生物药物分析与检验概论优秀课件
❖ 生物技术药物：采用DNA重组技术或其 他新生物技术生产的治疗和预防药物。
重组DNA药物（基因药物） 重组蛋白质药物（基因工程药物）
③ 按生物药物的用途分类 （1）治疗药物 （2）预防药物 （3）诊断药物 （4）用作其他生物医药用品
二、生物药物的性质
（1）在化学构成上，生物药物十分接近于人 体内的正常生理性质，进入人体后也更容易 为机体所吸收利用和参与人体的正常代谢与 调节。
a) 消化酶类 b)消炎酶类 c) 心脑血管疾病治疗酶类
d) 抗肿瘤类 e) 氧化还原酶类
(5) 脂类药物 （6）多肽和蛋白质类 （7）核酸类及其降解物和衍生物 （8）糖类 （9）生物技术药物类 （10）生物制品类
❖ 生物制品：是以微生物、细胞、动物或 人源组织和体液等为原料，应用传统技 术或现代生物技术制成，用于人类疾病 的预防、治疗、诊断，包括疫苗、抗血 清、血液制品等。
药物分析研究小分子之间的反应较多。 特点： A 比较快的反应 B 比较简单的体系 C 化学键的断裂，组合或重排 D 在反应体系中做布朗运动无序碰撞而反应
生物药物分析研究大分子与大分子或着大分 子与小分子之间反应。
③生物药物与化学药物的区别
a) 在结构上
大分子药物、化学结构不明确、分子量 不是定值。
广义的生物药物包括：
①从动植物和微生物中直接制取的各种天然 生理活性物质。 ②人工合成或半合成的天然类似物
2、生物药物分类
①按其来源和生产方法大致分为三类
a) 生化药物 b) 生物技术药物 c) 生物制品
②按生物药物的化学本质和化学特性来分类
（1）氨基酸及其衍生物药物 （2）有机酸，醇酮类 （3）维生素 （4）酶及其调节剂
1. 组织生产提高质量的手段； 2. 科学管理和技术监督的组成部分； 3. 联系科研、生产、供应、使用和检验的技 术纽带。
药品质量标准体系
中国药典（疗效确切、广泛应用、质量可控）
药 品 标 准
国家 标准
部颁标准
临床研究用标准(临床研究) 暂行标准(试生产) 试行标准(正式生产初期)
地方标准整理提高后的品种
化学药物 药物分类:
生物药物
中药、天然药物 药品分类: 化学药品
生物制品
生物药物的概述
❖ 1、生物药物是运用生物学、医学、生物 化学等的研究成果，从生物体、生物组 织、细胞、体液等综合利用物理学、化 学、生物化学、生物技术和药学等学科 的原理和方法制造的一类用于预防、治 疗、诊断人类疾病的制品。
生物药物分析与检验概论
❖ 药物：能够预防、治疗、诊断人的疾病 的物质。
药品的定义是“用于预防、治疗、诊断 人的疾病，有目的地调节人的生理机能 并规定有适应症或者功能主治、用法和 用量的物质，包括中药材、中药饮片、 中成药。化学原料药及其制剂、抗生素、 生化药品、放射性药品、血清、疫苗、 血液制品和诊断药品等。” 《中华人民 共和国药品管理法》（自2001年12月1日 起施行）十章第一百零二条
二、中国药典 （一）中国药典的沿革 v 建国以来，先后出版了10版药典，1953、1963、
1977、1985、1990、1995、2000、2005、2010 和2015年版药典，现行使用的是中国药典 （2015年版）。其英文名称是 Chinese Pharmacopiea，缩写为ChP（2015）。
企业 标准
使用非成熟(非法定)方法 标准Fra bibliotek格高于法定标准
v 我国制定药品质量标准的指导思想：中药标准立 足于特色，西药标准立足于赶超,生物制品基本保 持一致。
我国现行药品质量标准 1. 中华人民共和国药典，简称中国药典 2. 中华人民共和国卫生部药品标准，简称部 颁标准
v《药品管理法》中第三十二条规定“药品必须符 合国家药品标准”。明确取消了地方药品标准。 从2001年12月1日起至2002年11月30日，国家药品 监督管理局对《药品管理法》修订前按照当时实 行的地方药品标准批准生产的药品品种，逐个进 行审查，经审查，对符合《中华人民共和国药品 管理法》有关规定的，纳入国家药品标准，可以 继续生产；对不符合规定的，立即停止该品种的 生产并撤销其批准文号。
b) 在检查项目上
热源检查 过敏实验 异常毒性实验
