第八章 植物基因工程 总结
植物基因工程复习整理资料
《植物基因工程》复习资料整理第一部分概述植物基因工程：采用工程设计的方式，通过体外DNA重组技术，将特定的外源基因导入受体植物细胞内，由此获得的转化植物可以表现出预期的遗传特性，具有上述特点的科学被称之为植物基因工程。
第二部分转化系统1.植物转化：外源DNA通过载体﹑媒体或其他物理﹑化学方法导入植物细胞并得到整合及表达的过程。
实现这一过程的途径称之为“植物转化系统”。
2.转化：外源DNA通过载体﹑媒体或其它物理﹑化学方法导入细胞并得到整合及表达的过程。
——Transformation3.T-DNA是农杆菌侵染植物细胞时，从Ti质粒上切割下来转移到植物细胞的一段DNA，称为转移DNA。
4.Ti质粒致瘤原理：5.T-DNA的结构特点：a.Ti质粒T-DNA区的长度约为23kb。
b.T-DNA仅存在于植物肿瘤细胞的核DNA中；T-DNA 含有激发和保持肿瘤状态所必需的基因；T-DNA和植物DNA之间没有同源性。
c.在T-DNA的5´端和3´端都有真核表达信号。
如TATAbox、AATAAbox及polyA等。
e.T-DNA的两端左右边界各为25bp的重复序列，即边界序列（border sequence），分别称之为左边界（BL或TL）和右边界（BR或TR）。
该25bp边界序列属保守序列,但通常右边界（TR）序列更为保守，左边界(TL)序列在某些情况下有所变化。
其核心部分是14bp，可分为10bp(CACG ATATAT)及4bp(GTAA)两部分,是完全保守的。
f.左边界（TL）缺失突变仍能致瘤,但右边界（TR）缺失则不再能致瘤,几乎完全没有T-DNA的转移,这说明右边界(TR)在T-DNA转移中的重要性。
6.T-DNA在植物细胞中的整合过程（原理）：T-DNA在植物染色体中的插入是随机的，可以插入任何一条染色体，但插入的位点有以下特点：a. T-DNA优先整合到转录活跃的植物基因位点。
植物基因工程
第二节 植物基因转移的途径
• 一、土壤农杆菌法 • 土壤农癌杆菌(Agrobacterium tumefaciens)
是一种革兰氏阴性菌，它的质粒转入植物 之后导致植物产生冠瘿瘤(crown gall)。这 个菌一般只侵染双子叶植物。
• （一）、土壤农杆菌的Ti质粒引起冠瘿瘤
• 冠瘿瘤是由一些土壤农癌杆菌细菌在感染 部位形成的植物肿瘤(图10－3)。
第八章 植物的基因工程
• 植物育种已成为应用遗传学的一个非常重要的分 支。传统的植物育种方法速度慢，且具不确定性。 要引入一个或一套所需基因，传统的方法需要两 系间的有性杂交，然后进行杂种后代与一亲本间 的重复回交，直到植物获得所需性状。
• 重组DNA技术的出现突破了上述限制。植物遗传 专家可将所需性状的基因(如抗虫害基因)克隆， 并将此类基因引入到有价值的植物品种当中。
复制的质粒克隆位点上。 • ２、将一中间穿梭质粒引入大肠杆菌细胞，通过在pBR322序列上编
码的氨苄青霉素抗性基因选择转化子。
• ３、然后通过大肠杆菌和土壤农癌杆菌的交配特此质粒转移到土壤农 癌杆菌细胞内。
• ４、两种质粒上的T-DNA序列发生同源重组，穿梭质粒（中间载体） 整合入整合质粒（pＧＶ３８５０）。这一过程使穿梭质粒全部融入 T-DNA的左右边界内。没有整合的质粒不会累积，因为它们不含土壤 农癌杆菌的复制起点。
第一节 再生植株
•
一、植物在遗传工程方面的优缺点
•
１、优点
•
（１）、拥有在分子水平上可加以利用的大量植物品种，这些
品种携带有遗传上各具特点的突变。
•
（２）、许多植物可自体受精，使其特别适合于遗传操作。当一
具有某一突变的植物杂合子自体受精时，谱系中就包含了野生型
第八章植物基因工程总结
农杆菌
Vir 帮助质粒
左 外源基 右 感染植物
进入植物细胞核， 整合，表达
Vir 左 外源基因 右
农杆菌
双元系统的特点
