心肌梗死动物模型研究的最新进展
建立一种家兔心肌梗死模型的新方法
建立一种家兔心肌梗死模型的新方法戴淑芳;龙晓凤;纪丽丽;田辉;宫德正;徐静;孙艺平【摘要】[Objective] Discuss a new method of the myocardial infarction established in rabbits, the micro - method. [Methods] Rabbits were anaesthetized by 3% napental, 30 mg/kg. The heart was exposed by blunt dissecting the left intercostal muscles between the 3rd and 4th ribs. The left anterior descending of coronary artery was ligated, which would not only prevent the blood blow of coronary, but also make the similar condition of myocardial infarction between rabbits and single coronary artery blocked in clinic. [Results] Twenty minutes later, the ST segment of rabbit ECG was raised, and R segment was droped. Two weeks later, the ventricular wall motion was weak and stiff from M - mode ultrasound. Ischemic myocardium was shrinked and ventricular wall was subsided and the color was lighter than surrounding normal myocardial tissue.[ Conclusion] By this establishment, the myocardial infarction model is simple, light trauma and high success rate.%[目的]探讨建立一种家兔心肌梗死动物模型的新方法——微创法的可行性.[方法]用3％戊巴比妥钠30mg/kg麻醉家兔,采用钝性分离左侧第3～4肋间肌暴露心脏,不剪断肋骨,结扎左冠状动脉前降支(LAD),阻断冠状动脉血流,造成家兔心肌梗死与临床上单支冠脉阻塞形成的心肌梗死相似.[结果]家兔术后20 min,心电图肢体导联ST段明显弓背向上抬高,心电图R 波降低；术后2周M型超声观察室壁运动明显减弱且僵硬.大体观察缺血心肌萎缩变薄,室壁塌陷,颜色明显较周围正常心肌组织浅.[结论]该心肌梗死动物模型构建方法简单,创伤轻,成功率高,结果可靠.【期刊名称】《大连医科大学学报》【年(卷),期】2012(034)001【总页数】4页(P97-100)【关键词】心肌梗死;动物模型;左前降支;家兔【作者】戴淑芳;龙晓凤;纪丽丽;田辉;宫德正;徐静;孙艺平【作者单位】大连医科大学机能室,辽宁大连 116044;大连大学附属中山医院ICU,辽宁大连 116001;大连市中心医院急诊科,辽宁大连 116033;大连开发区医院ICU,辽宁大连 116600;大连医科大学机能室,辽宁大连 116044;大连医科大学机能室,辽宁大连 116044;大连医科大学机能室,辽宁大连 116044【正文语种】中文【中图分类】R3心血管疾病是当今发达国家发病和死亡最主要的原因之一。
