简答(分子生物学)
分子生物学简答题

分子史上的经典事件?答:1953watson 和crick 提出的DNA分子双螺旋模型在科研过程中,要具有清醒的宏观洞察力、非凡的科学想像力和严密的逻辑思维能力,选择正确的研究路线,广泛借鉴他人的研究成果并加以综合性的科学思考。
分子生物学的理论基础是?主要的研究策略有?(第一章)答:1958年,克里克提出两个学说,奠定了分子生物学的理论基础。
第一个学说是“序列学说”,它认为一段核酸的特殊性完全由它的碱基序列决定,碱基序列编码一个特定蛋白质的氨基酸序列,蛋白质的氨基酸序列决定了蛋白质的三维结构。
第二个学说是“中心法则”,遗传信息只能从核酸传递给核酸,或核酸传递给蛋白质,而不能从蛋白质传递给蛋白质,或是从蛋白质传回核酸。
研究策略:体内和体外实验的结合将遗传和DNA联系起来。
体内(In vivo)实验:在活体内进行的实验,包括在培养的细胞或组织。
体外(In vitro)实验:在细胞提取物中,或者是人工合成的细胞成分混合物中。
分子与其他学科关系?生物学离不开生物学技术?答:分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以至信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的。
现代生物学的发展越来越多的应用分子生物学的理论和方法进行研究。
什么是分子生物学?广义的概念:分子生物学是研究核酸、蛋白质等生物大分子形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学。
狭义的概念:从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学,主要指遗传信息的传递(复制)、保持(损伤和修复)、基因的表达(转录和翻译)与调控等,也称之为基因的分子生物学。
DNA分子在结构上为什么最适合作为遗传信息载体?(第二章第一节)化学性质比较稳定,DNA复制时严格遵守碱基互补配对原则,且为半保留复制;四种脱氧核糖核苷酸可以组成不同的长链,可以携带大量遗传信息。
DNA提取操作要点是?(第二章第一节)提取原则:保持一级结构的完整性,将其他生物大分子的污染降到最低。
分子生物学简答题

1.(1)说明基因组的大小和基因组复杂性的含义基因组的大小:指在基因组中DNA的总量基因组复杂性:指基因组中所有单一序列的总长度(2)这个基因组的大小怎样?4000bp(3)这个基因组的复杂性如何?450 bp2.试比较原核生物与真核生物的翻译原核生物与真核生物的翻译比较如下:仅述真核生物的,原核生物与此相反。
①起始Met不需甲酰化②无SD序列,但需要一个扫描过程③tRNA先于mRNA与核糖体小亚基结合④起始因子比较多⑤只一个终止释放因子3.试比较真核生物与原核生物mRNA转录的主要区别原核生物:操纵子RNA聚合酶核心酶加δ因子不需加工与翻译相偶联类核真核生物:单基因RNA聚合酶Ⅱ聚合酶加转录因子需加工故与翻译相分离核内4.激活蛋白(CAP)对转录的正调控作用环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP,cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP。
当大肠杆菌生长在缺乏葡萄糖的培养基中时,CAP合成量增加,CAP具有激活乳糖(Lac)等启动子的功能。
一些依赖于CRP的启动子缺乏一般启动子所具有的典型的-35区序列特征(TTGACA)。
因此RNA聚合酶难以与其结合。
CAP的存在(功能):能显著提高酶与启动子结合常数。
主要表现以下二方面:①CAP通过改变启动子的构象以及与酶的相互作用帮助酶分子正确定向,以便与-10区结合,起到取代-35区功能的作用。
