质谱分析技术
质谱技术--检测技术
质谱技术蛋白质组学中常用质谱仪汇总（二）。
目前，常见的用于在质谱分析中分离离子的质谱仪有六种：四极质谱仪、飞行时间质谱仪、扇形磁质谱仪、静电质谱仪、四极离子阱质谱仪、离子回旋共振。
上期文章中，我们介绍了四极质谱仪和飞行时间质谱仪，本期将介绍其他四种常用质谱仪。
蛋白质组学中常用质谱仪汇总（一）。
常见的用于在质谱分析中分离离子的质谱仪有六种：四极质谱仪、飞行时间质谱仪、扇形磁质谱仪、静电质谱仪、四极离子阱质谱仪、离子回旋共振。
小编对蛋白质组学实验室中常用的仪器以及仪器选择前应考虑的技术标准做了汇总。
质谱知识学习资源。
百泰派克小编整理了几种质谱知识学习资源，包括Nature Milestones Mass Spectrometry，The Broad Institute 2012 Proteomics Workshop及IonSource。
实用蛋白质谱分析数据库资源。
GPMdb，EBI PRIDE Archive，Human Proteome Map，UniProt四种蛋白质谱分析数据库资源简介。
质谱技术发展以及在生物学研究中的应用。
质谱作为现今在生物研究中的普遍运用的技术，借助快速高效测定复杂生物大分子和小分子的优势，在生物研究中的重要性越来越凸显。
这期我们讲一下质谱技术发展以及在生物学研究中的应用。
KEGG Pathway 功能绘制通路图。
KEGG全称为Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，它是日本京都Kanehisa Laboratories阅读文献手工整理的一个庞大的数据库，始建于1995年。
其中包括文献报道过的信号通路、基因、疾病、药物等信息，是国际上常用的生物信息学数据库之一，以"理解生物系统的高级功能和实用程序资源库"著称。
质谱技术在蛋白质组学中的应用。
质谱技术是蛋白质组学研究的核心技术之一，可应用于蛋白质组学中多项内容的研究。
质谱分析的原理
质谱分析的原理质谱分析是一种广泛应用于化学、生物、环境等领域的分析技术，它通过对样品中分子的质量和结构进行测定，从而实现对样品的定性和定量分析。
质谱分析的原理主要包括样品的离子化、质谱仪的质量分析和数据处理三个方面。
首先，样品的离子化是质谱分析的第一步。
通常采用质谱仪将样品分子转化为离子，常见的离子化方法包括电子轰击离子化、化学离子化和电喷雾离子化等。
其中，电子轰击离子化是最常用的方法，它通过高能电子轰击样品分子，使其失去一个电子而形成分子离子。
化学离子化则是利用化学反应使样品分子产生离子，而电喷雾离子化则是通过高压气体将溶液样品喷射成小液滴，再通过电场使其产生离子。
这些离子化方法能够将样品分子转化为离子，为后续的质谱分析奠定基础。
其次，质谱仪的质量分析是质谱分析的核心环节。
质谱仪主要由离子源、质量分析器和检测器组成。
离子源将离子化的样品分子引入质谱仪，质量分析器则根据离子的质量/电荷比对离子进行分离和分析，最后通过检测器将分离的离子信号转化为电信号。
常见的质谱仪包括飞行时间质谱仪、四极杆质谱仪和离子阱质谱仪等。
飞行时间质谱仪利用离子在电场中的飞行时间来测定其质量，四极杆质谱仪则通过在交变电场中对离子进行轨道控制来实现质量分析，而离子阱质谱仪则利用离子在电场中的稳定轨道来进行质量分析。
这些质谱仪能够高效准确地对离子进行质量分析，从而实现对样品分子的定性和定量分析。
最后，数据处理是质谱分析的最后一步。
质谱仪通过检测器将分离的离子信号转化为电信号，这些电信号经过放大、数字化处理后形成质谱图。
质谱图是质谱分析的结果，它能够直观地反映样品中各种分子的质谱特征。
数据处理主要包括质谱图的解析和定量分析。
质谱图的解析是通过对质谱图进行峰识别和质谱峰的质量测定来确定样品中分子的质量和结构，而定量分析则是通过对质谱峰的峰面积进行积分来确定样品中分子的含量。
这些数据处理方法能够准确地分析样品中各种分子的质谱特征，从而实现对样品的定性和定量分析。
生物大分子的质谱分析
生物大分子的质谱分析随着生物学研究的深入，人们对大分子的研究越来越深入，其中质谱分析技术起到了举足轻重的作用。
