槲皮素对大鼠慢性酒精性肝损伤的保护作用
茶多酚对慢性酒精中毒大鼠肝损伤的保护作用

茶多酚对慢性酒精中毒大鼠肝损伤的保护作用张勇;李苗苗;华田苗;孙庆艳【摘要】目的:建立慢性酒精诱导的成年大鼠肝损伤动物模型,并进行茶多酚的干预,观察茶多酚的干预对慢性酒精诱导的肝损伤大鼠的防护作用及其可能的机制.方法:将36只SD大鼠适应性喂养一周后,随机分为对照组、酒精损伤组和茶多酚干预组(每组12只).对照组大鼠用0.9%生理盐水按7 g/kg灌胃,酒精组用体积分数56%的红星牌白酒同剂量灌胃,茶多酚干预组在酒精灌胃同时给予0.25 g/kg剂量的茶多酚.每天定时灌胃一次,连续8周.8周后处死大鼠,取内脏脂肪和肝脏组织,以脂体比衡量内脏脂肪含量,以肝体比和油红O染色结果衡量肝脂质沉积,测定超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力等氧化应激指标,测定肝脏组织中脂肪酸转位酶(FAT/CD36)蛋白水平.结果:与对照组相比,酒精损伤组大鼠内脏脂肪含量、SOD/MDA比值、T-AOC和GSH-Px活力显著下降((P<0.05或P<0.01),肝体比、FAT/CD36蛋白水平显著提高(P<0.01),肝细胞中脂滴增加;与酒精损伤组相比,茶多酚干预组大鼠内脏脂肪含量、SOD/MDA比值、T-AOC和GSH-Px活力显著增加((P<0.05或P<0.01),肝体比、FAT/CD36蛋白水平显著下降(P<0.01),肝细胞中脂滴减少.结论:茶多酚干预能改善慢性酒精中毒大鼠肝脏的脂质沉积和氧化应激状态,并伴有肝细胞膜上FAT/CD36表达的减少.【期刊名称】《中国应用生理学杂志》【年(卷),期】2018(034)006【总页数】5页(P481-484,529)【关键词】酒精;肝损伤;茶多酚;脂质沉积;氧化应激;脂肪酸转位酶;大鼠【作者】张勇;李苗苗;华田苗;孙庆艳【作者单位】安徽师范大学生命科学学院,芜湖241000;安徽师范大学生命科学学院,芜湖241000;安徽师范大学生命科学学院,芜湖241000;安徽师范大学生命科学学院,芜湖241000【正文语种】中文【中图分类】R285.5肝脏是一种重要的器官,参与调节机体的糖代谢、蛋白质代谢和脂肪代谢,其损伤会对机体产生严重的影响。
葛根对大鼠酒精性肝损伤的干预作用

葛根对大鼠酒精性肝损伤的干预作用冯琴;方志红;崔剑巍;王晓柠;胡义扬【期刊名称】《上海中医药杂志》【年(卷),期】2007(41)4【摘要】目的观察中药葛根水提液对大鼠慢性酒精性肝损伤的防治作用。
方法按Lieber-Decarli配方制备酒精液体饲料,以定量喂饲大鼠的方法,复制酒精性肝损伤模型。
32只雄性SD大鼠随机分为正常组、无酒精液体饲料组(对照组)、酒精液体饲料组(模型组)及酒精液体饲料+葛根组(葛根组)。
在造模第4周开始灌胃葛根水提液或蒸馏水。
8周末取材观察:①肝组织病理变化;②肝组织三酰甘油(TG)含量;③血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性和肝组织γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)活性;④肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、一氧化氮合酶(NOS)活性及血清铁(Fe2+)含量。
结果模型组大鼠肝组织脂肪变性和炎症浸润明显,血清ALT、AST活性和组织γ-GT活性、TG含量较对照组均显著增加;且肝组织MDA 含量、NOS活性及血清Fe2+含量均显著升高,而肝组织SOD显著降低。
葛根组的肝组织脂肪变性和炎症浸润均较模型组显著减轻,肝组织γ-GT活性和TG含量显著低于模型组;同时肝组织MDA含量、NOS活性显著低于模型组,而SOD活性显著高于模型组。
结论葛根水提液有显著的抗慢性酒精性肝损伤的作用。
【总页数】3页(P64-66)【关键词】葛根;肝损伤;酒精【作者】冯琴;方志红;崔剑巍;王晓柠;胡义扬【作者单位】上海中医药大学附属曙光医院,上海中医药大学肝病研究所【正文语种】中文【中图分类】R575.1;R285.1【相关文献】1.针刺对加皮葛根饮抗大鼠酒精性肝损伤的协同作用 [J], 矫承媛;成泽东;陈明明;陈以国2.葛根对大鼠酒精性肝损伤的治疗作用 [J], 栾玉泉;徐立;赵媛;王成军;陈道邦3.葛根护肝片对慢性酒精性肝损伤大鼠保护作用研究 [J], 赵宏宇;王玉;刘新宇;宋莲莲;史顶聪;史保银;邸琳4.葛根保健饮料的研制及其对大鼠酒精性肝损伤的保护作用 [J], 祝冬青;黄亚东5.葛根素对大鼠亚急性酒精性肝损伤的保护作用及机制初探 [J], 赵岩因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
槲皮素对慢性阻塞性肺疾病大鼠的保护作用

doi:10.3969/j.issn.1000⁃484X.2019.21.003槲皮素对慢性阻塞性肺疾病大鼠的保护作用①魏 萍 陈志斌② 王春娥② 李大治② 陈可强② (福建中医药大学,福州350102) 中图分类号 R563 文献标志码 A 文章编号 1000⁃484X (2019)21⁃2570⁃06①本文为福建省卫生计生青年科研课题(2016⁃2⁃35)㊂②福建中医药大学附属第二人民医院呼吸科,福州350003㊂作者简介:魏 萍,女,主治医师,讲师,主要从事慢性阻塞性肺疾病和支气管哮喘方面的研究,同时就职于福建中医药大学附属第二人民医院呼吸科,E⁃mail:jiangjun98052393@㊂[摘 要] 目的:应用熏香烟联合气道内滴注脂多糖(LPS)法造成大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型,并探究懈皮素对COPD 大鼠慢性阻塞性肺疾病模型的保护作用及肺病改善机制㊂方法:选择3周龄SPF 级别SD 大鼠给予香烟联合气道内滴注LPS(1mg /kg)方法建立大鼠慢性阻塞性肺疾病模型,分别设置健康对照组(Healthy Ctrl 组)㊁QT 单独作用组(QT 组)㊁COPD 组和COPD+QT 组,其中QT 用药组采用每天口服50mg /kg㊂HE 染色观察细胞形态,TUNEL 染色和Western blot 