医疗器械产品无菌检验操作规程.

医疗器械产品无菌检验操作规程

1 目的

通过无菌检验,确保灭菌后产品能够达到无菌的要求。

2 适用范围

适用于灭菌后医疗器械产品(列举的无菌检验。

3 检验依据

本厂产品注册标准(编号

EN1174-1996 医疗器械灭菌产品中微生物数量的评估

《中国药典》(2005年版

GB14233.2-2005 医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分:生物试验方法

GB15980-1995 一次性使用医疗用品卫生标准

4 仪器、设备

百级层流超净工作台、电热干燥箱、电热恒温培养箱、霉菌培养箱、压力蒸汽灭菌器、集菌仪(器、电子天平、PH计、冰箱、恒温水浴锅、酒精灯、三角烧瓶,接种环、无菌棉签、镊子,试管架,大试管若干等。

5 无菌检验室的环境要求

5.1 无菌检验应在环境洁净度10000级下的局部百级的单向流空气区域内进行。

5.2 缓冲区与外界环境、无菌检验室与缓冲区之间空气应保持正压,阳性对照室与缓冲区之间空气应保持负压。无菌检验室与室外大气之间静压差应大于10Pa。无菌检验室的室温应保持18~26℃,相对湿度:45~65%。

5.3 无菌检验室的单向流空气区、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室(区悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的监测。每年至少检测一次。

5.4 无菌检验过程中应同时检查超净工作台单向流空气中的菌落数:每次操作时在层流空气所及台面的左中右置3个营养琼脂平板,暴露30min,于30~35℃培养48小时,菌落数平均应不超过1CFU/平板。

6 无菌检验前的准备

6.1 器具灭菌、消毒

6.1.1 灭菌:试验过程中与供试品接触的所有器具必须采用可靠方法灭菌。可经电热干燥箱160℃以上干烤2小时,或置压力蒸汽灭菌器内121℃蒸汽灭菌30分钟后使用(根据灭菌效果验证决定灭菌参数。所有的灭菌物品不应超过2周即用毕,否则应重新灭菌。

6.1.2 消毒:凡检验中使用的器材无法灭菌处理的,使用前必须经消毒处理。如无菌检验室的试管架、电子天平、工作台面、工作人员的手、橡胶吸头等。可采用消毒剂浸泡或擦拭。消毒剂应每月更换,以防止产生耐药菌株。

6.1.3 标识:器具的灭菌、消毒后必须做好标识,标明灭菌、消毒时间和使用有效期。

6.2 人员、物料进入无菌检验室

6.2.1 开启紫外线灯或臭氧发生器进行空间灭菌处理,消毒时间不得少于

30min。

6.2.2 物料进入无菌检验室流程

6.2.2.1 脱包:进入无菌检验室的物品若有双重包装的,需将外包装在传递窗/缓冲间拆除后,传入试验室。

6.2.2.2 消毒:进入无菌操作室的所有培养基、供试品等的外表都应采用适用的方法进

行消毒处理,以避免将外包装污染的微生物带入无菌检验室。

6.2.2.3 传递:查看所有进入无菌检验室的器具上的灭菌、消毒标识,是否在有效期内。符合要求的经传递窗传入无菌检验室。

6.2.3 人员进入无菌检验室流程

6.2.3.1 更鞋脱衣:在一更区脱去一般区工作鞋,穿上无菌检验室工作鞋;脱去一般区工作服。

6.2.3.2 洗手:首先用肥皂或洗手液在手上揉擦出泡沫,再用流水连续冲洗20秒,洗净泡沫。

6.2.3.3 更衣:在二更区按照从上到下的顺序穿戴无菌工作服(包括衣、帽、口罩等,要求裤子掖在上衣里,口罩掩住口鼻,帽子包裹所有头发。

6.2.3.4 手消毒:用消毒液浸泡双手5秒以上或用浸过消毒液的棉球擦拭双手。消毒液可用洗必泰、新洁尔灭、碘伏、75%酒精等。

6.2.3.5 人员进入:经缓冲间进入无菌检验室。

6.2.4 人员进入无菌检验室后,进一步用消毒液擦拭工作台面,戴无菌手套。

7 无菌检验操作要求

7.1 全过程必须严格执行无菌操作,防止微生物污染。

7.2 使用玻璃器皿应轻取轻放,避免破损,以防培养物扩散。

7.3 所有操作均应在近火焰区进行,且不得有大幅度或快速动作,以免搅动空气中的尘埃微粒。

7.4 使用金属接种器具时,用前、用后均需灼烧灭菌。

7.5 在接种培养物时,动作应轻、准,防止培养物溅出,产生汽溶胶,造成污染。

7.6 操作过程中所有的带菌物品,用后均应作消毒、灭菌处理。可在检验过程中随用随时放入消毒液缸内浸泡或消毒桶内,或在检验完成后经传递窗传至一般区,立即用压力蒸汽灭菌锅121℃灭菌30分钟。

8 培养基制备

8.1需气菌、厌气菌培养基(硫乙醇酸盐流体培养基的制备

8.1.1 所用试剂

酪胨(胰酶水解15.0g 葡萄糖5.0g

L-胱氨酸0.5g

硫乙醇酸钠0.5g

(或硫乙醇酸(0.3ml酵母浸出粉5.0g

氯化钠2.5g

新配制的0.1%刃天青溶液1.0ml 琼脂0.75g

水1000ml

8.1.2 制备

除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成分混合,微温溶解,调节pH为弱碱性,煮沸,滤清,加入葡萄糖和刃天青溶液,摇匀,调节pH为7.1±0.2。

8.1.3 硫乙醇酸盐流体培养剂氧化层的颜色要求

在供试品接种前,培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5,否刚需经100℃水浴加热到粉红色消失(不超过20分钟迅速冷却,只限加热一次,并应防止被污染。

8.2 霉菌培养基(改良马丁培养基的制备

8.2.1 所用试剂

胨5.0g

酵母浸出粉2.0g 葡萄糖20.0g 磷酸二氢钾1.0g 硫酸镁0.5g

水1000 ml

8.2.2 制备

除葡萄糖外,取上述成分混和,微温溶解,调节pH值约为6.8,煮沸,加葡萄糖溶解后,摇匀,滤清,调节pH为6.4±0.2。

8.3 还可使用按处方生产的符合规定的脱水培养基,按照使用说明书配制。

8.4 培养基配制后应尽快灭菌,避免微生物繁殖。一般采用高压蒸汽121℃灭菌30分钟。

8.5 制备好的培养基应在2~25℃保存,在3周内使用。

8.6 培养基的无菌性检查

每批配制的培养基均应进行无菌性检查(可与产品无菌检验同步进行。检查时,每批培养基随机取不少于5支(瓶培养14天,应无菌生长。