双元系统是穿梭质粒和Ti质粒两个质粒 ，在接合 后可以自主性地共存于同一农杆菌细胞中。
穿梭质粒编码植物选择标记、表达信号、多克隆 位点、两个T-DNA
④Ori区(origin of replication，复制起 始区)：Ori区上的基因调控Ti 质粒的自我 复制。
(2). 农杆菌的感染和生存
第一步:植物受伤 乙酰丁香酮、羟基乙酰丁香酮诱导Ti
质粒的毒性基因表达。 第二步 感染植物
脓杆菌吸附于植物的表面伤口部位 第三步 毒性基因（vir）表达 第四步 T-DNA转移
ori
(7) Ti载体的类型
共整合载体（cointegrate vectors） 由比利时科学家P.Zambrisky等1983年改造 的pGV3850 受体载体，需要同源重组才能插入外源基因。
双元载体（binary vectors） 既有大肠杆菌复制起点也有农杆菌复制起点， 是个穿梭载体。
①pGV3850
外源基因插入pGV3850 的过程
pBR322不能在土壤农杆菌中复制，只能同 pGV3850重组。只有这样，土壤农杆菌才能得 到抗卡那霉素性状。
外源基因 插入
Kanr pBR322
抗卡那霉素 卡那霉素筛选
转化
的土壤农杆菌 pBR322与 土壤农杆菌 感染 pGV3850重组 含pGV3850
植物组织
物的细胞中 筛选转化细胞，并诱导产生转基因植株 转基因植株大规模种植
三、外源基因导入植物的方法
（一）DNA直接转移法
化学刺激法
植物基因工程及其应用
植物基因工程及其应用近年来，随着科学技术的发展和进步，植物基因工程在农业和生命科学领域迅速发展，成为一种重要的生物技术手段。
植物基因工程利用分子生物学和遗传学等学科的知识，对植物基因进行改造和编辑，以达到增强作物抗性、提高产量、改进食品品质等目的。
本文将介绍植物基因工程的基本原理和技术手段，重点分析其应用。
一、植物基因工程的基本原理植物基因工程，是指利用人工技术手段，对植物的基因进行特定的操作和编辑，以改变其性状和性能等方面的特征。
其基本原理包括以下几个方面：1. 分离目标基因：通过PCR技术、序列标记等手段，从目标植物中顺利分离出目标基因。
2. 基因克隆和编辑：将目标基因插入到植物细胞中，并对基因进行编辑，实现目标序列的整合和精准改造。
比如，可以在植物基因组中去除一段非必要序列，或者加入一段有利的外源DNA。
3. 转化培养：将克隆和编辑过的目标基因导入植物细胞，通过体外培养和转化等手段，如基因枪法、农杆菌媒介等，将其整合到植物体内，从而实现基因的转移和表达。
二、植物基因工程的主要技术手段植物基因工程是一项复杂的技术，需要经过多方面的技术支持和实验操作步骤才能实现。
常见的技术手段包括：1. 基因克隆和编辑：通过PCR技术、DNA重组技术等，克隆并编辑目标基因序列，使其能够在植物细胞中稳定表达。
2. 转化培养：把编辑好的基因导入植物细胞，通过转化培养等手段，将其整合到植物体内，使其在植物生长发育过程中产生效应。
3. 利用遗传分析手段，如CRISPR/Cas9等，在植物细胞中进行基因组编辑，以实现基因的整合和转移。
三、植物基因工程的应用植物基因工程的应用相当广泛，重要的应用领域包括以下几个方面：1. 提高农作物抗性：通过编辑和转移有关基因序列，增强作物对气候和环境变化的抵抗力，提高作物的产量和品质，并罕见减少灾害损失。
2. 改进生态环境：利用基因工程技术编辑植物基因组，改变其作用机制，从而实现抗旱、抗病、抗逆性等特性的提升。
高中生物基因工程知识点总结
高中生物基因工程知识点总结基因工程，作为现代生物技术的核心领域之一，在高中生物课程中占据着重要的地位。
它不仅具有深刻的理论意义，还在农业、医药等众多领域有着广泛的实际应用。
下面我们就来详细梳理一下高中生物中基因工程的相关知识点。
一、基因工程的概念基因工程，又叫基因拼接技术或 DNA 重组技术，是指按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。