技术检测组织细胞凋亡及纤维化相关分子标记㊂ELISA 检测血清中炎症因子表达水平㊂Masson 检测肺纤维化水平㊂结果:与Healthy Ctrl 组比较,QT 单独作用于健康大鼠后,大鼠体重㊁肺功能和肺生理指标,细胞凋亡及炎症因子等差异无显著统计学意义;与Healthy Ctrl 组比,COPD 组大鼠体重㊁肺功能㊁肺泡细胞形态明显受损,肺泡组织严重纤维化(P <0.01);促细胞凋亡因子,炎症因子明显上升(P <0.01),抑炎因子显著下降(P <0.01);与COPD 组比,COPD+QT 组大鼠体重㊁肺功能及肺纤维化水平显著改善(P <0.01);肺泡细胞损伤及凋亡有所缓解,凋亡因子和炎症因子表达水平明显下调(P <0.01)㊂结论:QT 在50mg /kg 剂量下对大鼠无明显毒性,并可以降低TGF⁃β1㊁α⁃SMA 和TNF⁃α等表达,抑制大鼠肺泡细胞凋亡,降低大鼠肺组织炎症和纤维化损伤㊂[关键词] 槲皮素;慢性阻塞性肺疾病;肺纤维化;凋亡;炎症因子Protective function and mechanism of quercetin in chronic obstructive pulmon⁃ary diseaseWEI Ping ,CHEN Zhi⁃Bin ,WANG Chun⁃E ,LI Da⁃Zhi ,CHEN Ke⁃Qiang .Fujian University of Traditional Chinese Medicine ,Fuzhou 350102,China[Abstract ] Objective :To investigate the function and mechanism of quercetin (QT)on chronic obstructive pulmonary disease (COPD)in rat models.Methods :The markers of lung injury (body weight /pulmonary function)were measured,the protein levels of inflammatory⁃and apoptosis⁃and fibrotic⁃related were determined by Western blot.HE /TUNEL /Masson staining were performed to investigate the mechanisms involved.The levels of inflammatory factors lung injury were detected by ELISA.The in vivo activities of all moleculars were determined using a rat model.Results :The QT suppressed the injury of alveolus pulmonis cells occurred in vivo due to the decrease in inflammatory factors and biochemical markers by reduced the expression of TGF⁃β1,α⁃SMA and TNF⁃α(P <0.05),as⁃sociated with the declined of Caspase⁃3and Caspase⁃9(P <0.05).Additionally,protective effection of QT downregulated the IL⁃6and upregulated the IL⁃10(P <0.05).Conclusion :Protective effection of QT inhibits the apoptosis,inflammation and fibrosis of alveolus pulmonis cells in rat models.[Key words ] Quercetin;Chronic obstructive pulmonary disease;Pulmonary fibrosis;Apoptosis;Inflammatory factor 慢性阻塞性肺疾病(Chronic obstructivepulmonary disease,COPD)是典型的阻塞性肺疾病,COPD 会常伴有呼吸问题和气流阻塞,主要表现为呼吸短促㊁咳痰现象[1,2]㊂吸烟㊁空气污染和扬尘是造成COPD 的主要原因[3]㊂作为一种重要的公众健康问题,COPD 已经成为中国第三大死亡原因[4]㊂流行统计学数据显示,2015年中国COPD 患病率为8.6%,约有999万患者患有COPD [5,6]㊂虽然西药在COPD 的治疗中取得了一定治疗效果,但是具有为患者带来极大痛苦的副作用㊂而中药在COPD 的治疗过程中具有疗效好,副作用小等特点,越来越受到重视㊂槲皮素(Quercetin,QT)是一种天然饮食类黄酮,富含于水果㊁蔬菜㊁绿茶和一些合成药物之中,具有较低毒性[7]㊂近年来,QT 广泛的药理作用,包括抗氧化㊁抗炎㊁抗癌引起大量研究者关注[8]㊂在COPD 发病过程中,IL⁃6和TNF⁃α等可通过破坏小气道和肺泡组织结构与功能导致患者肺功能下降[9,10]㊂然而QT 是否对慢性肺阻塞性肺病有保护作用及分子调控机制尚不清楚㊂目前主要治疗手段为控烟㊁氧疗㊁支气管扩张剂和呼吸兴奋剂等,虽然临床疗效也有所提高,但是目前高发病率和高死亡率的现状并无明显改善[11,12]㊂积极探索COPD病理机制,对发现有效治疗靶点有十分重要的意义㊂本研究根据前人科研成果,探究QT对大鼠COPD 模型的治疗效果和作用机制,期望为COPD的治疗提供新思路㊂1 材料与方法1.1 材料1.1.1 试剂 Click⁃iT®Plus TUNEL assay试剂盒(货号:C10618)购自Invitrogen公司㊂苏木素伊红(HE)染色试剂盒(货号:C0105)购自碧云天㊂Masson Stain Kit Masson染色试剂盒(货号: 60532ES58)购自上海翊圣生物科技有限公司㊂Caspase⁃3(货号:ab13847)㊁Caspase⁃9(货号: ab202068)㊁TGF⁃β1(货号:ab64715)㊁α⁃SMA(货号: ab5694)㊁GAPDH(货号:1056)一抗购自美国Abcam 公司,HRP标记的山羊抗小鼠二抗购自美国Santa Cruz公司㊂IL⁃6(货号:E⁃EL⁃R0015c)㊁TNF⁃α(E⁃EL⁃R0019)㊁IL⁃10(E⁃EL⁃R0016)和ELISA试剂盒购自Elabscience㊂AniRes2005动物肺功能分析系统购自北京贝兰博科技有限公司㊂1.1.2 仪器 PCR仪㊁电泳仪及半干转膜仪均购自美国伯乐公司㊂Gel View6000化学发光凝胶成像系统购自广州云星仪器有限公司㊂Multiskan GO 酶标仪购自Thermo㊂1.2 方法1.2.1 应用熏香烟联合气道内滴注脂多糖(LPS)的方法造成大鼠COPD模型 经学校实验动物伦理委员会审查同意后,选择40只3周龄SPF级别SD 大鼠,购自北京维通利华实验动物公司,许可证号为SCXK(京)2014⁃0001㊂随机分为四组,分别设置健康对照组(Healthy Ctrl组)㊁COPD模型组(COPD 组)㊁QT单独作用组(QT组)和COPD+QT组㊂大鼠适应性饲养一周后给予香烟联合气道内滴注LPS 方法进行造模:将各模型组大鼠置于自制有机玻璃熏烟箱中,盖上盖子;将黄果树牌香烟插入点烟盒,然后打开微型真空泵,泵入烟雾㊂每次点烟20支,熏烟1h,连续进行3个月㊂大鼠经气道内滴注LPS (1mg/kg)㊂空白大鼠只进行生理盐水滴注,不做烟熏处理,建立慢性阻塞性肺疾病大鼠模型后进行相关实验㊂用药治疗:口服给药QT连续四周(50mg/kg)后,进行相关实验㊂1.2.2 大鼠基本指标检测 QT治疗结束后样本提取前,称量大鼠体重㊂检测大鼠肺功能:大鼠禁食12h后,用2%戊巴比妥(30mg/kg)麻醉,将大鼠仰卧固定,剪开颈部皮肤及肌肉进行气管插管,用Ani⁃Res2005动物肺功能分析系统检测大鼠肺功能㊂通过一秒用力呼吸气容积(FEV1)/用力肺活量(FVC)比率对大鼠肺功能进行评价㊂1.2.3 HE染色 取左肺用生理盐水充分冲洗,再用10%中性福尔马林固定,切片经3次二甲苯脱蜡,每次时间分别为15min㊁15min㊁10min;梯度酒精脱苯,分别用100%㊁90%㊁80%㊁70%的酒精脱苯10min;蒸馏水冲洗5min,2次;苏木素染核15min,蒸馏水冲洗;0.5%的盐酸酒精分色,用蒸馏水冲洗15min;70%和80%酒精先后浸泡10min,复染伊红1min,90%酒精分化10s;95%酒精脱水2次,各10min,100%酒精脱水2次,各15min,二甲苯透明3次,每次时间分别为10min㊁15min㊁15min;中性树脂封片观察㊂1.2.4 ELISA检测炎症因子 大鼠心脏取血1ml,低温离心机4000r/min8min,取上清液供实验使用㊂加样:分别设空白孔,标准品待测样品孔㊂在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl㊂温育:用封板膜封板后置于37℃温育30min㊂配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水稀释30倍后备用㊂洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30s后弃去,如此重复5次,拍干㊂加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外㊂温育:再次用封板膜封板后置37℃温育30min㊂洗涤:再次小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30s 后弃去,如此重复5次,拍干㊂显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl轻轻振荡混匀, 37℃避光显色10min㊂终止:每孔加入50μl终止液,终止反应(此时蓝色立转为黄色)㊂测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔吸光值(OD 值)㊂测定在加终止液后15min内进行㊂1.2.5 TUNEL检测细胞凋亡 大鼠处死后组织经过石蜡包埋,二甲苯中脱蜡5~10min,换用新鲜二甲苯,再脱蜡5~10min㊂无水乙醇5min㊂90%乙醇2min㊂70%乙醇2min,蒸馏水2min㊂滴加20μg/ml不含DNase的蛋白酶K用P0106免疫染色洗涤液(20~37)℃作用15~30min㊂PBS洗涤3次㊂配制适当量TUNEL检测液滴加样品上,37℃避光孵育60min㊂洗涤后用抗荧光猝灭封片液封片后显微镜下(激发波长范围为450~500nm)观察㊂1.2.6 Masson染色 切片染色前先用蒸馏水润湿玻片30~60s㊂加入适量苏木素核染液染色60s,弃去,清洗液冲洗30s㊂加入适量酸性品红浆染液染色30~60s,弃去,清洗液冲洗30s㊂加入适量磷钼酸分色液分色6~8min,弃去㊂加入适量苯胺蓝复染液染色5min,弃去,用无水乙醇冲洗干净㊂吹干后封片镜检㊂1.2.7 Western blot检测蛋白表达 收集四组肺组织并取相同部位,PBS清洗3次,用添加蛋白酶抑制剂的细胞裂解液裂解提取总蛋白㊂用BCA试剂盒检测总蛋白浓度,10%SDS⁃PAGE分离蛋白后用半干转膜仪转移蛋白质至PVDF膜㊂用5%脱脂牛奶室温封闭蛋白2h,随后加入一抗于4℃封闭过夜,第2天加入对应二抗室温封闭1h,最后滴加ECL 曝光显影㊂显色并统计灰度值计算相对表达量㊂1.3 统计学分析 所有实验数据均用统计软件SPSS19.0进行统计分析,实验结果均以x±s表示㊂方差齐且服从正态分布则组间比较用One⁃Way ANOVA,反之则用秩和检验㊂以P<0.05为差异有统计学意义㊂2 结果2.1 QT改善COPD大鼠体重和肺功能指标 QT 对大鼠COPD模型治疗后,与Healthy Ctrl组相比, QT组大鼠体重和肺功能间无差异;与Healthy Ctrl 组比较,COPD组体重和肺功能均显著下调;与COPD组比较,COPD+QT组大鼠体重和肺功能均明显改善(图1)㊂2.2 QT抑制COPD肺脏病理损伤 HE染色实验显示,与Healthy Ctrl组相比,QT组大鼠支气管管腔㊁上皮及肺泡结构完整,管壁未见变厚,黏膜下层未见炎症性细胞浸润㊂提示QT使用对大鼠体征没有明显影响;与Healthy