:定期检查和更换GC柱和MS柱子,以确保其性能和分离效果。
根据使用情况,柱子的寿命可能不同,但一般建议每3-6个月更换一次。
3.校准和校验:定期校准和校验GC和MS仪器。
校准是通过使用标准物质来验证仪器的准确性和精确性,而校验是通过检查仪器的响应和定量线性来验证仪器的性能。
4.气体管理:维护好GC和MS仪器的气源和气体管道,确保其稳定供气。
使用纯净的气体,如氮气、氢气和氦气,并定期更换气源过滤器。
5.清洗和校准样品进样器:样品进样器是GC和MS分析中容易污染和堵塞的部件之一、定期清洗和校准样品进样器,以确保准确的样品进样和避免交叉污染。
6.定期校准和维护质谱检测器:质谱检测器是质谱仪的核心部件之一、定期校准和维护质谱检测器,以确保其性能和稳定性。
这包括清洗离子源、调整离子光度和检查电离器等操作。
7.定期备份和更新仪器软件:定期备份和更新仪器的软件,以确保其正常运行和兼容性。
这包括操作系统、控制软件和分析软件的更新。
8.定期培训和交流:与仪器供应商进行定期培训和交流,了解最新的维护技术和操作指南。
并确保实验室操作人员熟悉仪器的正确使用和维护方法。
综上所述,对于安捷伦系列GC和MS仪器的维护,定期检查和清洁仪器、检查和更换柱子、校准和校验、气体管理、清洗和校准样品进样器、定期校准和维护质谱检测器、备份和更新仪器软件以及定期培训和交流都是非常重要的措施。
通过有效的维护和保养,可以延长仪器的寿命,保证仪器的稳定性和分析结果的准确性。
(完整word版)Agilent1260安捷伦高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程

Agilent 1260(四元泵)高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程Agilent 1260(四元泵)高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程1目的建立1260(四元泵)高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程,规范人员操作。
2 适用范围适用于Agilent(四元泵)高效液相色谱仪的使用与维护。
3 责任与监督检验人员负责执行本规程,部门负责人监督本规程的实施。
4 规程细则4.1仪器原理高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱,对供试品进行分离测定的色谱方法。
注入的供试品,由流动相带入色谱柱内,各组分在柱内被分离,并进入检测器检测,由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。
4.2仪器操作4.2.1系统组成:本系统由四元梯度泵、VWD检测器、自动进样器、柱温箱及Openlab Chemstation工作站和台式电脑等组成。
4.2.2操作前准备:4.2.2.1流动相的选择分类:组成分——单组分和多组分极性-极性、弱极性、非极性常用溶剂:甲醇、水、乙腈、乙醇、乙酸乙酯、四氯化碳等。
(溶剂最好为HPLC级,水为纯化水)其中多采用二元或多元组合溶剂作为流动相,通过调节各组分的比例改变流动相的极性,已达到最佳的分离效果,对于部分情况还可以加入缓冲盐,调节出峰时间和达到改善峰型的效果。
4.2.2.2流动相的选择为了除去流动相中的杂质,保护系统和色谱柱,在流动相使用完,装入新的溶剂前应使用抽滤瓶对溶剂进行过滤。
4.2.2.3流动相的超声与脱气为了除去溶解在流动相中的气泡,降低基线噪音,在HPLC开机前应把各溶剂瓶在超声机中超声10-15min左右。
对于溶解在流动相中的极微气体,安捷伦1260HPLC四元泵中集合了脱气机,可以进一步对混合后的流动相进行脱气处理。