质谱分析（Mass spectrometry，简称MS）是一种广泛应用于化学、医学、物理、生物学及其他相关领域的分析技术，简单地说，质谱分析就是利用对分子的质量和电荷进行测定的原理，对物质进行分析的一种方法。
质谱分析技术与其他分析方法相比，有许多优点，如快速、高敏感性、大信号动态范围、高分辨率、无需特殊前处理等，因此已经成为生物大分子分析中的重要手段。
什么是生物大分子生物大分子是指相对分子质量较大的生物分子大分子，如蛋白质、核酸、多糖等。
这些生物大分子在体内有着非常重要的生理功能，如蛋白质在细胞的生物信息传递和代谢过程中扮演着重要的角色，而核酸则是遗传信息的主要媒介。
因此，对生物大分子的研究对于展开生物学研究和发现治疗疾病的新方法有着至关重要的作用。
质谱分析技术在生物大分子研究中的应用1. 蛋白质分析蛋白质是生物体内形态最复杂、功能最多样的大分子之一。
现在常用的蛋白质质谱方法有常用的液相层析-质谱联用技术（LC-MS）、二甲基化标记技术等。
其中，液相层析-质谱联用技术可以将蛋白质通过柱层析技术进行分离，再进行质谱分析，其主要作用是用于鉴定蛋白质。
二甲基化标记技术是在蛋白质分析中的较为重要方法，其贯穿整个蛋白质分析过程，包括蛋白提取、纯化、消化、分离等。
2. 核酸分析核酸是生物大分子中的基本组成部分之一，可通过质谱分析了解其序列和结构，从而进一步探究其生命活动中的具体作用。
核酸质谱分析的方法主要是通过电喷雾质谱（ESI-MS）技术，即将核酸样品通过喷雾器喷雾后进入质谱仪中，并加上电荷，通过质量/荷比对核酸样品进行检测。
3. 多糖分析多糖指的是由多个糖组成的生物大分子，如淀粉质、纳豆菌多糖、黏多糖等。
多糖分析的方法有很多，常信用的方法有糖基化物谱质（SGS）、质谱成像（MSI）等。
其中，质谱成像可以提供高空间分辨率的多糖分布图像，为了研究多糖分布和生理功能之间的关系提供了有力的手段。
红外光谱与质谱分析技术
红外光谱与质谱分析技术一、红外光谱分析技术红外光谱（Infrared Spectroscopy，简称IR），是一种常用的分析技术，适用于各种类型的化合物分析。
该技术基于物质在不同频率下的振动产生的谱带，可以用来确定有机化合物的结构、功能基团、聚合物、金属-配体配位、药物、蛋白质和多肽等物质。
1. 原理红外光谱技术是通过红外线辐射与分析物相互作用而得出物质的结构和化学键信息的一种方法。
光谱成像技术利用相同光谱来源于不同位置成像样品的特点，然后将成像合并起来作为一张图像。
2. 应用红外光谱在药物和化学领域中广泛应用，可以用于药物中同分异构体的鉴定、纯度的测定、药品的质量监控、化学反应的控制、催化反应中配位基分析、蛋白质和多肽的特征分析等。
二、质谱分析技术质谱分析技术（Mass Spectrometry, MS）是一种高效的分析技术，主要用于确定物质的分子量和结构以及其化学组成。
质谱分析是基于分子离子的质量和荷质比的分析方法。
1. 原理质谱分析技术的原理是将样品分离成分子离子的荷质比，并用质谱仪进行测量。
质谱仪是一个电离仪，将样品原子或者化合物离子化，并加速至不同荷质比下飞行，最后将不同荷质比的离子通过万能检测器进行检测。
2. 应用质谱分析技术在化学、物理、材料等领域中广泛应用，可以用于药物或者蛋白质分子的组成分析、变性序列分析、寿命短的离散粒子的质谱分析、热力学研究等。
三、红外光谱和质谱分析技术联用红外光谱和质谱分析技术联用可以实现更准确的分析结果，同时也可以提高信噪比和减少干扰因素。
将两种技术联合使用可以分析复杂的化学物质，更好地理解它们的结构和功能。
1. 原理红外光谱和质谱分析技术在原理上存在巨大的联系和交叉。
红外光谱技术可提供有关功能基团的信息，在质谱分析中可以用于大分子中的各个基团的分析。
而质谱法可以提供分子的分子量和分子结构等信息，为红外光谱分析提供数据支持。
2. 应用红外光谱和质谱分析技术联用已经成为许多领域研究人员的核心工具。
质谱分析技术简介