标准动物实验报告
实验名称：小鼠心肌梗死后心肌细胞凋亡检测实验目的：1. 观察心肌梗死后心肌细胞凋亡情况。
2. 分析心肌梗死后心肌细胞凋亡与心肌功能的关系。
3. 探讨心肌梗死后心肌细胞凋亡的干预策略。
实验材料：1. 实验动物：清洁级雄性C57BL/6小鼠，体重20-25g，购自XX动物实验中心。
2. 试剂：TUNEL试剂盒、DAPI染料、Trizol试剂、RT-PCR试剂盒、ELISA试剂盒等。
3. 仪器：显微镜、荧光显微镜、PCR仪、凝胶成像系统、酶标仪等。
实验方法：1. 实验分组：将小鼠随机分为正常组、心肌梗死组、干预组，每组10只。
2. 心肌梗死模型的建立：采用冠状动脉结扎法建立小鼠心肌梗死模型。
3. 心肌细胞凋亡检测：- TUNEL染色：取心肌组织，按TUNEL试剂盒说明书进行操作，观察心肌细胞凋亡情况。
- DAPI染色：取心肌组织，按DAPI染料说明书进行操作，观察心肌细胞核形态。
4. 心肌功能检测：- 心肌收缩力检测：采用Langendorff离体心脏灌流技术，记录心肌收缩力。
- 心肌细胞损伤程度检测：采用ELISA试剂盒检测心肌细胞损伤标志物（如肌酸激酶、乳酸脱氢酶等）。
5. 干预措施：干预组在心肌梗死模型建立后给予干预药物，观察心肌细胞凋亡及心肌功能的变化。
实验结果：1. TUNEL染色结果显示，心肌梗死组心肌细胞凋亡率显著高于正常组和干预组（P<0.05）。
2. DAPI染色结果显示，心肌梗死组心肌细胞核形态异常，较正常组和干预组明显增大、浓染。
3. 心肌收缩力检测结果显示，心肌梗死组心肌收缩力显著低于正常组和干预组（P<0.05）。
4. 心肌细胞损伤程度检测结果显示，心肌梗死组心肌细胞损伤标志物水平显著高于正常组和干预组（P<0.05）。
5. 干预组心肌细胞凋亡率、心肌细胞核形态、心肌收缩力及心肌细胞损伤标志物水平均显著低于心肌梗死组（P<0.05）。
讨论：本研究采用冠状动脉结扎法建立小鼠心肌梗死模型，通过TUNEL染色和DAPI染色检测心肌细胞凋亡情况，结果显示心肌梗死组心肌细胞凋亡率显著高于正常组和干预组，表明心肌梗死后心肌细胞凋亡是心肌损伤的重要机制。
红花注射液对急性心肌梗死动物模型疗效研究
【 关键词】 心肌梗死 ； 红花 ； Ｃ反应蛋 白质 ； 受体 ， 内皮素 Ａ
红花注射液 由菊科植物红花 提取制备 ， 含较多黄 酮类化 合物 ， 主要成 分为 红花黄色素 ， 中医角度讲 ， 从 红花注射 液具 有活血化瘀 、 通经止痛 的作 用 ， 从西 医角度 讲红 花黄色 素 抑制二磷酸腺苷 （ Ｄ ） 导的血 小板 聚集作用 ， Ａ Ｐ诱 有防止血 栓 的形成和发展或促进血栓溶解作用 ， 其能增加 离体心脏冠 状 动脉血流量 ， 护缺血 心肌 ， 保 降低心肌耗 氧量 ， 具有较强 的抗
度 明显降低 （ Ｐ＜０ ０ ） 随红 花浓度 升 高 ，ｓ Ｒ 均 ．５ ， ｈＣ Ｐ浓 度 降
低更 明显。
（ 解放军总医 院） 高敏 ｃ反应 蛋 白（ ｓＲ ） 剂盒 （ ， ｈＣ Ｐ 试 上海 申
索佑福 医学诊断用品有限公 司） 。 表 １ 对 照组 、 红花用药组炎症标记物浓度此较 （ － ） ４