②CAP还能抑制RNA聚合酶与DNA中其它位点的结合,从而提高与其特定启动子结合的概率。
5.原核生物与真核生物启动子的主要差别原核生物TTGACA——TATAA T——起始位点-35 -10真核生物增强子——GC——CAAT——TA TAA——5mGpp——起始位点-110 -70 -256.比较DNA复制和RNA转录的异同相同点:DNA复制和RNA转录在原理上是基本一致的,体现在:①这两种合成的直接前提是核苷三磷酸,从它的一个焦磷酸键获得能量促使反应走向合成②两种合成都是一个酶为四种核苷酸工作③两种合成都是以DNA为模板④合成前都必须将双链DNA解旋成单链⑤合成的方向都是5-37.假设从一种生物抽提了核酸,你将用什么简便的方法,区别它是DNA或RNA?是单股或双股?我们可用紫外分光光度计对抽提的核酸进行鉴定。
分子生物学简答题

1.简述临床分子生物学检验在复杂性疾病中的应用。
(1)在感染性疾病中,对微生物感染作出确诊、对感染性病原体进行分型和耐药性监测;(2)通过患者的DNA、RNA、染色体、蛋白质和某些代谢产物来揭示与遗传病发生相关的生物学标记,从而对遗传型疾病进行早期预防、早期诊断和早期治疗的目的;(3)用分子生物学检验方法寻找特异性肿瘤基因型标志进行肿瘤基因检测,有利于肿瘤的早期发现和诊断,以及肿瘤的预防和治疗;(4)推动个体化医学的发展。
2.简述RNA 生物标志物的优点。
RNA 生物标志物包括多种形式,如mRNA、tRNA、miRNA、lncRNA 等;多种病理生理过程、药物治疗或食品中的物质均可以在转录水平上出现差异;基因表达在mRNA 水平上的变化通常大于蛋白质水平的变化;在血浆中存在游离的循环miRNA 可以反应体内的病理生理过程;母亲血浆中的胎儿RNA 在无创产前诊断中对染色体疾病的诊断更加方便。
3.简述原核生物基因组的特征。
(1)原核生物基因组较小(2)原核生物的类核结构(3)原核生物的操纵子结构(4)原核生物的结构基因中无内含子成分,其R NA 合成后不需要经过剪接加工过程(5)具有编码同工酶的基因(6)含有可移动D NA 序列4.简述核酸分离纯化的主要步骤。
目前核酸的分离纯化主要包括4 个步骤:①制备细胞及破碎细胞。
②消化蛋白质,去除与核酸结合的蛋白质、多糖及脂类等生物大分子。
③去除其它不需要的核酸分子。
④沉淀核酸,去除盐类、有机溶剂等杂质。
5.简述蛋白质分离纯化的方法及其原理。
(1)根据蛋白分子大小不同:主要有透析、超滤、凝胶过滤和离心等。
(2)根据蛋白分子溶解度不同:常用的方法有等电点沉淀和pH 值调节、蛋白质的盐溶和盐析、有机溶剂法等。
(3)根据蛋白表面电荷不同:常用方法有电泳和离子交换层析。
(4)采用配体的特异性亲和力:亲和层析等。
6.Southern 印迹杂交的临床应用(1)单基因遗传病的基因诊断(2)基因点突变的检测7.Nouthern 印迹杂交的临床应用(1)RNA 病毒的检测(2)基因表达的检测8.核酸分子杂交的影响因素在核酸杂交反应中影响杂交体形成因素较多,主要有探针的选择、探针的标记方法、探针的浓度、杂交率、杂交最适温度、杂交的严格性、杂交反应时间及杂交促进剂等。
(完整word版)分子生物学简答题

课后思考题1. 试述乳糖操纵子的结构及调控原理?乳糖操纵子开放转录需要什么条件?(1)乳糖操纵子的结构:含Z、Y、A3个结构基因,分别编码乳糖代谢的3个酶;一个操纵序列O,一个启动序列P,一个CAP结合位点共同构成乳糖操纵子的调控区.乳糖操纵子的上游还有一个调节基因I。
(2)阻遏蛋白的负性调节:I基因的表达产物为一种阻遏蛋白,在没有乳糖存在时,阻遏蛋白与O序列结合,阻碍RNA聚合酶与P序列结合,抑制转录启动,乳糖操作子处于阻遏状态;当有乳糖存在时,乳糖转变为半乳糖,后者结合阻遏蛋白,使构象变化,阻遏蛋白与O序列解离,在CAP蛋白协作下发生转录。