二、基因工程的基本工具1、限制性核酸内切酶（限制酶）限制酶能够识别双链 DNA 分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
它具有特异性，即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割 DNA 分子。
2、 DNA 连接酶DNA 连接酶的作用是将两个具有相同末端的 DNA 片段连接起来，形成磷酸二酯键。
3、运载体常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等。
运载体需要具备的条件有：能在受体细胞中复制并稳定保存；具有一至多个限制酶切点，供外源 DNA 片段插入；具有标记基因，便于筛选。
三、基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取目的基因可以从自然界中已有的物种中分离出来，也可以用人工的方法合成。
常用的方法有：从基因文库中获取、利用 PCR 技术扩增目的基因、通过化学方法人工合成。
2、基因表达载体的构建这是基因工程的核心步骤。
基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
启动子是 RNA 聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出 mRNA；终止子是转录终止的信号；标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
3、将目的基因导入受体细胞将目的基因导入植物细胞常用的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；导入动物细胞常用的方法是显微注射法；导入微生物细胞常用感受态细胞法。
4、目的基因的检测与鉴定检测目的基因是否导入受体细胞可以采用 DNA 分子杂交技术；检测目的基因是否转录出 mRNA 可以采用分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质可以采用抗原抗体杂交技术；还可以进行个体生物学水平的鉴定，比如抗虫或抗病的接种实验。
植物基因工程与农作物改良
植物基因工程与农作物改良植物基因工程是一门重要的生物技术领域，它利用现代分子生物学技术手段对植物基因进行修改，以实现对农作物的改良。
这项技术通过改变植物自身的遗传特性，使其获得更好的抗病性、耐旱性、耐寒性、耐虫性等特点，从而提高作物的产量和品质。
本文将从植物基因工程的原理、方法和应用等方面进行详细分析。
一、植物基因工程的原理植物基因工程的原理基于遗传物质的改变，主要包括DNA重组和基因转导两个步骤。
首先，科学家通过DNA重组技术将目标基因与载体DNA连接，并通过转化技术将重组DNA导入植物。
随后，这些外源基因会经过一系列的转录、翻译和调控过程，最终被植物细胞所接受并表达。
这样一来，植物就会产生具有目标特性的新蛋白质，从而实现基因改良。
二、植物基因工程的方法植物基因工程的方法主要有基因转化、基因敲除和基因编辑三种。
其中，基因转化是最常见的技术手段，它包括农杆菌介导的基因转化和生物质转化两种方式。
农杆菌介导的基因转化利用农杆菌特定的转座子基因将外源基因导入植物细胞中，从而实现遗传信息的改变。
而生物质转化则是直接利用生物物理化学方法将DNA序列导入植物细胞中。
至于基因敲除和基因编辑技术，则是通过特定的酶切和修复机制来改变植物基因组的结构，从而实现基因的去除或修饰。
三、植物基因工程的应用植物基因工程的应用范围广泛，涉及到农作物的抗病性、耐旱性、耐寒性、耐虫性等多个方面的改良。
例如，通过插入Bt基因，科学家成功使玉米、大豆、棉花等农作物具备抗虫性，减少对农药的依赖。
此外，通过改变植物的响应机制，研究人员还能增加作物对干旱和高盐环境的适应性，提高其生存能力。