梗死模型 中的疗效及其机制作一观察 。
一
、
材 料 和方 法
１ ．红花 注射液 对炎症 反应的影响 （ １ ： 表 ） 动物结扎冠状
１ ．仪器与试剂 ：Ｎ６ ２型放射计 数器 ， ．０２ Ｓ －８ Ｇ３ ２ Ｄ型酶 联
动脉后 ， 电图证实 心肌梗死 形成 ， 心 红花 注射液使用后 ， 实验
动物 白细胞 变化不明显。与 Ａ组 比较 ， Ｂ组 和 Ｃ组 ｈＣ Ｐ浓 ｓＲ
免疫检测仪 ， 台式 高速冷冻 离心机 ， 红花注射液 （ 山西安特生 物制药股份有限公司 ） 普萘洛尔 （ ｒ， 京制 药厂 ） 无色水 ， Ｐｏ北 ，
针剂 ， 硝基蓝 四唑 （ 北京 化学试剂公司 ） 内皮素 （ Ｔ 试剂盒 ， Ｅ）
心肌梗死的动物模型制作
心肌梗死的动物模型制作心肌梗死是一种严重的心血管疾病，其主要病理特征是冠状动脉的阻塞导致心肌缺血与坏死。
为了研究心肌梗死的发病机制和寻找可能的治疗方法，研究人员常常利用动物模型来模拟心肌梗死的发生。
下面，我将介绍一种常用的大鼠心肌梗死动物模型制作方法。
制作大鼠心肌梗死动物模型可以按照以下步骤进行：1.动物选择。
常用的实验动物有大鼠和猪。
由于大鼠的心血管解剖和生理特征与人类较为接近，同时成本较低，因此大鼠是一种常见的选择。
2.麻醉动物。
使用适量的麻醉剂，如异氟醚或七氟醚等，来使动物处于麻醉状态。
确保动物处于无痛苦的状态。
3.固定动物。
将动物固定在手术台上，以避免动物在手术过程中的移动。
4.体表消毒。
在手术区域进行局部消毒，以防止感染。
5. 做出胸骨切口。
在胸骨两侧做出1-2cm的胸骨切口，用手术器械将胸骨分开，暴露出心脏。
6.找到冠状动脉。
用吸引管或者类似的器械将心包囊抽吸，暴露出心脏表面。
紧邻左心室肌肉的左前降支是心肌梗死的常见发生区域。
7.梗死诱导。
用细导管或者相似的器械将一根可以封堵冠状动脉的丝线或者微球导入至冠状动脉中，使其堵塞。
这一步骤可以模拟冠状动脉的阻塞引发心肌梗死。
8.恢复心脏正常血流。
待梗死产生一段时间后（一般为30分钟-60分钟），再次将导管或器械取出，恢复冠状动脉的血流。
9.缝合胸骨。
将胸骨进行缝合，确保伤口能够愈合。
10.外科处理。
术后外科处理，如用抗生素进行预防性治疗，避免可能的感染。
研究人员可以通过观察心肌梗死后的心电图变化、心肌组织的病理切片等方式来评估心肌梗死的程度与发展。
总的说来，大鼠心肌梗死动物模型是一种常见的研究心肌梗死发病机制的实验模型。
通过制造大鼠心肌梗死动物模型，研究人员可以更好地模拟心肌梗死的发生，寻找新的治疗策略和探索其发病机制。
当然，在制作动物模型时，需要严格遵循相关伦理规范和动物保护法律法规，确保动物的利益和权益不受损害。
此外，动物模型只是研究的一部分，结合体外实验和临床数据，才能更全面地了解心肌梗死的病理机制及治疗方法。
心肌梗死实验动物模型论文
心肌梗死动物模型研究综述摘要：根据世界范围内各种疾病的发病率和死亡率统计，心血管系统疾病占第一或第二位，心肌梗死是心血管疾病的一种，同样严重危害着人类的健康安全。
通过建立心肌梗死的实验动物模型，可以更好的了解心肌梗死发病的机制和临床病理表现，提供更多的研究数据，同时也可以以更好的用于新药的研发。
本文介绍了一些常见的心肌梗死动物模型，分析不同动物模型的优缺点，用途及动物模型的研究趋势。
关键词：心肌梗死动物模型研究趋势心肌梗死是指由于冠状动脉供血阻断导致严重而持久的缺血、缺氧所引起的较大范围的坏死，可并发心率失常、心力衰竭或休克，对人类的健康有着严重危害。
