采样方法(手和皮肤黏膜消毒效果监测)

3.17.6 手和皮肤黏膜消毒效果监测

采样时间:在消毒后立即采样。

采样方法

(1) 手的采样:被检人五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2 次(一只手涂擦面积约30cm2)，并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml 含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。

(2) 皮肤粘膜采样:用5cm×5cm 的标准灭菌规格板，放在被检皮肤处，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子 1 支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5 次，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml 含相应中和剂的无菌洗脱液的试管内，立即送检。不规则的粘膜皮肤处可用棉拭子直接涂擦采样。

检测方法

(1) 细菌总数检测:将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80 次，用无菌吸管吸取1.0ml 待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，内加入已溶化的45℃～48℃的营养琼脂15ml～18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置36℃±1℃温箱培养48h，计数菌落数。

采样结果计算方法：

平板上菌落数×稀释倍数

细菌总数(cfu/cm2)＝────────────────

采样面积(cm2)

(2) 致病菌检测:按

结果判定

(1) 消毒洗手

Ⅰ、Ⅱ类区域工作人员：细菌总数≤5cfu/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌为消毒合格。

Ⅲ类区域工作人员：细菌总数≤10cfu/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。

Ⅳ类区域工作人员：细菌总数≤15cfu/cm2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。

母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的工作人员手上，不得检出沙门菌、大肠杆菌、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌为消毒合格。

(2)皮肤黏膜:参照手的卫生学标准执行。

注意事项

皮肤粘膜采样处，若表面不足5cm×5cm 可用相应面积的规格板采样。

3.17.7 物品和环境表面消毒效果的监测

采样时间:在消毒处理后进行采样。

采样方法:用5cm×5cm 的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积≥100cm2，连续采样4 个，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子 1 支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5 次，并随之转棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。

门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。

检测方法

(1) 细菌总数检测:检测方法按执行。小型物体表面的结果计算，用cfu/件表示。

(2) 致病菌检测:检测方法按

结果判定

Ⅰ、Ⅱ类区域：细菌总数≤5cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。

Ⅲ类区域细菌：总数≤10cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。

Ⅳ类区域细菌：总数≤15cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。

母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门菌。

注意事项

(1) 采样时间:按执行。

(2) 样本量及处理:按执行。

3.17.8 空气消毒效果的监测

采样时间:在消毒处理后、操作前进行采样。

采样方法：平板暴露法

(1) 布点方法:室内面积≤30m2，设内、中、外对角线3点，内、外点布点部位距墙壁1M 处；室内面积＞30m2，设4 角及中央5 点，4 角的布点部位距墙壁1m 处。

(2) 采样方法:将普通营养琼脂平板(直径为9cm)放在室内各采样点处，采样高度为距地面1.5m 采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5min，盖好立即送检。

检测方法:按照2.1.3 要求进行。

平板暴露法结果计算公式：

细菌总数（cfu/m3）=50000N/（A ×T）

式中A为平板面积（cm2）；T为平板暴露时间（min）；N为平均菌落数（cfu）。结果判定

Ⅰ类区域：细菌总数≤10cfu/m3(或0.2cfu/平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；

Ⅱ类区域：细菌总数≤200cfu/m3(或4cfu/平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；

Ⅲ类区域：细菌总数≤500cfu/m3(或10cfu/平板)，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。

注意事项

采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10min 进行采样。

3.17.9 消毒液的监测

常用消毒液有效成分测定

（1）有效氯含量测定：按的方法进行。

（2）有效碘含量的测定：按的方法进行。

上二种消毒剂的简易浓度试纸测定法按的方法进行；水中余氯测定按的方法进行。

（3）戊二醛（C5H8O2）含量的测定：按

（4）过氧化氢(H2O2)浓度的测定：按

（5）过氧乙酸(C2H4O3) 浓度的测定：按

（6）二氧化氯(ClO2) 含量的测定：按

（7）二溴海因含量测定：按

（8）乙醇含量测定：按

（9）醋酸氯己定( C22H30Cl2N10·2C2H4O2) 含量的测定：

（10）臭氧含量测定：按

（11）苯扎溴铵含量测定：按

使用中消毒液染菌量测定

(1) 检测方法：

1）涂抹法:用无菌吸管吸取消毒液1.0ml，加入9.0ml 含有相应中和剂的采样管内混匀，用无菌吸管吸取上述溶液0.2ml，滴于干燥普通琼脂平板，每份样品同时做2个平行样，一平板置20℃培养7d，观察霉菌生长情况，另一个平板置35℃温箱培养72h记数菌落数，同时按

消毒液染菌量(cfu/ml)＝每个平板上的菌落数× 50

2）倾注法：用无菌吸管吸取消毒液1.0ml，加入到9.0ml 含相应中和剂的无菌生理盐水采样管中混匀，分别取0.5ml 放入 2 只灭菌平皿内，加入已熔化的45℃～48℃的营养琼脂15ml～18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，一平板置20℃培养7d，观察霉菌生长情况;另一个平板置36℃±1℃培养72h，计数菌落数，同时按

消毒液染菌量(cfu/ml)＝每个平板上的菌落数× 20

(2) 结果判断:消毒液染菌量≤100cfu/ml，并未检出致病菌为合格。

(3) 注意事项:采样后1h 内检测。

餐具消毒效果监测

采样时间:在消毒后、使用前进行采样。

采样方法:将2.0cm×2.5cm 灭菌滤纸片于无菌洗脱液中浸湿均匀，贴在食具表面，经5min 取下，每10张滤纸合为一份样本(相当于50cm2采样面积)，投入含50ml生理盐水的100ml 三角烧瓶中，于4h 内送检。

检测方法

(1) 细菌总数的检测:按执行。

(2) 大肠菌群的检测:取1ml 采样液，加入相应的单倍或双倍乳糖胆盐发酵管内，置37℃温箱培养24h，若乳糖胆盐发酵管不产酸不产气，则可报告大肠菌群阴性。如果有疑虑则进行分离培养。

纺织品: 细菌总数≤5cfu/cm2，大肠菌群未检出。

注意事项:餐具若用化学消毒剂消毒，采样液中应加入相应中和剂。

卫生洁具消毒效果监测

(1) 采样时间:在消毒后、使用前进行采样。

(2) 采样方法:便器、尿壶等容器可用沾有含相应中和剂的无菌生理盐水的棉拭子，反复涂擦容器的内表面及内口处，剪去手接触部位后，将棉拭子投入5ml 无菌生理盐水试管中，立即送检。

拖把、抹布等物品可用无菌的方法剪取1cm×3cm，直接投入5ml 含相应中和剂的无菌生理盐水中，立即送检。

(3)检测方法:将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80 次，取采样液按

(4)结果判定:未检出致病菌为消毒合格.

内镜消毒灭菌效果的监测