同时，植物基因工程还为农作物的品质和生产效益提供了新途径。
例如，通过调控驯化基因，可以增加水稻和小麦的产量和品质，提高作物的经济价值。
然而，植物基因工程也面临着一些挑战和争议。
首先，基因改良引种也可能会导致植物的稳定性下降，从而增加对农药的依赖。
其次，外源基因的导入会增加基因的复杂性，可能导致对环境的不良影响。
基因工程-8-植物基因工程
3.1 T-DNA功能 致瘤基因 冠瘿碱合成酶及其分解基因
3.2 Vir 的基因功能
① 细菌附着到植物受伤细胞上 ② Vir基因产物加工T-DNA形成单股DNA片段 ③ T－股（T Strand）被转入植物细胞，整合到寄 主基因组中 ④ T－DNA基因被表达，使植物细胞增殖并产生冠 瘤碱
4. Ti质粒的改造
① 基因附加：通过添加1个或多个基因改变植物的性状。 ② 基因扣除：使一个或多个植物已经存在的基因失活
利用反义RNA延迟番茄果实的成熟
多聚半乳糖醛酸酶基因
第二节 植物基因工程技术的应用
抗病 抗虫 四“抗” 抗药 一提高 抗逆（寒，旱，盐） 提高营养价值 1、高营养价值的基因工程植物 双子叶植物 单子叶植物 大豆 小麦，水稻，玉米 赖氨酸 高 低 蛋氨酸 — 高（16％） 设计多种必须氨基酸密集基因 复合Aa蛋白质
2、抗病基因工程植物 烟草花叶病毒外壳蛋白基因 烟草，番茄 1986年，美国第一次，棉花枯萎病 黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因 黄瓜 抗性株 大豆花叶病毒外壳蛋白基因 大豆 抗性株 3、抗虫基因工程植物 烟草 番茄 苏云金杆菌 马铃薯 抗性植株 产毒基因 玉米 （15个） 大豆 油菜
（96年）从苍蝇 中分离抗菌基因
4、抗除草剂基因工程植物
以除草剂为底物的酶的基因
5 5、抗逆基因工程植物
抗冻、旱，抗缺氧
6、转基因工程植物产生药物
① 转基因烟草生物单克隆抗体 ② 荷兰用转基因马铃薯产生人血清蛋白 ③ 南朝鲜用基因烟草产生人胰岛素
第三节 植物基因工程的完全性
• • • • • 毒性问题 过敏反应问题 营养问题 对抗生素的抵抗作用 对环境的威胁
第七章
植物基因工程
植物基因工程操作的一般程序
生命科学中的植物基因工程与改良
生命科学中的植物基因工程与改良植物基因工程是一项重要的生命科学技术，通过改变植物的基因组来实现对植物的改良和调整。
这项技术可以应用于农业、医药以及环境保护等领域，对人类社会的可持续发展起到了重要的作用。
一、植物基因工程的原理与方法植物基因工程的核心是通过转基因技术将外源基因导入植物的染色体中，使其表达并产生所需的特异性特点。
基因工程的方法主要有以下几种：1. 转化法：通过将外源DNA片段导入目标植物的细胞中，并借助细胞分裂和再生过程，将外源基因整合到植物基因组中。
这种方法常用于改善作物的农艺性状，如提高产量、增强抗病虫害能力等。
2. 基因敲除法：通过外源基因表达抑制或剥夺目标植物中某个特定基因的功能，从而观察该基因在植物生长发育中的作用。
这种方法常用于研究植物基因功能和代谢网络的调控机制。
3. 基因编辑法：通过利用胚胎基因组编辑技术，如CRISPR/Cas9系统，直接对植物基因组中的特定位点进行修饰，实现精确的基因改良。
这种方法能够针对性地修改植物基因组，对于研究基因功能和改良植物性状具有重要意义。
二、植物基因工程的应用领域1. 农业改良：植物基因工程可以应用于提高作物的抗病虫害性能、耐盐碱性、抗逆性以及提高产量和品质等方面。
例如，通过转基因技术使水稻具备抗虫特性，减少对农药的依赖，提高农作物生产的可持续性。
2. 医药研发：植物基因工程是一种重要的药物生产技术。
通过将具有特定药物活性基因导入植物，可以大规模生产特定的药物蛋白。
例如，转基因烟草可以用于生产疫苗、抗癌药物等，为人类健康事业做出贡献。
3. 环境保护：植物基因工程可以应用于修复受污染土壤和水体。