(3)CAP的正性调节:分解代谢基因激活蛋白(CAP)分子内存在DNA和cAMP结合位点.当没有葡萄糖时,cAMP浓度较高,cAMP与CAP结合,cAMP-CAP结合于CAP结合位点,提高RNA转录活性;当有葡萄糖时,cAMP浓度降低,cAMP与CAP结合受阻,乳糖操纵子表达下降。
(4)协调调节:乳糖操纵子阻遏蛋白的负性调节和CAP的正性调节机制协调合作,CAP不能激活被阻遏蛋白封闭基因的表达,但如果没有CAP存在来加强转录活性,即使阻遏蛋白从操纵序列上解离仍无转录活性。
因此,乳糖操纵子开放转录需要的条件是:1)诱导物乳糖存在,解除阻遏蛋白的负调节。
2)葡萄糖缺乏,CAP蛋白活化,启动正调节。
2.试述原核生物和真核生物基因表达调控特点的异同.(1)相同点:转录起始是基因表达调控的关键环节。
(2)不同点:1)原核生物基因表达调控主要包括转录和翻译水平;真核基因表达调控包括染色质活化、转录、转录后加工、翻译、翻译后加工多个层次.2)原核基因表达调控主要为负调节;真核生物基因表达调控主要为正调节。
3)原核转录起始不需要转录因子,RNA聚合酶直接结合启动子,由σ因子决定基因表达的特异性;真核转录起始需要基础、特异两类转录因子,依赖DNA—蛋白质、蛋白质-蛋白质相互作用,调控转录激活。
分子生物学简答题

第二章1、DNA二级结构的特点?答:(1)DNA分子是由两条互相平行的脱氧核甘酸长链盘绕而成的(2)DNA分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接,排在外侧,构成基本骨架,碱基排列在内侧.2.阐述Meselson和Stahl关于DNA半保留复制的证明实验?答:用普通培养基(含14N的氮源)培养15N标记的大肠杆菌,经过一代后,所有DNA 的密度都在15N-DNA和14N-DNA之间,即形成了一半15N和一半14N的杂合分子,两代后出现等量的14N分子和14N-15N杂合分子。
若再继续培养,可以看到14N-DNA分子增多,说明DNA分子复制时均可被分成两个亚单位,分别构成子代分子的一半,这些亚单位经过很多代复制仍然保持着完整性。
3.描述大肠杆菌DNA聚合酶I在DNA生物合成过程中的作用?答:该酶被认为在切除由紫外线照射而形成的嘧啶二聚体中起着重要的作用,它也可用以出去冈崎片段5,端RNA引物,使冈崎片段间缺口消失,保证连接酶将片段连接起来。
4.DNA的损伤原因是什么?答:DNA的损伤分自发性损伤、物理因素引起的DNA损伤、和化学因素引起的DNA损伤.自发性损伤是由于DNA复制中的错误和碱基的自发性化学变化造成DNA的损伤.物理因素引起的DNA损伤常是缘于紫外线引起的DNA损伤和电离辐射引起的DNA损伤.化学因素引起的DNA损伤是突变剂或致癌剂对DNA的作用,包括烷化剂对DNA的损伤和碱基类似物对DNA的损伤.5.组蛋白具有哪些特性?答:进化上的极端保守性,无组织特异性,肽链上氨基酸分布的不对称性,组蛋白的修饰作用(包括甲基化,乙酰化,磷酸化,范素化9口「核糖基化),富含赖氨酸的组蛋白H56.比较原核生物和真核生物DNA复制的不同点。
答:真核生物每条染色质上可以有多处复制起始点,而原核生物只有一个起始点;真核生物的染色体在全部完成复制之前,个个起始点上DNA的复制不能再开始,而在快速生长的原核生物中,复制起始点上可以连续开始新的DNA复制,表现为虽只有一个复制单元,但可有多个复制叉。
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分子生物学考试简答题1、何谓断裂基因( split gene)?何谓重叠基因( overlapping gene)?它们在生物进化与适应上有何意义?答:断裂基因是指真核生物的结构基因,它由外显子和内含子组成。
重叠基因指的是两个或两个以上的基因共用一段DNA序列。