一、质谱分析技术简介p y Introduction of Mass Spectrometry2017.2.27主要内容1、概述概述2、质谱仪的基本结构（1）进样系统（2）离子源（3）质量分析器（4）检测器3、质谱仪质谱仪1、概述质谱（Mass Spectrometry）分析将样品分子经过离子化后，在电场与磁场的共同作用下，利用其质荷比(m/z)不同而进行分离，检测得到质谱图的一种分利其离检得质谱的种析方法。
质谱的主要作用①测定物质的分子量;②根据碎片特征进行化合物的结构分析;③对于高分辨质谱可获得元素组成信息。
信息 质谱的分类2、质谱仪的基本结构质谱仪工作原理样品分子从进样系统进入离子源，形成带电离子→→进入质量分析器→→在质量分析器中，不同质荷比m/z的离子实现时空分离→→检测器中检测和记录数据。
（1）进样系统最常见的试样引入方式有：()()•直接插入(direct insertion):样品置于探针或样品板如MALDI)直接插入离子源，热或激光解吸使之挥发和离子化。
直接喷入(direct infusion)：采用毛细管或毛细管柱将气体或液体样品喷入质•(direct infusion)谱仪中进行分析检测（如EI, ESI)，可以通过注射泵连续泵入（GC/MS、接口）LC/MS接口）。
(EI, ESI)(MALDI)（2）离子源作用：将被分析的样品分子电离成带电的离子。
种类：气相源：如EI, CI, FIFD,FAB,APCI,ESI,LD,硬源离子化能量高伴有化学键的断裂谱图复杂解吸源：如FD, FAB, APCI, ESI, LD,MALDI…硬源：如EI ，离子化能量高，伴有化学键的断裂，谱图复杂，可得到分子官能团的信息。
软源软源：如CI, FI, FD, FAB, APCI, ESI, LD, MALDI…… 离子化能量低，产生的碎片少，谱图简单，可得到分子离子峰即得到分子量信息峰，即得到分子量信息。
《生物质谱分析技术》课件
生物质谱分析技术在生物学、医学和农业等领域有广泛的 应用，如蛋白质组学、代谢组学、药物筛选和食品安全检 测等。
生物质谱分析技术的原理
生物质谱分析技术的原理是基于质谱原理，通过离子化样 品中的分子，测量其质量/电荷比值，从而确定分子的质 量和结构。
THANKS
感谢观看
临床应用
随着质谱分析技术的发展，其在临床 诊断、药物发现和个性化医疗等领域 的应用将得到进一步拓展。
人工智能与机器学习
人工智能和机器学习技术将进一步优 化和提高质谱数据的解析能力，使生 物质谱分析更加高效和准确。
06
参考文献
参考文献
生物质谱分析技术概述
生物质谱分析技术是一种基于质谱原理的生物分子分析方 法，通过测量生物分子质量，可以用于鉴定、定量和分离 生物分子。
蛋白质组学研究是生物质谱分析技术的重要应用领域之一。通过质谱分析，可以 鉴定蛋白质的成分、结构和功能，进而研究蛋白质之间的相互作用和蛋白质的表 达调控。
质谱分析在蛋白质组学研究中常用于蛋白质鉴定、差异表达分析、蛋白质修饰和 相互作用研究等方面。例如，在研究癌症等疾病过程中，质谱分析可以帮助科学 家发现与疾病相关的差异表达蛋白和蛋白质修饰，为疾病的诊断和治疗提供新的 靶点。
生物质谱分析技术逐渐成熟， 开始广泛应用于蛋白质组学研
究。
21世纪初
随着各种新型质谱仪器的出现 ，生物质谱分析技术的应用领
域不断拓展。
目前
生物质谱分析技术已经成为生 命科学领域的重要研究手段， 不断推动着生命科学的发展。
02
质谱仪的基本原理与构成
质谱仪的工作原理
1 2
离子化
通过电离方式将生物分子转化为带电离子。
质谱分析技术
质谱分析技术1. 引言质谱分析技术（Mass Spectrometry，简称MS）是一种高效、灵敏和准确的分析方法，广泛应用于化学、生物、环境等领域。
本文旨在介绍质谱分析技术的原理、仪器配置及应用领域。
2. 原理质谱分析技术基于化合物分子的离子化和质量-电荷比（m/z）的测量。
主要分为四步：样品的离子化、离子的加速和分离、离子的检测和质量分析。
常用的离子化技术包括电子冲击（EI）、化学电离（CI）、电喷雾（ESI）和大气压化学电离（APCI）等。
3. 仪器配置质谱仪由离子源、质量分析器和信号采集系统组成。