通过建立心肌梗死动物模型，可以全部或者部分模拟人类心肌梗死的临床病理表现和发病机理，用于研究心肌梗死的发病机理，筛选具有活性的新药，从而找寻心肌梗死的治疗方法。
由于心血管系统时当前医学研究的一个热点，所以目前，国内外已经建立了很多的心肌梗死动物模型，包括小鼠、大鼠、狗、兔等。
这些心肌梗死动物模型有各自的优缺点，学者们可以根据自己的研究需要选择相应的动物模型。
1.常见的心肌梗死动物模型1.1大鼠模型大鼠心肌梗死模型是目前国内外最常用的一种动物模型，也是一种应用最为广泛的心肌梗死动物模型，构建的方法有很多种，包括冠状动脉结扎法、药物注射法、微创法、冷冻法等。
参考文献[2],刘振，刘玲玲等人研究了结扎法和药物注射法构建的大鼠心肌梗死模型的区别，下面将会谈到这两种方法的优缺点。
1.1.1冠状动脉结扎法冠状动脉结扎法是一种较为经典的方法。
主要步骤是将大鼠麻醉后，固定在鼠板，在大鼠的左侧胸骨做斜向切口，开胸，撕开心包，缝合左冠脉前支。
具体方法参照文献[ 2 ]。
冠状动脉结扎法的优点是它能最大限度的模仿临床，这种模型与临床上心肌梗死的病理表现更加相像，因此这种方法可以更好地研究心肌梗死的发病机理，这也是为什么更多的学者选择采用大鼠冠状动脉结扎模型研究心肌梗死的原因。
关于心脏病小鼠模型创建的研究进展
关于心脏病小鼠模型创建的研究进展引言心脏病是目前世界范围内主要的致死疾病之一，因此研究心脏病的病因和治疗方法一直是科学界的关注焦点。
小鼠作为实验动物模型，在心脏病的研究中起着重要的作用。
本文将介绍关于心脏病小鼠模型创建的研究进展。
心脏病小鼠模型的创建方法自然发病模型自然发病模型是指利用小鼠天然患有心脏病的特点来进行研究。
这种方法的优点是符合真实的疾病发展过程，但由于小鼠心脏病的发生具有随机性，研究的结果可能存在较大的变异性。
基因突变模型基因突变模型是通过改变小鼠心脏相关基因的表达或功能来创建疾病模型。
这种方法可以精确地模拟特定疾病的发生机制，但由于基因突变的复杂性，模型的创建和验证需要较长的时间和精力。
手术诱导模型手术诱导模型是通过手术操作来引起小鼠心脏病的发生。
常见的手术方法有冠状动脉、心肌梗死模型等。
这种方法可以控制实验条件，但手术操作对小鼠的伤害较大，且操作复杂。
心脏病小鼠模型的应用病理机制研究通过心脏病小鼠模型的应用，可以深入研究心脏病的病理机制，揭示心脏病的发生与发展过程中的分子和细胞变化。
药物研发心脏病小鼠模型可以用于评估心脏病相关药物的疗效和安全性。
通过观察小鼠的心脏功能、病理指标和生存率等指标，可以评估新药物在临床应用前的效果和副作用。
治疗方法探索心脏病小鼠模型还可以用于探索心脏病的治疗方法。
例如，可以通过基因编辑技术恢复或改善病变基因的功能，或者通过干细胞移植等方法修复受损的心肌。
结论心脏病小鼠模型的创建和应用在心脏病研究中具有重要的意义。
不同的模型方法各有优缺点，可以根据研究的目的和需求选择合适的模型。
未来，随着基因编辑和干细胞等技术的进步，心脏病小鼠模型的应用将更加广泛，为心脏病的病因和治疗方法的研究提供更多的可能性。
心肌肥厚动物模型建立方法研究进展
心肌肥厚动物模型建立方法研究进展摘要目的：综述心肌肥厚（CH）动物模型的建立方法，为CH类疾病的研究和临床治疗提供参考。