断裂基因有利于变异和进化。
(虽然单个碱基的改变有时可引起氨基酸的变更而造成蛋白质的变化,但是很难产生重大变化形成新的蛋白质,单个碱基突变发生在密码子第三位往往是沉默的大大降低了突变效应,而在断裂基因中如果发生在内含子与外显子的结合部位,那么就会发生剪接方式的改变结果是蛋白质结构发生大幅度的变化,从而加速进化)。
重叠基因是原核生物进化的经济原则,用较小的C值可编码加多的基因信息。
2、什么是顺反子?用“互补”和“等位基因”说明“基因”这个概念。
答:等位基因是指同一基因的不同状态通常位于不同的同源染色体上。
顺反子是基因表达的单位即转录单位,在原核生物中一般由多个翻译成蛋白质的片段组成,而真核生物中则不然。
仅含有一个翻译单位的转录单位成为一个顺反子。
顺反子可以通过互补分析得以鉴定。
3、你如何证明 Ty元件在转座时经历了一个RNA中间体?答:构建一个含内含子与δ元件的人工Ty 元件。
采用诱导型GAL 启动子合成大量的Ty 元件的mRNA,从而使这一元件整合到基因组新位点的转座频率增加。
检测新插入的Ty 元件。
若具有δ元件但缺少内含子,则通过RNA 的中间体。
(该知识点在课本85页,老教材)4、IS元件整合到靶位点时会发生什么?答:由于在转座子插入之前已产生一个交错切口,而且这一交错切口在转座子插入后被填补,因此导致靶位点序列重复。
答:IS元件整合到靶位点时,转座酶对受体靶位点序列和供体转座子的末端反向重复序列进行特定长度的交错切割。
共同的机制使转座子和靶序列的切口末端发生交叉共价连接,形成单链移复合体,DNA聚合酶利用连接缺口的3‘—OH末端和模板链填补缺口,完成转座子及正向重复序列复制,而后发生供体转座子的复制型转座或非复制型转座。
分子生物学简答题

分子生物学是生物学的一个分支,它研究生物分子如DNA、RNA、蛋白质的结构和功能,以及这些分子在细胞内的相互作用和生命过程中的作用。
以下是一些关于分子生物学的简答题:1. 什么是DNA?答:DNA(脱氧核糖核酸)是细胞中的遗传物质,由两条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成的双螺旋结构组成。
2. RNA有哪些类型?答:RNA(核糖核酸)主要有三种类型:mRNA(信使RNA)、tRNA(转运RNA)和rRNA(核糖体RNA)。
3. 蛋白质的功能有哪些?答:蛋白质的功能非常多样,包括催化生化反应(酶)、DNA复制(聚合酶)、信号传导(受体)、运输(载体)等。
4. 基因是如何控制蛋白质合成的?答:基因通过转录和翻译过程控制蛋白质合成。
转录过程中,DNA序列被复制成mRNA,然后mRNA被翻译成蛋白质。
5. 什么是转录因子?答:转录因子是一类能够与DNA结合并调控基因转录的蛋白质。
6. 真核生物的RNA聚合酶有哪些类型?答:真核生物的RNA聚合酶主要有三种类型:RNA聚合酶I、RNA聚合酶II 和RNA聚合酶III。
7. 什么是剪接?答:剪接是指在mRNA前体的加工过程中,去除内含子并将外显子连接起来形成成熟的mRNA的过程。
8. 什么是启动子?答:启动子是DNA上的一段序列,它能够引导RNA聚合酶开始转录过程。
9. 什么是增强子?答:增强子是DNA上的一段序列,它能够增强特定基因的转录活性。
10. 什么是基因表达?答:基因表达是指基因信息被转录成mRNA,然后通过翻译过程合成蛋白质的过程。
这些简答题涵盖了分子生物学的一些基本概念和原理,有助于学生巩固基础知识。
分子生物学简答题

分子生物学简答题
1、细胞膜受体是信号转导过程的受体的一种类型,请简述细胞膜受体的三种不同结构域。
(1)胞外域:与配体相互作用,具有结合特异性。
(2)内域:在细胞内触发信号转导,具有效应特异性。
(3)跨膜结构域:又称穿膜域,将受体固定在细胞膜上。
2、简述四种不同种类的酶及其主要的作用?