根据不同应用需求，常见的质量分析器包括飞行时间质谱仪（Time-of-Flight Mass Spectrometer，简称TOF-MS）、四极杆质谱仪（Quadrupole Mass Spectrometer，简称Q-MS）、离子陷阱质谱仪（Ion Trap Mass Spectrometer，简称IT-MS）和三重四极杆质谱仪（Triple Quadrupole Mass Spectrometer，简称QQQ-MS）等。
4. 应用领域4.1 生物医学领域质谱分析技术在生物医学领域中发挥重要作用。
通过分析生物标志物、药物代谢产物等，可以实现疾病诊断、药物监测和生物分子功能研究。
例如，质谱成像技术可以揭示组织和细胞内代谢物的空间分布，从而提供生物医学研究的重要信息。
4.2 环境领域质谱分析技术在环境领域的应用主要体现在环境监测和污染物分析方面。
通过分析空气、水、土壤等样品中的有机污染物、重金属等，可以评估环境质量和污染源，为环境保护和治理提供科学依据。
4.3 食品安全领域质谱分析技术在食品安全领域中有着重要的应用。
通过对食品中农药残留、添加剂、重金属等有害物质的检测和分析，可以确保食品安全，保护消费者健康。
同时，质谱技术还可以对食品中的香气成分进行定性和定量分析，为食品研发提供支持。
5. 发展趋势5.1 高分辨质谱技术随着科学技术的不断进步，高分辨质谱技术在质谱分析中得到广泛应用。
质谱分析的原理
质谱分析的原理质谱分析是一种广泛应用于化学、生物、环境等领域的分析技术，它通过对样品中化合物的质量和结构进行测定，为科研和工业生产提供了重要的数据支持。
质谱分析的原理主要包括样品的离子化、离子的分离、离子的检测和数据处理等几个方面。
首先，样品的离子化是质谱分析的第一步。
通常采用不同的方法将样品转化为离子态，常见的离子化方法包括电离、化学离子化和光解离子化等。
其中，电离是最常用的方法，通过电子轰击、化学反应或激光辐射等方式将分子转化为离子。
其次，离子的分离是质谱分析的关键步骤。
离子在磁场或电场的作用下，根据其质荷比的不同而受到不同程度的偏转，从而实现离子的分离。
常见的离子分离方法包括质谱仪、电泳和毛细管电泳等，这些方法可以根据离子的质量和电荷将其分离开来，为后续的检测和分析提供了基础。
接着，离子的检测是质谱分析的核心环节。
通过质谱仪等设备，可以对分离后的离子进行高灵敏度的检测和记录，得到离子的质荷比和相对丰度等数据。
质谱仪的种类繁多，包括质子谱仪、电子转移谱仪和飞行时间质谱仪等，它们在检测离子时具有不同的优势和适用范围。
最后，数据处理是质谱分析的最后一步。
通过对检测到的离子数据进行处理和分析，可以得到样品中化合物的质谱图谱，从而确定化合物的质量和结构信息。
数据处理的方法包括质谱图的解释、质谱数据库的比对和质谱图谱的定量分析等，这些方法可以帮助研究人员快速准确地获取样品的信息。
总的来说，质谱分析的原理涉及样品的离子化、离子的分离、离子的检测和数据处理等几个方面，通过这些步骤可以获取样品中化合物的质量和结构信息。
质谱分析技术的不断发展和完善，为科研和工业生产提供了强大的分析工具，有助于推动相关领域的发展和进步。
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SELDI-TOF MS分析使用的各种蛋白质芯片
SELDI-TOF MA检测结果与处理
实例：鼻咽癌病人血清标志物检测
卵巢癌细胞培养液 上清中分泌蛋白的 SELDI-TOF MS检 测分析
2）MS/MS 串连质谱分析原理示意图
限制酶切蛋白质为肽段
Enzymatic Digest and
先找出y系列离子
88 145 292 405 534 663 778 907 1020 1166 b ions
S
G
F
LEEDE
L
K
1166 1080 1022 875 762 633 504 389 260 147 y ions
y6 100
y7
% Intensity
y2
y3
y4
0
250
500
y5 750
3）胶内蛋白酶限制酶切，从此步骤可由公司完成
4）肽段提取纯化，点样
5）质谱分析数据获取（质谱仪器分析）