Ctrl组比较,COPD组大鼠支气管管腔严重变形,上皮细胞明显脱落,肺泡腔扩大融合成肺大泡,管壁破坏㊁增厚,管壁周围可见大量炎性细胞浸润;与COPD组比较,COPD+QT组大鼠支气管管腔形变恢复,上皮细胞脱落改善,管壁厚度逐渐恢复变薄,炎症浸润细胞明显减少,肺泡腔扩大融合现象明显改善(图2)㊂2.3 QT抑制肺泡细胞凋亡及相关因子表达 TUNEL染色实验显示,与Healthy Ctrl组比较,QT组肺泡组织中细胞凋亡数目没有明显差异;与Healthy Ctrl组比较,COPD组细胞凋亡数目显著上升;与COPD组比较,COPD+QT组细胞凋亡水平明显下调(图3A)㊂Western blot实验结果显示,与Healthy Ctrl组比较,QT组肺泡组织中促凋亡因子Caspase⁃3和Caspase⁃9水平差异均无显著统计学意义;与Healthy Ctrl组比较,COPD组Caspase⁃3和Caspase⁃9水平均显著上升;与COPD组比较,COPD+QT组Caspase⁃3和Caspase⁃9水平则显著下降(图3B)㊂2.4 QT降低血清中炎症因子表达 ELISA检测血清中相关炎症因子IL⁃6㊁TNF⁃α和IL⁃10结果显示:与Healthy Ctrl组比较,QT组肺泡组织中相关炎症因子表达水平无差异;与Healthy Ctrl组比较,COPD 组炎症因子IL⁃6和TNF⁃α表达水平显著上升,而抑炎因子IL⁃10显著下调;与COPD组比较,COPD+QT 组炎症因子IL⁃6和TNF⁃α表达水平显著下调,抑炎因子IL⁃10明显上调(图4)㊂2.5 QT降低肺泡组织肺纤维化及凋亡通路分子活性 Masoon染色实验显示,与Healthy Ctrl组相比, QT组极少蓝色着色于肺泡细胞,大量胞浆被染成红色;与Healthy Ctrl组比较:COPD组大量具有较深蓝色着色于细胞中,很少胞浆红色减少;与COPD组比较:COPD+QT组肺泡细胞着蓝色降低,胞浆着红色逐渐加深(图5A)㊂Western blot检测肺泡组织中TGF⁃β1和α⁃SMA结果显示:与Healthy Ctrl组比较,QT组TGF⁃β1和α⁃SMA表达水平无差异;与图1 不同处理组大鼠基本指标测量Fig.1 Basic indexes of rats in different treatment groups were measuredNote:Healthy ctrl.Healthy rats;QT group.Rats received QT;COPD group.Rats treated by the LPS and cigarettes;COPD+QT.Ratstreated by the LPS,cigarettes and QT.QT were treated for4weeks.**.P<0.01compared with the control group;##.P<0.01compared with COPD group.Bars,SEs.图2 HE染色鉴定肺泡细胞形态(×200)Fig.2 HE staining detected alveolus pulmonis cells morphology(×200)Note:QT were treated for4weeks.图3 肺泡组织中凋亡相关因子表达水平(x ±s ,×200)Fig.3 Expression of apoptosis⁃related markers were detected in alveolus pulmonis cells (x ±s ,×200)Note:A.TUNEL;B.Western blot.**.P <0.01compared with thecontrolgroup;##.P <0.01comparedwithCOPDgroup.Bars,SEs.图4 ELISA 检测显示血清中相关炎症因子表达水平(x ±s )Fig.4 Expression of inflammatory factors were detectedin serum by ELISA (x ±s )Note:**.P <0.01compared with the control group;##.P <0.01compared with COPD group.Bars,SEs.Healthy Ctrl 组比较,COPD 组TGF⁃β1和α⁃SMA 表达水平显著上升;与COPD 组比较,COPD +QT 组TGF⁃β1和α⁃SMA 表达水平受到显著下调(图5B)㊂3 讨论COPD 是一种进展性疾病,最终会演变为每天发作,如行走或增加压力都会导致呼吸困难[13],严重影响患者生活质量㊂COPD 患者肺内含有多种炎症细胞,如中性粒细胞㊁嗜酸性粒细胞㊁肺泡巨噬细胞等,炎性细胞被刺激因子激活后能够产生炎症介质,进而损害气道壁和肺部组织[14,15]㊂COPD 属于严重的公共卫生问题,目前已被行业列入重大疾病慢病管理体系内㊂有关病理演变机制的研究已经证明:慢性气道炎症是关键,病情进展与肺对有害颗粒或气体的异常炎症反应有关[9,10]㊂QT 几乎存在于所有植物中,作为人类正常饮食图5 肺纤维化及各处理相关凋亡基因表达水平(x ±s )Fig.5 Fibrosis and apoptosis related makers were detected in alveolus pulmonis cells (x ±s )Note:A.Masson;B.Western blot.**.P <0.01compared with thecontrol group;##.P <0.01compared with COPD group.Bars,SEs.