(1)限制性核酸内切酶。
作用:识别双链DNA的特定序列,水解该序列内部或附近的磷酸二酯键。
(2)DNA连接酶。
作用:将目的DNA与载体共价连接成重组DNA。
(3)DNA聚合酶。
作用:催化dNTP合成DNA。
(4)修饰酶。
作用:标记、保护目的DNA。
3、请简述真核生物染色质DNA复制的特点?
(1)复制速度慢
(2)发生染色质解离与重塑
(3)多起点复制
(4)冈崎片段短
(5)DNA连接酶差异
(6)终止阶段涉及端粒合成
(7)受DNA复制检查点控制
4、请问真核生物染色质水平的调控都有哪些方式?
(1)染色质活化
(2)组蛋白修饰
(3)DNA甲基化
(4)基因重排
(5)基因扩增
(6)染色质丢失
(7)基因组印记
5、请简述原核生物基因表达的特点?
(1)多以操纵子为转录单位
(2)基因转录的特异性由σ因子决定
(3)转录与翻译偶联。
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L111. 如何理解结构决定功能(通过2个以上实例说明)12. 互补测验的原理及用途。
顺反试验,测定两个基因突变作用方式的遗传学试验,即互补测验。
通过测验可确定两个表型效应相似的突变位点是否位于同一个顺反子或基因内。
L27. The specificity determines the blood group for human (illustrate by example)决定人类血型的特异性(举例阐述)基因座可能会有不止一条野生型等位基因,即基因座可能会有等位基因的多态分布,而无任何一条等位基因可以被认为是野生型的。
在任何一个遗传位点上并非一定要有一个野生型基因。
ABO血型基因座编码半乳糖基转移酶,其特异性决定了血型的差别。
功能缺失可由空白型表示,即O型。
但是功能性的A型和B型是共显性的,并且对O型表现出显性。
在所有的个体中都产生O型或者H型抗原,它们含有特殊的碳水化合物基团连接到蛋白质。
ABO等位基因编码一种半乳糖基转移酶,能够在O抗原加上糖基,其特异性决定了血型。
A、B等位基因表达相应的转移酶并利用相应的碳水化合物辅因子产生了A、B抗原,O等位基因无法表达产生转移酶,因此O抗原没有发生修饰。
A和B都不能被认为是野生型的,因为他们表达出一种功能,而没有存在功能缺失或者新功能的产生。
这种现象,即一个群体中存在多条功能型等位基因,被称为多态性L31.Conservation of exons and its application(外显子的保守性及其作用)L41.非互补粘性末端DNA分子间的连接方式;1经过专门作用于单链DNA的Sl核酸酶处理变成平末端之后,可以使用T4 DNA连接酶进行有效连接。
2使用附加衔接物or附加接or同聚物加尾技术的办法提高平末端间的连接作用的效率L51.蛋白质组学研究中所用方法及原理二维电泳(2ED)2.试说明每个等位基因具有不同的表型(举例)3.限制性位点孟德尔遗传定律15人类基因组数目与蛋白质组关系人类基因组的数目约为 3.3×109bp,约含有3000~4000条基因,而人类蛋白质组约有50000~60000个蛋白质成员1)基因表达是不连续,且受外部环境影响,存在时间和空间的表达差异。
2)存在可变剪切,所以基因的总数比潜在的蛋白质数目少..L612.动物可以从植物中得到营养的原因。
植物可以通过光合作用固定空气中的CO2,形成葡萄糖等有机物,由于Rubisco的存在,经过一系列反应,可以把CO2 转变为磷酸甘油酸的形式,然后在被其他酶变成蔗糖等有机物,供植物使用。
动物不能固定空气中的CO2,但动物可以通过食用植物而得到有机物(蛋白质、糖类等营养物质),并消化利用。