4.2.2.4流动相冷却流动相在超声机中长时间超声后,由于水分子振动摩擦,使水温上升,因此流动相瓶中的溶剂也会被加热。
安捷伦气相色谱柱选择和介绍

色谱柱选择原则 (11)选择固定相 (12)色谱柱直径 (20)柱长 (22)色谱柱膜厚 (24)方法指南 (27)环境应用 (40)石化应用 (52)食品、调味品和香精香料应用 (55)工业化学品应用 (59)生命科学应用 (63)GC毛细管色谱柱 (67)GC/MS色谱柱 (68)优级聚硅氧烷色谱柱 (77)聚乙二醇(PEG)色谱柱 (94)专用色谱柱 (101)PLOT 色谱柱 (110)毛细管柱安装快速参考指南 (118)色谱柱性能下降的原因 (121)问题评估 (128)故障排除指南 (130)GC方法开发基础 (133)目录寻找最佳载气平均线速度 (134)进样器缺省设置 (135)柱温箱温度 (135)开发升温程序 (137)安捷伦J&W高性能气相色谱柱 (1)GC应用 (39)色谱柱的安装和故障排除 (117)气相色谱基础 (2)什么是气相色谱? (2)毛细管柱 (4)术语和条件 (5)安捷伦J&W高性能气相色谱柱2000年,发明熔融石英GC毛细管柱的公司—安捷伦科技公司与第一个用交联硅氧烷聚合物制造GC固定相的制造商—J&W Scientific合并。
现在,因为他们的合作,您可以找到属于安捷伦名下的著名的HP和DB色谱柱系列。
安捷伦科技是一个有着40多年气相色谱经验的公司,能为您提供所需的所有服务。
流失性最低的色谱柱可获得高灵敏度和高性能色谱柱流失会降低质谱图完整性、缩短正常运行时间和色谱柱的寿命。
但是安捷伦J&W 色谱柱有最小的低流失标准而它的固定相具有优异的惰性和高温上限的特点(特别是对于离子阱MS用户)。
更高的精密度可获得更好的结果安捷伦J&W色谱柱符合严格的保留因子(k)性能指标,提供一致的保留和分离性能。
他们的保留指数窄和每米理论塔板数高,确保窄的色谱峰和改善相邻流出峰的分离度。
业界最严格的质量控制性能指标安捷伦的严格测试可确保可靠的定性和定量结果,甚至对于最具挑战性的化合物也可保证。
【色谱柱】色谱柱的维护方法 色谱柱维护和修理保养

【色谱柱】色谱柱的维护方法色谱柱维护和修理保养色谱柱的使用寿命,除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关系外,最紧要的是与日常的维护紧密相关。
色谱柱的使用寿命紧要是柱效和柱压两个指标来衡量,假如一支色谱柱柱效太低或柱压太高,通常被认为该色谱柱已经结束。
因此,延长色谱柱使用寿命的关键是,除去引起柱效下降和柱压上升的因素。
以下是色谱柱的维护方法:一、流动相的PH应在使用的范围内流动相超过其PH范围将会导致硅胶基质流失和键合相碳链断裂,使柱效下降,使用寿命变短。
由于流动相的PH掌控不当而对色谱柱造成的损害,通常很难是色谱柱恢复,因此必需认真对待,严格掌控流动相的PH值。
二、去除样品和流动相中的固体颗粒样品和流动相中含有的固体颗粒物质会堵塞色谱柱筛板,筛板被堵住不仅会引起柱压的上升,而且也会引起柱效下降,由于筛板的堵塞会引起液流不均,导致色谱峰型拖尾、变宽,从而使柱效下降。
因此,建议使用超纯水和色谱纯试剂,在分析样品前对样品进行针筒过滤,流动相过0、45μm滤膜。
三、使用保护柱或在线过滤器样品和流动相经过滤后并不能完全除去固体颗粒物质,由于泵的磨损、密封圈和管路的老化也会产生固体颗粒物质,这些固体颗粒被流动相带入色谱柱,堵塞筛板,导致柱压上升、柱效下降。
保护柱和在线过滤器上都有筛板,其孔径与色谱柱孔径相同,因此可以阻拦固体颗粒物质到达色谱柱,有效防止色谱柱筛板的堵塞。