的一部分,已具有悠久历史㊂随着对QT 生物和药理活性研究逐渐深入,越来越多的研究证明QT 对人体颇有裨益,包括抗癌㊁抗过敏㊁抗炎㊁抗动脉粥样硬化和保心功能[16,17]㊂本研究也证实,对大鼠连续四周给药(50mg /kg)后,对大鼠体重㊁肺功能㊁肺泡结构和凋亡等进行检测发现,与正常大鼠比较并未有明显差异㊂说明重要制剂QT 对生物体具有较小影响,对大鼠没有明显毒性作用㊂此外一些前瞻性研究表明QT 可有效抑制冠状动脉㊁肺动脉血管收缩和降低血压的功效[18]㊂更有研究表明QT 可以显著逆转肺动脉高压的形成[19]㊂本研究结果显示,QT 可以显著改善COPD 大鼠肺损伤情况,降低肺泡细胞凋亡和炎症因子水平,抑制凋亡发生和炎症水平㊂TGF⁃β1可以抑制多种细胞增殖并诱导上皮细胞凋亡,同时又可以诱导间质样细胞增殖和向肌成纤维细胞分化,来促进伤口愈合和组织纤维化形成[20]㊂有研究表明,TGF⁃β1被认为是体内促纤维化生长因子最重要的分子㊂如IPF 和博来霉素诱导的肺纤维化损伤中显示TGF⁃β1表达增加[21]㊂TGF⁃β1体外可以激活成纤维细胞,体内过表达可以造成肺持续的纤维化进程[22]㊂TGF⁃β1调节肌成纤维细胞的主要方式是通过控制α⁃SMA 来促进细胞外基质蛋白(胶原蛋白和黏联蛋白)分泌;也有许多纤维化信号激活肌成纤维细胞功能的信号也由TGF⁃β1调节或激活[23]㊂TGF⁃β1一方面降低TNF⁃α活性来降低炎症因子IL⁃6来抑制免疫炎症[24⁃26],IL⁃6是由多种细胞产生㊁具有诱导B 细胞活化产生抗体的多功能细胞因子,可以通过凝聚胶原蛋白,抑制细胞外基质分解,刺激成纤维细胞增殖,导致COPD 气道纤维结缔组织形成及平滑肌增生,从而参与COPD气道重构[9,10]㊂而IL⁃10作为多效抗炎性细胞因子,具有重要的抗炎及免疫抑制作用[27]㊂本研究证明,COPD大鼠模型中TGF⁃β1和α⁃SMA 的表达量急剧上升;但在经过QT治疗后,TGF⁃β1和α⁃SMA的表达量明显下调,接近正常组大鼠体内的表达水平,同时大鼠肺纤维化的程度也明显缓解㊂常见的凋亡途径分为:内源性凋亡(线粒体途径)和外源性途径㊂内源性途径常与细胞压力应激相关,当细胞感受到压力之后便会激活BH3,使抗凋亡因子Bcl⁃2降低,从而减少对凋亡促进因子Bax 抑制,最终通过Caspase⁃9诱导Caspase3/6/7激活造成细胞发生凋亡;而外源性途径则是依赖FASL, TNF⁃α及TRAIL与细胞上死亡受体结合后,进一步激活Caspase8来诱导Caspase3/6/7激活造成细胞凋亡[28]㊂本研究发现COPD疾病模型组大鼠经过QT治疗后,Caspase⁃3和Caspase⁃9都受到明显下调㊂TGF⁃β信号分子在多种重要信号途径中参与多细胞应答,如细胞增殖㊁分裂㊁凋亡㊁免疫及炎症应答等[29⁃31]㊂TGF⁃β1可以结合TNF⁃α共同抑制Caspase⁃3依赖的凋亡通路来抑制凋亡发生㊂综合研究结果可以证明,当COPD模型大鼠经过QT治疗后可以显著地降低TNF⁃α和TGF⁃β1的表达水平,有效降低下游Caspase⁃3和Caspase⁃9的活性,从而降低肺泡细胞凋亡发生㊂综上所述,QT对COPD有一定保护作用,通过降低TGF⁃β1㊁TNF⁃α和α⁃SMA活性来抑制细胞凋亡及降低细胞炎症因子释放㊂本研究通过COPD损伤大鼠模型初步探究QT在临床治疗COPD损伤方面具有相关性和可行性㊂但是QT在体内发挥功能的信号通路比较复杂,需要进一步明确其相关信号转导机制并选择关键靶点分子才能为精准治疗慢性阻塞性肺疾病提供指导㊂参考文献:[1] 常 芬,肖贵华,李 琪,等.慢性阻塞性肺病及其相关小细胞肺癌进程与EMT的相关性研究[J].中国免疫学杂志, 2017,33(4):598⁃602.Chang F,Xiao GH,Li Q,et al.Correlation analysis between EMT and progression of chronic obstructive pulmonary disease(COPD) and its related non⁃small cell lung cancer(NSCLC)[J].Chin J Immunol,2017,33(4):598⁃602.[2] Graf J,Jorres RA,Lucke T,et al.Medical treatment of COPD[J].Dtsch Arztebl Int,2018,155(37):599⁃605.[3] Soriano JB,Hahsler M,Soriano C,et al.Temporal transitions incopd severity stages within the gold2017classification 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铁皮石斛在亚砷酸钠致大鼠肝损伤中的保护作用吴长艳叶建方郑冲郑雯琳朱凯

铁皮石斛在亚砷酸钠致大鼠肝损伤中的保护作用吴长艳叶建方郑冲郑雯琳朱凯*发布时间:2023-06-07T05:47:03.572Z 来源:《健康世界》2023年5期作者:吴长艳叶建方郑冲郑雯琳朱凯* [导读] 目的探讨铁皮石斛(DC)在亚砷酸钠(NaAsO2)诱导大鼠肝损伤过程中的保护作用。
方法健康成年大鼠40只分为正常组(10 mL/kg生理盐水灌胃)、亚砷酸钠模型组(10 mg/kg 亚砷酸钠溶液灌胃)、铁皮石斛干预组(4g/kg铁皮石斛溶液灌胃)、亚砷酸钠+铁皮石斛联合处理组(10mg/kg 亚砷酸钠溶液+4g/kg铁皮石斛溶液灌胃),连续干预4周,每天观察大鼠生存状态,每周称量并记录大鼠体重。
贵州省疾病预防控制中心毒理科贵州 550004摘要:目的探讨铁皮石斛(DC)在亚砷酸钠(NaAsO2)诱导大鼠肝损伤过程中的保护作用。
方法健康成年大鼠40只分为正常组(10 mL/kg生理盐水灌胃)、亚砷酸钠模型组(10 mg/kg 亚砷酸钠溶液灌胃)、铁皮石斛干预组(4g/kg铁皮石斛溶液灌胃)、亚砷酸钠+铁皮石斛联合处理组(10mg/kg 亚砷酸钠溶液+4g/kg铁皮石斛溶液灌胃),连续干预4周,每天观察大鼠生存状态,每周称量并记录大鼠体重。
处死后,称取大鼠肝脏重量,全自动血生化仪测量大鼠AST、ALT等肝损伤指标。
结果亚砷酸钠模型组较正常组体重降低(P<0.05),铁皮石斛处理组和亚砷酸钠+铁皮石斛联合处理组较亚砷酸钠模型组体重显著增加(P<0.05);第四周止,亚砷酸钠模型组较正常组脏器指数、血清AST、ALT水平增加(P<0.05),与亚砷酸钠模型组相比,亚砷酸钠+铁皮石斛联合处理组肝脏器指数、AST、ALT水平明显降低(P<0.05)。
结论铁皮石斛的干预可有效减缓亚砷酸钠致SD大鼠肝损伤。