方法：以“心肌肥厚”“动物模型”“Cardiac hypertrophy”“Model”等组合作为关键词，在中国知网、 PubMed等数据库中检索相关文献，筛选2004－2014年有关CH动物模型建立方法的内容，综述常用模型的基本原理、制备方法及特点等。
结果与结论：共查阅到376条文献，其中有效文献29条。
目前常用的CH动物模型建立方法有物理法（包括压力超负荷法致CH、容量负荷法致CH、心肌梗死致CH、运动诱导致CH）、化学法（包括药物诱导法致CH）和生物法（包括转基因型CH、自发性高血压大鼠模型致CH）等。
其均可模拟CH，而CH原理、制备方法和模型特点各异。
在CH动物模型中，大鼠易饲养、经济、抗感染力强，常作为首选造模动物，常用鼠种为SD大鼠及小鼠，雌雄均可。
在现有成模方法中，压力超负荷法制作慢性CH模型，手术操作简单方便、重复性好、造价低廉，最为常用；转基因动物模型对人类疾病的模拟程度更高，但耗时长，费用昂贵，可能成为未来的发展方向。
关键词心肌肥厚；动物模型；建模方法；转基因心肌肥厚（CH）是心肌细胞对多种病理刺激的一种适应性反应。
在早期，CH因心室壁增厚、心肌收缩功能改善而被视为代偿性过程 [1]；但在持久病理性应激情况下， CH伴随间质纤维化、收缩功能失调以及基因表达、能量代谢和电生理特征异常，最终导致失代偿性心功能衰竭，严重危害人体健康。
目前认为， CH是心血管疾病的一种常见并发症，已被列为引起心血管疾病发生率和病死率显著升高的独立危险因素[2]。
其发生机制复杂，至今仍未完全阐明，而对CH的发生机制及治疗方法等研究常用动物实验进行，因此复制动物模型成为目前国内外从事CH研究的常用手段。
本文拟以“心肌肥厚”“动物模型”“Cardiac hypertrophy”“Model”等组合作为关键词，在中国知网、 PubMed 等数据库中检索相关文献，筛选2004－2014年有关CH动物模型建立方法的内容。
异丙肾上腺素所致心肌损伤动物模型的研究进展
3、不同剂量研究：研究发现， ISO的剂量与心肌损伤的程度密 切相关
1、模型差异：由于实验动物种类、年龄、健康状况和实验条件等方面的差异， 导致不同研究结果之间可能存在可比性差的问题。
2、剂量标准：目前研究中使用的ISO剂量差异较大，可能导致不同研究结果无 法准确比较。此外，关于最佳剂量和给药途径的研究仍需进一步探讨。
概述
ISO所致心肌损伤动物模型的研究已取得了显著进展。这些研究主要ISO对心 脏生理学、生物化学和病理学方面的影响，以期发现有效的干预措施。尽管在 实验方法和模型选择上仍存在一定差异，但这些研究为我们深入理解ISO致心 肌损伤的机制提供了重要依据。
研究现状
1、动物模型研究：研究者们分别在鼠、兔、犬和灵长类等动物中建立了ISO所 致心肌损伤模型。这些模型在实验方法、ISO剂量和给药途径等方面存在一定 差异。例如，有研究通过连续注射ISO 100 μg/kg 3周的方法，成功建立了 大鼠心肌损伤模型。而另一项研究则采用冠状动脉灌注ISO的方法，诱导犬心 肌损伤。
讨论
本研究通过比较异丙肾上腺素诱导小鼠急性心肌缺血模型的建立方法和实验数 据，发现该模型具有较好的可靠性。首先，心电图监测显示模型组小鼠出现明 显的ST段抬高，与文献报道一致，证实了异丙肾上腺素可诱导小鼠急性心肌缺 血的发生。其次，超声心动图检测发现模型组小鼠LVEF明显降低，这与文献报 道的急性心肌缺血导致心功能受损的结果一致。最后，模型组小鼠心肌组织中 CK和LDH活性显著升高，提示心肌细胞损伤。
谢谢观看