由于柱压上升在分析故障中占很大比例,因此,除对样品和流动相进行过滤外,建议您在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器。
假如色谱柱柱压上升是由于进样端筛板被堵引起的,可选择以下方式进行补救:1、先在色谱柱前加上保护柱或在线过滤器,然后用甲醇、水=20/80ml/min反向冲色谱柱180min、2、先在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器,然后反向使用。
四、正确使用缓冲盐缓冲盐通常易溶于水,难溶于有机溶剂,因此缓冲盐使用不当会使其析出,堵塞填料基质上的微孔和颗粒间的空隙,使填料板结,柱压上升;同时阻拦了基质上键合的碳链自由伸展,使色谱柱的保留本领下降,柱效降低。
agilent色谱柱的分类与选择

agilent色谱柱的分类与选择
Agilent的色谱柱可以根据其功能和分离机制进行分类。
常见的Agilent色谱柱分类及选择如下:
1. 相对极性柱:这类柱适用于非极性物质或具有较低极性的化合物的分离,如挥发性有机化合物。
常见的相对极性柱包括HP-5,HP-1和HP-35等。
2. 极性柱:这类柱适用于极性化合物的分离,如酸、碱、酮和醇等。
常见的极性柱包括DB-5MS,DB-Wax和DB-17等。
3. 离子交换柱:这类柱通常用于离子分析或离子交换色谱,用于分离离子化合物。
常见的离子交换柱包括IonPac和BioIon等。
4. 手性柱:这类柱用于手性化合物的分离,如药物中的非对映体。
常见的手性柱包括Chiralcel等。
5. 多种机制柱:这类柱结合了多种分离机制,适用于复杂样品的分析。
常见的多种机制柱包括HP-INNOWax和HP-88等。
对于选择Agilent色谱柱,一般需要考虑样品性质,分离需求,分析目标等因素。
同时,还需考虑色谱柱尺寸、填充物类型和分离机制等参数。
在选择时可以咨询
Agilent或其他专业人士,以获得更准确的建议。
色谱柱维护保养方法

色谱柱维护保养方法色谱柱维护保养非常重要,可以延长其使用寿命,并确保分离效果和分析结果的准确性。
以下是常见的色谱柱维护保养方法:1. 色谱柱的储存:如果打算长时间不使用色谱柱,可以将其封装,并储存在干燥、避光和温度适宜的地方,以防止柱内填料受潮、变质或分层。
2. 柱前保护:可以在色谱柱前端安装一个柱前保护器,以延长色谱柱的使用寿命。
柱前保护器可以过滤掉样品中的大颗粒物质,防止其对色谱柱造成损害,并保护柱后的检测器。
3. 样品预处理:对样品进行合适的前处理,如过滤、稀释、净化等,可以减少对色谱柱的损害,减轻色谱柱的负担。
4. 样品pH调节:合适的pH值可以增强样品的溶解性,降低颗粒物质的沉淀和析出,从而延长色谱柱的使用寿命。
但要注意不要超出色谱柱的pH范围限制。
5. 洗脱溶剂选择:选择适合的洗脱溶剂可以有效地清洗色谱柱,去除残留物质,恢复柱性能。
常用的洗脱溶剂包括纯水、有机溶剂、缓冲液等。
选择洗脱溶剂时,要注意其对色谱柱填料的溶解性以及对分离结果的影响。
6. 色谱柱的受控使用:在使用色谱柱进行分析时,要注意避免超过柱压和最大样品容量的限制,避免样品直接接触到填料床层面,避免样品中含有腐蚀性物质等。
7. 定期检查:可以定期检查色谱柱的性能,如检查柱背压、峰形、峰对称性、分辨率等。
8. 色谱柱的再生:当色谱柱分离效果下降时,可以尝试使用一些再生方法,如洗脱溶剂冲洗、温度升高、pH调节等,以恢复色谱柱的分离能力。
以上是色谱柱维护保养的一些常见方法,实际操作时应根据具体的色谱柱类型和样品特性进行调整。
此外,根据色谱柱供应商的建议和操作手册,进行正确的操作和保养也是非常重要的。
安捷伦色谱柱选择与色谱柱维护保养讲课文档