c) 在分析方法上 化学药物测定方法：重量法，滴定法，比色 法，HPLC
生物药物测定法： HPLC，电泳法，酶法， 免疫法，生物检定法
v 药品质量标准与药典
一、药品质量标准
v药品质量标准是国家对药品质量、规格及检验 方法所作的技术规定，是药品生产、供应、使用、 检验和药政管理部门共同遵循的法定依据。
（二）中国药典的基本结构和内容
v药典的内容一般分为凡例、正文、附录和索引 四部分。
1. 凡例（General Notices）是制定和执行药 典必须了解和遵循的法则，解释和说明《中国药 典》概念,正确进行质量检验提供指导原则。
v将正文、附录及质量检定有关的共性问题以及 采用的计量单位、符号与专门术语等加以规定, 避免全书中重复说明。其内容同样具有法定约束 力。
v 药典是一个国家关于药品标准的法典，是国家管 理药品生产与质量的依据。具有与其他法令一样的 约束力。凡属药典收载的药品，其质量不符合规定 标准的均不得出厂、不得销售、不得使用。
v药典在一定程度上反映一个国家的医药水平。 v中国药典质量标准所涉及的分析方法根据生产工艺、 检验条件和水平及综合国力等多因素来选择、建立。 v方法学上要求具有普遍适用性。
（2）在药理上，生物药物具有更高的生化机 制合理性和特异诊疗有效性。
（3）在医疗上，生物药物具有药理活性高， 针对性强，毒性低，副作用小，疗效可靠及 营养价值高等特点。
（4）生物药物的有效成分在生物材料中浓 度很低，杂质的含量相对比较高。
（5）生物药物常常是一些生物大分子，它 们不仅相对分子质量大，组成结构复杂，且 具有严格的空间构象，以维持其特定的生理 功能。
（6）生物药物对热，酸，碱，重金属及PH 变化都比较敏感，各种理化因素的变化易对 生物活性产生影响。
三、生物药物的分析特点：
（1）相对分子量的测定 （2）生物活性的检查 （3）安全性的检查 （4）效价测定 （5）生化法确证结构
药物分析与生物药物分析的关系
① 生物药物分析是药物分析的一个分支。 ② 研究对象不同
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生物药物分析与检验_第三章免疫分析法ppt课件
主要内容
一、概述 二、抗原 三、抗体与免疫反应 四、免疫分析方法及应用 五、免疫扩散法
考评项目赋标准分，对照考评内容和 考评办 法对考 评项目 进行考 评，评 出各考 评项目 的考评 实际得 分，考 评类目 下各考 评项目 考评实 际得分 之和为 该考评 类目的 考评实 际得分
2.1 定义
▪ 抗原（antigen,Ag)：是一类能刺激机体免疫系统 发生免疫应答，并能与相应免疫应答产物（抗体 和致敏淋巴细胞)在体内外发生特异性结合的物质
▪ 抗原的两种特性：免疫原性和抗原性（免疫反应 性）
▪ 免疫原性（immunogenicity),能刺激机体发生免疫 应答，产生抗体和致敏淋巴细胞的能力。
▪ 免疫反应性能与相应抗体或致敏淋巴细胞发生特 异性结合的能力。
凡具有免疫原性和抗原性的物质称为完全抗原 只有抗原性而不具有免疫原性的物质称为半抗原 半抗原+蛋白质——完全抗原 赋予半抗原以免疫原性的蛋白质称为载体。
比例性和 反应阶段性
✓ 比例性：抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的 量比关系
前带(prezone)：抗体过量 后带(postzone)：抗原过量 等价带(equivalence zone)：抗原抗体比例合适
考评项目赋标准分，对照考评内容和 考评办 法对考 评项目 进行考 评，评 出各考 评项目 的考评 实际得 分，考 评类目 下各考 评项目 考评实 际得分 之和为 该考评 类目的 考评实 际得分
自然界中天然的抗原物质有：蛋白质、多糖、核蛋 白
考评项目赋标准分，对照考评内容和 考评办 法对考 评项目 进行考 评，评 出各考 评项目 的考评 实际得 分，考 评类目 下各考 评项目 考评实 际得分 之和为 该考评 类目的 考评实 际得分
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②滤膜培养法