L7andL85.To illustrate the developmental control via example. (via globin)珠蛋白四聚体由两条相同的 a 链和b 链构成,而胚胎血细胞包含的珠蛋白四聚体与成体中的形式不同,其每个四聚体包含两条相同的类a 和类b 珠蛋白链,每一条都与成体中的肽链相关,并在稍后被其取代。
随着连续的不同基因的开关,在不同时期,不同的基因产物会执行相同的功能。
6.Unequal crossing-over can result in what results?不等交换可以改变基因数目。
如果一条染色体上的基因1与另一条染色体上的基因2 配对,则其他基因拷贝就无法配对。
错配基因间的重组就产生了一条有单一(重组)基因拷贝的染色体和一条有三份基因拷贝(包括两条来自亲本的和一条来自重组的)的染色体。
地中海9.DNA fingerprinting:(DNA指纹分析技术)使用限制性内切酶切割每个个体的、含有短重复序列的区域后所产生的片段,通过分析这些片段的异同而得到个体间的遗传关系。
因为这些片段对于每个个体都是唯一的,任何两个个体之间所存在的这样的特殊片段可以用来定义他们之间的遗传关系(如父亲-孩子之间的遗传关系。
1.What is 5-FU? How does 5-FU affect the DNA synthesis?5-FU:5-氟尿嘧啶。
胸苷酸合成酶抑制药,是尿嘧啶5位上的氢被氟取代的衍生物。
5-FU在细胞内转变为5-氟尿嘧啶脱氧核苷酸(5F-dUMP),而抑制脱氧胸苷酸合成酶,阻止脱氧尿苷酸(dUMP)甲基化转变为脱氧胸苷酸(dTMP),从而影响DNA的合成。
此外,5-FU 在体内可转化为5-氟尿嘧啶核苷,以伪代谢产物形式掺入RNA中干扰蛋白质的合成,故对其他各期细胞也有作用。
2.The “adapter” is transfer RNA (tRNA),why.1. 它代表唯一的氨基酸,并与其共价相连2. 它包含了一个三核苷酸反密码子序列,使tRNA通过碱基互补配对原则识别密码子。
3.比较三种RNA的结构及功能。
①mRNA是信使RNA,一般为单链状,在原核生物中不需要加工修饰,直接用于蛋白质翻译,转录翻译同时进行形成多聚核糖体,一条mRNA上翻译多种蛋白质。
真核生物中,前体mRNA 5′端形成帽子结构、3′端加上poly(A)尾巴、拼接除去内含子、链内核苷酸一系列加工修饰后翻译。
一般一条mRNA只翻译一种蛋白质。
②rRNA是核糖体RNA,它组成了核糖体两个大小亚基,在真核生物核糖体中40S小亚基含有一条18S rRNA,60S大亚基含28S rRNA、5S rRNA和5.8S rRNA。
在原核生物核糖体中30S小亚基含一条16S rRNA,50S大亚基含23S rRNA和5S rRNA。
rRNA主要作用是参与蛋白质的合成。
③tRNA是转运RNA,它在蛋白质合成中具有转运氨基酸和识别密码子的作用。
它的二级结构是三叶草型,由氨基酸接受臂、反密码子环、D环、T C环和额外环组成。
它的三级结构为倒L型结构。
4.What`s its function of poly (A) and how to use it in experimentsL91.To compare the process of protein synthesis for prokaryotic and eukaryotic.(比较原核和真核翻译过程)3. What different features have for the initiator tRNA?fMet-tRNA作为tRNA起始子,不同于其他tRNA的特点是1)携带一个氨基基团被甲酰化的甲硫氨酸,称为氨甲酰甲硫氨酰-tRNA。
2)tRNA氨基酸臂末端的几个面对面的碱基在fMet-tRNA f中是不配对的,此位置的不配对碱基能阻止该tRNA参与延伸,而且这种不配对特性也是甲酰化反应所需的。