金属浓度(ppm) Na K Mg Al Ca Ti Fe Zr Cu Cr Zn 10 < 3 4 1.5 2 nd 3 nd nd nd 1 17 nd nd 57 9 32 21 88 < 1 nd 88 56 N/ A N/ A nd 130 57 76 nd N/ A N/ A nd 2900 N/ A 40 300 38 65 230 N/ A N/ A N/ A N/ A
固定相键合 二甲基硅烷
CH 3
O Si R
+ OH CH 3
OH CH 3
O Si R
CH 3
CH 3
Cl Si CH 3
CH 3
( TMS)
封端 四甲基硅烷
CH 3
O Si R
CH 3
OH
CH 3
O Si CH 3 CH 3
CH 3
O Si R
第19页,共62页。
安捷伦专利的空间位阻保护
键合相 流失, 保留减弱
6. Triprol内径ine 苯丙烯啶pKa 6.5 7. Diphenhydramine 苯海拉明 pKa 9.0
10
Time (min)
待测物pKa+1.5以外 的流动相pH
可保证方法的稳定性
第26页,共62页。
Zorbax色谱柱发展史
1973 ZORBAX SIL
发明专用于HPLC分离的球状、小颗粒硅胶(专利)
• 宽径柱 (3-21.2mm) - 载样量高
第11页,共62页。
C-18柱---性能影响因素
颗粒形状 --- 对色谱分离的影响
当使用黏度较大的流动相50:50=MeOH:H2O时, 球 型颗粒可以降低柱压, 延长色谱柱寿命
agilent7890气相色谱仪维护保养内容

Agilent7890气相色谱仪维护保养内容一、引言Agilent7890气相色谱仪是一种用于分析化学物质成分的仪器,广泛应用于化学、药物、食品等领域。
为了保证仪器的正常运行和分析结果的准确性,对色谱仪进行定期的维护和保养至关重要。
本文将介绍Agilent7890气相色谱仪的维护保养内容,以帮助用户更好地进行仪器的管理与维护。
二、日常维护1. 清洁(1)每次使用后,应当对色谱仪进行清洁。
主要包括色谱柱、进样口及周围区域、检测器等部位的清洁,避免残留物影响下次分析的结果。
(2)色谱仪的外部也需要定期清洁,保持仪器外观的整洁。
2. 环境(1)要确保色谱仪的工作环境干燥、通风良好,温度和湿度应符合仪器的工作要求,避免因环境问题导致仪器故障。
(2)色谱仪工作时应避免受到振动和冲击,保持稳定的工作状态。
3. 检查(1)定期对仪器的各项参数进行检查,包括进样量、流速、温度、压力等,确保仪器运行参数正常。
(2)检查色谱柱、进样器等部件是否有损坏或异物堵塞,及时进行更换或清理。
三、定期维护1. 色谱柱的更换色谱柱是色谱仪中最为关键的部件之一,定期更换色谱柱是保证色谱分析准确性的重要环节。
正确认识什么时候应该更换色谱柱是非常重要的。
2. 进样针的维护进样针是色谱仪的关键部分,定期的维护和保养对于仪器的正常运行至关重要。
正确使用和保养进样针不仅可以延长其使用寿命,还可以保证进样量的准确性。
3. 检测器的维护与校准色谱仪的检测器是用来检测分离出的化学物质的浓度和组分的,因此检测器的准确性和灵敏度直接关系到色谱分析的结果。
定期对检测器的进行清洁和校准,确保其正常工作。
四、仪器存放当使用结束后,须将色谱仪关机,并且在存放时需注意以下几点:1. 清洁仪器表面,避免尘埃和杂物进入仪器内部;2. 色谱柱需放在干燥、无尘的环境中;3. 定期对仪器进行防潮、防尘、防锈的维护工作;4. 仪器存放的环境条件需要符合要求,避免受到阳光直射、高温、高湿等影响。
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非离子化
抑制电离反相键合相色谱 离子对键合相的反相模式
样品
离子化
用硅胶的正相模式 离子交换模式 溶于有机溶剂 凝胶渗透色谱 凝胶过滤色谱
分子量>2, 000
溶于水