然而，该方法仍存在一定的不足之处。例如，异丙肾上腺素腹腔注射的剂量不 易控制，可能导致个体差异增大。此外，不同品系和品种的小鼠对药物的反应 可能存在差异，影响实验结果的可靠性。为了提高模型的稳定性，未来研究可 考虑采用更为精确的给药方式，如微泵持续给药等。同时，应充分考虑实验操 作和环境因素对实验结果的影响，以增加实验的严谨性和可重复性。
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[文章编号] 100723949(2005)1320120113203・文献综述・心肌梗死动物模型研究的最新进展孙慧君1, 范江霖2(1.大连医科大学药理学教研室,辽宁省大连市116027;2.日本筑波大学基础医学系心血管病研究室,日本筑波市30528575)[关键词] 病理学与病理生理学; 心肌梗死动物模型; 综述; 冠状动脉粥样硬化; 不稳定斑块; 家族性高脂血症[摘 要] 心肌梗死是发达国家的主要致死因素之一,在我国随着生活习惯的改变及胆固醇摄取量的增加而增加。
但对心肌梗死的研究及治疗因为没有合适的动物模型一直受到很大的限制。
心肌梗死动物模型的研制及开发不但可以研究心肌梗死的发病机制以预防心肌梗死的发生,也将为制定新的治疗方案用于治疗心肌梗死提供理论依据。
本文将回顾这一方面的国际进展情况,特别是将我们最近研制成功的自发型心肌梗死家兔模型作一重点介绍。
此种家兔血中胆固醇水平明显升高,心电图发现心肌梗死的典型征象。
病理组织学分析表明,此种家兔心肌梗死病变为陈旧性心肌梗死病变伴急性梗死病变,与人类心肌梗死相似。
导致心肌梗死病变部位的冠状动脉呈严重的粥样硬化,狭窄程度达90%以上,且有些斑块为不稳定性斑块。
这些结果表明此种家兔可以作为人类心肌梗死的一种合适动物模型。
[中图分类号] R363[文献标识码] A[收稿日期] 2003207218 [修回日期] 2004212216[作者简介] 孙慧君,医学博士,副教授,主要研究方向为心血管药理学,现工作于大连医科大学药理学教研室,E 2mail 为sunhuijun @ 。
范江霖,医学博士,教授,博士研究生导师,主要研究方向为心血管病理学,现工作于日本筑波大学基础医学系,E 2mail 为j 2lfan @md.tsukuba.ac.jp. 心肌梗死是发达国家的主要致死因素之一,在我国也随着生活习惯的改变及胆固醇摄取量的增加而不断增加。
研究心肌梗死发生的机制,不但可以预防心肌梗死的发生,也将为制定新的治疗方案用于治疗心肌梗死提供理论依据。
但心肌梗死的研究及治疗由于没有合适的动物模型一直受到很大限制。
因此就迫切地需要研制出一种与人类心肌梗死非常相似的动物模型。
至目前为止,已有许多动物模型被报道,本文将回顾这一方面的研究进展情况,特别是将我们最近研制成功的自发型心肌梗死家兔模型作一重点介绍。
1 已报道的心肌梗死动物模型已经报道的心肌梗死动物模型可以根据动物种类及制造方法不同分为以下几种:首先是小鼠心肌梗死模型。
小鼠体型较小,容易造成转基因或基因敲除,目前已有报道载脂蛋白E 基因敲除小鼠在同时敲除内皮素1受体,或NO 分解酶及清道夫受体时会出现类似心肌梗死病变123。
此种小鼠的特点是具有严重的高脂血症及动脉粥样硬化。
但小鼠的脂代谢类型与人类不同,另外,小鼠体形较小,使得一些外科手术及治疗措施的研究无法进行及运用,也是这种模型的缺点。
其次是用大鼠、家兔、羊、犬及猪等中大型动物建立的心肌梗死动物模型。