通过引入具有吸收、降解或转化有害物质的基因，改良植物的吸收和降解能力，实现对环境污染物的治理。
这种方法可以有效推进可持续发展的生态环境建设。
三、植物基因工程的争议与风险植物基因工程虽然具有广阔的应用前景，但也存在争议和风险。
其中，主要包括以下几点：1. 安全性问题：转基因植物可能对环境和生物多样性产生潜在影响。
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第三节 植物转基因技术在植物品种改良 中的应用
控制果实成熟的转基因植物 抗病虫害的转基因植物 抗除草剂的转基因植物 改变花卉形状和颜色的转基因植物 抗环境压力的转基因植物 产高品质产物的转基因植物
“转基因逃逸”造成的危害： 诱发害虫和野草的抗性问题 诱发基因转移跨越物种屏障 诱发自然生物种群的改变 基因污染 食物链的破坏
④Ori区(origin of replication，复制起 始区)：Ori区上的基因调控Ti 质粒的自我 复制。
(2). 农杆菌的感染和生存
第一步:植物受伤 乙酰丁香酮、羟基乙酰丁香酮诱导Ti 质粒的毒性基因表达。 第二步 感染植物 脓杆菌吸附于植物的表面伤口部位 第三步 毒性基因（vir）表达 第四步 T-DNA转移 单链T-DNA被切下来，整合到植物基因 组中。 第五步 诱导冠瘿瘤
(5) 天然Ti质粒作载体的缺点
野生型Ti 分子大（200kb）操作起来十分麻烦； 各种限制型酶切位点多，切割产生很大片段。且单 一的酶切位点很少； tms和tmr 基因产物干扰植物内源激素的平衡，产 生冠瘿瘤，阻碍转基因植物细胞的分化和再生； 无大肠杆菌的复制起点和作为转化载体的选择标记 基因。
①pGV3850 特点：外源基因不能直接插入，需要借助 于pBR322质粒作为中间载体 选择标记 脓杆菌选择标记 宿主土壤农杆菌的选择标记是位于中间载 体pBR322上的卡那霉素抗性（Kanr）基 因。卡那霉素抗性（ Kanr ）基因（卡那 霉素对植物有剧毒！） 最终受体植物的选择标记 位于T-DNA右半部分的胭脂碱合成酶基因 （nos）。
左 外源基因 右 感染植物
进入植物细胞核， 整合，表达
Vir 左 外源基因 右
农杆菌
双元系统的特点
双元系统是穿梭质粒和Ti质粒两个质粒 ，在接合 后可以自主性地共存于同一农杆菌细胞中。 穿梭质粒编码植物选择标记、表达信号、多克隆 位点、两个T-DNA
பைடு நூலகம்
双元系统中的 Ti 具有Vir基因和农杆菌复制起始 子(OriA)，但没有T-DNA边界序列。 接合后，两个质粒可以自主共存于同一农杆菌细 胞中。 穿梭质粒可在农杆菌内自主复制
（二）载体介导法
Ti 质粒介导的整合转化程序
植物病毒介导的转染程序（略）
1 Ti 质粒介导的整合转化程序
Ti 质粒的结构与功能
双子叶植物尤其豆科植物的根部常常会由于植物根部
被土壤杆菌农杆根瘤菌（A.tumefaciens）形成根瘤，
其致瘤特性是由该菌细胞内的野生型质粒 Ti质粒（ Tumor-inducing plasmid）介导的，又称肿瘤诱导 质粒。
第八章 植物基因工程
转基因植物 将外源基因导入植物细胞，经组织培养， 获得能够表达外源基因的植物称为转基因 植物。 抗虫 抗病 抗逆 生产药物
第一节 植物的转基因技术
植物细胞培养技术
植物转基因技术的基本路线
转基因的受体系统 外源基因导入植物的方法
一、植物转基因技术的基本路线 分离目的基因 将目的基因与载体连接，形成重组DNA 利用细菌繁殖扩增重组DNA 将与表达载体相连的重组DNA导入到目标植 物的细胞中 筛选转化细胞，并诱导产生转基因植株 转基因植株大规模种植
染色体上
转化后可诱导愈伤组织分化成转基因植物
共 整 合 转 化 程 序
②双元载体（binary vectors） 能在大肠杆菌和农杆菌中复制，是穿梭载体。 双元载体的结构 Ti质粒被剔除了T-DNA、冠瘿碱代谢基因、 vir基因。 大幅度减小质粒的体积。（<10kb）