关键词:铁皮石斛、砷、肝损伤Protective effect of DC on liver injury induced by sodium arsenite in rats Abstract: Objective To explore the intervention effect of Dendrobium candidum (DC) on liver injury induced by sodium arsenite (NaAsO2) in rats. Methods Forty healthy adult SD rats were divided into the normal group (10 mL/kg normal saline), the sodium arsenite model group (10 mg/kg sodium arsenite solution), the Dendrobium candidum intervention group (4 g/kg Dendrobium candidum solution), the sodium arsenite+Dendrobium candidum joint treatment group (10 mg/kg sodium arsenite solution+4 g/kg Dendrobium candidum solution). After continuous intervention for 4 weeks, the survival status of rats was observed every day, weigh and record the weight of rats every week. After being killed, the weight of rat liver was weighed, and AST, ALT and other liver injury indicators were measured by automatic blood biochemical instrument. Results The body weight of the sodium arsenite model group was lower than the normal group (P<0.05), and Dendrobium candidum treatment group and the NaAsO2 + Dendrobium candidum combined treatment group was significantly higher than the sodium arsenite model group (P<0.05); At the end of the fourth week, the organ index, AST and ALT levels in the sodium arsenite model group were higher than those in the normal group (P<0.05). Compared with the sodium arsenite model group, the liver organ index, AST and ALT levels in the NaAsO2+Dendrobium candidum combined treatment group were lower (P<0.05). Conclusion The intervention of DC can effectively alleviate the liver injury induced by NaAsO2 in SD rats. Keyword: Dendrobium Officinale, arsenic, liver injury砷是一种广泛存在于水、空气和食品中的有毒元素,长期砷暴露会造成机体多器官、系统损害,肝脏是其主要的靶器官之一[1]。
三叶青超微粉对酒精性肝损伤大鼠肠道菌群的调节作用

程晓阳,廖明,何全光,等. 三叶青超微粉对酒精性肝损伤大鼠肠道菌群的调节作用[J]. 食品工业科技,2023,44(18):415−424.doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022090022CHENG Xiaoyang, LIAO Ming, HE Quanguang, et al. Effects of Tetrastigma hemsleyanum Superfine Powder on Intestinal Microflora in Rats with Alcohol-Induced Liver Injury[J]. Science and Technology of Food Industry, 2023, 44(18): 415−424. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022090022· 营养与保健 ·三叶青超微粉对酒精性肝损伤大鼠肠道菌群的调节作用程晓阳1,2,廖 明2,何全光3,莫财锋4,黄茂康3,黄梅华3,*(1.广西医科大学,广西南宁 530021;2.肇庆市鼎湖区人民医院,广东肇庆 526070;3.广西壮族自治区农业科学院农产品加工研究所,广西南宁 530007;4.广西华银医学检验所有限公司,广西南宁 530000)摘 要:目的:研究三叶青超微粉能否缓解酒精引起的肝损伤,并探讨其保护作用机制,为开发酒精性肝损伤辅助治疗产品提供新的研究思路。
方法:连续给予大鼠8周酒精制备肝损伤模型,同时给予大鼠灌胃不同剂量的三叶青超微粉,观察其对酒精性肝损伤的保护作用。
检测大鼠血清中ALT 、AST 、ALP 和肝组织中GSH 、SOD 、MDA 的变化,观察肝组织病理切片损伤情况,并采集粪便提取基因组DNA ,进行16S rDNA 全长测序分析。
槲皮素对肝脏的药理作用研究进展