其主要方法是人工阻塞左冠状动脉,使动物造成急性或慢性心肌缺血及梗死;包括冠状动脉结扎或夹闭术4211及冠状动脉阻塞术12215。
此种模型实验周期短,可以观察梗死后再灌注对心肌细胞的损伤。
但此种动物模型手术操作过程复杂,创伤大,心肌周围组织的切开也影响心肌梗死后的重建。
另外,此种动物模型并无血脂升高及冠状动脉粥样硬化病变,因此,与人类由冠状动脉粥样硬化引起的心肌梗死差别较大,临床相关性较小。
猪、羊及犬体形较大,饲养条件苛刻也是用这些大动物研制心肌梗死模型的缺点。
用结扎羊无名动脉及其对角分支方法建立起来的心肌梗死模型,与上述结扎冠状动脉方法建立起来的模型具有相同的特点16。
也有报道用血管造影术在家兔旋动脉处放置导致血栓形成的环的方法,以建立起胸腔闭合型心肌梗死动物模型17,避免了手术创伤及心肌周围组织切开对梗死后重建的影响。
也有人用剖开犬的左冠状动脉放置血管夹的方法,通过产生人工狭窄建立心肌梗死模型,此种模型的优点是可以精确控制狭窄的程度18。
用化学药物诱导方法建立大鼠心肌梗死模型的方法也曾有报道,与冠状动脉阻塞方法类似19。
Nakamura 20曾报道过用猪(G ottingen maleminiature swine )建立的心肌梗死模型与人类由冠状动脉痉挛引起的变异型心肌梗死极其相似,方法是对病灶部位进行内皮细胞剥脱,中度高脂血症及X 线辐射。
此种模型心肌梗死的发生机制主要是由痉挛部位中膜平滑肌细胞在组胺及5羟色胺作用下产生的过度收缩引起的,内膜依赖性的舒张障碍作用较小。
综上所述,虽然有很多上述心肌梗死模型报道,但据我们所知,至目前为止,与人类心肌梗死模型极其相似的自发性心肌梗死模型特别是由冠状动脉粥样硬化引起的心肌梗死模型还未曾建立起来,本文将重点介绍由我们实验室新近研制成功的自发性心肌梗死家兔模型。
2 自发性心肌梗死动物模型的创建日本神户大学Watanabe 等21人在1980年首次报道了遗传性高脂血症(Watanabe 2heritable hyperlipidemic rabbit ,WHHL )家兔。
此种家兔具有先天性LDL 受体缺损的特点311CN 4321262/R 中国动脉硬化杂志2005年第13卷第1期(LDL基因编码蛋白的半胱氨酸结合区的基因先天性缺损),因此,血中胆固醇不能被肝脏代谢,会出现自发性高脂血症及动脉粥样硬化,成为人类家族性高脂血症的良好的动物模型。
在原始WHHL家兔模型的基础上,Shiomi等22又研制成功了可以产生高度冠状动脉粥样硬化倾向(coronary2 prone)的WHHL家兔。
自1994年开始,又与我们合作通过系列选择性繁育WHHL家兔,建立了产生自发性心肌梗死的家兔模型,命名为遗传性高脂血症心肌梗死(WHHL my2 ocardial infarction,WHHLMI)家兔,并证明WHHLMI家兔将成为研究心肌梗死的重要实验手段。
自发性心肌梗死家兔模型的建立是采用具有冠状动脉粥样硬化倾向的WHHL家兔进行的。
选择性繁育条件包括:①心肌梗死的产生;②冠状动脉粥样硬化斑块中含有丰富的巨噬细胞;③冠状动脉的狭窄程度大于亲代家兔的平均值加上标准误;④12月龄时血中总胆固醇水平>21mmol/L,24月龄时血中总胆固醇水平>18mmol/L。
在6年繁育里,共获得了5至7代种系。
3 遗传性高脂血症心肌梗死家兔的特征3.1 血清脂质水平、冠状动脉狭窄程度及心肌梗死发生率选择性繁育后WHHLMI家兔的血清甘油三酯无明显变化,但总胆固醇是对照WHHL家兔的1.4倍,11～35月龄的WHHLMI家兔的冠状动脉狭窄程度也明显增加,为对照组的1.6倍。