Ti的精髓：Vir基因（转移）和左右界（整合）
改造后的Ti质粒载体模式
ori
(7) Ti载体的类型
共整合载体（cointegrate vectors） 由比利时科学家P.Zambrisky等1983年改造 的pGV3850 受体载体，需要同源重组才能插入外源基因。 双元载体（binary vectors） 既有大肠杆菌复制起点也有农杆菌复制起点， 是个穿梭载体。
T-DNA上的产物催化产生过量的生长素和细胞分裂素，形成植物冠瘿瘤。
(3).Ti质粒转化的对象 裸子植物、双子叶被子植物、禾谷类单子叶 植物（玉米） (4). Ti质粒作为载体的可能性 能够自发地整合到植物的染色体上。 能转化多种植物。 强启动子 T-DNA的opine合成酶基因上有一个强 启动子，能启动外源基因的表达。
转基因育种的程序
基因分离 体外重组
载体的构建
农杆菌介导 基因枪轰击
转化 转化体
筛选 遗传稳定性 评价
结合常规育种 转基因品种
安全性评价
市场开发
七、转基因生物潜在危害
转基因植物引发的安全事件
英国Pusztai事件 康奈尔大学斑蝶事件 加拿大“超级杂草”事件 墨西哥玉米事件
中国Bt抗虫棉事件
潜在危害 转基因食品可能具有毒性 ; 转基因食品可能产生过敏反应; 抗生素标记基因可能使人和动物产生抗药 性; 病毒重组,发生基因重组,产生新的病毒,产生 变异,或产生新病毒 转基因作物的生态安全性问题转 基作物本身可能演变为农田杂草
对生态环境的影响：植物的“转基因逃逸” 种苗的散失/残缺组织的再生 花粉的传播
三、外源基因导入植物的方法 （一）DNA直接转移法 化学刺激法 PEG、PNA（肽核酸）、磷酸钙、氯化钙 电击法 基因枪法 花粉通道法 将外源DNA片段在自花授粉后的特定时期注入 柱头或花柱，外源DNA沿花粉管通道或传递 组织通过珠心进入胚囊，转化不具备细胞壁 的受精卵，合子或早期胚体细胞。
双元载体的转化 基因插入 转化农杆菌之前，所有的克隆步骤都在大 肠杆菌里操作。 帮助质粒（ helper plasmid） 受体农杆菌内要求带有整套vir基因（但缺 失T-DNA及左右边界）的“帮助质粒”提 供vir产物。
E.coli 左 外源基因 右 双元载体 转化
农杆菌 Vir 帮助质粒
（6）Ti 质粒的改造
除去 T-DNA 上的 tmt ， tms 和 tmr 生物合成 基因； 除去 Ti 质粒的其它非必需序列， 安装大肠杆菌复制子，
安装植物细胞的筛选标记，如 neor 基因， 使用植物基因的启动子和polyA化信号序列； 插入人工多克隆位点，以利于外源基因的 克隆。
生长素 细胞分裂 左边界 基因 素基因
tms tmr
冠瘿碱 合成
tmt
右边界
②毒性基因（vir） 决定土壤农杆菌对植物的感染和T-DNA的转 移， 进入和整合。使根癌农杆菌表现出毒性。 ③Con 区(regions encoding conjugations，接合转移编码区)：该区 段上存在与细菌间接合转移的有关基因， 调控Ti 质粒在农杆菌之间的转移。
外源基因插入pGV3850 的过程
pBR322不能在土壤农杆菌中复制，只能同 pGV3850重组。只有这样，土壤农杆菌才能得 到抗卡那霉素性状。 外源基因
插入
Kanr pBR322
转化
抗卡那霉素 卡那霉素筛选 土壤农杆菌 的土壤农杆菌 pBR322与 pGV3850重组 含pGV3850 感染 外源基因 胭脂碱筛选 植物组织 表达鉴定 整合到
（1） Ti 质粒的图谱区 整个质粒160 -240 kb T-DNA区、 Vir区、 Con区、 Ori区
①转移DNA T-DNA（transfer-DNA） T-DNA 12 -24 kb tms的编码：合成吲哚乙酸 tmr的编码：合成植物分裂素 tmt的编码：合成氨基酸衍生物冠瘿碱 在T-DNA 的两端还含有左右2 个边界，长为 25bp的末端重复顺序，在切除及整合过程具 有重要意义。