102C hi nese Jour nal of I nf or m at i on on TC M M a y2008V ol.15Suppl.槲皮素对肝脏的药理作用研究进展辛秀,袁琳,王兴,雷磊(西南交通大学药学院,四川峨眉山614202)关键词:槲皮素;乙肝病毒;肝癌;肝纤维化;药理作用;综述中图分类号:R285.5文献标识码:D文章编号:1005-5304(2008)S05-0102-03槲皮素(Q uercet i n,Q ue)作为一种具广泛生理作用的天然生物黄酮类化合物,广泛存在于许多植物的花、叶、果实中。
多以苷的形式存在,如芦丁、槲皮苷、金丝桃苷等,经酸水解可得到槲皮素。
槲皮素是多种中药的活性成分,其来源广泛,约有100种中药含有槲皮素。
通过对槲皮素的实验研究,发现其具有多种药理活性,如免疫增强功能[1]、抗菌、抗病毒[2]、镇痛[3]、抑制血小板凝集[4]、舒张血管[5]等。
近年来,以槲皮素为其主要活性成分的中药材,如赶黄草、瑞香狼毒、水芹和黄珠子草等用来治疗各种肝脏疾病也取得了较好的疗效。
笔者现就近年来槲皮素对肝脏药理作用的实验研究进展综述如下。
1清除自由基,抗氧化肝肺综合征(H epat opul m onar y Syndr om e,hps)为肝功能不全,肺血管扩张和低氧血症综合征。
肺内扩张导致肝硬化部位血氧供应不足时就会发生肝肺综合征,自由基在肝肺综合征进程中可能扮演了一个作用极其显著的角色。
而经研究发现,黄酮类化合物能够防止自由基的毒害作用。
J T i eppo[6]等以胆管结扎(bdl)引起的胆汁性肝硬化小鼠为模型,用槲皮素以50m g/kg连续14d施给肝硬化小鼠,从小鼠身上抽取出骨髓来对微核进行分析,对肺脏、肝脏活检和抽取的血液用慧核实验来探明D N A的损害。
结果显示,在bdl小鼠中肺脏和肝脏的微核和D N A损害显著上升,而槲皮素对D N A没有产生损害,同时还减少了骨髓中微核细胞的损害。
槲皮素解酒作用的研究

槲皮素解酒作用的研究摘要】目的:探讨槲皮素对小白鼠血液中酒精含量的影响。
方法:将40只健康3-4周龄雄性小鼠随机分为4组,A组(对照组)及B、C、D组(实验组)。
给实验组和对照组小鼠灌胃酒精溶液0.16ml/10g酒精同时灌胃,造模实验结束半小时后开始灌胃给药,三组实验组分别以40mg/kg、80mg/kg、120mg/kg槲皮素蒸馏水0.2ml/10g悬浊液灌胃,对照组加入0.2ml/10g悬浊液相同体积的蒸馏水。
半小时后抽取小鼠血液2ml,使用分光光度仪测其血清中酒精含量,并记录数据,通过t检验来反映酒精的变化。
结果:与对照组对比,B、C、D组血清酒精含量差异与A组血清酒精含量差异有统计学意义(P<0.05)。
实验组之间对比,B、C、D组血清酒精含量之间差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:槲皮素具有降低血液中酒精含量的作用【关键词】槲皮素;解酒作用;引言据统计我国酒精依赖者人群已达2亿左右,慢性酒精中毒率日益增高{1~2}。
研究得出乙醇可以麻醉人的中枢神经、运动神经和末梢神经,使人的动活迟缓,生理机能减退,视力、听力等感知能力降低{3}。
主要因为乙醇在人体的转化为乙醛,它能与蛋白质结合,形成乙醛-蛋白质产物,破坏蛋白质的结构和性质,使某些酶降低活性或失去活性;还可导致某些组织失去作用而死亡,长期大量饮酒蓄积的毒物与饮酒量成正比,乙醛对人体肝脏和胰脏功能的影响最为严重{4}。
近年来我国酒精性肝硬化逐渐有超过病毒性肝硬化的趋势,而肝硬化患者是肝癌的高危人群。
基于酒精对人体的多重危害,所以涌出大批学者对解酒药物的研究,以求寻找高效的酒精药物,以此来降低酒精对人体的损害。
这也是本实验目的所在。
众所周知黄铜类药物近年来都是科学家们研究的热点,比如实验使用的是槲皮素,它是一种多羟基黄酮类化合物,它具有抗氧化及清除自由基的作用,降低氧化损伤,还具有抗癌、抗炎、抗菌、抗病毒、降糖降压、免疫调节及心血管保护作用等槲皮素具有较好的祛痰、止咳作用,用于治疗慢性支气管炎,对冠心病及高血压患者有辅助治疗作用{4}。
【最新2018】中药防治酒精性肝损伤的实验研究-范文模板 (6页)

本文部分内容来自网络,本司不为其真实性负责,如有异议或侵权请及时联系,本司将予以删除!== 本文为word格式,下载后可随意编辑修改! ==中药防治酒精性肝损伤的实验研究酒精性肝损伤(alcoholic liver disease,ALD)是由于长期大量饮酒导致的肝中毒性损害,包括酒精性脂肪肝(alcoholic fattyliver,AFL)、酒精性肝炎(alcoholic hepatitis,AH)、酒精性肝纤维化(alcoholic fibrosis,AF)和酒精性肝硬化(alcoholic cirrhosis,AC)。
当肝脏功能因饮酒而发生损害时,机体的其他器官很快会因营养缺乏和血液中过多的毒性物质蓄积而受到不良影响。
随着我国经济的飞速发展、人民生活方式和饮食结构的改变,ALD已成为不容忽视的隐型杀手,严重威胁着人民的健康。
现代医学治疗ALD除了戒酒、对症治疗外,尚无特效疗法。
而中医学中虽无ALD之称,但对饮酒伤肝的认识和论述已有悠久的历史,如伤酒酒癖酒鼓酒疸等。
近年来,中医学发挥其特色优势,在单味中药提取物的实验研究及临床组方的应用研究上,对防治ALD取得了一定的成果和疗效。
单味中药提取物的实验研究随着科学技术的发展,研究人员可从单味中药中提取出纯度较高的有效物质,有针对性地进行研究。
在ALD方面,比如有葛花中的黄酮类提取物、葛根中的异黄酮类及皂苷类提取物等,现列举一些研究较为成熟且有效的单味中药提取物进行论述。
1. 葛花葛花为豆科植物葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi或甘葛藤Pueraria thomsonii Benth.的未开放花蕾,自古已有解酒醒脾之用,为当代临床常用的具有代表性的解酒药物。
苗彦妮等观察葛花对大鼠ALD有预防作用,其采用酒精灌胃的方法建造大鼠ALD模型,结果表明模型组大鼠血清谷氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartatetransaminase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphate,ALP)活性较空白组显著增加,总蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,ALB)含量较空白组显著降低,且肝组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性显著降低,丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量显著升高。