大孔填料的离子交换模式
用大孔填料的反相模式
Agilent Technologies
高或低pH下, 硅胶会溶解 化学修饰困难
5页
• 硅胶基质- pH 3~8 • Al2O3 . nH2O - pH1~14 - pH1~14
孔结构复杂, 孔径不均匀导致柱效不够高, 有 • 聚合物基质 机溶剂可能导致聚合物基质溶涨而受损
Agilent Technologies
C-18柱---性能影响因素
11页
• 窄径柱 ( 2.1mm) - 检测器灵敏度高 • 宽径柱 (3-21.2mm) - 载样量高
Agilent Technologies
12页
C-18柱---性能影响因素
颗粒形状 --- 对色谱分离的影响
当使用黏度较大的流动相50:50=MeOH:H2O时 , 球型颗粒可以降低柱压, 延长色谱柱寿命
4
7
6
6
0 5 10 Time (min) 1. Maleate 马来酸盐 2. Scopolamine 东莨菪碱 pKa 7.6 色谱柱: ZORBAX Extend-C18 3. PseudoEphedrine 假麻黄碱 pKa 9.8 4.6 x 150 mm, 5 mm 4. Doxylamine 抗敏安(多西拉敏) pKa 9.2 流动相: 30% 缓冲液: 70% 待测物pKa+1.5以外 5. Chlorpheniramine 氯苯吡胺pKa 9.1 MeOH pH 7 缓冲液20 mM 的流动相pH Na2HPO4 pH 11缓冲液 20 mM 6. Triprol内径ine 苯丙烯啶pKa 6.5 可保证方法的稳定性 TEA 7. Diphenhydramine 苯海拉明 pKa 9.0 0 5
安捷伦科技
Sa
1页
HPLC色谱柱选择与维护保养
Agilent Technologies
2页
安捷伦HPLC色谱柱选择
Agilent Technologies
分离模式的选择
溶于正己烷 溶于甲醇或甲醇/水 或乙腈或乙腈/水 溶于有机溶剂
3页
用硅胶的正相模式
用键合相的正相模式 用键合相的反相模式
用键合相的反相模式
•硅胶纯度 •色谱柱尺寸 物理性质
6页
•颗粒形状
•粒径 •表面积 •孔径
•键合类型 化学性质 •碳覆盖率 •封端
Agilent Technologies
7页
C-18柱---性能影响因素
色谱柱物理性质
硅胶纯度
• 填料硅胶的纯度与残留金属离子浓度
色谱柱尺寸
• 填料床的长度和内径
颗粒形状
• 球型或不规则型
HO OCH 3 O O OCH 3 CH 2 CH 2 O H 3C O HO 3 O O O H
分子量虽小但 hydrodynamic volum (水动力学体积)较大的分子
N CH 3 O CH 3 O HO CH 3 O H CH 3
SB-C3 (80Å)
Pw 1/2 = 0.442
CH 3
Agilent Technologies
15页
300Å 孔径可改善蛋白质和多肽峰形
孔径,
选择合适的 填料孔径分析 大分子可获得 最佳峰形
0.20 0.18
0.16 0.14
分子量对峰宽的影响(梯度分离)
300SB-C18 (300Å) SB-C18 (80Å)
PW 1/2
0.12 0.10 0.08 0.06 0.04 0.02 0
Agilent Technologies
21页
液相柱---保留值与pH的关系
色谱柱:Zorbax StableBond C18 4.6 X 250mm, 5um 部件号:880975-906 流动相:27%甲醇:73%磷酸 pH 2.5 & 2.6 温度:500C 流速: 1.0mL/min.
pH变化值 0.1
Agilent Technologies
19页
传统键合及封端技术
CH 3 OH OH OH OH
R = C8, C18,etc.