③酵母菌镜检计数法
9. 大肠杆菌检查法
概述、原理 检验程序 增菌培养 分离培养 纯培养、革兰染色、镜检
生化试验（IMViC）
实验中的注意事项
10．沙门菌检查法
11．铜绿假单胞菌检查法
12．金黄色葡萄球菌检查法
13．破伤风梭菌检查法
14．活螨检查法
15．结果判断
LOGO
微生物限度检查法概述
某一种 药物的 依据
生物药物的杂质检查 LOGO
➢杂质及其来源
✓药物中无治疗作用，或影响药物的稳定型 和疗效，甚至对人体健康有害的物质 ✓药物纯度和一般化学品及试剂的要求不同 ✓生产过程引入杂质 ✓贮存过程引入杂质
生物药物的杂质检查 LOGO
➢杂质的种类
✓按性质分为影响药物稳定性的杂质、毒 性杂质和信号杂质 ✓按来源分为一般杂质和特殊杂质
✓药学的分支学科，是药学和分析学的 交叉学科 ✓包括药物的检验、药物稳定性、生物 利用度、药物临床监测和生物药物检定 等多方面的定性定量分析 ✓目的是确保药物的质量及病人的用药 安全有效
生物药物分析学概述 LOGO
➢药物分析的任务
✓对药物生产过程的控制 ✓对药物贮运进行检测 ✓对临床用药进行监护 ✓配合药物研究部门进行新药与新剂型 的研制 ✓提高药物工作者的素质
载气：氮气 检测器：氢火焰离子化检测器检测 柱温：80～170℃ 色谱系统适用性试验：中国药典规定， 在残留溶剂测定前应作色谱系统适用性 试验。
生物药物的杂质检查 LOGO
➢特殊杂质检查
✓指药物在生产和贮存过程中，有可能引 入的中间体、分解产物以及副产物杂质 安全性检查 ✓生物药物还有一类特殊杂质需要检查， 对生物体产生特殊生理作用。
药物分析_14生物药物分析ppt
细菌类疫苗、病毒类疫苗、 抗毒素及抗血清、生长因 子、单克隆抗体等
1. 生物药物的分类（Ⅱ）
按化学本质和化学特性可分为：
氨基酸及其衍生物类 蛋氨酸 谷氨酸 丙氨酸 多肽和蛋白质类 催产素 血清白蛋白 胰岛素 酶和辅酶类 胃蛋白酶 门冬酰胺酶 凝血酶 核酸及其降解物和衍生物类 5-氟尿嘧啶 6-硫代嘌呤 多糖类 肝素 人参多糖 透明质酸钠 脂类 卵磷脂 胆红素 前列腺素系列（ PGE1、PGE2和PG12 ） 细胞生长因子类 生长素 白细胞介素 肿瘤坏死因子 生物制品类 疫苗
1. 鉴别试验(Ⅱ)
② 生化鉴别
—酶法 利用酶对底物特异性的催化活力，作为酶 类生物制品的鉴别。 尿激酶的鉴别:
尿激酶 牛纤维蛋白溶酶原 牛纤维蛋白原 牛凝血酶 蛋白结块 结块溶解： 气泡上升
1. 鉴别试验(Ⅱ)
② 生化鉴别
—电泳法 用于蛋白质、核苷酸类生物制品的鉴别。 C H2O SO 肝素鉴别： 3
3. 生物药物分析的特点
① 全过程的质量控制 此类药物对热、酸、碱、重金属以及pH较敏感，生物活 性易发生变化，需对原材料、生产过程和最终产品进行质 量控制。
② 相对分子质量测定
除氨基酸、核苷酸、辅酶及甾体激素等属化学结构明确 的小分子化合物外，大部分为大分子物质，其分子量一般 几千至几十万。对大分子的药物而言，即使组分相同，往 往由于分子量不同而产生不同的生理活性。
二、生物药物的质量检定
生化药物质量控制的项目： 来源与种类 性状 鉴别 氨基酸组分分析 肽图 糖含量 纯度 干燥失重或水分 炽灼残渣 生物活性 热源试验 含量分析
二、生物药物的质量检定(Ⅰ)
1. 鉴别试验
利用化学法、物理法及生物学方法 来确证生化药物的真伪。用标准品或对照品在同一 条件下进行对照试验。
1. 生物药物的分类（Ⅱ）
按化学本质和化学特性可分为：
氨基酸及其衍生物类 蛋氨酸 谷氨酸 丙氨酸 多肽和蛋白质类 催产素 血清白蛋白 胰岛素 酶和辅酶类 胃蛋白酶 门冬酰胺酶 凝血酶 核酸及其降解物和衍生物类 5-氟尿嘧啶 6-硫代嘌呤 多糖类 肝素 人参多糖 透明质酸钠 脂类 卵磷脂 胆红素 前列腺素系列（ PGE1、PGE2和PG12 ） 细胞生长因子类 生长素 白细胞介素 肿瘤坏死因子 生物制品类 疫苗
1. 鉴别试验(Ⅱ)
② 生化鉴别
—酶法 利用酶对底物特异性的催化活力，作为酶 类生物制品的鉴别。 尿激酶的鉴别:
尿激酶 牛纤维蛋白溶酶原 牛纤维蛋白原 牛凝血酶 蛋白结块 结块溶解： 气泡上升