WHHL对照组家兔冠状动脉管腔内因粥样硬化斑块引起狭窄程度达90%以上的仅为21%,在WHHL2 MI家兔中却已达90%以上。
WHHLMI家兔从11月龄开始就出现在无任何症状前提下突然死亡的情况。
组织学分析表明35月龄以上家兔的死亡97%是由于心肌梗死造成的,且在发生率,病变分布及病变大小上无性别差异。
3.2 遗传性高脂血症心肌梗死家兔的心肌梗死病理特征遗传性高脂血症心肌梗死(WHHLMI)家兔心肌病变广泛分布于左心室、右心室及室间隔。
在很多的WHHLMI家兔中,可以见到慢性心肌梗死的陈旧性梗死病变,并伴有新发病变(复合型心肌梗死)。
新发心肌梗死病变包括充血、心肌细胞嗜酸性变性和中性粒细胞浸润等急性心肌梗死特征。
这些病变存在于心内膜区心肌纤维化附近。
在陈旧性病变中,有很明显的钙化和心内膜下的梗死,而这经常会在人类的陈旧性心肌梗死中见到,另外在右后区及室间隔部位有心肌细胞死亡及纤维化。
而在外侧壁会观察到左室壁变薄及穿壁梗死病变。
3.3 引起心肌梗死的冠状动脉近端的粥样硬化斑块的特征动脉粥样硬化病变在所有的引起心肌梗死的冠状动脉中均可以见到,最严重的病变见于冠状动脉分支的左旋支(LCX),其次为左中隔动脉(L SP)、左前降支(LAD)和右冠状动脉(RCA)。
在冠状动脉左旋支,73%的切片发现管腔狭窄程度为90%以上,且均为进展性病变。
另外,管腔狭窄程度70%以上的发生率在冠状动脉左旋支、左前降支及左中隔动脉分别为97.2%、54.7%及59.2%。
这些现象表明在冠状动脉中观察到的一系列进展性硬化斑块与上述心肌梗死病变有关。
冠状动脉左旋支(LCX)的粥样硬化斑块含有丰富的泡沫细胞及细胞外基质,造成严重的管腔狭窄及同心性阻塞。
典型病变经常在大分支中观察到,且为动脉粥样硬化复合病变,很多病变中可以观察到钙化和斑块内出血。
在有些病变中,斑块表层发现非常脆弱的征象,上面覆盖着一个很薄的帽状结构,在其下面是大量的巨噬细胞、脂质灶及钙沉积,平滑肌细胞却很少,构成WHHLMI家兔病变的典型特征。
但在WHHLMI家兔的冠状动脉斑块中尚未检测到典型的斑块破裂或血栓形成,说明斑块破裂还需要其他因素参与。
3.4 遗传性高脂血症心肌梗死家兔的心电图特点遗传性高脂血症心肌梗死(WHHLMI)家兔死亡前的心电图监测结果呈现典型的人类急性心肌梗死心电图变化,如ST段抬高。
4 今后的展望心肌梗死是发达国家中引起死亡的主要心血管病之一,在我国的发病率也逐年增高。
因此创建一种与人类心肌梗死极其相似的动物模型以研究心肌梗死的发病机制,开发新的治疗手段及药物也变得越来越重要。
我们通过选择性繁育具有冠状动脉粥样硬化倾向的WHHL家兔成功地获得了自发性心肌梗死的家兔模型(WHHLMI家兔)。
WHHLMI 家兔的心肌病变与人类冠心病相似,很多冠状动脉粥样硬化斑块呈现几乎破裂的征象。
缺点是虽然我们观察到了大量的斑块内出血、钙沉积及巨噬细胞富积引起的管腔堵塞,但我们并没有真正检测到破裂及管腔内血栓。
因此我们正考虑通过研究斑块的稳定性及引入一些其他的危险因子[基质金属蛋白酶,组织因子和脂蛋白(a)]的方法在WHHLMI家兔中产生斑块破裂或急性冠状动脉综合征,以希望在不久的将来可以建立起更加接近人类心肌梗死的动物模型。
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