6）数据信息解读 人工：氨基酸序列分析（可以自己人工分析）
软件处理：蛋白质鉴定、氨基酸序列分析 网站：/tools/#proteome
可以选择转向相关网站 软件：MASCOT等适用于PMF和氨基酸序列分析 数据库：MSDB、NCBInr、SwissProt
用于蛋白质鉴定的两种基本的质谱分析技术
1）MALDI-TOF MS Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization/ 基质辅助激光解吸附离子化 Time-Of-Flight mass spectrometry 飞行时间 PMF: peptide mass fingerprinting 肽质量指纹谱 MW: 800-300,000
2、质谱峰图谱比较：用于混合物比较 如血、尿、分泌液中的代谢物（ 大分子和小分
子）等改变的监测，可以用于生物标记物分析鉴定， 作为生物药材的鉴定，监测疾病过程，治疗效果， 预后评价，各种生理病理过程研究的监测和评估
3、质谱分析方法的选择 1）质谱峰图谱比较： SELDI-TOF MS 2 kDa – 50 kDa MALDI-TOF MS 0.8 kDa – 300 kDa 2）蛋白质鉴定： MALDI-TOF MS PMF 串联质谱（MS-MS）氨基酸序列分析
胰蛋白酶酶切Myoglobin产生的肽段及其分子量
1811.90 1606.85 1271.66 1378.83 1982.05 1853.95 1884.01 1502.66
748.43
GLSDGEWQQVLNVWGK VEADIAGHGQEVLIR LFTGHPETLEK HGTVVLTALGGILK KGHHEAELKPLAQSHATK GHHEAELKPLAQSHATK YLEFISDAIIHVLHSK HPGDFGADAQGAMTK ALELFR
D=aspartate 115.09
907 b8 SGFLEEDE
K=lysine 128.17 1020 b9 SGFLEEDEL
DELK ELK LK K
ion MW y9 1080 y8 1022 y7 875 y6 762 y5 633 y4 504 y3 389 y2 260 y1 147
Myoglobin用胰蛋白酶限制酶切后产生的肽段 （从碱性氨基酸的羧基端切断）
• Myoglobin GLSDGEWQQV LNVWGKVEAD IAGHGQEVLI RLFTGHPETL EKFDKFKHLK TEAEMKASED LKKHGTVVLT ALGGILKKKG HHEAELKPLA QSHATKHKIP IKYLEFISDA IIHVLHSKHP GDFGADAQGA MTKALELFRN DIAAKYKELG FQG
控制CID过程中的能量，使多肽主要从最弱的键--肽键处断裂产生N-端b系列和C-端y系列肽段
yn-i
yn-i-1
-HN-CH-CO-NH-CH-CO-NH-
Ri
Ri+1
bi bi+1
串联质谱氨基酸序列分析例子 肽段SGFLEEDELK在理想条件下可生成的b、y
系列离子
MW ion
S=serine 87.08
八、质谱数据分析软件使用 （以Mascot为例）
ExPASy Proteomics Tools Matrix Science主页 PMF分析 MS/MS分析
2）结合肽谱数据库鉴定蛋白质（肽质量指纹谱）
3）蛋白质修饰鉴定
用MALDI-TOF MS检测特定部位氨基酸残基 的磷酸化
4）分子量测定： MALDI-TOF 的准确度高达0.1%~0.01%，远远
高于目前常规应用的SDS 电泳与高效凝胶色谱技术， 目前可测定生物大分子的分子量高达300KDa。
5） 另外分子量测定还可以提供分子结构信息： （1）分子式(样品的元素组成)用同位素丰度比法 （低分辨法）或高分辨质谱仪测得的准确相对分子质 量，均可以确定分子式； （2）鉴定某些官能团如甲基(m/z 15)、羰基(m/z 28)、 甲氧基(m/z 31)、乙酰基(m/z 43)…… （3）分子结构信息由分子结构与裂解方式的经验规 律,根据碎片离子的m/z 及相对丰度RA 提供分子结构 信息。