1. 鉴别试验(Ⅱ)
② 生化鉴别
—电泳法 用于蛋白质、核苷酸类生物制品的鉴别。 C H2O SO 肝素鉴别： 3
3. 生物药物分析的特点
① 全过程的质量控制 此类药物对热、酸、碱、重金属以及pH较敏感，生物活 性易发生变化，需对原材料、生产过程和最终产品进行质 量控制。
② 相对分子质量测定
除氨基酸、核苷酸、辅酶及甾体激素等属化学结构明确 的小分子化合物外，大部分为大分子物质，其分子量一般 几千至几十万。对大分子的药物而言，即使组分相同，往 往由于分子量不同而产生不同的生理活性。
二、生物药物的质量检定
生化药物质量控制的项目： 来源与种类 性状 鉴别 氨基酸组分分析 肽图 糖含量 纯度 干燥失重或水分 炽灼残渣 生物活性 热源试验 含量分析
二、生物药物的质量检定(Ⅰ)
1. 鉴别试验
利用化学法、物理法及生物学方法 来确证生化药物的真伪。用标准品或对照品在同一 条件下进行对照试验。
生物药物分析与检测抗生素药物分析34页PPT
1
0
、
倚
南
窗
以
寄
傲
பைடு நூலகம்
，
审
容
膝
之
易
安
。
66、节制使快乐增加并使享受加强。 ——德 谟克利 特 67、今天应做的事没有做，明天再早也 是耽误 了。——裴斯 泰洛齐 68、决定一个人的一生，以及整个命运 的，只 是一瞬 之间。 ——歌 德 69、懒人无法享受休息之乐。——拉布 克 70、浪费时间是一桩大罪过。——卢梭
文 家 。汉 族 ，东 晋 浔阳 柴桑 人 （今 江西 九江 ） 。曾 做过 几 年小 官， 后辞 官 回家 ，从 此 隐居 ，田 园生 活 是陶 渊明 诗 的主 要题 材， 相 关作 品有 《饮 酒 》 、 《 归 园 田 居 》 、 《 桃花 源 记 》 、 《 五 柳先 生 传 》 、 《 归 去来 兮 辞 》 等 。
生物药物分析与检测抗生素药物分析
6
、
露
凝
无
游
氛
，
天
高
风
景
澈
。
7、翩翩新 来燕，双双入我庐 ，先巢故尚在，相 将还旧居。
8
、
吁
嗟
身
后
名
，
于
我
若
浮
烟
。
9、 陶渊 明（ 约 365年 —427年 ），字 元亮， （又 一说名 潜，字 渊明 ）号五 柳先生 ，私 谥“靖 节”， 东晋 末期南 朝宋初 期诗 人、文 学家、 辞赋 家、散
生物药物分析与检测 高效液相色谱法PPT课件
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HPLC与经典LC区别
第10页/共236页
HPLC与经典LC区别
✓ 主要区别：固定相差别，输液设备和检测手段
经典LC
仅做为一种分离手段 柱内径1～3cm，固定相 粒径>100μm 且不均匀
常压输送流动相 柱效低（H↑，n↓） 无法在线检测 分析周期长
HPLC
分离和分析
柱内径2～6mm，固定相 粒径<10μm（球形，匀浆 装柱） 高压输送流动相 柱效高（H↓，n↑） 可以在线检测 分析时间大大缩短
第43页/共236页
色谱柱柱效指标 填料粒径为3μm、4μm、5μm 、7μm或
10μm时，柱效应分别大于8万、6万、5万、4 万及 2．5万理论塔板数／米（或用 m－1表示 ）。
第44页/共236页
色谱柱的再生
反相色谱柱 以甲醇一水（95：5）、纯甲 醇及一氯甲烷等为流动相，依次冲洗，顺序 不得颠倒。每种流动相的冲洗体积应20倍于 柱体积。然后，再以相反顺序依次冲洗。
2021/7/15
第21页/共236页
液相色谱仪（3）
2021/7/15
第22页/共236页
液相色谱仪（4）
2021/7/15
第23页/共236页
液相色谱仪（5）
Agilent 1100系列
2021/7/15
第24页/共236页
一、 高效液相色谱仪结构流程
高压泵
进样器
色谱柱
检测器 储液瓶 废液 高压输液泵、高效分离住、高灵敏度检测器
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第18页/共49页
HPLC常见机型
• Waters LC-600 • Waters LC-2690 • 岛津LC－10A • HP1050 • Agilent 1100系列