3)在反密码子环前面的臂上存在一系列3个G-C碱基对,它是tRNA f Met所特有的,这些碱基对是fMet-tRNA f直接插入到P位所必需的。
4. What is Tu-Ts cycle?延伸因子EF-Ts可以将EF-Tu-GDP转化为EF-Tu-GTP,使其继续参与肽链延伸,就构成了一个Tu-Ts循环。
具体过程是:EF-Ts将GDP移走结合形成EF-Tu-EF-Ts,然后GTP替换EF-Ts后形成EF-Tu-GTP,该活化的二元复合体能与氨酰-tRNA结合,释放EF-Ts.5. How to demonstrate that inhibiting one step in protein synthesis blocks the next step for kirromycin? (证明在蛋白质合成过程中黄色霉素对第一步的阻断会使下一步合成被阻断。
) 黄色霉素是抑制EF-Tu 作用的抗生素,当EF-Tu 被黄色霉素结合后,它仍可使氨酰-tRNA 结合到A 位。
但EF-Tu * GDP 复合体不能从核糖体中释放,阻止肽酰-tRNA与氨酸-tRNA 间形成肽键。
结果,核糖体停滞在mRNA 上,使蛋白质合成终止。
6. How to reveal the nature of the transfer reaction via the antibiotic puromycin?(嘌呤霉素是如何抑制蛋白质的合成)嘌呤霉素的结构类似于氨酰-tRNA。
该抗生素进入核糖体后,肽酰-tRNA的肽链将被转移到嘌呤霉素的氨基基团上。
嘌呤霉素不能与核糖体A 位结合,所以多肽酰嘌呤霉素合成物以多肽酰嘌呤霉素的形式从核糖体上放出,蛋白质合成在成熟之前被终止1.帽子0,帽子1如何加上去的以及其功能作用L101.The stability of peptidyl-tRNA is higher than of aminoacyl-tRNA,why?16S rRNA与P位上的tRNA比A位上的tRNA有更多的接触,这可能是肽酰-tRNA比氨酰-tRNA具有更高稳定性的原因。
一旦tRNA到达P位,核糖体就已经认为它是被正确结合的,而它在A位时,还处于评估这个结合是否正确阶段。
2.How to inhibit the process of the protein synthesis at particular stages by usingantibiotics?(抗生素如何在蛋白质合成的特殊阶段抑制其合成)一些抗生素作用于单一的核糖体蛋白,而另一些作用于rRNA。
链霉素能与小亚基的S12蛋白结合,抑制蛋白质的合成。
而突变体的S12蛋白失去了与链霉素结合的特性,从而表现出对链霉素的抗性。
目前已通过这类方法选择出5种小亚基蛋白质和4种大亚基蛋白质的突变体。
利用这些突变体可以研究有关的核糖体蛋白质的功能。
3.How to process the 3¢end and the the 5¢end of a tRNA?在大肠杆菌中核酸内切酶首先引发前体下游的裂解反应,几个核酸外切酶随之沿3’到5’方向降解前体,修剪3’端。
在真核生物中,这个反应也是由多个酶来完成的。
这个过程形成了3’端加上CCA 的tRNA。
tRNA 3’端通过切割、修整,再加上CCA而成;5’端由切割产生。
4.Inosine can pair with any of U, C, and A,why?次黄嘌呤核苷酸常存在于有嘌呤生物合成途径的细胞中,依靠RNA中对A的修饰而成的。
对A的修饰还包括许多复杂基团的加人。
它通常出现在反密码子的第一位,能同U、C和A 中的任何一种碱基配对。
5.To illustrate missense suppressors completed with wild-type.反密码子为CCU的tRNA携带甘氨酸,当它突变为UCU时依旧携带甘氨酸。