b3 y2
y3 b4
y4 b5
b6
b7
b8
b9y8 y9
0 250
500
750
1000 m/z
新序列推测
100
% Intensity
0 250
E
L
500
750
1000 m/z
新序列推测2
100
% Intensity
SGF L
KL
E
0 250
E
D
EE
500
E
L
D
E
750
FG L 1000 m/z
新序列推测原则 软件辅助分析
88 b1 S
GFLEEDELK
G=glycine 57.05
145 b2 SG
FLEEDELK
F=phenylalanine 147.18
292 b3 SGF 405 b4 SGFL
LEEDELK EEDELK
L=leucine 113.16
534 b5 SGFLE
EDELK
E=glutamate 129.12 663 b6 SGFLEE 778 b7 SGFLEED
（二）样品制备注意事项
1）防止蛋白质降解 2）需要还原与烷基化处理 3）电泳胶块处理过程中（取胶、染色、切 取胶块等），不可皮肤直接接触，和头皮削 掉落其上。 4）切胶前后留胶的图像 5）送作质谱分析样品达到必须的浓度 6）有可带电荷基团、适当的pH值、不含各 种去污剂、DMSO、DMF、甘油、磷酸盐、 其它盐和缓冲剂 < 100 mM。
Fractionation
第一步MS分离各个肽段 第二步MS对其中的一个肽段进行氨基酸序列分析
MS/MS
碰撞诱导解离CID中多肽分子结构中 键断裂的多种可能性
xn-i yn-i zn-i
yn-i-1
-HN-CH-CO-NH-CH-CO-NH-
Ri ai bi ci
CH-R’i+1 Ri”+1
bi+1
Detector grid -Vs
用MALDI-TOF MS和数据库鉴定细菌蛋白GroEL
PMF肽质量指纹谱鉴定蛋白质例子
Myoglobin GLSDGEWQQV LNVWGKVEAD IAGHGQEVLI RLFTGHPETL EKFDKFKHLK TEAEMKASED LKKHGTVVLT ALGGILKKKG HHEAELKPLA QSHATKHKIP IKYLEFISDA IIHVLHSKHP GDFGADAQGA MTKALELFRN DIAAKYKELG FQG
• 找出最佳路径
• 一个峰不能使用两次，连续前进或者退后。
• 简单肽段模式
• 软件辅助分析（上网利用相关网站的软件和 数据库）
六、质谱分析技术在医学生物学中的应用
1、蛋白质鉴定： 用于多肽，蛋白质的分子量测定外，还广泛的应
用于肽指纹图谱测定及氨基酸序列测定。
1）直接通过末端氨基酸序列分析鉴定蛋白质
实际质谱分析所得的肽质量指纹谱
ALELFR
LFTGHPETLEK HGTVVLTALGGILK
HPGDFGADAQGAMTK VEADIAGHGQEVLIR
GLSDGEWQQVLNVWGK GHHEAELKPLAQSHATK
YLEFISDAIIHVLHSK KGHHEAELKPLAQSHATK
2）SELDI-TOF MS （原理示意图）
七、基本过程与样品制备注意事项
（一）基本过程 1）蛋白质分离纯化：
还原和巯基封闭（烷基化） 等电聚焦-SDS PAGE电泳（500-10,000个点） 混合HPLC层析直接接MS分析（用IEX/RPC 方法可以产生~2,500洗脱带） 对SELDI-TOF MS溶解蛋白质直接加在蛋白质 芯片上
2）胶染色，图像分析（比较找差异，双染色如 Cy3、Cy5染色），含蛋白胶切取（前后图像对 照）。以上各个步骤在自己的实验室完成
The following components are ACCEPTABLE Acetic or formic acid, Acetonitrile, ethanol, Guanidine/HCl 4M, Hexafluoroisopropanol up to 40%, Methanol, Sodium chloride 10 mM, Urea 1M
Source
UV (337 nm)
Pulse voltage