HPLC与经典LC区别
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HPLC与经典LC区别
✓ 主要区别：固定相差别，输液设备和检测手段
经典LC
仅做为一种分离手段 柱内径1～3cm，固定相 粒径>100μm 且不均匀
常压输送流动相 柱效低（H↑，n↓） 无法在线检测 分析周期长
HPLC
分离和分析
柱内径2～6mm，固定相 粒径<10μm（球形，匀浆 装柱） 高压输送流动相 柱效高（H↓，n↑） 可以在线检测 分析时间大大缩短
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色谱柱柱效指标 填料粒径为3μm、4μm、5μm 、7μm或
10μm时，柱效应分别大于8万、6万、5万、4 万及 2．5万理论塔板数／米（或用 m－1表示 ）。
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色谱柱的再生
反相色谱柱 以甲醇一水（95：5）、纯甲 醇及一氯甲烷等为流动相，依次冲洗，顺序 不得颠倒。每种流动相的冲洗体积应20倍于 柱体积。然后，再以相反顺序依次冲洗。
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液相色谱仪（3）
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液相色谱仪（4）
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液相色谱仪（5）
Agilent 1100系列
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一、 高效液相色谱仪结构流程
高压泵
进样器
色谱柱
检测器 储液瓶 废液 高压输液泵、高效分离住、高灵敏度检测器
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HPLC常见机型
• Waters LC-600 • Waters LC-2690 • 岛津LC－10A • HP1050 • Agilent 1100系列
生物药物分析与检测抗生素药物分析精品PPT课件
第二节 β-内酰胺类抗生素
二、鉴别试验 （二）各种盐的反应
K+、Na+的火焰反应 青霉素和头孢菌素类药物多制成 钠盐或钾盐使用，可利用火焰反应进行鉴别。 （三）光谱法
1．红外光谱法 β－内酰胺环上的羰基伸缩振动增强而向高波数方向位 移，仲酰胺的氨基、羰基伸缩振动，羧基离子伸缩振动是 本类药物的特征峰。 2．紫外光谱法 通常利用最大吸收波长进行鉴别。
α-氨基结构，可显茚三酮反应和双缩验 （一）呈色反应
3．其它呈色反应 （1）与重氮苯磺酸反应
头孢哌酮结构中含有酚羟基，可与重氮苯磺酸发生偶 合反应而显色。
（2）与变色酸-硫酸反应 青霉素类药物中，如阿莫西林、氨苄西林等结构中有
活泼“-CH2-”经硫酸加热分解生成的甲醛与变色酸反应而 呈色。
素类药物在弱酸性下水解，可以产生具有共轭双键的青霉 烯酸，在紫外光区有吸收。侧链中有苯环等取代基的药物， 在紫外光区也有吸收。像苄青霉素。头孢菌素类分子中有 共轭体系（O＝C－N－C＝C）在波长260nm处有最大吸收。
第二节 β-内酰胺类抗生素
一、化学结构与性质 （二）性质
4. -内酰胺环的不稳定性 干燥、纯净青霉素类抗生素稳定，其水溶液很不稳定
氨基糖苷类的麦芽酚反应等。 2．光谱法 包括紫外吸收光谱和红外吸收光谱。 3．色谱法 包括高效液相色谱和薄层色谱。 4．生物学法 检查抗生素的抗菌能力。
第一节 概 述
二、抗生素药物的质量分析
（二）检查 1．影响产品稳定性的指标 包括晶型、水分、pH等。 2．控制有机和无机杂质的指标 包括澄清度与颜色、有
关物质、残留溶剂、炽灼残渣、重金属等。 3．与临床安全性密切相关的指标 包括异常毒性、热原、
细菌或内毒素、降压物质、无菌等。 4．其他指标 对多组分抗生素进行组分分析等。