CH3 O CH 3 OH Si R CH 3
O CH3
Si R
+
OH CH3 OH CH 3 O Si R CH 3
Cl Si R CH 3
+
CH3
CH3 CH 3
Cl Si CH 3 CH 3
Tylosin(泰乐菌素) MW. 926
300SB-C3 (300Å)
Pw 1/2 =0.125
0
0
5 Time (min)
10
• 溶液中的分子尺寸决定适宜的色谱柱孔径 • 窄的峰宽表明待测分子进入填料孔没有受到阻碍
Agilent Technologies
17页
C-18柱---性能影响因素
<1ppm); 99.995% 纯度的二氧化
Agilent Technologies
ZORBAX®生产工艺
• StableBond • Eclipse XDB • Bonus-RP • Extend
硅胶 + 脲 (pH=2) + 甲醛 CH2O
10页
D O2
粒径
1.8 µm 3.5 µm 5.0 µm 7.0 µm
Bonus-RP pH 2~9
Eclipse XDB C18 pH 2~9
StableBond C18 pH 1~8
Agilent Technologies
26页
复杂组分的流动相pH选择技巧
Extend-C18 高pH下, pH 7
4 2, 1 1 5 5 2 3 7 3
碱性成分的保留增加
Extend-C18 pH 11
B类硅胶 (高纯)
ZORBAX Rx-Sil (1987) 由于金属含量低, 硅羟基pKa高, 碱性化合物不发生拖尾
二氧化硅 Zorbax Rx-SIL Zorbax SIL Nucleosil Hypersil nd = 未检出
Na 10 17 56
K <3 nd
金属浓度(ppm) Mg Al Ca Ti 4 nd 1.5 57 300 2 9 38 nd 32
粒径
• 平均颗粒直径, 通常3-10µm
表面积
• 颗粒外表面和内部孔表面的总和,
示
以m2/gram表
孔径
• 颗粒的孔或腔的平均尺寸,
范围80-300Å
Agilent Technologies
8页
C-18柱---性能影响因素
色谱柱化学性质
键合类型
• 单体键合 - 键合相分子与基体单点相连 • 聚合体键合 - 键合相分子与基体多点相连
正相 &反相色谱
正相吸附色谱
极性:固定相 > 流动相 固定相 - 极性 流动相(己烷, 庚烷)- 非极性 极性物质后出峰
4页
反相分配色谱
极性:固定相 < 流动相
固定相 - 非极性
流动相(甲, 乙醇, 乙腈, THF, 二氯乙烷)- 极性 非极性物质后出峰
Agilent Technologies
柱填料基质
Fe 3 21 76
Zr nd 88
Cu nd
Cr nd
Zn 1 88
< 1 nd
N/ A N/ A nd
130 57
nd N/ A N/ A nd
2900 N/ A 40
65 230 N/ A N/ A N/ A N/ A
Zorbax Rx-SIL: 11种金属< 35 ppm (未检出其他杂质,
250oC
孔径
80A & 300A
ZORBAX Rx
多孔硅胶微球
安捷伦拥有此项溶胶-凝胶填料专利技术
Agilent Technologies
C-18柱---性能影响因素
色谱柱尺寸 --- 对色谱分离的影响
• 短柱 (15-100mm) - 运行时间短, • 长柱 (150-250mm) - 分辨率高, 柱压低 运行时间长
4
5
6
pH 7.25
0 1
2
67
3
2
3 Time (min)
4
5
6
• 可电离的组份的分离可能会随pH变化发生显著变化 —甚至很小的 0.05–0.25 个pH变化单位.
Agilent Technologies
23页
液相柱---保留值与pH的关系
pH变化: 0.2个pH(7.0~7.2) 保留时间改变: 1.2分钟 (13.6~14.8分钟)
键合类型 --- 对色谱分离的影响
单齿键合: 提高传质速率, 双齿键合: 加快色谱柱平衡
CH 3 O Si CH 3 CH 3 3 O Si CH CH 3 CH3 O Si CH 3 CH 3 O Si CH 3 CH 3 CH 3 O Si CH3
OSi
OSi
增加色谱柱稳定性, 量
增加色谱柱的载样
高表面积对于多组份样品的分离具有较强的保 留能力, 柱容量和分离度. 表面积低的填料通 常能迅速达到平衡状态, 对于梯度淋洗尤为 重要
孔径 --- 对色谱分离的影响
大孔的填料颗粒可以延长溶质大分子在填料表面滞 留的时间, 达到充分分离, 改善峰形 样品 MW 4, 样品 MW > 4, 000, 000, 选择 80Å 的孔径 选择 300Å 的孔径