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槲 皮 素 对 大 鼠 慢 性 酒 精 性 肝 损 伤 的 保 护 作 用
周 晓 娟 ,王 超 ( 长江大学医学院, 湖北荆州 4 3 4 0 2 3 )
[ 摘 要] 目的 :研 究槲 皮 素对 大 鼠 慢 性 酒 精 性 肝 损 伤 的 保 护 作 用 。 方 法 : 将 6 8只 S D大 鼠随机 分为对 照
1 2周 ;槲皮 素低 、中 、高剂 量组 :将槲 皮 素分别 以 1 0 、3 0 、5 0 mg /( k g・ d )的剂量 溶 于酒 中制 成混 悬
液按 1 5 ml /( k g・ d )灌 胃 1 2周 。期 间各 组 大 鼠正 常进食 饮 水 。
1 . 3 . 2 标本 收集及 检 测 末 次给药 1 6 h后将 大 鼠麻 醉处理 ,心脏穿 刺采 血 ,离心分 离血 清 ,用 于检 测
含 量 , 降低 肝 组 织 中 MDA含 量 。 肝 组 织病 理 结果 显 示槲 皮 素 能 改 善酒 精 性 肝 损 伤 。结 论 :槲 皮 素 对 酒 精 性 肝 损 伤 具 有保 护作 用 ,其 机 制 与增 强肝 脏 抗 氧 化 功 能有 关 。
[ 关 键 词 ] 槲 皮 素 ;酒 精 性 肝 损 伤 ;大 鼠 [ 中 图分 类 号 ] R 2 8 5 . 5 [ 文献标志码]A [ 文章 编 号 ] 1 6 7 3— 1 4 0 9( 2 0 1 3 )3 3 —0 0 0 8 —0 3
长江大学学报 ( 自科 版 ) 2 0 1 3 年l 1 月号医学下旬刊 第 1 o 卷第3 3 期 J o u r n a l o f Y a n g t z e U n i v e r s i t y( N a t S c i E d i t ) No v . 2 0 1 3 ,V o 1 . 1 0 N o . 3 3
血 TG、AL T及 AS T水平 。迅 速取 出肝 脏 ,取 部 分 肝 组 织 用 生理 盐 水 清 洗 后 制 备 肝 匀 浆 ,用 于 检 测
S O D、GS H 及 MD A 水 平 ;剩余 肝组 织用 l 0 % 中性 福 尔马林 溶液 固定 ,常规病 理制 片 ,苏木 精一 伊红 染
作 用并 初探 其发 生机制 。
1 材 料 与方 法
1 . 1 动 物
健康 S D大 鼠 6 8只 ,雌性 ,S P F级 ,体质 量 ( 2 0 0 ±2 0 )g ,华 中科技 大 学 同济 医 学 院动 物 研究 所
提供 。
1 . 2 药 物
槲 皮 素购 自 S i g ma 公 司 。甘 油三 酯 ( TG) 、超 氧化 物歧化 酶 ( S o D) 、谷胱 甘 肽 ( GS H)及 丙 二 醛 ( MDA)检 测试 剂盒 ,均 购 自南 京建成 生 物工程研 究所 。5 6 度 红 星二锅 头购 自北京 红星股 份有 限公 司 。
性 氧 自由基 能力 ,能在一 定程 度上对 抗氧 化应 激所 致 细胞 损伤 ,其对 化 学性 肝 损伤 、缺血 / 再 灌 注性 肝
损 伤 、血吸虫 性肝 纤维化 等均 有不 同程度 的 保护 作 用 。 ] ,而 在酒 精 性肝 病 方 面 的研 究 较少 _ 5 ] 。为探 索 槲 皮素保 肝解 毒效 果 ,本 研究 通过 建立 大 鼠慢 性酒 精性肝 损伤 模型 ,观察 槲皮 素对酒 精性 肝损 伤 的保 护
组 、模 型 组和 槲 皮 素低 、 中 、高 剂 量 组 ,采 用 白酒 灌 胃的 方 法建 立 大 鼠 酒 精 性 肝 损 伤 模 型 , 给 予 不 同 剂 量槲 皮 素 混 悬液 保 护 。l 2周 后 测 定 大 鼠血 清 甘 油 三 酯 ( TG ) 、谷 丙 转 氨 酶 ( AL T )和谷 草转氨酶 ( AS T) 及 肝 组 织 匀 浆 中超 氧 化 物 歧 化 酶 ( S OD ) 、谷胱甘 肽 ( G S H) 和 丙 二醛 ( MD A) ,观察肝 脏组 织学变 化。 结 果 :槲 皮 素 能 降低 酒精 性 肝 损 伤 大 鼠血 清 中 TG、AL T 和 AS T 水 平 ;提 高 肝 组 织 中 S OD 活 性 和 G S H
长期 大量饮 酒 可引起酒 精性 脂肪 肝 、酒精性 肝炎 、肝纤 维化 以及 肝硬化 等不 同程 度 的肝 损伤 。酒精
参 与肝 细胞 内氧化应 激反 应 ,其 在肝 脏 中过量 代谢使 肝细胞胞浸 润导致 肝损 伤口 ] 。槲皮 素是 自然界 中常见 的类 黄酮 物质 ,含大 量酚 羟基 ,有较强 的清除 活
[ 收稿日期]2 0 1 3~o 9—1 0 [ 作者简介]周晓娟 ( 1 9 7 5一 ) ,女 ,讲 师 ,主要 从 事 基 础 医 学 研 究 工作 ;通讯 作 者 :王 超 ,E — ma i l :c e l f u l 6 0 @y a h o o . c o m. c n 。
第 1 O卷 第 3 3期
1 . 3 方 法
1 . 3 . 1 动物 分组及 处理 大 鼠适应 性 喂养 1 周 后 随机分 为 5组 :对 照组 8只 ,其余 4组 每组 1 5只 。对
照组 :给予生 理盐 水 1 5 ml /( k g・d )灌 胃 1 2周 ;模型 组 :给予 5 6度红 星二 锅头 1 5 ml /( k g・ d )灌 胃
周晓娟 等 :槲皮素对大鼠慢性酒精性肝损伤的保护作用
色 ,光镜 下 观察肝 脏形 态改 变 。病 理 分 级标 准 参 照 文 献 [ 6 - 1 ,l级 :脂 肪变 < 3 O 9 / 6 ,局 灶 水样 变 ,少
数小 坏死 灶 ;2级 :脂 肪 变> 3 0 ,气 球样 变 , 多 数小 坏 死灶 ,Ma l l o r y小体 形 成 ,局 部 中性粒 细 胞 浸 润 ;3级 :脂 肪 变> 5 O ,变性 坏死 重或 形成桥 接 坏死 ;4级 :脂肪 变> 7 5 , 损 伤 广泛 。